II.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Material biolgico: sangre de personas sanas y con hipertrigliceridemia en estado pre prandial
de 12 a 14 hs. Los TG en suero son estables 3 dias refrigerados (2-10C). no emplear sueros con
hemolisis intensa o ictricos, para evitar resultados errneos.

Materiales de laboratorio

4 gradillas
12 tubos de ensayo de 16 x15
4 pinzas 3 pipetas de 5 ml
4 micropitetas
4 vasos de precipitacin de 150 ml
Agua, algodn, ligadura

Reactivos

Solucin buffer Goods con clorofenol ph 7.5

Enzimas: vial con lipoprotena lipasa, glicerokinasa (GK), glicerol glicerol fosfato oxidasa
(GPO), peroxidasa (POD), adenosin trifosfato (ATP) y 4-amino fenazona (4-AF)
Standard: solucin de gliceron 2.26 mmol/l (equivalente a 2 gl/l de trioleina)
R. trabajo: 10 x 20 ,l: agregar 20 ml buffer de vial de enzimas, mezclar hasta disolucin
completa homogenizar. Fechar estable 30 dias refrigerador (2-10C)
Alcohol de 70

Equipo

Equipo de bao Mara a 37C

Espectrofotmetro a 505 nm

III. PROCEDIMIENTO

Homogenizar muestra antes de usar especialmente frente a sueros lechosos

En tres tubos de fotocolimetro colocar

Tubo problema
Componentes Tubo blanco Tubo estndar
I II
Suero - - 20 ul 20 ul
Estndar - 20 ul - -
Rvo. trabajo 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml
Mezclar, incubar 10 minutos x 37C
Enfriar y leer en espectrofotmetro a 510 nm

La reaccin es estable 60 minutos

TUBOS PROBLEMAS
a) recoleccin de muestras problemas

TOMA DE MUESTRA TOMA DE MUESTRA

N1 N2

b) centrifugacin de las muestras problemas

TOMA DE MUESTRA
N1

TOMA DE MUESTRA
N2
c) agregacin del Rvo. Trabajo a las muestras, despus de la centrifugacin e incubadas por 10
min a 37C, y llevadas al espectrofotmetro

TOMA DE MUESTRA TOMA DE MUESTRA Llevadas al

N1 N2 espectrofotometro

d) resultados del espectrofotmetro

Tubo blanco: 0 Abs

Tubo estndar: 0.570 Abs

Tubo problema 1: 0.405

Tubo problema 2: 0.435

IV. RESULTADOS

Tubo Absorbancia
Tubo blanco 0
Tubo estndar 0.570
Tubo problema 1 0.405
Tubo problema 2 0.435

CALCULOS

Corregir las lecturas con el Blanco y emplear las lecturas corregidas para los clculos

Utilizando el Estndar podemos averiguar el factor

200mg /dl
f= =350.8
0.570 Rango normal = 0.35
1.65 g/l
Resultados de los problemas

Problema 1:

TGC = F x Abs Normal: Esta dentro del rango

TGC= 350.8 x 0.405

TGC= 142.1 mg/dl

Problema 2

TGC = F x Abs Normal: Esta dentro del rango

TGC= 350.8 x 0.435

TGC= 152.6 mg/dl