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Artigo de pesquisa testes de diagnstico rpido duo como alternativa aos ensaios
sorolgicos convencionais para o diagnstico de doena de Chagas conclusivos.
Abstrat
A doena de Chagas causada pelo parasita Trypanosoma cruzi. Isso afeta vrios milhes de pessoas,
principalmente na Amrica Latina, e complicaes cardacas e / ou digestivas graves ocorrem em ~ 30% dos
pacientes cronicamente infectados. O estgio agudo da doena principalmente assintomtico e Infeco no
diagnosticada. Na fase crnica, a deteco direta de parasitas Sua presena e diagnstico ocultos so obtidos por
mtodos sorolgicos, como ELISA ou Hemaglutinao indireta. Em pelo menos dois testes devem ser obtidos
Parasita ampla variabilidade antignica. Essas tcnicas requerem laboratrios equipados e pessoal treinado e no
esto disponveis em regies distantes. Como resultado, muitas pessoas infectadas Permanecem no diagnosticadas
at que seja tarde demais, uma vez que as duas quimioterapias disponveis Eficcia no estgio crnico avanado.
Testes de diagnstico rpidos fceis de usar foram desenvolvidos para serem implementados em reas remotas
como alternativa aos testes convencionais. Eles no Precisam de eletricidade, nem cadeia de frio, eles podem
retornar resultados dentro de uma hora e alguns at mesmo trabalho Com sangue total como amostra, como Chagas
Stat-Pak (ChemBio Inc.) e Chagas Detect Plus (InBIOS Inc.). No entanto, para qualificar um paciente positivo
rapidamente diagnosticado para tratamento, a confirmao serolgica convencional obrigatria, o que pode arriscar
seu incio. Nisso Dois testes rpidos baseados em diferentes conjuntos de antgenos foram usados em paralelo como
Um diagnstico rpido e conclusivo da doena de Chagas utilizando amostras de sangue total. Chagas StatPak e
Chagas Detect Plus foram validados por comparao com trs testes convencionais Produzindo sensibilidade de
100% e especificidade de 99,3% sobre 342 pacientes em busca de doena de Chagas Diagnstico em um centro de
referncia em Sucre (Bolvia). Utilizao combinada de RDTs em regies distantes. Poderia substituir a serologia
convencional laboriosa, permitindo tratamento imediato e favorecendo uma melhor adeso a ela.

Resumo do autor
A doena de Chagas uma doena tropical negligenciada causada pelo parasita Trypanosoma cruzi. Isto Afeta 6-7
milhes de pessoas, principalmente na Amrica Latina. Uma fase assintomtica inicial faz A infeco no
diagnosticada e no tratada, progredindo silenciosamente em seu estgio crnico. Cerca de 30% dos pacientes
cronicamente infectados acabam por desenvolver uma interrupo potencialmente fatal do corao e / ou tecidos
intestinais. Existem duas drogas disponveis, mas sua eficcia diminui Quanto mais uma pessoa foi infectada.
Portanto, de suma importncia alcanar Um diagnstico precoce para iniciar o tratamento antes do incio dos
sintomas. No estgio crnico, a presena de parasita intermitente e o diagnstico feito por testes serolgicos que
detectam imunoglobulinas especficas de parasitas. O problema que as tcnicas serolgicas convencionais so
Laborioso e requer equipamentos e pessoal treinado no disponvel em regies remotas
Com alta prevalncia de doena. Para contornar esses inconvenientes, foram desenvolvidos testes de diagnstico
rpido fceis de usar. Eles retornam resultados dentro de uma hora e alguns trabalham com Sangue total como
amostra, permitindo o diagnstico de puno digital. Propomos que os ensaios convencionais possam ser
substitudos por testes rpidos para todo o sangue, a fim de Alcanar um diagnstico conclusivo da doena de
Chagas em regies remotas. Isso facilitaria o acesso ao tratamento que aumenta as taxas de adeso a ele.

Introduo
A doena de Chagas causada pela infeco com o parasito quinetoplastido Trypanosoma cruzi (T. Cruzi),
geralmente transmitidos por vetores triatomneos endmicos das Amricas. Recentemente Dcadas, movimentos
populacionais de regies endmicas para no endmicas e a chance de transmisso independente de vetores
globalizaram o impacto da doena para pases no endmicos Como Espanha [1]. Segundo os relatrios da OMS,
existem 6-7 milhes de pessoas infectadas com o parasita em todo o mundo e 25 milhes em reas de risco de
transmisso vetorial [2]. Apesar destes dados exaustivos So apenas duas quimioterapias disponveis, benznidazol e
nifurtimox, e sua indicao ainda Uma questo de debate [3,4]. Embora altamente eficazes contra a fase aguda,
sua eficciaDiminui quanto mais tempo uma pessoa foi infectada. Alm disso, o tratamento intil na Tardias de
complicaes cardacas crnicas, de modo que pode ser concludo a partir do resultado de o estudo clnico
BENEFCIO que investigou a capacidade teraputica do benznidazol no tratamento de pacientes chagsicos com
dano cardaco avanado [5]. Apesar do desenvolvimento de terapias mais eficazes e menos txicas, uma
necessidade urgente de doena de Chagas, hoje em dia o acesso precoce a Medicamentos actualmente disponveis
ainda uma questo importante. Estima-se que as quimioterapias atuais mal Atingem 1% das pessoas infectadas
[2,6], o que est directamente relacionado com o estigma que ainda circunda. Esta infeco eo fato de que, muito
geralmente, no diagnosticado at que seja tarde demais. Um diagnstico oportuno e preciso continua sendo um
grande obstculo para iniciar o tratamento. O diagnstico Dificultado pelas caractersticas prprias da doena,
representado por suas duas fases distintas. Em primeiro Curta fase aguda principalmente assintomtica e, como
conseqncia, amplamente no diagnosticada Apesar dos parasitas serem detectados no sangue [7]. A longa fase
indeterminada que se segue pode Durante todo o perodo em que o parasita se esconde e no facilmente
detectado apesar de Uma infeco crnica [7]. Ento, cerca de 30-40% dos infectados cronicamente desenvolvero
sintomas cardacos, digestivos ou cardiodigestivos terrveis [7]. Estes causam inflamao macia dos tecidos,
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levando a disfuno orgnica e, finalmente, a morte se no tratada. Assim, quanto mais Diagnstico alcanado
quanto mais cedo o tratamento pode ser administrado, e quanto mais seria.
No estgio crnico indeterminado, com escasso ou sem parasitas circulantes, o diagnstico realizado
serologicamente [8]. Os testes sorolgicos mais utilizados so ensaios imunoenzimticos (ELISAs), quer com base
em lisado de parasita inteiro ou protenas recombinantes como Antignios; Deteco de imunofluoresccia
indirecta (IIF); E ensaio de hemaglutinao indireta (IHA). No entanto, os recursos e pessoal necessrios para o
desempenho desses testes so limitados ou inexistentes em regies distantes. A fim de contornar essa limitao,
Testes de diagnstico (RDTs) foram desenvolvidos para a deteco da doena de Chagas [9]. Estes so fceis de
usar Ferramentas de diagnstico que geralmente fornecem uma leitura de resultados dentro de uma hora. Eles no
exigem equipamentos eltricos ou pessoal treinado para seu funcionamento e so armazenveis e funcionais na sala
Temperatura [9,10]. Todos eles recursos fundamentais para sua implementao em controle remoto Regies, onde o
acesso a / por provedores de sade difcil e o suprimento eltrico pode ser instvel ou Inexistente
Entre os pases americanos onde a doena de Chagas endmica, a Bolvia registra a Maior taxa de
soroprevalncia (6,1%; [11]). Na Bolvia, o diagnstico convencional de Rotineiramente feitas em laboratrios
localizados em locais urbanos maiores, onde as instalaes necessrias esto disponveis. No entanto, a maioria dos
pacientes vive em reas rurais ou periurbanas onde no h acesso a Equipado laboratrios, nem est disponvel o
pessoal treinado para executar e ler os testes. Atualmente, Segundo as orientaes estabelecidas pelo Programa
Nacional de Chagas, o serodiagnstico da doena Feito primeiro por rastreio rpido com RDT Chagas Stat-Pak
(CST; Chembio Inc., Medford, EUA). As deteces positivas so ento confirmadas por testes serolgicos
convencionais: ELISA com base em antignio de lisado de parasita ou por IHA [12]. Somente aps a confirmao da
infeco por serologia convencional, o tratamento pode ser iniciado. Se os resultados do RDT e da serologia
convencional estiverem em desacordo, um terceiro ensaio serolgico, um ELISA baseado em antgeno recombinante,
usado para inclinar a balana [12]. Os testes convencionais fornecem alta sensibilidade e especificidade, mas Eles
so demorados, envolvem etapas mltiplas, precisam de pessoal treinado para realiz-los e Requerem pelo menos
duas visitas do paciente ao centro de sade para serem diagnosticadas. Alm disso, o diagnstico convencional de
Chagas exige recursos (capacidade mdica, equipamento de laboratrio, sangue Bancos, armazenagem frigorfica)
que so escassos nas zonas rurais onde a doena tem uma maior prevalncia. L, o diagnstico por RDTs pode
fazer a diferena (se uma confirmao de diagnstico por uma serologia convencional no fosse necessria para
iniciar a terapia).
No presente estudo, apresentamos a hiptese de que implementar o uso sncrona de dois RDTs Com base em
conjuntos antignicos distintos seria suficiente para fornecer um diagnstico definitivo em pouco tempo, Acelerando o
acesso dos pacientes ao tratamento, resultando em melhor aderncia a ele. Com isso Objetivo, avaliamos em
paralelo o desempenho de dois RDTs: CST (Chembio Inc., Medford, EUA; [13]) e Chagas Detect Plus (CDP; InBios
Inc., Seattle, EUA; [14]). Eles eram Em comparao com testes sorolgicos rotineiramente utilizados (IHA, ELISA de
antignio de lisado e ELISA de antignio recombinante).

Mtodos
Local de estudo, participantes, amostragem e design
A inscrio para este estudo prospectivo foi oferecida a todos os pacientes com 1 e 60 anos que Frequentou o
Laboratrio de Referncia Departamental de Chuquisaca em Sucre, seja sob consulta mdica Prescrio ou por
iniciativa pessoal para obter um diagnstico de doena de Chagas. Pacientes que Participaram da Plataforma de
Ateno Integral ao Paciente Chagas em Sucre tambm foram oferecidos inscrio. Em qualquer caso, os pacientes
vieram da rea urbana de Sucre, que tem uma populao de 312.024 pessoas (152.238 homens e 159.785
mulheres). O departamento de Chuquisaca, dos quais Sucre a capital, povoada com 413.823 pessoas (203.607
homens e 210.216 mulheres).
Nenhum dos pacientes matriculados j havia recebido tratamento anti-Chagas. Aps a assinatura do O
consentimento informado, os pacientes voluntariamente concordaram em participar do estudo desinteressadamente.
No total, Foram coletadas 342 amostras (223 mulheres e 119 homens). A amostragem foi realizada entre maro E
maio de 2014. O sangue total para os RDTs foi obtido pela puno do dedo. No mesmo Visitar um volume sanguneo
maior tambm foi obtido por extrao venosa. Foi colocado sangue extrado Em tubos de coleta de 5 ml sem anti-
coagulantes e deixa coagular durante 10 min temperatura ambiente. Os tubos foram centrifugados 10 minutos a
3.000 rpm para segregar os soros que eram ento
Colocados em tubos apropriadamente rotulados. As amostras de soro foram usadas imediatamente ou Armazenado
congelado at ser necessrio.
O estudo foi duplo-cego com trs observadores diferentes envolvidos: um para o CST, outro
Para o CDP e um terceiro para os testes sorolgicos convencionais (IHA, ELISA com base em lisado Antignio e
ELISA com base em antignio recombinante). Nenhum dos observadores conhecia os resultados obtidos pelos
outros a qualquer momento. Todos os testes (dois RDTs e os trs ensaios serolgicos convencionais). Foram
avaliados em toda a populao inscrita (faixa etria de 1 e <60 anos, n = 342). Notavelmente, RDTs usaram sangue
total como amostra enquanto os testes convencionais dependiam de amostras de soro.

tica
O estudo foi revisado e aprovado pelos Comits de tica de "Fundacio'n Ciencia y Estudios
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Aplicados para o Desenvolvimento em Sade e Meio Ambiente "(CEADES) e o Departamento de Servio de Sade
de Chuquisaca (SEDES Chuquisaca). Da mesma forma, o protocolo foi aprovado por A Universidade Andina Simon
Bolivar (Sucre, Chuquisaca, Bolvia), e foi enviada para ambos Programas Departamentais e Nacionais de Chagas
para seu reconhecimento e aprovao. Todos os pacientes Includo no estudo, assinou um consentimento informado.
Nos casos em que os pacientes tinham menos de 18 anos Anos (idade legal), informar o consentimento foi assinado
pela me, pai ou tutor atribudo.

Testes serolgicos convencionais

Os testes utilizados no estudo so aqueles rotineiramente realizados pelo Programa Nacional de Chagas e por A
Plataforma de Ateno Integral ao Paciente Chagas. Os testes de ELISA eram de Wiener Lab (Rosario, Argentina) e
incluiu o ELISA baseado em lisado de parasita (Wiener v2.0) e o ELISA recombinante baseado em antignio (Wiener
v3.0). Os testes foram realizados seguindo as instrues do fabricante.
Em relao ao teste IHA, foi utilizado o kit Chagas Polychaco da Lemos Laboratorios (Buenos Aires, Argentina).
Resumidamente, a funcionalidade do ensaio baseada na capacidade de anti-T. Immunoglobulinas cruzi para induzir
a hemaglutinao de glbulos vermelhos pr-sensibilizados de sangue de ovelha parasita. As amostras foram
Testado em uma faixa de diluio de 2 vezes de 1/16 at 1/1024. As diluies de 1/8 de srum foram incubadas Com
glbulos vermelhos de ovelha no sensibilizados como controle de reatividade cruzada com antgenos heterlogos.
Amostras que induziram uma malha de hemaglutinao em clulas vermelhas sensibilizadas em diluies 1/16
Foram considerados positivos, na medida em que no reagiram de forma cruzada com glbulos vermelhos no
sensibilizados Em 1/8. Se a reactividade cruzada ocorreu, o protocolo foi repetido ao tratar as amostras com 2-
mercaptoetanol seguindo as instrues do fabricante. Todos os indivduos confirmados como positivos receberam
tratamento benznidazol pelo mdico Oficial da Plataforma de Ateno Integral ao Paciente Chagas em Sucre ou no
Servio De Sade Departamental, se preenchessem os critrios de tratamento.

Testes rpidos de diagnstico

A seleo de RDTs para o estudo baseou-se na sua capacidade de permitir o diagnstico de sangue total Amostras,
gerar resultados em uma hora, no exigir instrumentao para leitura de resultados, ter Longa vida til na
temperatura ambiente, e basear-se em conjuntos distintos de antgenos parasitas. CST (Chembio Inc.) est em uso
como ferramenta padro para a triagem da doena de Chagas pelo nacional de Chagas Programa desde 2005.
Baseia-se na deteco de IgG especfica para os antgenos de T. cruzi B13, 1F8 e H49 / JL7 (o ltimo permitindo a
deteco de anticorpos IgG caractersticos do estgio crnico da doena [15]). Apesar de no estar comercialmente
disponvel na Bolvia no horrio de estudo, O CDP (InBios Inc.) foi escolhido devido sua capacidade de ser usado
com amostras de sangue total, o Fato de que apenas 5 l eram necessrios para uma leitura vivel, e porque ele tem
uma mudana de resultado de cerca de 25 min [14]. Baseia-se em um antgeno de vrios eptopos (ITC8.2; [16]) que
contm difere em sua origem a partir do CST. Os RDTs foram feitos imediatamente aps a coleta de sangue com a
segunda queda de sangue anexada
Para instrues do fabricante.

Medio de performances de testes

As variveis de estudo consideradas foram: (i) sensibilidade, definida como a porcentagem de positivo Pacientes
corretamente diagnosticados em comparao com o padro; (Ii) especificidade, definida como a Percentual de
pacientes negativos corretamente diagnosticados em comparao com o padro; (Iii) valor preditivo positivo, a
proporo de pacientes positivos que foram realmente positivos; (Iv) negativo Valor preditivo, a proporo de
pacientes negativos que eram realmente to; E (v) eficincia de diagnstico (isto , preciso), a proporo de
resultados vlidos entre todos eles, definida, portanto, como a proporo de indivduos classificados corretamente. Ao
longo do estudo, os padres para Comparar com foram respectivamente ELISA com base em antgeno recombinante
(Wiener ELISA V3.0), e os resultados coordenados dos trs testes sorolgicos convencionais utilizados.

Anlise de dados e mtodos estatsticos

Os dados de cada participante no estudo foram inseridos no Microsoft Excel e analisados com o Software livremente
disponvel EPIDAT (verso 3.1; Sergas, Santiago de Compostela, Espanha; disponvel Em
http://www.sergas.es/Saude-publica/EPIDAT). A porcentagem de concordncia entre As metodologias foram
determinadas com o coeficiente Kappa () que compara o acordo Entre os resultados reais e esperados, seguindo a
escala de critrios de Landis e Koch [17]. Dentro O presente estudo, para que um RDT seja considerado confivel,
seu deve ser> 0,8. Um valor > 0,8 e 0,9 indicou uma concordncia muito boa, enquanto que [0,9> 1,0] foi
considerado excelente. Dentro Todos os casos, o intervalo de confiana (IC) foi estabelecido em 95% e seus valores
so fornecidos entre parnteses Onde correspondente. O teste Z foi utilizado para determinar o nvel estatstico de
significncia em Cada caso (p <0,05). O ndice de Youden foi calculado para determinar a eficcia diagnstica
(preciso) da combinao RDT em comparao com os testes sorolgicos convencionais.

Resultados
Estudar dados demogrficos
A amostragem, o teste e a anlise do estudo foram realizados entre maro e julho de 2014.
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Os critrios de incluso e excluso, finalmente, participaram 342 pacientes (faixa etria de 1 e <60 anos). A maioria
das amostras foi de pacientes> 15 anos de idade. A idade mdia dos participantes foi de 32,3 anos (desvio padro
15,2). O grupo composto por aqueles> 15 anos de Idade representaram 86,5% das amostras (296/342). Apenas 18
participantes (5,3%) tinham menos de 5 anos,
E os restantes 28 (8,2%) tinham entre 5 e 14 anos de idade. As mulheres foram mais (65,2%)
Comparado aos homens (34,8%) (relao homem / mulher de 0,53). Desempenho dos testes convencionais Em
primeiro lugar, IHA e ELISA com base em antignio de lisado de parasita (ELISA v2.0) foram avaliados em Uma
comparao de um por um com o ELISA v3.0. A sensibilidade IHA foi de 99% (IC: 98,8-99,3%; P <0,05), uma vez que
relatou duas deteces falso-negativas em relao ao ELISA padro v3.0.
(Tabela 1). A especificidade IHA foi de 99,3% (IC: 98,9-99,6%; p <0,05), pois tambm relatou uma amostra falsa
positiva. No geral, seus valores preditivos positivos e negativos foram respectivamente 99,5% (IC:99,3-99,8%) e
98,5% (IC: 98,1-98,9%).
Em contraste, a triagem das 342 amostras com o ELISA v2.0 produziu uma sensibilidade de 100% (CI: 99,8-100%; p
<0,05). Sua especificidade foi de 99,3% (IC: 99,8-100%; p <0,05), assim como A IHA resulta, detectou um soro falso
positivo (um diferente). ELISA v2.0 positivo e
Os valores preditivos negativos foram respectivamente 99,5% (IC: 99,3-99,8%) e 100% (IC: 99,6-100%).

Tabela 1. Categorizados resultados de testes sorolgicos convencionais em comparao com Chagas Stat-Pak
(CST) e Chagas Detectar Plus (CDP) RDTs.
*a falta de amostra um triplo negativo paciente por sorologia convencional que foi positivo tanto com RDTs. N,
negativo; P, positivo.

Avaliao de CST e CDP

O desempenho de CST e CDP foi idntico (Tabela 1). Assim, a comparao com os resultados da serologia
convencional produziu exatamente os mesmos resultados, avaliando-os individualmente ou Como uma dupla. A
sensibilidade relatada foi de 100% (IC: 99,8-100%; p <0,05), enquanto a especificidade Foi de 99,3% (IC: 98,9-
99,6%; p <0,05). O valor preditivo positivo de RDTs foi de 99,5% (IC: 99,3- 99,8%), e seu valor preditivo negativo foi
de 100% (IC: 99,6-100%). Em comparao com o Trs testes sorolgicos convencionais, cada RDT detectou o
mesmo paciente falso positivo positivo. Isso mostrou-se negativo nos trs exames serolgicos convencionais (Tabela
2).O nvel de concordncia da eficcia do diagnstico alcanado por um uso combinado dos dois RDTs em
comparao com o uso de IHA e ELISA v2.0 medido por meio do coeficiente foi 0.97 (CI: 0.94-0.99; p <0.05). Por
outro lado, o coeficiente obtido aps a comparao do uso combinado de RDT com o resultado de todos os trs
testes convencionais foi = 0,99 CI: 0,98-1,00; p <0,05). Quanto eficincia diagnstica (DE) ou exatido dos
RDTs, el Foi de 99,7% face a resultados serolgicos convencionais (IC: 99,0-100%) e relatou um O ndice de Youden
de 0,99.Por favor, o potencial do casal RDT para detectar corretamente o positivo E negativos foi equivalente
metodologia convencionalmente utilizada.

Tabela 2. Tabela de dois por dois da classificao da doena de Chagas conforme definido pelo uso de RDTs e testes
sorolgicos convencionais (IHA, ELISA v2.0 e ELISA v3.0).

Fig. 1. Seropositividade por faixa etria. Status sorolgico dos pacientes por faixa etria estudada. Dark bars show O
nmero de amostras positivas das amostras totais (barras inteiras) (escala no eixo Y esquerdo); Linha representa o %
De pacientes soropositivos por faixa etria (escala no eixo Y direito).

Classificao serolgica das amostras

No momento da amostragem, idade e sexo dos indivduos que participaram no estudo foram registrados. E mais
tarde costumava classificar os resultados obtidos em relao a esses parmetros. O estudo incluiu 342 indivduos
com idades entre 1 e 59 anos. Se as amostras dos participantes So agrupados em trs subgrupos de acordo com
sua idade (n1: 1-4 anos, n2: 5-14 anos e N3: 15-59 anos), o mais representado o ltimo (n3 = 296, em comparao
com n2 = 28 e n1 =18). Tambm rene a maior porcentagem de indivduos soropositivos (68,6%, 203/296) com
Respeito aos dois outros subgrupos: 14,3% (4/28) e 5,6% (1/18), respectivamente para n2 e n1 (Figura 1). No geral,
a taxa mdia de soroprevalncia obtida foi de 60,8% (208/342). Por outro lado, quanto distribuio sexual, as
mulheres estavam mais representadas do que Homens no estudo (n = 342; 223 mulheres com mais de 119 homens),
e a soroprevalncia entre eles foi Maior do que entre os homens (mulheres: 64,6% (144/223), contra 53,8% (64/119)
dos homens).

Discusso
Os estudos de triagem para validar CST e CDP relataram resultados variados. Do acordo de 100% entre ELISA e
CST em quase 6.000 amostras de soro de sangue centro-americano
Doadores e pacientes com Chagas [15], CST 87% de sensibilidade e 93,2% de especificidade relatada por Sanchez-
Camargo et al. Ao testar soros de nove locais separados geograficamente [10]. NaquiloO mesmo estudo, o CDP
superou o CST ao registrar 93,4% de sensibilidade e 95,2% de especificidade [10]. No entanto, a CDP tinha uma
sensibilidade mdia de 84,8% e 97,3% de especificidade em soros de quatro Pases distintos (Argentina, Equador,
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Mxico e Venezuela) em outro trabalho [18]. At a presente data, O nico estudo que comparou CST e CDP no
mesmo conjunto de amostras, respectivamente, determinou 87,5% e 90,7% de sensibilidade em soros bolivianos,
enquanto a sensibilidade CST e CDP nos soros
Do Peru foi muito menor (respectivamente, 26,6-33% e 54,3-55,2%, dependendo da observador; [19]). Como
sugerido em outros lugares, pode ser que, em regies com menores taxas de prevalncia, Com os ttulos de
anticorpos generalizados mais baixos esperados, a implementao de RDTs no vivel Devido a uma sensibilidade
muito baixa [20]. Em ambos os locais, a especificidade foi> 98%, apontando para deteces falsas positivas como
causa da discrdia, o que pode ser devido reatividade cruzada com outras Infeces, como a leishmaniose. CST e
CDP tambm so funcionais com sangue total como amostra [10,13,14], o que representa uma grande vantagem em
relao aos soros, pois reduz os procedimentos laboratoriais necessrios. Alm disso, O volume de sangue
necessrio para os testes to pequeno (10 e 5 l, respectivamente) que a amostragem pode ser Feito pela puno
digital, que facilita em grande parte o processo e simplifica a triagem de crianas. A caixa CST inclui tantos tubos
Microsafe (10 L) para sangue total de dedo Aquisio como dispositivos de teste, enquanto o kit CDP no os inclui
[13,14].
A primeira avaliao de campo de CST com amostras de sangue total (n = 1.913, todos menores de 18 anos Antigo)
da Bolvia (regio de Sucre) relatou 93,4% de sensibilidade e 99% de especificidade (98,6% de concordncia entre
os resultados sricos e de sangue total [21]). Com essa sensibilidade, os autores concluram Que o CST no era
ideal como ferramenta de diagnstico, mas afirmou que foi melhorado para 96,7% se a leitura do teste
O tempo foi feito em 20 min em vez dos 15 minutos instrudos pelo fabricante. Ns no temos
Encontrou tais diferenas em nosso estudo. Considerando os resultados do serolgico convencional Ensaios Roddy
et al. Encontrou uma taxa de seroprevalncia de 6,3% (121/1913) [21]. Em nosso caso, testando um Uma coleo de
pacientes muito menor, a soroprevalncia entre os menores de 15 anos foi de 11,1% (5/45). Outro estudo do CST
sobre n = 874 amostras de sangue de migrantes latino-americanos na Sua (> 16 anos, a maioria dos pacientes
infectados eram da Bolvia) determinou uma sensibilidade de 95,2% e 99,9% de especificidade (99,7% de
concordncia entre soro e amostras de sangue; 22]). Dentro
Acordo com esse trabalho, tambm encontramos uma excelente sensibilidade (100%), uma especificidade muito alta
(99,3%) e o mesmo nvel de concordncia entre o uso de soro e sangue com CST.
A avaliao do campo InBios CDP com sangue tambm foi feita com amostras bolivianas, desta vez Da provncia de
Santa Cruz (n = 108 adultos) e do Chaco, incluindo mulheres grvidas (N = 277) e crianas at aos 17 anos (n = 200)
[20]. Em geral, em comparao com o convencional. A sensibilidade sorologia CDP foi de 96,2% e sua
especificidade foi de 98,8% (95,3% de concordncia de soro e sangue, = 0,905). Em nosso estudo, o CDP tambm
mostrou excelente sensibilidade e especificidade Respectivamente, 100% e 99,3%), e a concordncia entre soro e
sangue foi de 99,7% (341/342; = 0,99). A maior soroprevalncia detectada por ns em mulheres (64,6%; 144/223)
em relao ao Shah e ao coletivo congnita (48,4%; [20]) pode ser devido ao fato Que as mulheres matriculadas em
seu sub-estudo eram mais jovens em mdia (15-42 anos). Contudo, Dentro da faixa etria inclusiva entre 15 e 42
anos de idade em nosso estudo (56,5% das mulheres; 126/223) a seroprevalncia recuperada por ns ainda
bastante alta (67,5%; 87/126). Assim, essa diferena Com o trabalho anterior pode estar relacionado aos locais
estudados e uma soroprevalncia geral maior em Sucre (Chuquisaca) em comparao com Camiri (provncia da
Cordilheira, regio do Chaco [20]).
Definitivamente, a variao geogrfica, diretamente relacionada a diferentes taxas de soroprevalncia e cepas
parasitrias circulantes, de grande relevncia para a implementao de RDTs no campo. Portanto, em total
concordncia com outros, os RDTs devem ser validados em campo em cada site especfico antes recomendado o
uso para triagem [19,20]. A seroprevalncia detectada neste trabalho foi bastante Alto (60,8%), mas, de acordo com o
governo boliviano, o Departamento de Gesto de Chagas Programa (com dados de 2013), a soroprevalncia da
doena de Chagas no departamento de Chuquisaca foi estimada em 5,6% entre crianas entre 1-4 anos, 5,4% na
faixa etria De 5 a 14 anos e 56,6% nos 15 anos [23]. Isso est acima do pas Significa (6,1%; [11]), ilustrando uma
distribuio heterognea da doena de Chagas no pas.
Embora a principal populao alvo desses diagnsticos sejam pacientes indeterminados, Ser interessante determinar
se o desempenho deles varia em relao ao perodo indeterminado ou Estgio sintomtico da doena de Chagas
crnica.
No caso da Bolvia, os resultados deste estudo e outros com amostras de sangue bolivianas, descrevem CST e CDP
como ferramentas rpidas, confiveis e precisas [19,20,22], trazendo a chance de incorpor-los nos protocolos de
diagnstico (CST j est na linha de frente para a triagem sorolgica da doena de Chagas na Bolvia, tanto na
triagem de banco de sangue quanto Diagnstico clnico) [12]. Contudo, Apesar da permeao RDT no sistema de
sade, o diagnstico serolgico convencional ainda necessrio para a confirmao da infeco [12,21]. Este
requisito para um diagnstico convencional definitivo Impe um atraso no incio do tratamento que pode dificultar a
adeso do paciente a ele. No Departamento de Chuquisaca, a maioria dos municpios endmicos apresenta alta
prevalncia de infeco por T. cruzi e Tem problemas para acessar servios de laboratrio devido a ms
comunicaes e falta de recursos. Laboratrios em A regio pequena, est equipada e possui recursos muito
limitados. No entanto, eles so obrigados Por lei, para incluir o diagnstico da doena de Chagas para a populao
que exige o servio [24].
Tendo em conta que a CST e a CDP demonstraram desempenhar de forma excelente na escala de critrios De
Landis e Koch [17], e que eles so baseados em conjuntos de antgenos distintos, o uso da dupla Para substituir a
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serologia convencional usada atualmente seria justificada. Como os mesmos resultados foram Recuperado com
ambos os RDTs, teria sido muito interessante ter considerado outros recursos. Para comparao entre eles (ou seja,
fora do sinal, facilidade de uso). No entanto, devido ao cego Caractersticas do estudo, com um observador distinto
responsvel por cada RDT e outro em Carga de testes serolgicos convencionais, no foram includos outros critrios
de comparao. De acordo com um artigo recente de Angheben et al., Uma comparao cega de RDTs e ensaios
serolgicos convencionais (ouro-padro) deve ser feita em uma srie consecutiva de pacientes de um relevante
Populao clnica para uma avaliao tima de sua preciso [25]. Em vista dos resultados obtidos.
O uso de CST e CDP em regies distantes uma alternativa s metodologias convencionais. No entanto, deve notar-
se que os RDTs demonstraram ter uma sensibilidade adequada em regies onde a soroprevalncia menor do que
na Bolvia [19]. Como as taxas de soroprevalncia Tambm variam entre regies distintas do pas, inevitvel pensar
que RDTs seria pior do que o que relatamos aqui se o estudo tivesse sido realizado em outras regies. Portanto,
Estudos-piloto especficos da regio ou um estudo maior a nvel nacional, incluindo amostras de origem
geograficamente heterognea, devem ser lanados antes de adotar completamente essa abordagem.
Outro problema poderia ser o preo do RDT, que , em princpio, desvantajoso para os ensaios convencionais. Na
Bolvia, os custos de RDT variam de 4 $ a 7 $ (US $) por determinao nica, Enquanto o custo mdio de uma leitura
nica de teste convencional de 1 $. No entanto, se o custo da logstica das tcnicas convencionais contabilizado,
seu custo real ser muito maior. Apesar de no ter ocorrido neste estudo, no pode ser descartado que resultados
divergentes entre Ambos os RDTs so observados. Ento, um terceiro teste ainda seria necessrio para a
confirmao do resultado inconclusivo. Embora isso aumentasse os custos, notadamente isso s deveria ser
realizado em um Pouca porcentagem de resultados no conclusivos esperados e seria razoavelmente ainda rentvel
Se os custos logsticos serolgicos convencionais forem considerados.
Os resultados recuperados deste estudo validam o uso da dupla de diagnstico CST e CDP para Reduzir o tempo de
resposta aos pacientes e os recursos logsticos atualmente necessrios para elaborar um diagnstico confirmado de
doena de Chagas. Portanto, recomendamos a implementao da Ambos RDT com sangue total como amostra para
fornecer um diagnstico rpido, confivel e definitivo da doena de Chagas em contextos distantes.