Manual de Prcticas:

Biologa Celular

Unidad Acadmica Multidisciplinaria Zona Huasteca

MANUAL DE PRCTICAS
DE LABORATORIO DE
BIOLOGA CELULAR

INSTRUCTORA: Alumno (a):

Ingeniera en Alimentos 1
BQ. Karina Velzquez Pauln
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

PRESENTACIN

Todos los organismos vivos estn constituidos por clulas, o al menos por una sola
clula. Tu cuerpo est compuesto por trillones de clulas que se mantienen
trabajando arduamente para mantenerte en orden. Cada una de las clulas contiene
el genoma completo y en teora es capaz de originar un organismo completo,
adems de esto, las clulas hospedan a otros organismos, contienen provirus (los
cuales contienen el DNA de los virus que te han infectado a ti y a tus ancestros). La
biologa celular es muy interesante y divertida por eso te invitamos a que te
introduzcas en este mundo microscpico que es parte fundamental de la vida y que
est funcionando activamente durante la vida de los organismos.
En este manual de prcticas para el laboratorio de Biologa Celular se incluyen
experimentos y actividades bsicas que por principio debe conocer el estudiante de
Ingeniera en Alimentos las cuales se complementan con el programa de estudios
de la Unidad de aprendizaje.
En este contexto el manual del curso constituye un auxiliar y gua de las actividades
prcticas y de laboratorio. El documento est organizado en dos partes, el programa
de la parte terica y las prcticas de laboratorio, ambas en este curso interactan
reforzndose mutuamente.
El objetivo esperado es que el alumno integre los elementos bsicos para su
incorporacin en los cursos avanzados de su formacin profesional, as como en
optativas vinculada al rea de biologa celular y molecular, ya que el conocimiento a
nivel celular resulta indispensable para comprender la estructura elemental de todos
los individuos.
Los conocimientos y habilidades adquiridos le brindarn las herramientas para
realizar investigacin cientfica, as como para poder preparar informes tcnicos en
el rea, con responsabilidad y tica profesional.

La inteligencia consiste no solo en el conocimiento,

si no tambin en la destreza de aplicar los conocimientos en la prctica.
Aristteles.

Ingeniera en Alimentos 2
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

REGLAMENTO DE TRABAJO DENTRO DEL LABORATORIO

Se tendr un margen de tolerancia de 10 minutos despus de la hora de

entrada.
A las tres faltas injustificadas al laboratorio, el alumno ser dado de baja.
Como requisito para efectuar la prctica, el alumno deber presentar un
diagrama de flujo de las instrucciones de cada prctica a realizar. (5 %)
Es obligatorio el uso de bata blanca (abotonada), equipo de seguridad y
material solicitado por equipo.
Est estrictamente prohibido: fumar, comer y/o beber, masticar chicle, utilizar
celular, jugar o hacer bromas en el laboratorio, lanzar objetos, usar tacones,
shorts, gorras, minifaldas o sandalias, tener objetos innecesarios en las
mesas, tener soluciones y reactivos sin etiqueta o mal etiquetados, etc.
Mantener siempre limpia y ordenada el rea de trabajo.
Dejar mochilas, ropa, etc., en el lugar asignado para ello, evitando colocar
stos en las mesas de trabajo, solamente se deber contar con lo necesario
para tomar notas y su manual de laboratorio.
El material que se use deber dejar debidamente lavado y escurrido.
Es obligatorio mantener lavaderos perfectamente limpios, y revisarlos antes
de salir de prctica.
Los desechos qumicos y biolgicos que se generen debern ser depositados
en los recipientes adecuados. (Anexo 1)
Checar todos los detalles que se necesitarn antes de cada prctica.
No se permite la entrada a toda persona ajena al desarrollo de la prctica.
Se dar por anulada la prctica al alumno o equipo que no venga provisto de
las materias primas solicitadas para el desarrollo de las prcticas.
Si se hace uso de algn equipo de laboratorio, es obligatorio el registro en su
bitcora correspondiente.
Dejar en perfectas condiciones de limpieza y orden el laboratorio antes de
salir de la prctica.
Asegrese que los aparatos elctricos que haya utilizado queden apagados y
desconectados antes de que usted abandone su rea de trabajo.
La limpieza del laboratorio ser responsabilidad de un equipo por sesin.

Ingeniera en Alimentos 3
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

FORMA DE EVALUAR EL LABORATORIO

El reporte de prcticas se realizar a mano en una libreta especial de

reportes.
Cada reporte deber incluir los siguientes apartados:
- Portada (nombre de institucin, prctica, alumno, lugar y fecha)
- Introduccin 10 %
- Objetivo 5 %
- Material y Mtodo 5 %
- Resultados (imgenes) 10 %
- Discusin (anlisis de resultados) 15 %
- Conclusiones 10 %
- Bibliografa 5 %
- Cuestionario 5 %
Adems tambin se evaluarn los siguientes aspectos.
- Ortografa 5 %
- Puntualidad 5 %
- Trabajo de laboratorio 10 %
- Trabajo en equipo 10 %
- Diagrama de flujo 5 %
De esa manera el valor total de cada Reporte de laboratorio ser el 100 %
Para aprobar el laboratorio se deber obtener una calificacin mnima de 6
o 60 % de acuerdo a lo sealado anteriormente.
Si el alumno no se asiste a la sesin de laboratorio no tendr el derecho de
entregar el reporte de laboratorio, esto mismo se aplicar a aquellos
alumnos que sean suspendidos del laboratorio a causa de infracciones
cometidas dentro del mismo.

Ingeniera en Alimentos 4
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Contenido

Prctica 1.- Uso del microscopio: Identificacin de clulas ............................................................... 6

Prctica 2.- Diversidad Celular ............................................................................................................ 9

Prctica 3.- Medicin de clulas........................................................................................................ 11

Prctica 4.- Demostracin de la difusin y smosis .......................................................................... 13

Prctica 5.- Identificacin de tejidos y estructuras ........................................................................... 15

Prctica 6.- Observacin de clulas asociadas a la divisin celular .................................................. 17

Prctica 7.- Observacin de clulas asociadas a la divisin celular .................................................. 19

Prctica 8- Permeabilidad celular...................................................................................................... 21

Ingeniera en Alimentos 5
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 1.- Uso del microscopio: Identificacin de clulas

Objetivos:
Identificar las partes del microscopio de campo claro.
Ser capaz de realizar un enfoque en una preparacin fija.
Aprender a realizar la iluminacin de Khler y observar diferentes tipos
celulares.

Introduccin:
El tamao de las clulas escapa al poder de resolucin del ojo que se define como
la distancia mnima entre dos puntos para que puedan verse como objetos
separados. El descubrimiento de las clulas fue posible a partir de la invencin del
microscopio compuesto. Una clula animal tpica mide entre 10 y 20 mm de
dimetro, unas cinco veces menos que el dimetro de la partcula ms pequea
observable por el ojo humano.
En una primera parte se busca promover la exploracin rpida de algunas clulas
procariontas y eucariontas, para lo cual se debe conocer el adecuado uso de los
microscopios compuestos y el uso de la iluminacin Klher.
Se han desarrollado diferentes sistemas de iluminacin para el microscopio, que
permiten observar clulas o tejidos vivos, o fijados y teidos.
El microscopio de campo claro es til para la observacin de material teido, la
tincin incrementa el contraste entre la muestra y el medio que lo rodea. La imagen
formada resalta sobre un fondo blanco brillante. En este sistema, el trayecto que
sigue la luz va desde la lmpara hasta el ojo del observador pasando por un sistema
de lentes que la alinea y la concentra.
August Khler (1866-1948), desarroll un sistema que permite el alineamiento del
sistema ptico con el sistema de iluminacin sobre un mismo eje. Esto se realiza
tomando como referencia el diafragma de campo, que regula la apertura para el
paso de sta.
La iluminacin de Khler crea un campo visual que ilumina uniformemente el
espcimen. Esta tcnica evita la aberracin cromtica, mejorando la resolucin de
las imgenes. Se pueden cambiar los objetivos (10X, 40X y 100X), sin tener que
volver a alinear el sistema.

Ingeniera en Alimentos 6
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos, aceite de inmersin y preparaciones
fijas.

I.- Uso del microscopio:

El microscopio es un instrumento delicado. Debido a esto debe recordar las
siguientes instrucciones bsicas:
a) Coloque el microscopio en una posicin cmoda sobre la mesa. Tmelo siempre
del brazo. Si desea cambiar la posicin del instrumento levntelo y NO lo arrastre
por la mesa.
b) Es conveniente verificar la limpieza de los lentes antes de comenzar a realizar
observaciones.
c) Encienda la lmpara, baje el condensador y abra el diafragma completamente.
Recuerde, la observacin se realiza ms eficientemente con iluminacin Kheler.

II.- Realizacin de la observacin:

1. Identifique las partes del microscopio y verifique su funcionamiento.
2. Abra el diafragma de iris y el diafragma de campo.
3. Suba el condensador hasta el tope, utilizando el tornillo del
portacondensador.
4. Seleccione el objetivo de 10X.
5. Ajuste la distancia interpupilar. Enfoque una preparacin con el tornillo
macromtrico. Para realizar el enfoque fino use el tornillo micromtrico.
Afine el enfoque para el ojo izquierdo con el dipter.
6. Cierre el diafragma de campo completamente, se debe ver una luz difusa.
7. Utilizando el tornillo del portacondensador, descienda el condensador hasta
ver ntido el diafragma de campo que aparecer como un polgono.
8. Centre este polgono con los tornillos posteriores.
9. Abra el diafragma de campo totalmente.
10. Contraste la imagen con el diafragma de iris del condensador.
11. Para observar sus muestras con el objetivo de 40X y 100X solamente afine
el enfoque con el tornillo micromtrico.

Ingeniera en Alimentos 7
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Cuestionario:
1. Menciona las partes de un microscopio.
2. Cmo se llama el aceite que utilizaste para el objetivo 100X?
3. Qu importancia tiene realizar la iluminacin de Khler?

Ingeniera en Alimentos 8
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 2.- Diversidad Celular

Objetivos:
Elaborar preparaciones microscpicas, utilizando los colorantes empleados
en el laboratorio.
Reafirmar los lineamientos generales para el uso del microscopio.

Introduccin:
Un examen microscpico es el primer paso a realizar para el estudio de muestras de
tipo biolgico. Es un examen que nos proporciona datos, como la presencia de
microorganismos, su morfologa, movilidad y caractersticas estructurales.
La microscopa de contraste de fases es una tcnica ptica que explota los cambios
en el ndice de refraccin para producir imgenes de alto contraste de especmenes
transparentes.
El microscopio de contraste de fases se utiliza principalmente en el estudio de clulas
vivas sin alterar o sin teir, as como tambin es de gran utilidad para observar
clulas cultivadas, cuyo crecimiento y divisin mittica pueden seguirse fcilmente.
Para observar los objetivos a travs del microscopio es necesario colocar los objetos
sobre una laminilla de vidrio (portaobjetos) y generalmente se coloca otra laminilla
ms delgada (cubreobjetos); en esta forma se obtiene la preparacin microscpica,
la que puede durar poco tiempo o puede ser guardada lo que nos da la clasificacin
de preparaciones microscpicas temporales y/o permanentes.
Sin embargo el tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan
difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta de
contraste entre la clula y el medio que la rodea, y el medio ms simple de aumentar
el contraste es la utilizacin de colorantes. Las tcnicas de coloracin permiten la
observacin morfolgica con un mejor contraste que en el examen en fresco, as
como la observacin de estructuras celulares. El examen microscpico de
preparaciones teidas tiene una serie de pasos comunes previos a la tincin.

Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos y preparaciones fijas.
Reactivos: Lugol, colorante azul de metileno.

Ingeniera en Alimentos 9
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

I.- Preparaciones en fresco

Epidermis de cebolla.
1. Desprenda un fragmento de epidermis de cebolla.
2. Depostelo en el portaobjetos cuidando que quede completamente extendido,
agregue una gota de lugol.
3. Coloque el cubreobjetos y enfoque la muestra con el objetivo de 10 %.
4. Una vez efectuado esto realice el contraste de fases y haga sus observaciones
en 10X y 40X.

Frotis de Yogurt.
1. Coloque la muestra sobre el porta objetos y distribyala.
2. Fije la muestra por secado, pasndolo sobre un mechero. El paso del
portaobjetos sobre la llama del mechero debe ser rpido, repita hasta que
est seca la muestra. La temperatura del porta debe ser la que soporta el
dorso de la mano sin quemarla.
3. Coloque unas gotas del colorante azul de metileno al 10 %, cubriendo la
extensin; el tiempo de actuacin del colorante es de tres minutos, sin dejar
que seque totalmente.
4. Enjuagar con agua corriente para eliminar exceso.
5. Dejar secar al aire.
6. Observar al microscopio con objetivo 100X.

Cuestionario:
1. De acuerdo con sus observaciones, diga qu diferencias o ventajas encontr
al usar el microscopio de contraste de fases, con respecto al de campo claro
que utiliz en la prctica anterior.
2. Qu tipos de colorantes pueden utilizarse para teir componentes
celulares?
3. Menciona los factores que intervienen en la coloracin de una preparacin
microscpica.

Ingeniera en Alimentos 10
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 3.- Medicin de clulas

Objetivos:
Aprender a medir muestras observadas al microscopio.
Aprender a calcular el coeficiente micromtrico para cada objetivo.

Introduccin:
Las clulas no son visibles a simple vista, por lo que es difcil hacerse una idea de
su tamao o medirlas. Como son tan pequeas, las clulas han de medirse en
unidades diminutas llamadas micras ().
Para esto se usa utiliza un objetivo micromtrico con una escala que mide un
milmetro de longitud y que est grabada en el centro de un portaobjetos, esta
reglilla micromtrica est dividida en 100 partes iguales, cada una de las cuales mide
10 micrmetros (m). Cuando se cambian las lentes objetivos, el tamao de lo
observado se aprecia diferente por lo que es necesario medir la escala del ocular
para cada objetivo del microscopio.
Las dimensiones de las clulas y sus elementos se pueden apreciar y cuantificar
tanto al microscopio ptico como al microscopio electrnico (Fig. 1).

En la presente prctica se sustituir el objetivo micromtrico por la cmara de

Neubauer, la cual tambin posee una escala definida y calibrada.

Ingeniera en Alimentos 11
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

La cuadrcula de recuento muestra 9 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm2. Los

4 cuadrados grandes de las esquinas sealados con una "L" estn divididos en 16
cuadrados con aristas de 0.25 mm. Se utilizan para el recuento de leucocitos. El
cuadrado grande central est dividido en 25 cuadrados medianos con aristas de 0,2
mm estando cada cuadrado mediano subdividido en 16 cuadrados pequeos con
aristas de 0,05 mm y una superficie de 0.0025 mm2. Los 5 cuadrados medianos
sealados con una "E" se utilizan para recuento de eritrocitos y de trombocitos.
Tiene especial relevancia que todos los cuadrados medianos presentan en todos los
lados lneas lmite triples. La lnea central es la frontera y decide si las clulas de
esta zona se deben contar o no. Marcado CE segn las directrices IVD 98/79 CE.

Procedimiento:
Materiales: Preparaciones fijas.

1. Colocar la cmara de Neubauer sobre la platina del microscopio.

2. Centrar y enfocar la escala, utilizando el objetivo que se vaya a calibrar.
3. Haga que una de las lneas de la escala del ocular coincidan exactamente con
una de las lneas de la escala de la cmara.
4. Seleccione un segundo punto, lo ms alejado del primero, donde coincida
exactamente el par de lneas.
5. A partir de esas lneas coincidentes, se cuentan las divisiones de la escala del
ocular y de la cmara.
6. El nmero de divisiones anotado para la cmara de Neubauer se multiplica
por lo que son los micrmetros que mide exactamente cada una de las
divisiones y el producto se divide entre el nmero de divisiones contadas de
cada divisin del micrmetro ocular.
7. Una vez determinados los coeficientes realizar la medicin de las clulas
proporcionadas por el instructor.

Cuestionario:
1. Qu unidades se usan en la medicin de estructuras celulares?
2. Al observar una misma clula a 10X y a 40X. Hay variaciones en cuanto a
sus medidas? Si las hay, a qu pueden deberse?
3. Qu importancia tiene la tcnica de micrometra?

Ingeniera en Alimentos 12
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 4.- Demostracin de la difusin y osmosis

Objetivos:
Entender los principios de actividad osmtica.
Comprobar el funcionamiento de la smosis en clulas vegetales vivas.

Introduccin:
La smosis es un fenmeno fsico relacionado con el comportamiento de un slido
como soluto de una solucin ante una membrana semipermeable para el solvente
pero no para los solutos. Tal comportamiento entraa una difusin simple a travs
de la membrana, sin "gasto de energa". La smosis del agua es un fenmeno
biolgico importante para el metabolismo celular de los seres vivos.
Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos y cubreobjetos, azul de metileno, 100 gr de azcar,
100 gr de sal, 1 zanahoria y 2 huevos frescos.

I. Demostracin de la difusin.
1. Coloque agua destilada en un recipiente (mida el volumen).
2. Agregue 5 gotas de azul de metileno.
3. Describa lo que sucede cada 15 minutos.

II. Demostracin de la smosis, prueba A, en zanahoria.

1. Corte un trozo de la zanahoria de tal forma que se forme un recipiente.
2. Llene la cavidad con azcar o sal.
3. Coloque el trozo en un recipiente con agua, de tal forma que la parte
externa este en contacto con lquido.
4. Describa lo que sucede despus de 2 horas.

III. Demostracin de la smosis, prueba B, en zanahoria.

1. Corte un trozo de zanahoria y hordelo.
2. Agregue 1 mL de agua destilada.
3. Coloque el trozo en un recipiente con solucin hper-salina o hper
azucarada, de tal forma que la parte externa este en contacto con el
lquido.
4. Describa lo que sucede despus de 2 horas.

Ingeniera en Alimentos 13
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

IV. Demostracin de la smosis con un huevo.

1. Rompa con sumo cuidado la cscara de un huevo, en el extremo ms
cnico, dejando una pequea perforacin.
2. Por el otro extremo del huevo rompa la cscara, sin daar la membrana
3. Llene la cavidad con agua destilada.
4. Coloque el huevo de tal forma que la parte externa este en contacto con
lquido hper-salino o hper azucarado.
5. Describa lo que sucede despus de 2 horas.

Ingeniera en Alimentos 14
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 5.- Identificacin de tejidos y estructuras

Objetivos:
Conocimiento del uso y fundamento de la tincin.

Introduccin:
La mayora de las clulas y matrices extracelulares no poseen un color propio por lo
que su observacin directa al microscopio ptico no permite observar sus
caractersticas morfolgicas. Para poder observarlos se emplean colorantes,
sustancias dotadas de color que se unen de manera ms o menos especfica a
determinadas estructuras del tejido.
Una de las tcnicas ms utilizadas es la tincin de hematoxilina y eosina. Las
caractersticas de los compuestos que la componen hacen posible observar al
microscopio ptico las clulas individualizadas y sus ncleos, que se tien de forma
diferenciada. Gracias a esta tcnica se han podido observar gran cantidad de tejidos
animales. Se han descrito, bajo esta tincin, la gran mayora de tejidos musculares
y glandulares del cuerpo. Aportando con ella la morfologa de las clulas que forman
el tejido y la posicin relativa y la forma del ncleo dentro de ellas.

Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos y aplicadores de madera.
Material biolgico: tejido de ratn.
Reactivos: Hematoxilina, eosina, etanol, alcohol, agua.

1. Hidratar tejidos en etanol al 90 %.

2. Enjuagar con agua destilada, durante unos segundos.
3. Teir con hematoxilina por 5 minutos.
4. Enjuagar con agua corriente.
5. Sumergir en alcohol-cido al 50 %, tres veces.
6. Sumergir dos veces en agua amoniacal y enjuagar.
7. Contrateir con eosina por dos minutos.
8. Deshidratar con etanol diez veces.
9. Aclarar con xileno por cinco minutos.
10. Colocar una gota de resina en el portaobjetos y colocar un cubreobjetos y
observar al microscopio.

Ingeniera en Alimentos 15
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Cuestionario:
1. Escribe el fundamento de la tincin de hematoxilina y eosina.
2. Esquematiza las caractersticas de los diferentes tejidos observados.

Ingeniera en Alimentos 16
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 6.- Observacin de clulas asociadas a la divisin celular

Objetivos:
Realizar una preparacin que permita la observacin de la mitosis al
microscopio.

Introduccin:
Todos los seres vivos, uni y pluricelulares tienen como misin fundamental la de
reproducirse preservando sus caractersticas esenciales a travs de las generaciones.
Los fenmenos que tienen lugar durante la reproduccin celular corresponden a una
de las etapas del proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la
coordinacin de una serie de procesos que involucran la integracin de diferentes
seales que conducen a la duplicacin de ADN, su condensacin, segregacin y
posterior descondensacin.
Cuando una clula se divide en dos, uno o ambos productos de la divisin pueden
volver a dividirse, establecindose de esta forma un ciclo de divisin celular, el
perodo entre dos mitosis consecutivas, se denomina interfase. El estado normal de
una clula es con los cromosomas en estado de un cromatidio, es decir en estado
de una doble hlice de ADN.
Indudablemente para que una estructura pueda dividirse en dos exactamente
iguales, esta estructura ha de estar duplicada, es decir todos sus componentes
repetidos y separados en estructuras diferenciadas. El cromosoma antes de dividirse
debe pasar a un estado en el que posea dos cromatidios, genticamente idnticos.
La duplicacin de la materia gentica ha de ser previo a la divisin celular.
De una forma tradicional y basndose en aspectos morfolgicos observados al
microscopio ptico, la mitosis suele dividirse en 4 fases o estados: profase,
metafase, anafase y telofase. Aunque esta diferenciacin es correcta, y se
corresponde con etapas concretas de la cariocinesis, no hemos de pensar que ello
ocurre en etapas diferenciadas, sino ms bien en un proceso totalmente continuo,
sin pausa en el tiempo, y que todo se engloba en un ciclo de la clula.

Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos, acetocarmin, y cebolla.

Ingeniera en Alimentos 17
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Raz de cebolla (Mitosis):

Al menos una semana antes de la sesin, escoja una cebolla fresca de 5 a 7 cm de
dimetro. Quite las races y fibras secas de la base del bulbo.
1. Inserte 3 palillos de forma que la cebolla se pueda suspender en un vaso o
recipiente con agua, de tal forma que las races toquen continuamente el
agua.

Procedimiento de tincin:
2. Elija de la cebolla una o varias races completa. La regin de mayor inters
es la apical (zona de crecimiento).
3. Con la hoja de afeitar de un solo filo corte la mitad inferior de la punta de
una raz. Pngala en un vaso pequeo y cbrala con colorante de
acetocarmin. Caliente paulatinamente el vaso con el colorante de 3 a 5
minutos, evitando que el lquido hierva.
4. Corte la parte ms intensamente teida de la punta de la raz y colquela en
un portaobjetos, agregndole una gota de acetocarmin. Corte la raz en
pequeos trozos y cbrala con un portaobjetos. Coloque papel absorbente
sobre la preparacin y con el borrador de un lpiz presione firmemente, para
convertir el material en una capa delgada, evitando resbale el cubreobjetos.
Limpie el exceso de colorante con papel.
5. Localice en la preparacin a las clulas que presenten estructuras
filamentosas teidas ms intensamente.
6. Localice y esquematice una clula que se encuentre en: a) Interface. B)
Profase. C) Metafase. D) Anafase. E) Telofase. Preste especial atencin en la
forma y disposicin de los cromosomas. Considerando que la mayora de las
clulas que se observen estarn en interface, se recomienda ser persistente
en la bsqueda de los diferentes estadios de la mitosis.

Cuestionario:
1. Menciona los tipos de reproduccin.
2. Fase del ciclo celular donde ocurre la replicacin del ADN?
3. Menciona donde principia la citocinesis.

Ingeniera en Alimentos 18
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 7.- Observacin de clulas asociadas a la divisin celular

Objetivos:
Realizar una preparacin que permita la observacin de la mitosis al
microscopio.

Introduccin:
Todos los seres vivos, uni y pluricelulares tienen como misin fundamental la de
reproducirse preservando sus caractersticas esenciales a travs de las generaciones.
Los fenmenos que tienen lugar durante la reproduccin celular corresponden a una
de las etapas del proceso conocido como ciclo celular. Este ciclo resulta de la
coordinacin de una serie de procesos que involucran la integracin de diferentes
seales que conducen a la duplicacin de ADN, su condensacin, segregacin y
posterior descondensacin. Dentro de este ciclo, la mitosis es la etapa durante la
cual una clula da origen a dos clulas hijas con igual dotacin de cromosomas.
Aunque la mitosis, de por s es un proceso continuo, para su estudio se divide en
diferentes etapas consecutivas de acuerdo a los cambios morfolgicos que va
experimentando la clula, llegando a la citocinesis.
Mientras que la mitosis siempre da lugar a clulas con el mismo nmero de
cromosomas, y adems, idnticos a los de las clulas madre, en el caso de la meiosis,
el nmero de cromosomas es la mitad que en las clulas madre y, adems, son
diferentes, ya que se ha producido la recombinacin gentica. Otra diferencia
importante es que la mitosis da lugar a dos clulas hijas y la meiosis a cuatro.
La meiosis es el proceso de divisin celular mediante el cual se obtienen cuatro
clulas hijas con la mitad de cromosomas. La meiosis se produce en dos etapas
principales: meiosis I y meiosis II.
Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos y muestra de esperma.

Muestra de esperma (Meiosis):

1. A partir de la muestra donada, tome una gota de semen y depostelo en

un portaobjetos.
2. Coloque un cubreobjetos y observe con los menores aumentos, utilizando
la menor cantidad de luz posible.

Ingeniera en Alimentos 19
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

3. Observe las clulas, con el mayor aumento de 100x utilizando

adecuadamente el aceite mineral, la iluminacin Klher y optimizando la
iluminacin.
4. Esquematice lo observado.

Cuestionario:
1. Menciona las diferencias que hay entre la mitosis y meiosis.
2. Describe la funcin de la meiosis.

Ingeniera en Alimentos 20
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Prctica 8.- Permeabilidad celular.

Objetivos:
Diferenciar los mecanismos de transporte mediante sustancias que
inducirn en la clula esos fenmenos.

Introduccin:
La clula, para llevar al cabo sus funciones vitales, requiere de un intercambio
constante de materia y energa con su entorno. Para esto, las molculas, requieren
atravesar la membrana que la recubre.
La membrana plasmtica, por el tipo de molculas que la componen, es de
naturaleza no polar. Las molculas no polares tendrn libre paso a travs de ella,
dependiendo de su grado de solubilidad en lpidos y de su tamao; a mayor
liposolubilidad, la penetracin es ms rpida. Una molcula debe satisfacer dos
condiciones para difundir al interior de una clula a travs de la membrana
plasmtica: Debe estar presente en concentracin ms elevada fuera de la clula, y
la membrana debe ser permeable a ella. Una membrana puede ser permeable a un
soluto determinado porque pasa directamente a travs de la bicapa de lpidos, o
porque es capaz de atravesar un poro situado en el espesor de la membrana que
impide el contacto del soluto con las molculas lipdicas de la bicapa.
Otro factor que determina la velocidad de penetracin de un compuesto a travs de
una membrana, es su tamao. Las molculas de menor tamao tienden a penetrar
en la bicapa de lpidos de una membrana con mayor rapidez en comparacin con la
molcula ms grande. Las molculas de agua se desplazan con mucha mayor rapidez
a travs de una membrana celular que los iones y pequeos solutos polares
comnmente presentes en las clulas. Debido a esta diferencia de penetrabilidad del
agua en comparacin con solutos se dice que las membranas son semipermeables.
El agua se mueve rpidamente a travs de una membrana semipermeable desde
una regin de baja concentracin hasta otra de alta concentracin de soluto. Este
proceso se denomina smosis y puede demostrarse fcilmente colocando la clula
en una solucin con una concentracin de soluto diferente de la presente en el
interior de ella.
Cuando se colocan las clulas en una solucin con una concentracin salina similar
a la de su medio (isotnica), la concentracin de agua permanece constante dentro
y fuera de la clula, por lo que su volumen y forma no se alteran. Los eritrocitos

Ingeniera en Alimentos 21
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

humanos pueden conservarse por largos periodos en una solucin de cloruro de

sodio al 0.9% sin presentar alteracin ni hemlisis.
Cuando las clulas son colocadas en soluciones de menor concentracin de soluto
que la propia (hipotnicas), el agua tiende a pasar hacia donde est la mayor
concentracin, dando lugar a que las clulas se hinchen. Por otra parte, cuando se
colocan en soluciones de mayor concentracin de soluto que la de ellas
(hipertnicas), el agua tiende a salir ocasionando la contraccin celular.
En las clulas vegetales, la presencia de una pared celular rgida, les ayuda a evitar
un incremento excesivo de volumen ante soluciones hipotnicas, sin embargo, en
soluciones hipertnicas, s se puede apreciar la contraccin del citoplasma por la
prdida de agua.
Procedimiento:
Materiales: Portaobjetos, cubreobjetos, cebolla y muestra de sangre
Reactivos: Solucin de NaCl, solucin de sacarosa.

Muestra de cebolla:
1. Colocar en tres portaobjetos diferentes, tres muestras de epidermis de
cebolla cortadas de la manera habitual y etiquetar como preparaciones
isotnicas. Hipertnica e hipotnica de sacarosa.
2. Colocar sobre la epidermis las diferentes soluciones de sacarosa
correspondientes en una cantidad suficiente para cubrir el tejido e impedir
que seque.
3. Dejar reposar por veinte minutos y colocar cubreobjetos.
4. Observar en 40 x. (Observar cambios).

Muestra de sangre:
1. Obtener sangre humana y colocar gotas de anticoagulante en un tubo de
ensayo.
2. Elaborar por separado cada preparacin:
a) Una gota de sangre en portaobjetos.
b) Colocar gota de sol. Isotnica de NaCl.
c) Observar en 40 x. (Cambio de inmediato).

Realizar pasos a, b y c pero ahora utilizando soluciones hipotnicas e hipertnicas.

Ingeniera en Alimentos 22
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

Cuestionario:

1. Investigue la composicin qumica de la pared celular de vegetales.

2. Describa el transporte activo y pasivo.
3. Qu diferencias observ entre las clulas animales y vegetales en
presencia de la solucin hipotnica? Explique la causa.

Ingeniera en Alimentos 23
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

ANEXO 1.

Identificacin y Clasificacin de los residuos generados con base a lo indicado en el

precepto legal, la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, la clasificacin de los residuos
peligrosos biolgico infecciosos deber realizarse de la siguiente manera:

BOLSA ROJA
Sangre
Unidades de sangre total.
Hemoderivados.

Cultivos y Cepas
Materiales desechables utilizados en el procesamiento de cepas
microbianas.

No Anatmicos
Bolsas que contengan sangre lquida y/o hemoderivados.
Materiales de curacin desechables que se encuentren saturados o
goteando sangre lquido, cefalorraqudeo, pericrdico, sinovial, pleural y
peritoneal.
Materiales desechables con secreciones utilizadas para el diagnstico de
tuberculosis, fiebre hemorrgica y cualquier otra nueva enfermedad
infecciosa determinada por la Secretara de Salud, mediante boletn
epidemiolgico.

BOLSA AMARILLA
Patolgicos
Placentas.
Cordn umbilical.
Partes de tejidos u rganos quirrgicos.
Cadveres de animales inoculados con agentes biolgicos.
Muestras biolgicas para estudios, excepto materia fecal y orina.

Ingeniera en Alimentos 24
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

CONTENEDOR DE PUNZOCORTANTES

Punzo-cortantes
Navajas.
Lancetas.
Agujas de sutura.
Agujas de jeringa sin tapa.
Estiletes de catter.
Rastrillos con navajas.
Tubos capilares.
Pipetas de vidrio que se encuentren contaminadas.
Tubos de vidrio con sangre.

Ingeniera en Alimentos 25
Manual de Prcticas:
Biologa Celular

BIBLIOGRAFAS

1. Manual de Laboratorio de biologa celular de la facultad de qumica

farmacutica biolgica. Universidad Veracruzana.
2. Manual de Laboratorio de biologa celular. Universidad Autnoma
Metropolitana.
3. Junqueira, Biologa celular. Prensa Medica Mexicana. 2001
4. Karp Gerald, Biologa Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos, 1ra
edicin,
5. Mc Graw Hill, Mxico, 2006
6. Matheus-von Holde. Bioqumica. Mxico: Mc. Graw-Hill. Interamericana.
2000.

Ingeniera en Alimentos 26