Universidad Catlica del Norte

Facultad de Ciencias
Departamento de Ciencias Farmacuticas
Laboratorio de Toxicologa

IDENTIFICACIN Y CUANTIFICACIN DE PARACETAMOL EN SUERO POR

ESPECTROFOTOMETRA UV-VISIBLE
Informe de Laboratorio
Toxicologa
2017
Cristian Rojo Contreras
Crc051@alumnos.ucn.cl
Fabian Vergara Arancibia
Fva012@alumnos.ucn.cl

conocida como ciclooxigenasa (COX-1, COX-

Introduccin
La toxicologa es la ciencia de los venenos;
rama que se ocupa de estudiar los efectos de
sustancias que no tienen aplicacin
teraputica y que son nocivas y perjudiciales.
En relacin con los venenos, la toxicologa
selecciona los antdotos ms adecuados, sus
vas de administracin y las dosis ms
efectivas1.
Los AntiInflamatorios No Esteroideos (AINEs)
son un grupo farmacolgico de qumicos
heterogneos, se asocian esencialmente por
sus propiedades teraputicas similares. Por
su estructura, los AINEs se dividen en dos
familias: cidos carboxlicos y cidos
enlicos, aunque tambin se encuentran los
no acidos en donde se encuentra el
paracetamol (PCT)2.
El PCT es un medicamento de uso
frecuente por sus propiedades analgsicas
y antipirticas. Se puede encontrar en
presentaciones oral, rectal y parenteral,
con diferentes dosificaciones y plasmticas comienzan a elevarse entre
formulaciones, ampliamente distribuido en
el mercado nacional. Es considerado un
frmaco seguro pero cuando es
administrado en sobredosis se asocia a
insuficiencia heptica aguda que puede
llegar a ser mortal.
El mecanismo de accin analgsica an no
est dilucidado por completo, se han
planteado diversos mecanismos que podran
explicarla, como por ejemplo: inhibicin de
las distintas isoformas de la enzima
prostaglandina-endoperxido sintasa tambin
2 y COX-3) principalmente a nivel del sistema
nervioso central, lo cual probablemente
explica el efecto antipirtico; activacin
indirecta de vas serotoninrgicas
bulboespinales que inactivan las seales de
dolor ascendentes de la mdula espinal.
Tambin se ha implicado al sistema
endocannabinoide en la accin analgsica de
paracetamol, aunque este efecto no sera
producido directamente por el frmaco ya
que ste no se une a receptores CB, sino
que uno de sus metabolitos tiene actividad
tipo cannabinoide lo que podra explicar en
parte esta accin del paracetamol2.
La dosis txica vara de acuerdo a los
niveles de glutatin basal de cada
individuo, pero se admite que luego de 150
mg/kg/dia en nios o 7.5-10 gr en adultos.
El PCT se absorbe rpida y
completamente en el tracto
gastrointestinal. Las concentraciones
los 30 y 120 minutos desde su ingesta,
alcanzando un peak plasmtico a las 4
horas.
A dosis teraputicas, el 90% del PCT es
metabolizado en el hgado a travs de la
conjugacin con sulfatos o glucurnidos,
para posteriormente ser eliminado por la
orina. Slo el 2% es excretado en la orina
de manera inalterada. El resto del PCT es
metabolizado en el hgado va citocromo

1
P450 por un mecanismo oxidativo hacia un
metabolito altamente txico y reactivo
llamado N-acetil-p-benzoquinoneimina
(NAPQI) como se muestra en la Figura
1. A dosis teraputicas el PCT produce
pequeas cantidades de NAPQI que es
rpidamente conjugado por el glutatin
heptico, formando metabolitos no txicos
que se excretan por la orina. Cuando se
ingieren dosis txicas de PCT y las vas de
sulfatacin y glucuronidacin estn
saturadas, una mayor proporcin de PCT
es metabolizado hacia NAPQI va CITP450
(Figura 1). Cuando los niveles de glutatin
heptico estn disminuidos, el NAPQI
comienza a reaccionar con los hepatocitos,
se une a protenas de forma covalente
creando aductos que producen dao
oxidativo y necrosis centrolobulillar 3.
Figura 1 : Metabolismo del Paracetamol (PCT).
Las manifestaciones iniciales suelen ser
leves e inespecficas, y no predicen la
hepatotoxicidad subsecuente con
exactitud. El curso clnico de la
intoxicacin por PCT se divide en cuatro
etapas secuenciales con el objetivo de
detectar precozmente los sntomas para
disminuir la morbimortalidad de los
pacientes.
Fase I (0.5-24 hrs): Pueden estar
asintomticos o con nuseas, vmitos,
diaforesis, palidez, astenia y malestar
general como un sndrome gripal. Los
estudios de laboratorio estn normales.
Fase II (24-72 hrs): La hepatotoxicidad
manifestada clnica y bioqumicamente
comienza a ser evidente, ocasionalmente
tambin la nefrotoxicidad.
Fase III (72-96 hrs): La falla heptica llega
a su mxima manifestacin post ingesta.
Los sntomas sistmicos de la fase I
reaparecen en conjunto con ictericia,
encefalopata, una marcada elevacin de
TA, hiperamonemia y coagulopata. Signos
de severa hepatotoxicidad.
Fase IV (4 das 2 semanas): Tambin
llamada fase de recuperacin. Son los
pacientes que sobreviven a la fase III. La
recuperacin puede ser ms lenta en
enfermos crticos.
La mejor manera de predecir el riesgo de
toxicidad es relacionando el tiempo desde
la ingesta con la concentracin de
paracetamol para esto debe evaluarse de
acuerdo al nomograma modificado de
Rumack-Matthew (Figura 2) para
determinar la necesidad de la terapia con
N-acetil-cistena(NAC).
Teniendo este enfoque, los pacientes con
concentraciones de PCT sobre la lnea
dibujada (>150 mcg/mL a las 4 hrs o >
18.8 mcg/mL a las 16 hrs) son
considerados como en riesgo de
hepatotoxicidad y determina una indicacin
para iniciar el tratamiento estndar con
NAC (Figura 2) 4.
Figura 2. Nomograma de Intoxicacin por
Paracetamol
2
La identificacin de PCT en suero se
puede realizar con diferentes mtodos, en
el cual la espectrofotometria UV-visible es
una de ella, en la cual consiste en la
utilizacin de una luz en los rangos visible y
adyacentes el ultravioleta (UV) cercano y el
infrarrojo (IR) cercano, en esta regin del
espectro electromagntico, las molculas se
someten a transiciones electrnicas.
Resultados y discusin
Parte 1: Identificacin de paracetamol por
mtodo de o-cresol
Al realizar el test se obtuvo un resultado
positivo debido a la variacin de color de
transparente a una tonalidad azul fuerte muy
similar al azul de metileno.
Figura 3: Muestra con o-cresol
Parte 2: Cuantificacin de paracetamol por
espectrofotometra uv-vis.
Se realiz una curva de calibracin como
muestra la tabla 1, mediante una solucin
hidro-metanlica y cloruro frrico (FeCl3).
Con esta se obtuvo el siguiente grfico
(Grafico 1) del cual se desprende la siguiente
ecuacin y=0,0704x + 0,158 con coeficiente
de correlacin de Pearson r2= 0,991.
Tabla 1: Curva de calibrado
Concentracin
(mg/L) abs
2 0,291
3 0,377
3,5 0,406
4 0,445
5 0,503
0.6
Curva de calibracin
Absorbancia
0.4
0.2
y = 0.0704x + 0.158
0 R = 0.9919
2 0
Concentracin 4
mg/mL 6
Grafico 1 : Concentracin vs absorbancia
Al medir nuestra muestra que fue por
duplicado, se obtuvo un promedio de 0,4685,
los cuales fueron insertados en la ecuacin
de la recta y con el factor de dilucin , dio
como resultado 8,8 mg/ L de la muesta en
suero.
Por lo tanto el paciente debe estar en la
Fase 2 de la intoxicacin, en donde se
manifiestan cambios bioqumicos (aumento
de las transaminasa aumento de la
bilirrubina), a veces asintomtico o con
dolor en el cuadrande superior derecho.
Conclusiones
Se logr la identificacin y la cuantificacin
de PCTp, adems con la ayuda de
nomograma podemos afirmar que el paciente
esta dentro de la lnea del tratamiento con el
antdoto.
Referencias
1.- Quezada R, Espinoza C, Rosario Fuentes
R. Manejo General del intoxicado,
[Internet],2015 [citado 17 de mayo 2017]
Disponible en:
https://www.redclinica.cl/Portals/0/Users/014/
14/14/manejo_inicial_intoxicado.pdf
2.- .O'Malley G. Emergency department
management of the salicylate-poisoned
patient. Emerg Med Clin North Am.
2007;25(2):333- 346
3.- Mieres J, Rios C. Toxicologa; mencin
clinca paracetamol, 2013 (10).
4.- Sintesis: biblioteca digital dinmica de la
Universidad de chile [Internet]. Santiago:
Universidad de Chile.[Citado el 15 de mayo
2017]. Disponible:
http://sintesis.med.uchile.cl/index.php/compo
nent/content/article/101-manual-de-
urgencias/1887-intoxicacion-por-paracetamol