Anuario Toxicologa 2001;1(1):104-8

Centro de Toxicologa y Biomedicina.

DETERMINACIN DE LA TOXICIDAD AGUDA DEL DICROMATO

DE POTASIO EN LARVAS DE ARTEMIA SALINA

Lic. Yuleidis Gonzlez Prez1 y Lic. Patricia Aportela Gilling1

RESUMEN: Por el potencial impacto que rrepr

epresenta par
epresenta paraa el ambiente
ambiente,, la emisin de cromatos
cromatos
y dicromatos (cromo VI), vertidos producto de la actividad de diferentes sectores industriales, se
determina la toxicidad aguda del K2Cr 2O 7 en larvas de Artemia salina como mtodo alternativo
aplicado a la ecotoxicologa. En este verstil mtodo se exponen nauplius de 24 h a diferentes
concentr aciones del compuesto y se determina la LLC50
concentraciones C50 corr espondiente
espondiente,, as como otr
correspondiente os efectos
otros
adv er
adver sos que pueda ocasionar
ersos ocasionar.. Esta metodologa combina simplicidad, rrapidez,
apidez, confiabilidad y bajo
costo, por lo que su empleo como screening en pruebas ecotoxicolgicas permite en un corto plazo
predecir la toxicidad de numerosas sustancias qumicas para los ecosistemas acuticos.

DeCS: DICROMATO DE PO
DICROMAT TASIO/toxicidad; TEST
POT TESTSS DE TTO
O XICID AD/mtodos; AR
XICIDAD/mtodos; TEMIA.
ARTEMIA.

El cromo es uno de los metales pesa- pigmentos y colorantes, curtido de pieles y

dos de mayor importancia toxicolgica en
la actualidad. Est presente en rocas, plan-
tas, suelos, animales, humos y gases vol-
cnicos.
Sus diversos efectos en la vida de los
organismos estn relacionados con las for-
mas fsicas y qumicas, en las cuales se
presenta. El estado metlico (valencia 0)
es biolgicamente inerte; la forma
trivalente representa el cromo como ele-
mento esencial, es la ms estable, y el esta-
do hexavalente, usualmente es de origen
antropognico y el de mayor importancia
toxicolgica.1-5 Los compuestos derivados
de ste son fundamentalmente los cromatos
y dicromatos, los cuales se utilizan en ope-
raciones de cromado, manufactura de
1
Licenciada en Ciencias Biolgicas.
tratamiento de madera. Los dicromatos
sdico y potsico son usados con frecuen-
cia en la industria como fuente de otros
compuestos del cromo, particularmente del
xido de cromo VI, y estos procesos son la
mayor fuente de contaminacin por cromo
hexavalente. En general, los efluentes in-
dustriales que contienen cromo, se incor-
poran a las aguas y, eventualmente llegan a
los ocanos, la forma qumica depender
de la presencia de materia orgnica en las
aguas pues, si sta est presente en gran-
des cantidades, el Cr6+ se reducir a Cr3+, el
cual se podr absorber en las partculas o
formar complejos insolubles. stos pueden
permanecer en suspensin cerca del sitio
de entrada al ambiente, ser transportados a

104
los ocanos, o bien precipitar y ser incor-
porados a los sedimentos.1
Las larvas de Artemia salina han sido
utilizadas en bioensayos por numerosos
laboratorios de todo el mundo, y los resul-
tados en la determinacin de la LC50 han
sido publicados para una serie de toxinas y
qumicos conocidos.2 Es reciente su em-
pleo en el campo de la ecotoxicologa, el
cual incluye investigaciones de la toxicidad
en mezclas de qumicos y muestras ambien-
tales, evaluacin de riesgos, screening agu-
do de sustancias qumicas, productos ali-
menticios y farmacuticos; adems, el es-
tudio de la transferencia trfica de contami-
nantes, ya que desde el punto de vista
ecotoxicolgico los invertebrados acuti-
cos juegan un importante papel en la trans-
ferencia de alimentos o flujo de energa den-
tro de la cadena alimentaria de estos
ecosistemas, por lo que las alteraciones ori-
ginadas por la presencia de un agente txico
en uno de estos grupos pueden en algn
grado, interferir con otros componentes
interdependientes de la cadena trfica.3
Este trabajo va dirigido a determinar la
LC50 y la toxicidad aguda tras 24 h de expo-
sicin del dicromato de potasio (K2Cr2O7)
sobre larvas de Artemia salina de 24 h con
el propsito de estudiar la susceptibilidad
de estos organismos a diferentes concen-
traciones del compuesto.
Mtodos
Los quistes de Artemia salina leach
fueron suministrados por el Centro de
Investigaciones pesqueras de Provincia
Habana. Se almacenaron en un lugar seco
a una temperatura estable de 25 C.
En el ensayo se emple agua de mar
artificial preparada segn la frmula de
Dietrich & Kalle: para 1 L de agua destila-
da, 23 g de NaCl, 11g de MgCl2 6H2O, 4g
de Na2SO4, 1,3g de CaCl2 2H 2O y 0,7 de
KCl; se ajust el pH de la solucin a 9,0
con Na2CO3.
105
Para la eclosin de los huevos se utiliz
una cmara de vidrio de 2 compartimentos
(uno oscuro y el otro iluminado por una
lmpara de 18 W colocada a una distancia
aproximada de 30 cm). El agua se aire a satu-
racin 15 min antes de colocar los huevos.
Durante el tiempo de incubacin se mantuvo
un flujo constante de aire para garantizar la
eclosin; temperatura de 28 C; salinidad
de 32g/mL y pH 9,0.
Ensayo de toxicidad a guda
Ensay
en Ar temia salina
El dicromato de potasio (K2Cr2O7) gra-
do analtico (99,9 % de pureza) suministra-
do por la BDH AnalaR fue disuelto en
agua destilada; las distintas concentracio-
nes se obtuvieron a partir de una solucin
madre fresca (1 mg/ml)2. Para la determina-
cin de la LC50 se hicieron grupos de 10
nauplius y se prob un rango de concen-
traciones de 5,0;10, 15 y 20 mg/L, donde se
establecieron 3 rplicas por tratamiento,
incluyendo el grupo control. El tiempo de
exposicin fue de 24 h. Culminado ste, se
contaron las sobrevivientes y se anot
cualquier comportamiento anormal (difi-
cultades en la natacin).
CL50: se refiere a la concentracin es-
timada a la cual se produjo la muerte en el
50 % de la poblacin.
Dificultades en la natacin:
Se refiere a cualquier comportamiento
natatorio anormal.
Tratamiento estadstico
de los resultados
La determinacin de la LC50 se realiz
por estimacin grfica. sta pudo obtenerse
representando la mortalidad de las larvas
en porcentajes, en funcin de la concentra-
cin de la sustancia a ensayar, utilizando
ejes con escala lineal a partir de los cuales
se pudo estimar este parmetro por
interpolacin. Se emple adems el progra-
ma Microsoft Excel 97 con el estadgrafo
pronstico el cual calcula o predice un va-
lor futuro en una tendencia lineal usando
valores existentes.
Resultados y Discusin
La eclosin de los huevos comenz a
ocurrir aproximadamente a partir de las 16 h
bajo las condiciones antes descritas para
los ensayos preliminares y definitivos. En
el ensayo de toxicidad la viabilidad en el
grupo control fue de un 100 % (tabla) no se
observaron alteraciones en el comporta-
miento. Los efectos txicos del dicromato
de potasio no se manifestaron en ninguno
de los casos en las primeras 3 h del trata-
miento.
En las concentraciones correspon-
dientes a 5, 10 y 15 mg/L se observ en
algunas larvas dificultades en la natacin
a las 24 h, relacionndose con lo reporta-
do sobre los efectos subletales descritos
TABLA. Valores registrados para el clculo de la LC50 24 h
Concentracin Nmero de artemias vivas por pocillo
mg/l 1 2
0 (Control) 10 10
5,0 9 10
10 6 7
15 4 4
20 0 0
T= es el total de artemias vivas al final del ensayo para cada concentracin.
P= es el porcentaje de artemias muertas al final del ensayo para cada concentracin.
106
para diferentes especies de crustceos.5 La
tabla resume los resultados obtenidos en el
ensayo definitivo.
En la figura se muestra el porcentaje de
mortalidad respecto a la concentracin de
la sustancia de estudio en un tiempo de
24 h. La LC50 estimada fue de 12,5 mg/L,
la cual est en el rango de valores reporta-
dos en la literatura para ensayos agudos en
invertebrados acuticos, (0,067-59,9 mg/L).4
El cromo hexavalente es acumulado por
los organismos acuticos por difusin
pasiva.6 La toxicidad para los diferentes
grupos, especies y estadios no es la misma
y vara adems de acuerdo con las condi-
ciones ecolgicas y a las caractersticas
qumicas del agua. Las especies de inver-
tebrados como los crustceos son ms sen-
sibles a sus efectos que los vertebrados
como los peces.4
Las mudas en Artemia salina son
muy frecuentes y las nauplius de 24 h
presentan una cutcula muy fina lo que las
hace especialmente sensibles al txico
(cromo VI), el cual penetra a travs de las
barreras fisiolgicas absorvindose rpi-
damente y provocando diferentes altera-
ciones en estos organismos, que van desde
efectos subletales sobre la movilidad, la
reproduccin y la hematologa hasta la
muerte de la larva.
3 T P
10 30 0
10 29 3,3
7 20 33,4
3 11 63,3
0 0 100
 M or ta lida d ( % )

FIG. Interpolacin de
la CL 50.

Conclusiones La concentracin de 5,0 mg/L fue la m-

La LC50 del dicromato de potasio de-
terminada para las condiciones de estu-
dio fue de 12,5 mg/L.
nima ensayada que provoc efectos adver-
sos en las larvas.
Con los resultados obtenidos se co-
rrobora la sensibilidad de los invertebrados
acuticos frente al dicromato de potasio.

SUMMARY: Due to the potential impact that represents for the environment the emission of
chromates and dichromates (chromium VI) poured as a result of the activity of different industrial
sectors, it is determined the acute toxicity of K2Cr2O 7 in larvae of artemia salina as an alternative
method applied to ecotoxicology
ecotoxicology.. In this vver
er satile method, 24-hour nauplius ar
ersatile aree exposed to differ ent
different
concentr ations of the compound and the corr
concentrations esponding LLC50,
corresponding C50, as w ell as other adv
well advererse effects it
erse
ma
mayy cause
cause,, ar
aree determined. This methodology combines simplicity
simplicity,, rrapidity
apidity
apidity,, rreliability
eliability and lo w cost
low
and, therefore, its use as screening in ecotoxicological tests allows to predict in a short time the
toxicity of numerous chemicals for the aquatic ecosystems.

Subject headings: POTASSIUM DICHROMA

POT TE/toxicity; TTO
DICHROMATE/toxicity; O XICITY TESTS/methods; AR
TESTS/methods; TEMIA.
ARTEMIA.

Referencias bibliogrficas Bengtson, W. Decleir, and E. Jaspers (Eds).

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Recibido: 29 de mayo del 2001. Aprobado: 30 de
junio del 2001.
Lic. Yuleidis Gonzlez Prez. Centro de Toxico-
loga y Biomedicina. Autopista Nacional km 1,
Santiago de Cuba, Cuba.