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Qumica Analtica Instrumental radiacin. Clulas. Selectores de longitud de onda. Detectores. Tratamiento de seales.
Tema 3.- Espectroscopa UV-visible. Sistemas que absorben en el UV-visible. Ley de Beer.
Instrumentacin. Mtodos y aplicaciones.
Tema 4.- Espectroscopa de luminiscencia molecular. Fluorescencia y fosforescencia.
Quimioluminiscencia. Instrumentacin. Aplicaciones.
Tema 5.- Principios de espectroscopa atmica. Espectros atmicos de emisin y
absorcin. Trminos espectrales. Anchuras de lnea. Atomizacin por llama y
electrotrmica. Eleccin de las condiciones ptimas. Atomizacin con fuentes de plasma.
Atomizacin con arco y chispa. Instrumentacin. Aplicaciones.
Tema 6.- Clasificacin de las Tcnicas Electroanalticas. Leyes Generales. Fenmeno
2013 Dr. Jos Mara Fernndez lvarez Electrdico. Lmite de Electroactividad. Montaje Potenciosttico. Electrodos selectivos de
Facultad de Ciencias iones.
Universidad de Navarra Tema 7.- Etapas de la Reaccin Electroqumica: control difusional; capa de difusin;
hiptesis de Nernst; flujo difusional y convectivo; leyes de Fick. Curvas i-E. Potenciales de
equilibrio, mixto y lmite.
Tema 8.- Valoraciones amperomtricas y potenciomtricas. Sistemas autoindicadores.
Sistemas electroqumicos indicadores de reacciones en equilibrio.
Tema 1. Introduccin
1
Regiones del espectro electromagntico Interaccin de la energa radiante con la materia
Interaccin de la energa radiante con la materia Interaccin de la energa radiante con la materia
La luz tiene una naturaleza dual: El principio de quantizacin de la energa implica que slo son
Corpuscular (fotones) posibles ciertos valores discretos de energa.
Ondulatoria (ondas)
2
La luz y su interaccin con la materia: niveles discretos de energa Onda electromagntica
Potencia, P, es la energa expresada en watios que alcanza un rea La amplitud de la onda resultante depende del desfase entre las ondas
determinada por unidad de tiempo individuales
h c
E h h c h, constante de Planck = 6,6310-34 J s
3
Transmisin de la luz a travs de un medio: frenado de onda Curva de dispersin refractiva
Lentes, n cte.
vi = f (i)
ni = f (i)
Prismas
ndice de c
ni
refraccin vi
Rayleigh
4
Refraccin de la luz: ley de Snell Reflexin de la luz
c
sen 1 n2 v 2 v1 1 1 Principio de Fermat: la
La longitud L de A a B es: luz sigue el camino ms
sen 2 n1 c v 2 2 2 corto (menos tiempo).
v1
n1 sen 1 n2 sen 2
Difraccin de radiacin monocromtica por rendijas Difraccin de radiacin monocromtica por rendijas
Difraccin: todo haz paralelo de radiacin electromagntica se curva al BCF DOE
pasar por un objeto puntiagudo o por una rendija estrecha.
CBF
CF BC sen
m BC sen
m : orden de interferencia
DE OD sen
BC DE BC DE
m
OD OE
5
Radiacin coherente Diagrama simplificado de niveles energticos
Radiacin emitida por una fuente cuando todas las ondas elementales emitidas poseen
una diferencia de fase constante en el tiempo y en el espacio (IUPAC, 1997)
6
Emisin atmica y molecular Emisin de un cuerpo negro: continuo de radiacin vs. lneas discretas de RX
1
mx (Wien)
T
W(B ) T 4 (Stefan)
W V 4 (en el VIS)
espectroscpicos.
Fuente Detector y
2. Fuentes de radiacin. registrador de la
seal
3. Clulas.
M t
5. Detectores.
6. Tratamiento de seales.
Absorcin
Fluorescencia
Emisin
7
Diagrama de bloques para absorcin Diagrama de bloques para fluorescencia y fosforescencia
Caractersticas relevantes:
3. Estabilidad
5. Tiempo de vida
6. Geometra
8
I: Fuentes de continuo I: Fuentes de continuo
9
Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
R 21(estimulada) N2
R 12 (absorbida) N1
Conclusin:
para lograr emisin
estimulada se precisa una
inversin de la poblacin:
N2 > N1
Lasing medium
at ground state
Pump energy
Population
inversion
Pump energy
10
Laser: tipos Laser: caractersticas
1. Filtros
Absorcin (vidrio, pelcula o disolucin coloreada: solucin ms barata)
Corte
Interferencia
2. Monocromadores
Prisma
Red
Muestran muy baja transmitancia Dos trminos asociados con los filtros pticos son: 1. Anchura de banda
efectiva medida a la
Presentan un perfil de pico muy ancho mitad de altura de pico.
Relativamente baratos
11
Filtros de corte (Cut-off filters) Combinacin de filtros de absorcin y de corte
%T
/ nm
t
Recorrido entre superficies:
Lminas de cos
Haz incidente vidrio 2t
Reforzamiento: m'
cos
0 cos 1
m ' 2 t
Capas metlicas
semi-reflectantes Radiacin Longitud de onda transmitida: t
transmitida
2tn
m
Tpicamente, el %T
disminuye con
anchuras de banda
decrecientes.
12
Cua de interferencia (wedge) Monocromador: Prisma
White Radiation
Moveable Slit
Glass
Metallic Layer
Dielectric Layer
Monochromatic
Se pueden usar desde el UV hasta el IR
Radiation
El material a emplear depende de la zona del espectro
Son tiles para seleccionar varias bandas de radiacin gracias al Vidrio: en el VIS por encima de 350 nm
movimiento de la radiacin incidente a lo largo del filtro.
Cuarzo: en el UV
Sales cristalinas (NaCl, KBr): en el IR
Las anchuras de banda tpicas son 20 nm
AB d sen r
m d (sen i sen r)
Una red que contiene 1.450 surcos/mm es irradiada con luz policromtica con
un ngulo incidente de 48. Qu longitudes de onda aparecern a un ngulo
de reflexin de +20 y de -10?
m d (sen i sen r)
mm 10 6 nm
d 689,7 nm
1.450 mm
Para r = 20:
Para r = -10:
13
Monocromador de red. Montajes Czerny-Turner y Ebert Monocromador: Dispersin
r i
m 2 dsen
2 d cos
D 1
mF
14
Monocromador de red de escalera Monocromador de red de escalera
Si la w se ajusta de
modo que ef =
se consigue resolucin
espectral completa.
w
nm
R 1,2 w?
D 1 ef y mm
y
Si y w ef ef
1
(589,6 589) 0,3 nm
2
ef w D 1
ef 0,3 nm
w 0,25 mm
D 1 1,2 nm
mm
Rendijas estrechas
garantizan mejor
resolucin
P
Rendija estrecha
Mejor resolucin: aptas para anlisis cualitativo
Prdida de potencia del haz: no recomendables para anlisis cuantitativo
15
Material ptico Celdas para la muestra
Muy sencillo
S = kP
Poco sensible
Fatiga
16
Tubo fotomultiplicador (PMT) Tubo fotomultiplicador (PMT)
I0
I1
+ -
h
Se origina una corriente
proporcional a la potencia radiante
R (a. u.)
Depletion layer
Sensibilidad intermedia entre el fototubo
de vaco y el tubo fotomultiplicador
190 1100 nm
17
Serie de fotodiodos (Photodiode array) Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD)
Diode Array
Multi-channel
Amplifier
Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD) Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD)
Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD) Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD)
Pixel Output
register
(a) (b)
(a) (b)
(a) By changing in a synchronized way the potential of the electrodes, electrons are
The way a CCD works is illustrated by means of a simplified CCD made of 9 pixels, an transfered from pixel to pixel. Charges on the right are guided to the output register
output register and an amplifier. Each pixel is divided in 3 regions (electrodes who serve to (b) The horizontal transfer of charges is then stopped and charge packages at the output
create a potential well). (a) when an exposure is made, the central electrode of each pixel is
register are transfered vertically, one by one, to an output amplifier and then read one
maintained at a higher potential (yellow) than the others ( green) and the charges collecting
process takes place. (b) At the end of the exposure, the electrodes potentials are changed by one. The cycle starts again until all the charges have been read (reading time of about
and charges transferred from one electrode to the other. 1 minute for a large CCD).
18
Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD) Dispositivo de carga acoplada (Charge Coupled Device, CCD)
La medida instrumental cuantitativa Cociente Seal/Ruido (Signal to Noise ratio; S/N): Su estimacin
x = 0.9 x 10-15
A menudo el ruido es constante e independiente de la seal S/N = x/s = 0.9 x 10-15/0.2 x 10-15 = 45
19
Ruido trmico (ruido blanco) Ruido de disparo (shot noise)
Hardware:
1. Toma de tierra y proteccin (caja de Faraday)
2. Filtracin analgica y RC
3. Modulacin: conversin de la seal DC a AC de alta
frecuencia y posterior demodulacin
4. Chopping de la seal: disco rotatorio, ayuda a discriminar
seales continuas de las transientes
5. Amplificadores operacionales
Deja pasar las seales de frecuencia baja, eliminando el ruido asociado a Elimina el ruido de frecuencia baja (parpadeo y deriva) permitiendo el
frecuencias altas (ruido trmico y de disparo) paso de las frecuencias altas.
High Pass
i Filter 0
Low Pass
Filter
Time Time
20
Filtro de paso de banda Modulacin - desmodulacin
Combinacin adecuada de filtros de paso bajo y alto para dejar pasar La seal se modula hacindola pasar por un chopper (disco rotatorio) de
solamente la(s) frecuencia(s) de inters. modo que pasa de poseer baja frecuencia a ser una seal de alta frecuencia (el
ruido 1/f es menos problemtico a frecuencias elevadas)
0.6 0.6 bajo para dar lugar a una seal de corriente continua (dc)
Band Pass
0.4
Filter
0.4
amplificada
0.2 0.2
0.01 0.1 1.0 10 100 1000 10,000 0.01 0.1 1.0 10 100 1000 10,000
Frequency, Hz Frequency, Hz
S
n
1. Promediado conjunto S Si
2
punto por punto como en una matriz i 1
i x
Sx N ( rms noise ) i 1
de la memoria de un ordenador n n
i 1 i 1
S n Sx S n
n x
N n Nx Nx
A Single Spectrum
1.5
S N S/N
1.0
0.91 0.289 3.14 Sx S
n 1 Suaviza las irregularidades de alta
Signal
21
Sensibilidad Lmite de deteccin (LOD) y de cuantificacin (LOQ)
a) Calibrado S = seal o respuesta del instrumento LOD: mnima concentracin o masa de analito que puede ser detectada por un
Sbl = seal del blanco mtodo instrumental a un nivel dado de confianza (95%)
S = mc + Sbl
c = concentracin de la muestra LOQ: mnima concentracin que puede ser fiablemente cuantificada
m = sensibilidad del calibrado (pendiente
b) Analtica de la curva de calibrado; no tiene en cuenta la
LOD
m precisin de las medidas individuales)
Seal analtica mnima detectable:
sS Sm: Seal mnima detectable
Sm = Savg, bl + ksbl
100
Signal (S )
Lmite de deteccin (LOD) y de cuantificacin (LOQ) Intervalo dinmico de linealidad y lmite de linealidad (LOL)
LOL
Instrume nt Re sponse
LOQ
cm
Dynamic Range
Conce ntration
LOQ
Seal mnima cuantificable: Concentracin mnima cuantificable:
Sq = Savg, bl + 10sbl 10 sbl
cq
m
1. Espectroscopa UV-visible.
3. Ley de Beer.
4. Instrumentacin.
5. Mtodos y aplicaciones.
160 780
22
Ley de Beer: presupuestos bsicos Ley de Beer: deduccin
1. La radiacin es monocromtica
radiacional P
db
mol 23 tomos
NC 6,02310 dV (L) 10 3 6,023 10 20 S db C
L mol
K'
dP
dP K db C P ; K C b S
P P0
P b
dP P
P
K C db ; ln K C b
P0 P
P0 0 db
P K P b
log bC log log T Abs
P0 2,303 P0
b [=] cm
a = , absortividad molar; [=] L mol-1 cm-1
Abs = a b Ley de Beer
C c [=] mol/L
Ley de Beer: Absorbancia, Transmitancia y Absorcin Ley de Beer: Prdidas de potencia radiante
T = P/Po
%T = (P/Po) x 100
A = -log T= abc
%Absorcin = 100 - %T
23
Ley de Beer: Correccin de prdidas Ley de Beer
celda
P' P P' P
Treal 1 ; Tmedida 1 1 ; Abs logT log 0
P' P0 P' P1
P1
Experimentalmente se miden slo potencias salientes
b1
b
En un medio absorbente, la potencia decae exponencialmente con la En un medio absorbente, la potencia decae exponencialmente con la
longitud de paso ptico concentracin.
P P1
P P1 C1
Potencia Potencia
b c b1
P P0 10 P P0 10 b c
P P
celda
P P2
P1
P C2
P2
P1 b2
P2 P2
b1 C1 C2
b2 b C
Abs b C
1.8
1.6 Se pueden encontrar valores elevados de
Absorbancia
1.4
Absorbance
R2 = 0.9995
max~45.000
SO 3H
HO3S 0.4
0.6 1.6
y = 13245x + 0.0351
0.5 1.4 O
R2 = 0.9995
Absorbance
0.3
1.2 UVA UVA
absorbance
0.4 1
0.2
0.3 0.8
T
0.2 0.6
HO 3S 0.1
0.4 O
0.1 0.2 O
SO 3H
0
0 0 200 250 300 350 400
0.00E+00 2.00E-05 4.00E-05 6.00E-05 8.00E-05 1.00E-04 1.20E-04 0.00E+00 2.00E-05 4.00E-05 6.00E-05 8.00E-05 1.00E-04 1.20E-04
Mexoryl SX W avelength/nm
[P340]/M [P340]/M
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Ley de Beer: aditividad Ley de Beer: desviaciones
Propias a la Ley A no tiene limitacin con respecto a b Propias a la Ley A no tiene limitacin con respecto a b
Se pueden emplear celdillas pequeas para analitos Se pueden emplear celdillas pequeas para analitos
concentrados y celdilla ms largas para muestras ms concentrados y celdilla ms largas para muestras ms
diluidas. diluidas.
Si A = 0,410 en una celdilla de 1,0 cm, entonces: Si A = 0,410 en una celdilla de 1,0 cm, entonces:
Si b = 2,0 cm, A = 0,820 Si b = 2,0 cm, A = 0,820
Si b = 0,1 cm, A = 0,041 Si b = 0,1 cm, A = 0,041
Concentraciones > 0,01 M alteracin del proceso de absorcin individual Concentraciones > 0,01 M alteracin del proceso de absorcin individual
Ley de Beer es una ley lmite Ley de Beer es una ley lmite
Un aumento de la concentracin del buffer o del disolvente tiene un efecto Un aumento de la concentracin del buffer o del disolvente tiene un efecto
similar similar
Si la modificacin de C implica cambio de n, entonces vara Si la modificacin de C implica cambio de n, entonces vara
(n) = [n/(n2 + 2)2] (n) = [n/(n2 + 2)2]
HIn H In
CHIn [HIn] [In-]
color 1 color 2
Qumicas
10-5 8.5x10-7 9.2x10-6
Expected
C
HIn
Estudiar el ej. 13.1 de las pginas 326-7 del Skoog
25
Ley de Beer: desviaciones. Punto isosbstico Ley de Beer: desviaciones.
Se observa un punto isosbstico cuando dos especies absorbentes en Efecto de la radiacin policromtica
equilibrio, X e Y, tienen la misma absortividad molar a una longitud de onda. Si
En la prctica, el monocromador deja pasar una banda de radiacin.
X e Y estn en equilibrio, para la longitud de onda del punto isosbstico, la
absorbancia total es independiente de las concentraciones relativas de X e Y.
0.9
0.8
A = b ([HIn] + [In-])
0.7
Rojo fenol
0.6
0.5
El punto isosbstico puede
Absorbance
0.4
0.3
llegar a ser una longitud de La absorbancia medida Am es:
0.2 onda analticamente til
0.1
ya que, a esta longitud de
0
400
-0.1
450 500 550 600 650
onda, se obtiene una curva
de calibracin lineal sin
Wavelangth (nm)
Instrumentales
controlar las condiciones de Slo cuando las absortividades molares
la disolucin (disolucin no son iguales a las dos longitudes de
tamponada). onda, y , la expresin anterior se
simplifica a:
La luz parsita es
ms relevante
cuanto ms
concentrada sea la
muestra y cuanto
Instrumentales Instrumentales ms larga sea la
celda, pues ambas
situaciones
implican una
La ley de Beer se cumple cuando la anchura de paso de banda del menor P
monocromador es <1/10 de la anchura de semipico de absorcin.
A b C; - log T b C (1) La indeterminacin en la medida de T afecta a C Contribucin de los distintos tipos de ruido
Corriente oscura (%T) 0,01%T
0,434 dT Precisin en la lectura (analgica) 0,5%T (1-3% error en la evaluacin de C)
0,434 ln T b C; Diferenciando: b C (2) Ruido de disparo (especialmente por encima del 95%T)
T
Parpadeo (a altas transmitancias)
0,434 dC C 0,434 Incertidumbre en la posicin de la celda (no es factor relevante)
Dividiendo (2) : (1) dT ; Escrito en incrementos finitos: T
T log T C C T logT
Category Characterized by Typical Sources Likely to be Important in
El error relativo en la determinacin de C, C/C, es funcin de T Case I Limited Readout resolution Inexpensive photometers and spectrophotometers having small
meter scales
ST = k1
d 1
(T lnT) T ln T 0 - ln T 1 2,303 log T 1 2,303 A Dark current and amplifier noise Regions where source intensity and detector are low
dT T
26
Error fotomtrico Especies absorbentes
Formaldehdo
C=C Ethene * 171 15,000 hexane
n * 290 15 hexane
C=O Ethanal
* 180 10,000 hexane
n * 275 17 ethanol
N=O Nitromethane
* 200 5,000 ethanol
Methyl
C-X X=Br n * 205 200 hexane
bromide
X=I n * 255 360 hexane
Methyl Iodide
27
Cromforos comunes Cromforos comunes
Cromforos: Grupos funcionales que absorben radiacin visible o del UV prximo ( >
200 nm) cuando se hallan enlazados a una cadena orgnica saturada no absorbente.
28
Algunos grupos cromforos y auxocromos Substituyentes en los compuestos aromticos
Benceno:
Los compuestos aromticos poseen tres
184 nm ( ~ 60.000)
conjuntos de bandas debido a transiciones
Banda E2 a 204 nm ( = 7.900)
*.
Banda B a 256 nm ( = 200)
29
Color de los iones sencillos Color de los metales de transicin
Las capas d son ms externas y estn ms expuestas que las f. Sus espectros son ms
anchos y la mx se ve influenciada por el disolvente y/o los ligandos.
Instrumentacin Instrumentacin
Haz simple
Puede ser de unicanal o de barrido
30
Instrumentacin Instrumentacin
Ventajas del doble haz frente al monohaz: Promedia la seal durante 1 s ms, para mejorar la S/N
Corrige las variaciones en la intensidad de la fuente Pocos componentes pticos: mnima prdida de potencia del haz
Compensa la deriva del detector y del amplificador (resuelto en el tiempo)
Lmpara de D2 y resolucin (ancho de banda) de 2 nm
Compensa la variacin de potencia del haz con la longitud de onda
Un filamento calentado
recubierto de xido proporciona
electrones
Lmpara de
filamento de
Wolframio y su
espectro
31
Instrumentacin: instrumentos tpicos Instrumentacin: Fotmetro (VIS)
Fotmetros
Instrumentos sencillos que usan filtros para seleccionar la
Solo pueden hacer medidas secuenciales a cada
Escasa disminucin de la potencia del haz (ptica escasa) buena S/N
Baratos
Espectrofotmetros
Emplean un monocromador o un elemento dispersivo para seleccionar la
Pueden hacer barridos de registro de espectros
ptica ms compleja peor S/N
Caros
Emplea una lmpara de Hg y con un filtro se aisla la lnea a 254 nm Econmico: 450 2500
Intervalo: 380 800 nm
Prctico para cuantificar sustancias Resolucin: 8 20 nm
orgnicas que absorben a 254 nm.
Fotmetro de sonda
Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV de haz simple y doble Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV de doble haz
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Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV de doble haz Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV de doble dispersin
La luz pasa dos veces por el sistema dispersante mejorando mucho la resolucin.
Caro: > 10.000
Ancho de banda: 0,07 nm
Luz dispersada o errtica: 0,0008%
Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV de doble dispersin Instrumentacin: Espectrofotmetros VIS-UV con fotodiodos
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Determinacin de estequiometras: Ordenada de Job Determinacin de estequiometras: Ordenada de Job
M 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 mL
L 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 mL
= MLn [MLn] + M[M] + L[L] - M[M] - M [MLn] - L[L] - L n [MLn]
mol
xmL C 10 x mL C mol
L C mol
AJ = (MLn - M - nL) [MLn] = K[MLn]
L
10mL 10mL L
AJ
MLn
XM 0........0,1........0,5........0,9........1
XL 1........0,9.......0,5........0,1.........0
XM + XL = 1 AJ
0 0
En el mximo: x ; x
Se mide la absorbancia de cada disolucin a una apropiada y se corrige por
0 XL 1
cualquier absorbancia de la mezcla si no se hubiese producido reaccin.
1 XM 0
JOB
Kd
[M] [L]n
; K d [ML n ] [M] [L]n En el mximo de Aj:
K d [ML n ] [M][L]n
0
M + nL
C nC
MLn
C(1-)
[ML n ] x x
MLn C 1 1
Kf
x : fraccin molar de L [L]libre xC n[ML n ] M Ln C (nC ) n nC n
0 0
AS
Determinacin de estequiometras: mtodo de las relaciones molares Determinacin de constantes de complejacin: mtodo de las relaciones molares
AM [M] = CM - [MLn]
Substituyendo,
AS se obtiene Kf
[L] = CL - n [MLn]
n
CL/CM
Partiendo de disoluciones isomolares, basta con mezclar un volumen constante de la AM AS Lo que se ha disociado
Lo que debera haberse formado
disolucin de metal y volmenes crecientes de la del ligando, midiendo a la a AM
CL/CM
que absorbe el complejo.
34
Determinacin de constantes de equilibrio Determinacin del grado de disociacin
Kd
In H HIn [H ] [In ] [HIn] HIn In H
Kd ; pK d pH log c 2 2 c 2
Kf [HIn] [In ] Kd
Kd
c(1 ) c c c(1 ) 1
Se miden las absorbancias de una disolucin de concentracin analtica (CT)
conocida a tres pH diferentes.
A2 = In- CT In-
3. pH intermedio (HIn + In-)
A 3 A1
CT = [HIn] + [In-] [HIn]
A3 = HIn [HIn] + In- [In-] [In-] A 2 A1
Midiendo el pH de la disolucin y
sustituyendo se obtiene Kd
hasta no absorber.
Elucidacin de ismeros. Ej.: bifenilos cis-trans
O O
275 nm
H3C C C C OC2H5
H2 = 20 Lmol-1cm-1
OH O
245 nm Esta forma posee dobles enlaces conjugados
H3C C C C OC2H5
H = 18000 Lmol-1cm-1
M + n L MLn.
35
Aplicaciones: determinacin de aminocidos y nucletidos Aplicaciones: estudios conformacionales
Changes from
form I to form II
Recta de calibrado con patrones o estndares Recta de calibrado por adiciones estndar
Se emplea en los casos en que los analitos se encuentran en matrices complejas en las
que es fcil que surjan interferencias.
b = y-intercept S mVs b
(V s ) 0
http://www.unav.es/quimicayedafologia/quimanal/monografias/estadistica/ Vs
Recta de calibrado por adiciones estndar Recta de calibrado por adiciones estndar
La expresin que nos da la seal analtica para cada adicin estndar es: Combinado las dos expresiones:
kVsC s kVx C x
S mVs b S
kV C kV C Vt Vt
S s s x x
Vt Vt
Donde:
S seal analtica
k constante de proporcionalidad
Vs volumen de estndar aadido
Cs concentracin del estndar
bCs
Vx volumen de la muestra alcuota
Cx
Cx
Vt
concentracin del analito en la muestra
volumen total de las disoluciones diludas
mVx
36
Recta de calibrado por adiciones estndar: Ejemplo Recta de calibrado por adiciones estndar: Ejemplo
Ej.: el As presente en una muestra biolgica se determina por el mtodo de adiciones Ej.: el As presente en una muestra biolgica se determina por el mtodo de adiciones
estndar. Para ello se pipetearon 10,00 mL de muestra en otros tantos matraces de estndar. Para ello se pipetearon 10,00 mL de muestra en otros tantos matraces de
100,00 mL. A continuacin, se aadieron volmenes crecientes de un estndar de 22,1 100,00 mL. A continuacin, se aadieron volmenes crecientes de un estndar de 22,1
ppm de As a 4 de los 5 matraces, y finalmente- se llevaron todos hasta el enrase con ppm de As a 4 de los 5 matraces, y finalmente- se llevaron todos hasta el enrase con
agua desionizada. A partir de las medidas de absorbancia, calcular la concentracin de agua desionizada. A partir de las medidas de absorbancia, calcular la concentracin de
As en la muestra problema. As en la muestra problema.
Arsenic Standard Addition
Muestra (mL) Estndar (mL)
Estndar (mL) Absorbancia Muestra (mL) Estndar (mL)
Estndar (mL) Absorbancia Adiciones estndar con concentraciones
0.45
0.25 0,2
Abs
10,00 10,00 0,239 10,00 10,00 0,239
0.20 0,15
b Cs (0,1554)ua(22,1)g/mL
Cx 41,98 g/mL Teniendo en cuenta la dilucin 10:100, la
m Vx (0,00818)ua/mL(10)mL concentracin en la muestra es: 42 ppm
- used for analytes in a complex matrix where interferences in the UV/Vis for the
(3) Dilute each solution to an equal volume, Vt.
analyte will occur: i.e. blood, sediment, human serum, etc..
- Method:
(1) Prepare several identical aliquots, Vx, of the unknown sample.
Note: This method assumes a linear relationship between instrument response and sample
concentration.
Estimacin de las concentraciones por adiciones estndar Estimacin de las concentraciones por adiciones estndar; Ejemplo
Una alcuota de 25,00 mL de una disolucin acuosa que contiene quinina fue diluida a
1. Preparar dos disoluciones con alcuotas idnticas del problema.
50,00 mL y su absorbancia a 348 nm fue de 0,416 con una celdilla de 1,00 cm. A una
2. Hacer una adicin del estndar a una de ellas segunda alcuota de 25,00 mL de disolucin problema se le aadieron 10,00 mL de una
3. Llevar a volumen las dos disoluciones y medir disolucin de 23,4 ppm de quinina. Despus de diluir a 50,00 mL la absorbancia result de
0,610. Calcular la concentracin de quinina en la celda.
0,65
S S1 m Vs La adicin realizada supone, tras 0,60
S2 0,45
0,40
0,35
10 mL 23,4 g
348
S1 50 mL mL 0,25
0,20
0,15
0,10
Vs S1Cs Vs (0,416) (23,4)(10) 0,05
Cx 20,07 ppm
S2 S1 Vx (0,610 0,416)(25) 0,00
-13 -12 -11 -10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5
S1C s Vs -1
Cx [Quinina] / g mL
S 2 S1 Vx
37
Mtodo del estndar interno Mtodo del estndar interno: Ejemplo
posibles desviaciones se asumen que son las mismas que sufre el analito. 3,5 6,00 43,2 18,6 2,32
1,5
80
0,5
60
0,0
2 4 6 8 10
4,85 40
-1
Ca (g L ) Sin estndar interno
20
2. Fluorescencia y fosforescencia
3. Quimioluminiscencia
4. Instrumentacin
5. Aplicaciones
160 780
Luminiscencia
Bioluminiscencia
38
Transiciones involucradas en la fluorescencia Reglas de seleccin
S1
T1
Energy
Internal
and
external
conversion
Absorption Fluorescence Phosphorescence
S0
Ground
state 2 1 3 4
39
Procesos y escala de tiempos Diagrama de energa de Franck-Condon
La transicin
tiene lugar con el
ncleo
estacionario.
Las transiciones
ms probables
tienen lugar
cuando la lnea
vertical toca la
curva superior.
de la radiacin, los que se pueden mover son los electrones, pero no los
Stokes Shift is 25 nm
Fluorescnece Intensity
Fluorescein
molecule
495 nm 520 nm
Wavelength
40
Reglas generales del espectro de fluorescencia Transiciones fluorescentes
fotones emitidos kr
= =
kr + knr
fotones absorbidos
kf
k f k isc k ec k ic k pd k d
Tiempo de vida de la fluorescencia ()
1
=
kr + knr
Fosforescencia
La rigidez estructural
previene la prdida
Pequeas diferencias energticas entre singlete y triplete excitados de energa por
Baja probabilidad de transicin no radiacional entre el triplete desactivaciones
rotacionales y
excitado y el singlete fundamental
vibracionales
41
Estructuras fluorescentes Efecto de la rigidez estructural
Fluoreno Bifenilo
Fluorescen
Fluorescena
Fluorescena Fenolftalena
Reacciones que incrementan (o disminuyen apagan-) la fluorescencia Compuesto Frmula F (nm) IF relativa
Benceno C6H5 270-310 10
pueden tener utilidad analtica como, por ejemplo, las reacciones de Tolueno C6H5CH3 270-320 17
Propilbenceno C6H5C3H7 270-320 17
complejacin de metales con ligandos orgnicos. Fluorobenceno C6H5F 270-320 10
Clorobenceno C6H5Cl 275-345 7
Bromobenceno C6H5Br 290-380 5
Yodobenceno C6H5I --- 0
Fenol C6H5OH 285-365 18
Fenolato C6H5O- 310-400 10
Anisol C6H5OCH3 285-345 20
Anilina C6H5NH2 310-405 20
Anilinio C6H5NH3+ --- 0
cido benzoico C6H5COOH 310-390 3 Probabilidad de pre-disociacin
Benzonitrilo C6H5CN 280-360 20
Nitrobenceno C6H5NO2 --- 0
O
Substituyentes deslocalizadores de e- : incrementan F
N Zn
Substituyentes de primer orden (dirigen a o-p-) donan e- al anillo: F crece (-OH, -OCH3, -CH3)
2
Substituyentes de segundo orden (dirigen a m-) retiran e- del anillo: F disminuye (-NO2, -COOH)
Especies paramagnticas
42
Ecuacin de Stern-Volmer Amortiguacin (quenching) de la fluorescencia
M* M + h Fluorescencia
M* + Q M + Q + Calor Quenching
F0
1
F
F0
1
F
[NaI]
Estado excitado
Un incremento de la T provoca una disminucin de IF Franck-Condon
E Geometra de equilibrio del estado
Un disolvente menos viscoso disminuye la IF excitado
43
Efecto de la concentracin Autoabsorcin
P Auto-amortiguacin (self-quenching)
F K' (P0 P) Beer : 10 bc F K' P0 (1 10 bc ) * Colisiones entre las molculas excitadas.
P0
Desactivacin no-radiacional aumentada
Auto-absorcin
(2,303 b c)2 (2,303 b c)3
F K' P0 (1 10 bc ) Maclaurin K' P0 2,303 b c (inner cell effect, inner filter effect)
2! 3!
Solapamiento de las bandas de absorcin y
de emisin: radiacin fluorescente que no
abandona la celda.
Si 2,303 b c < 0,05 Si b c > 1,5
Trabajar con muestras diluidas (absorcin mx: 0,1)
Si P0= cte:
O O
R2
Luciferase Spontaneous
Luciferin + O2 O C C R2 CO2 + O C* Light Fluorescencia
R1
1
R
Rpida (10-8s)
Fosforescencia
Lenta (mss). Los procesos
colisionales competitivos
pueden eliminarla
completamente a no ser
que se eviten totalmente
(p.e. en un vidrio)
F F0 e k f t
F0
f : F0 /e; F0 e k f f ; e e k f f
e
1
ln e k f f f
kf f
44
Propiedades de los compuestos lantnidos de coordinacin Propiedades de los compuestos lantnidos de coordinacin
naftilamina
TDI
N N
+ 1,2-benzopireno 400-450 Testosterona 580
O
= 630 nm O
Compuestos Heterocclicos Vitaminas
Cy5 HN
Quinolina 385-400 Riboflavina (B2) 565
O N O O = 630 nm
NH2 S TMR Sulfato de quinina 410-500 Cianocobalamina (B12) 305
7-hidroxicumarina 450
= 514 nm Tocoferol (E) 340
45
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
D* + A D + A*
Donor Aceptor
Molecule 1 Molecule 2
Fluorescence Fluorescence
DONOR ACCEPTOR
Absorbance
Absorbance
Wavelength
La FRET puede ser til para lograr un espectro de fluorescencia
desplazado a superiores.
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
h FRET h
1
1 R0
6
2Q J ( ) 6
~ 1/R6 kT R0 9.78 10 3 D 4
D r n
46
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
proteasa
Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET) Fluorescence Resonant Energy Transfer (FRET)
47
Luminiscencia en medios micelares Luminiscencia en medios micelares
48
Fosforescencia Fosforescencia y cruce intersistema
A + B C* C + h
C COO-
NH O2/OH-
+ h + N2 + H2O
NH
C
COO-
O
49
Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia
Determinacin de agentes oxidantes Cl2, HOCl, OCl-, H2O2, NO2 Aplicaciones emergentes
Estudios atmosfricos
Quimioluminiscencia Quimioluminiscencia
Bioluminiscencia Bioluminiscencia
O O
R2
Luciferase Spontaneous
Luciferin + O2 O C C R2 CO2 + O C* Light
R1
R1
N
S
510-670 nm
S
HO
N
O
HO
Plantas emisoras
Gen luciferasa clonado en plantas
50
Instrumentacin: fluormetro de filtros simple Instrumentacin: fuentes
Emission
51
Money (helps?) world go round! Tema 5
3. Trminos espectrales
4. Anchuras de lnea
9. Instrumentacin
10. Aplicaciones
v1
IR
Fluorescencia Atmica (FA, AF) v0
r2
r1
r0
1964: West y Winefordner comienzan a trabajar en FA con Zn, Hg y Cd E0 E0
52
Niveles de energa de Mg atmico Espectro de emisin del Na atmico
Ejemplos:
carbono
oxgeno
nitrgeno
2. Efecto Doppler (agitacin trmica de los tomos que varan su posicin respecto del
observador)
53
Efecto Doppler Ensanchamiento de las lneas atmicas
u
Si los tomos se D 0 u Temperatura, masa-1
mueven hacia el
c
detector, las ondas
estn ms compactas, T
mayor frecuencia, D 0 ; D T1/2 ; D 100 N
ms corta. m
Buena aproximacin para explicar la zona central de la lnea
Chopper
Muestra
Tipo Mtodo de Atomizacin Fuente de radiacin
P
Fuente Monocromador Detector Procesador de la seal P0 P
Selector Detector Procesador
de de la seal
90o
Fuente
Muestra
Muestra
Tipo Mtodo de atomizacin Fuente de
Tipo Mtodo de Atomizacin Fuente de
Radiacin
radiacin
arco arco elctrico
muestra
atmica (llama) muestra disuelta muestra
chispa arco de alto voltaje muestra
aspirada a la llama
plasma de Ar muestra calentada en un plasma de Ar
muestra
atmica (sin llama) muestra disuelta muestra
llama disolucin de la muestra aspirada a la llama evaporada y calcinada
muestra
fluorescencia RX no es necesario muestra
emisin de RX no es necesario; muestra bombardeada con e- muestra
54
Mecanismos de fluorescencia atmica Radiaciones fluorescentes resonante y normal del Tl
a f a f a f
Desactivacin no-radiacional
a f a f a f
t t
55
Introduccin de la muestra Introduccin de la muestra
Vaporizadores electrotrmicos:
depsito de la muestra slida o lquida sobre la superficie de un resistor
el paso de corriente a travs del resistor produce la evaporacin de la muestra
un gas (Ar) fluye a travs del resistor y porta la muestra gaseosa hacia el
atomizador
la seal obtenida es transiente en lugar de contnua
Add
NaBH4
SbH3 + Q Sb + 3/2 H2
SbH3,
AsH3
Sample
Generacin de hidruros:
til para As, Sb, Sn, Se, Bi, Pb
Reaccin modelo:
3 BH4- + 3 H+ + 4 H3AsO3 3 H3BO3 + 4 AsH3 + 3 H2O
56
Introduccin de muestras slidas Descarga luminiscente como fuente de plasma inico
Directa
Vaporizacin electrotrmica
Ablacin por Arco o Chispa
Ablacin por Lser
Descarga luminiscente
100g min-1
Chopper
57
Mecheros Mecheros de premezcla
Eficienica de
nebulizacin:
~5%
58
Estructura y temperatura de una llama Distribucin de metales en llama rica y pobre (lean) en combustible
Max
temperature
location about
1 cm above
the primary
combustion
zone. Optical
focus to this
region
Mg
Compromiso entre atomizacin y formacin
de compuestos moleculares Perfil de la llama para la lnea del Ca en una llama
ciangeno-oxgeno para diferentes caudales de muestra.
Eleccin juiciosa de la altura de llama
adecuada en cada caso
nodo: W, Ni, Zr
V 300 V; I = 5 20 mA
Inconveniente: autoabsorcin
59
Compartimento para las lmparas Lmpara de descarga sin electrodos (EDL)
Intensidad: Espectrales
TGL EDL > HCL Fsicas
Qumicas
1/ 2 TGL 0,001nm 1/ 2EDL
Variaciones en la T
Ionizacin
Interferencias en AA y FA:
Corriente relativamente elevada: 0,5 A
Dispersin de luz incidente (scattering)
V 30 V TGL y EDL :
se usan para As y Se
Ar: 1-5 torr < 200 nm Interferencia tpica de FA:
Filamento recubierto de xido de Ba, Ca, Sr Amortiguacin de la fluorescencia (quenching)
Variacin de T en el atomizador: supone una modificacin del nmero de El V tiene una lnea a 3 082,11 interfiere la cuantificacin del Al?
tomos excitados.
Afecta especialmente a la EA
Ciertamente, NO
Ionizacin: disminucin de la seal analtica por produccin de iones en lugar de
tomos
M0 M+ + e- (especialmente en alcalinos y alcalinotrreos y en llamas
calientes)
Alternativa: supresores de ionizacin
60
Interferencias espectrales: correccin con dos lneas Interferencias espectrales: correccin con fuente continua
La temperatura modifica el nmero de tomos en los estados fundamental y excitado La absorcin atmica se produce en La emisin atmica tiene lugar al
la transicin desde el estado pasar de un estado excitado al
fundamental a un estado excitado fundamental
61
Interferencias qumicas Interferencias qumicas
Una nebulizacin deficiente puede permitir que lleguen gotas gruesas a la V S h wat
B N 2 A 20 b 2
llama, que producen dispersin de radiacin, que resulta en: 4 m st
Disminucin de la potencia del haz radiante h
N 2 g 2 kT
Seales falsas (espreas): absorciones inespecficas e
N2 at*/m3 N0 g0
h
h g 2 kT wat
Quenching (AA y FA) d B A 20 b e N0 2
4 g0 m st
b
Desactivacin por va colisional con las molculas de los gases que se queman F
N 0 3 1021 C Winefordner
en la llama. Ar, N2 y gases nobles no amortiguan o apagan la fluorescencia. TQ
F: Flujo de muestra lquida aspirada (mL/s)
V S
IF
d
I F I 0 f F b N 0 C P Llama + fuente
4
I0
d
Llama sola
f: fuerza del oscilador de la transicin implicada
b tiempo
: depende de la geometra del atomizador (llama, filamento..)
F: rendimiento cuntico de la fluorescencia. Marcada La corriente oscura se anula con un obturador
dependencia de los gases de la llama (pueden quenchar) El 100%T se ajusta con un blanco aspirado a la llama
62
Instrumentacin: doble haz Ventajas de la llama como sistema atomizador
Volumen mnimo de muestra lquida relativamente elevado (1,5 2 mL) Disolucin y expansin de la muestra en el caudal grande (hasta 10 L/min) de
gases que pasan por la llama: dilucin y prdida de sensibilidad
Ausencia de O2 (purga con Ar) Copa de Delves (Ni) Delves cup: primer intento de confinamiento del vapor
atmico en el paso ptico. Determinacin de Pb en sangre
2. Posibilidad de usar micromuestras (5, 10, 20 L)
Atom trap: cilindro de cuarzo refrigerado (recoge
3. Anlisis de muestras slidas, sin ataque previo tomos) - calentado (desorbe tomos)
LCH D
4. Disminucin de absorciones inespecficas, facilitado por la purga con gas
5. Seales transientes
63
Alternativas a la llama: generacin de hidruros Alternativas a la llama: vapor fro de Hg
Fundamentados en trabajos
iniciales de Lvov
Introduccin de la muestra
Massmann: primer modelo con (solido, lquido, gas, lodo -slurry-)
posibilidades de comercializacin
Temp
Seal de tiempo
absorcin
64
Operaciones en el horno de grafito Etapas de calentamiento
Temperature (CO)
2500-2700C
Thermal
pretreatment, ash
or Char 1,000-2000 K/s
Atomizacin
(2000 - 2800 C) 500-700C
Remove matrix or promote reactions in ETA
Dry
110C Desolvate
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
50 A, 20 s
Time (s) typical
Automatizacin sencilla:
automuestreadores
65
Atomizadores electrotrmicos vs. llama Filamentos
+ Sensibilidad: mejores lmites de deteccin (elevados tiempos de residencia Filamento de West Mini-Massmann.
del vapor atmico en el atomizador) Nube atmica no confinada (Geometra cerrada)
+ Menor volumen de muestra
Qumicas
Causadas por la muestra
Volatilizacin de analito como sales voltiles
Disminucin de la eficiencia de atomizacin
Causadas por el aparato o por el mtodo
Formacin de carburos
Condensacin
Formacin de nitruros
Efectos memoria
Espectrales (Fsicas)
Emisin de luz por parte del grafito incandescente
Absorciones no especfica:
Dispersin de la radiacin
Formacin de especies moleculares
Formacin de haluros estables
66
Eliminacin de los efectos de matriz Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982)
Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982) Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982)
La vaporizacin de MX
colocado en la plataforma
se retrasa hasta que la
pared y el gas estn
suficientemente
calientes para atomizar MX
Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982) Horno de grafito con plataforma de Lvov (1982)
Tatomizacin
Approx
gas temp
seen by
analyte
Tpirlisis
tiempo Appearance
temperature
67
Correccin de fondo con lmpara de Deuterio Correccin de fondo mediante el efecto Zeeman
Zeeman normal: el
La dispersin o absorcin por parte de la matriz (fondo) ser el principal campo magntico
causante de la disminucin de la potencia radiante cuando se ilumina con la Lneas difieren ~0,01 nm produce
fuente de continuo. desdoblamientos
idnticos en los
estados
fundamental y
excitado
Niveles
energticos
Transicione
s
Espectros
- +
Sin Campo magntico Con Campo magntico
+ Corrige muy bien el fondo por realizar la correccin prcticamente a la misma del analito
- Puede presentar lecturas dobles (para concentraciones altas puede dar la misma absorbancia que para concentraciones
bajas)
1. Luz no polarizada procedente de la LCH (A) pasa a travs del polarizador rotatorio (B) - Prdida de energa del sistema ptico debida a los polarizadores (prdida de
sensibilidad)
2. El haz se desdobla en componentes perpendiculares y paralelos (C)
3. La luz entra en el horno sometido a un campo magntico, dando 3 picos de absorcin (D) - Coste elevado y manejo complicado
4. El analito solamente absorbe radiacin polarizada paralela al campo magntico, mientras que el - El sistema de introduccin de muestras en la cmara debe estar automatizado
fondo molecular absorbe siempre (E)
5. El resultado es un modelo cclico de absorcin (F) - Hay elementos que presentan efecto Zeeman normal (Cd, Zn), pero la mayora
6. La diferencia entre la absorbancia durante el semiciclo paralelo y el perpendicular proporciona presentan Zeeman anmalo, con muchos componentes, reducindose la sensibilidad en
el valor corregido con respecto al fondo. la determinacin del elemento en un 10 - 50%
68
Anlisis de muestras slidas Introduccin de muestras slidas
Directa
+ Se elimina -o minimiza- el tratamiento de las muestras Vaporizacin electrotrmica
+ No tiene lugar la retencin de analitos en los residuos insolubles Ablacin por Arco o Chispa
Ablacin por Lser
+ Se minimiza la posibilidad de contaminacin de la muestra
Descarga luminiscente
+ Se evita el uso reactivos qumicos
- Calibracin ms complicada
Directa Directa
Vaporizacin electrotrmica Vaporizacin electrotrmica
Ablacin por Arco o Chispa Ablacin por Arco o Chispa
Ablacin por Lser Ablacin por Lser
Descarga luminiscente Descarga luminiscente
69
Espectroscopa de Emisin Atmica Espectroscopa de Emisin Atmica
Mediados S XIX: Descubrimiento de Cs, Tl, In, Ga por espectroscopa La fuente de excitacin para promover las especies qumicas
a sus correspondientes estados excitados puede ser:
atmica (Bunsen, Kirchoff) Plasma
Llama
1877: Gouy disea el nebulizador neumtico Descarga elctrica (arco y chispa)
Descarga luminiscente (glow discharge)
1920s: Uso de arcos y chispas para AES Ablacin por lser
1930s: Primer espectrmetro comercial (Siemens-Zeiss) En Emisin Atmica (EA, AES), medimos la emisin de luz procedente
de la desactivacin radiacional de los tomos excitados, cuya
1960s: Fuentes de plasma (comercializados en los 70) intensidad es proporcional a la concentracin de los tomos en el
estado excitado alcanzado, que a su vez- es proporcional a la
concentracin de tomos en el estado fundamental.
Espectros de Emisin Atmica Emisin atmica en llama (Flame Atomic Emission Spectroscopy, FAES)
Lneas: Bandas:
Reacciones de recombinacin:
Limitado en prestaciones V
Plasma neutro entre
Muy til para alcalinos y los electrodos
Rarc
alcalinotrreos
70
Arcos y Chispas: espectros de emisin Potenciales de ionizacin
71
Emisin con Arco y Chispa: instrumentacin Emisin con Arco y Chispa: instrumentacin
Sensibilidad
300 nm 400 nm
AA, FA EA, AA, FA EA
seal AA ruido AA
103 103 Fuentes principales de ruido:
seal FA ruido FA
sputtering de la lmpara
FA: Hg, Zn, Cd, Pb, Pt, Ta, txicos En FA no se percibe el ruido de la lmpara.
y los ms voltiles El ruido limitante es el shot noise. Se
puede incrementar la potencia de la AA: Precisin < 1% a nivel de trazas (ppm)
EA: Alcalinos y alcalinotrreos
lmpara lo que se desee: mejor
EA: Precisin 2 - 5 %
AA: el resto sensibilidad.
FA: Precisin 2 -3 %
72
Inductively Coupled Plasma (ICP): Ventajas Inductively Coupled Plasma (ICP): Consumo de Argon
Atmsfera inerte de Ar previene formacin de xidos, alargando el tvida del analito Zona de radiacin inicial (roja)
Ionizacin relativamente grande susceptible de acoplamiento con MS Fuente de RF: 1-2 kW a 27 MHz
Antorcha
de cuarzo Ar que forma y sostiene el plasma (10-20 L min-1)
Preparacin de la muestra: similar a AAS Asociadas a los fenmenos de nebulizacin y transporte de la muestra
Determinacin de elementos: se pueden determinar casi todos los elementos Cambios de viscosidad y tensin superficial pueden originar resultados muy
imprecisos, especialmente en
Sin embargo, hace falta un espectrmetro de vaco para medir B, N, P, S y muestras con slidos disueltos
C, pues sus lneas de emisin caen por debajo de 180 nm donde absorben muestras con elevada concentracin de cidos
los componentes del aire. Formacin de sales en la punta del nebulizador, que afecta a la nebulizacin y
al flujo del aerosol
Las condiciones ptimas para la mayora de los metales no sirven para los
Remedios
alcalinos: las lneas ms prominentes de Li, K, Rb y Cs estn en el IR
Dilucin de la muestra
cercano
Uso de una bomba peristltica
73
ICP: desventajas ICP: instrumentacin secuencial
ICP: instrumentacin con deteccin simultnea ICP: instrumentacin multicanal con PMT
Y
La curvatura corresponde a la Crculo de Rowland PMT
curva focal de la rejilla cncava
74
Monocromacin con red de escalera ICP: instrumentacin multicanal con CCD
Comparacin de caractersticas analticas en espectroscopa atmica: LODs Comparacin de caractersticas analticas en espectroscopa atmica: LODs
Mtodo < 1 ppb 110 ppb 11100 ppb 101500 ppb > 500 ppb
Emisin ICP 9 32 14 6 0
75
GF-AAS vs. ICP-AES Plasma DCP (Direct Current Plasma)
Monoelemental Multielemental
Consume menos Ar y la fuente DC
es ms simple y menos cara
Interferencias de Interferencias espectrales
atomizacin
2. Leyes Generales.
3. Fenmeno Electrdico.
4. Lmite de Electroactividad.
5. Montaje Potenciosttico.
76
Clasificacin Campos de aplicacin emergentes
Difusin pura
Hidrodinmica
Voltametra Polarografa
Tcnicas de redisolucin
Potenciostticas
Culombimetra potenciosttica
Cronoamperometra
MTODOS Tcnicas
ELECTROQUMICOS Dinmicas
DE ANLISIS Potenciometra electroltica
Galvanostticas Cronopotenciometra
Culombimetra galvanosttica
Tcnicas conductimtricas
Tcnicas
no electrdicas
Tcnicas electroforticas
Cintica:
dQ dN dNOx
i nF Ox nFA nFA nFA
dt dt Adt
[ ] mol cm 2 s 1[ ]
77
Reaccin electrdica Mecanismos y regmenes de transporte en celdas electroqumicas
Ox ne Red
Transferencia de masa
Transferencia electrdica en la superficie del electrodo
Reacciones qumicas precedentes y subsiguientes
dC d
D uC Cv Nernst-Planck
dx x 0 dx x 0
DgradC uCgrad Cv
78
Potenciales en la interfaz I.P.E.: Capacidad de la doble capa
79
Electrodos selectivos de iones Electrodos selectivos de iones
80
Respuesta nerstiana Lmites de respuesta ideal
Cte.
CO 2 (ac) H2O HCO 3- H
[H ]int K
K 1 [H ]int K1[CO2 ]ext
[CO 2 ]ext [HCO3 ]
81
Sensores de gases Sensores de gases: cintica de los equilibrios
Desventaja de los
electrodos de gases:
tiempo de respuesta
relativamente largo:
1-7 min de equilibracin
82
Electrodos enzimticos: sensor de urea Transduccin potenciomtrica vs. amperomtrica
Fluoride Electrode
- LaF3 crystal doped with EuF2 Usually ionic compound
- mechanism similar to pH electrode with potential developing at two Single crystal
interfaces of the membrane from the reaction:
Crushed powder, melted and formed
LaF3 LaF2+ + F- Operation similar to glass membrane
5<pH<8
Eind = L+ 0.0592 pF
83
Electrodo de membrana policristalina
Ag2S
+
Ag2S + MS (Cu2+, Pb2+, Cd2+) MS
Mtodos Coulombimtricos
84
I. Coulombimetra a E = cte. I. Coulombimetra a i = cte.
I. Coulometry
+ - + -
- Iodine reacts with water 1:1
N I2 + N SO2 + N + H2O 2 NH I + N SO3
- The solvent methanol is involved in the reaction.
- A suitable base keeps the pH 5 - 7
Se hace en medio metlico:
+ - + - But iodine will be produced just in time from iodide:
N SO3 + CH3OH NHCH3OSO3
Para evitar:
2 I- I2 + 2 e-
N SO3 + H2O NHSO4H Anodic Oxidation
85
I. Iodine Production
+ Anode
Resolution: 0.1 g water
Iodine production by oxidation
- +
2 I- I2 + 2 e - Detection limit: 5 g water
for 5 g sample 1 ppm
Cathode
Hydrogen production by reduction Measuring range:
+
10 g - 100 mg water/sample
2 H + 2 e- H2 1 ppm - 5 % water
H+ H Side reaction:
-
Reduction of sulfur components.
- After 1 - 2 weeks, smells like mercaptans.
I- I
Change catholyte every week!
86
I. Electrogravimetra
Coulometric Titrations:
Uses titrant that is electrolytically generated by constant current.
I. Electrogravimetra
Tema 7.
2. Capa de difusin
3. Hiptesis de Nernst
5. Leyes de Fick.
6. Curvas i-E.
dC d
D uC Cv Nernst-Planck
dx
x 0 dx x 0
DgradC uCgrad Cv
Q QM
NOx (moles) ; mOx (gramos)
nF nF
Flujo difusional, Migracin inica Transporte
por gradiente de convectivo
concentracin.
87
Control difusional Capa de difusin de Nernst
C dC
D ; difusin plana : D dx Primera Ley de Fick
x x 0 x 0
La Segunda Ley de Fick expresa la variacin de la concentracin con respecto del tiempo,
para cada distancia al electrodo. 2
C C
D 2
t t x
El perfil del gradiente de concentracin en la interfaz, se obtiene integrando esta
expresin, y resulta:
C C* Sustituyendo en la expresin de i:
x x 0 Dt
C* D1/2
i nFAD nFAC * 1/2 1/2 kt 1/2 Cottrell
Dt t
Disolucin en reposo; E constante; geometra plana
88
Corriente lmite de difusin Corriente lmite de difusin
i Red
C(x 0) C*
D
C
D
C * C(x0) ; cuando C 0 : nd
COx(x0) COx
*
i
(i 0)
(x 0) ndOx
x Las corrientes mximas de oxidacin y reduccin se escribirn:
C* D iRed ndRedCRed
*
; iOx ndOx COx
*
mx D id nFAmx nFA C*
Sustituyendo CRed(x=0) y COx(x=0) y operando:
Para valores intermedios de i:
RT DRed RT (i iOx ) Curva i-E cato-andica
E E0 ln ln
nF DOx nF (iRed i)
i nFA C * -C(x 0) ndC * -C(x 0)
D
RT DRed RT i
E E0 ln ln Curva i-E andica
nF DOx nF (iRed i)
FAD D Constante de velocidad de
d ; : K D [ ] cm s-1 transferencia de masa.
RT DRed RT (iOx i)
E E0 ln ln Curva i-E catdica
nF DOx nF i
iOx
100 100 i
nF
1 exp (E E0 )
50 50
RT
i /u.a.
i / u.a.
0
nF 0
iRedexp (E E 0 )
RT
-50 i -50
nF
1 exp (E E0 )
-100
RT -100
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6
E/V E/V
nF
iRedexp (E E0 ) iOx
i RT
nF
1 exp (E E0 ) 100 0
E = 0,8 V
100
RT
50
50
i / u.a.
0
i / u.a.
-50
-50
-100
-100
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 E/V
E/V
89
Curvas i-E reversibles en rgimen convectivo Flujo difusional vs. convectivo
*
RT COx
E eq E ln * ; i 0
0
nF CRed
i
RT COx(x0)
E el E0 ln ; i0
nF CRed(x 0)
100
50
E/V equilibrio.
Potencial lmite
3. Coulombimetras
90
Montaje para volumetras con indicacin electroqumica Curvas i-E en el transcurso de una volumetra
100
50
2H2O 4 e O2 4 H
i / u.a.
0
-50
2H 2e H2
-100
E/V
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3
Fe - 1e Fe
-
E 0,3V
0
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+
Fe2+ Fe3+,Ce3+
-50 -50
Inicio Pre-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3
Fe - 1e Fe
-
E 0,3V
0
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+ Fe3+
Fe3+,Ce3+ -50 Ce3+ -50
Pre-equivalencia
Equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
91
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V Deteccin Amperomtrica y Potenciomtrica
i / u.a.
0
50
Punto equivalente
-50
-100
i / u.a.
E/V mL Ce4+
Potenciometra (i = 0) Potenciometra (i 0)
Fe3+
Ce3+,Ce 4+ -50
0,5 1,2
Post-equivalencia E E
-100 Error por defecto
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3
Fe -
- 1e Fe E 0,3V
0
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+ Fe2+
-50 Fe3+,Ce3+ -50
Inicio Pre-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+ Fe2+
Fe3+,Ce3+ -50 Fe3+,Ce3+ -50
Pre-equivalencia Pre-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
92
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V Fe 2 - 1e - Fe 3 E 0 0,3V
100 100
Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe3+ Fe3+
Ce3+ -50 Ce3+,Ce 4+ -50
Equivalencia Post-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
i 50
1,2
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Punto equivalente E
-50 -50 Error por defecto
-100
mL Ce4+
Amperometra (E = 0,1 V) Potenciometra (i 0; ctodo)
Potenciometra (i = 0)
mL Ce4+
0,7 0,3
i E E No hay indicacin
Punto equivalente
0,3 -0,2
mL Ce4+ mL Ce4+
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3 3 4 2 3
Fe -
- 1e Fe E 0,3V;
0
Ce 1e Ce E 0,8 V
0
Fe -
- 1e Fe E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E0 0,8 V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+ Fe2+
-50 Fe3+,Ce3+ -50
Inicio Pre-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
93
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3 3 4 2 3
Fe -
- 1e Fe E 0,3V;
0
Ce 1e Ce E 0,8 V
0
Fe -
- 1e Fe E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E0 0,8 V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe2+ Fe2+
Fe3+,Ce3+ -50 Fe3+,Ce3+ -50
Pre-equivalencia Pre-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
100 100
Ce4+
50 50
i / u.a.
i / u.a.
0 0
Fe3+ Fe3+
Ce3+ -50 Ce3+,Ce 4+ -50
Equivalencia Post-equivalencia
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
100
Amperometra (E = 0,6 V)
100
Deteccin Potenciomtrica a i0 Potenciometra (i 0; nodo)
50 50
0,8
i
i / u.a.
i / u.a.
0 0
E Error por defecto
-50
Punto equivalente -50
0,3
-100 -100
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
mL Ce4+ mL Ce4+
E E No hay indicacin
i
Punto equivalente
0,3 -0,2
mL Ce4+ mL Ce4+
94
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
Fe 2 - 1e - Fe3 E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E 0 0,8 V Fe 2 - 1e - Fe3 E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E 0 0,8 V
100 100
Ce4+ Ce4+
50 50
0 0
i / u.a.
i / u.a.
Fe3+ -50 Fe3+ -50
Ce3+ Ce3+,Ce 4+
-100 -100
Equivalencia Post-equivalencia
-150 -150
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3 Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
2 3 3 4 2 3
Fe - 1e Fe -
E 0,3V; Ce
0
1e Ce E 0,8 V
0
Fe - 1e Fe -
E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E 0 0,8 V
100 100
Ce4+
50 50
0 0
i / u.a.
i / u.a.
Ce3+,Ce4+ Ce3+,Ce4+
-100 -100
Post-equivalencia Post-equivalencia
-150 -150
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 -0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V E/V
Potenciometra (i 0; nodo)
100
Amperometra (E = 0,6 V)
100
50
50
Punto equivalente
0,8
0
i / u.a.
i
i / u.a.
-50
-100
-50 E Error por defecto
mL Ce4+ -100
-150
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 0,3
E/V -150
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V
Amperometra (E = 0,1 V) Potenciometra (i 0; ctodo)
mL Ce4+
mL Ce4+
0,8
0,3
mL Ce4+
95
Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza
Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza
150
Ag0 - e Ag+
100
-50
AgY3- + e Ag0+ Y4-
-100
Ag+ + e Ag0
2H+ + 2e H2
-150
-0,2 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8
E/V
Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza
96
Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza
I2 C5H5N SO2
1 : 10 : 3
+ - + -
N I2 + N SO2 + N + H2O 2 NH I + N SO3
+ - + -
N SO3 + CH3OH NHCH3OSO3
Para evitar:
2 I - I2 + 2 e- I -
-
I
After 1 - 2 weeks, smells like mercaptans.
Anodic Oxidation
Change catholyte every week!
97
Coulombimetra Karl-Fischer: Adicin de la muestra de H2O Coulombimetra Karl-Fischer: Celda con diafragma
Measuring range:
10 g - 100 mg water/sample
1 ppm - 5 % water
i
2 CH3OH 2 e 2 CH3O H2
ia
ic E
2 CH3OH 2 e 2 CH3 O H2
98
Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza Potenciometra a intensidad constante con dos electrodos indicadores de la misma naturaleza
Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante
Fe 2 Ce 4 Fe 3 Ce 3
Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante Fe 2 - 1e - Fe 3 E0 0,3V; Ce3 1e Ce 4 E0 0,8 V
100
50
0
i / u.a.
-50
Curvas i-E tericas en el
transcurso de la valoracin
-100 de Fe2+ con Ce4+
x <1
-150
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
E/V
99
Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante
Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante Valoracin amperomtrica con dos electrodos indicadores a diferencia de potencial constante
100