PRUEBA DE CLULA Y GENOMA 4MEDIO

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I. Encierre en un crculo la alternativa correcta.
1) El ADN recombinante se obtiene a partir de:
A. la fecundacin de ovocitos y espermatozoides de diferentes especies
B. la unin de molculas de ADN de diferentes especies.
C. La unin de protenas de diferentes especies
D. Mutaciones espontneas que se producen en el ADN de una especie.
2) La clave en la obtencin de un organismo genticamente modificado es:
A. extraer genes de inters e introducirlos en otros
B. aislar el ADN de una especie que presenta caractersticas ventajosas
C. realizar cruzamientos para obtener organismos mejores
D. alterar el ADN para lograr mutaciones positivas
3) Por qu las enzimas de restriccin son llamadas tijeras moleculares?
A. unen hebras de ADN de diferentes especies
B. cortan el ADN
C. aceleran una reaccin metablica
D. son fragmentos de ADN

4) Las enzimas de restriccin actan de manera especfica porque:

A. Pegan fragmentos especficos de ADN
B. Identifican y actan sobre diferentes ADN
C. Reconocen lugares especficos en diferentes protenas
D. Cortan secuencias particulares y determinadas de ADN.

5) Las enzimas llamadas ligasas tienen la funcin de:

A. Actuar sobre un determinado sustrato para transformarlo en otras
sustancias
B. Pegar fragmentos de ADN aislado dentro de otro organismo
C. Reconocer genes de inters y lo trasladan a otro organismo
D. Aislar genes con caractersticas negativas en un organismos

6) Con respecto a las enzimas de restriccin, cul alternativa es falsa

A. Existen solo en bacterias
B. Reconocen secuencias especficas en el ADN
C. Existen ms de 250 enzimas de restriccin
D. Pueden cortar el ADN propio de la bacteria
 7) Qu significa la siguiente nomenclatura utilizada para representar una
enzima?

Eco RI

A. Origen, secuencia y corte que realiza

B. Lugar donde acta y tiempo que demora en hacerlo
C. Tipo de ADN, corte y secuencia
D. Orden , lugar donde acta y producto que se obtiene

II. Responde verdadero o falso segn corresponda. Justifica tus respuestas.

1. Las enzimas de restriccin reconocen secuencias de nucletidos en el ADN.

2. Las enzimas de restriccin rompen la doble hlice del ADN en lugares

especficos o cerca de ellos.
3. Los fragmentos de ADN pueden ser incorporados a plsmidos o virus que
acten como vectores.
4. Los plsmidos extracromosmicos no son vehculos corrientes utilizados para
clonacin.
5. Las enzimas de restriccin ofrecen la posibilidad de segmentar el ADN en
trozos y ordenarlos en forma secuencial.
6. Escherichia coli es la nica bacteria que produce enzimas de restriccin.
7. Las bacterias producen enzimas de restriccin para degradar el material
gentico extrao que entre en la clula.
8. Las enzimas de restriccin actan sobre cualquier tipo de molcula.

III. Ordenar la secuencia de hechos que se emplean en ingeniera gentica:

Transferencia del vector con el ADN de inters (vector recombinante) a una
clula en donde se replique, proceso llamado transformacin de la clula
husped.
Generacin de un fragmento o fragmentos de ADN que han de utilizarse o
manipularse.
Seleccin de aquellas clulas que llevan las molculas de ADN
recombinante deseado, y su replicacin como clones.
Empalme de los fragmentos de ADN formando una molcula compuesta,
ADN recombinante, que puede actuar como vector, o ser incorporado en un
vector para su posterior transmisin.
IV. Anlisis de caso
Algunas consideraciones a tener en cuenta antes de hacer el ejercicio:
1) Cuando se realiza el protocolo de restriccin (es decir se sigue la receta para
el uso de las enzimas), se pueden combinar 2 o ms enzimas en un mismo
tubo de ensayo, siempre y cuando la solucin en la cual deben estar disueltas
sea la misma.
2) Cada enzima puede cortar en algunos o en todos los sitios que le
corresponde, esto depende de la cantidad de molculas enzimticas que se
utilicen, cunto ADN haya en el tubo y cunto tiempo se los deje actuar.
3) Antes de hacer la reaccin en el tubo de ensayo se debe evaluar qu otra
molcula de ADN se va a clonar y en base a eso elegir la mejor enzima para
cortar el gen de inters. Por lo general, cuando se tiene un gen ya cortado y se
quiere guardar, se usan vectores de clonado. Los vectores de clonado son
molculas de ADN circular del tipo plsmidos y que tienen un sitio en el cual
se insertan las secuencias de corte de varias enzimas como para poder elegir
la enzima que ms convenga, ese sitio se denomina sitio de mltiple
clonado.

Anlisis del caso:

Un ingeniero agrnomo que trabaja en un laboratorio de Biotecnologa Vegetal
desea obtener trigo transgnico que sea resistente al ataque de un hongo que
afecta ese cultivo en su pas. Como no existe otra variedad de trigo que tenga
genes antifngicos, el ingeniero evalu que no podra realizar cruzamientos
convencionales y tendra que recurrir a tcnicas de ingeniera gentica. Al
investigar en publicaciones cientficas hall que la cebada tiene genes de
resistencia, entonces decidi clonar esos genes de la cebada para luego utilizarlos
en la obtencin del trigo transgnico. Busc en bases de datos la secuencia del
gen de la cebada para analizar con qu enzimas de restriccin podra cortar el gen
que le interesa, una vez que haya hecho la extraccin del ADN de la planta. El
resultado de su anlisis se encuentra en la figura 1.
Una vez cortado el gen de inters deber insertarlo dentro del vector de clonado
que se muestra en la figura 2, para lo cual deber abrir el sitio de mltiple clonado,
cortando con alguna enzima de restriccin. Qu enzima/s habr elegido? Por
qu?

BamHI EcoRV
HindIII HindIII Hind
Sau96I III

Fig.2: Sitio de mltiple

clonado dentro del
vector de clonado

Vector de
clonado