Guía de Vigilancia Basada en El Laboratorio de Enfermedades Bacterianas y Otros

Instituto Costarricense de Investigacin y Enseanza en Nutricin y Salud (INCIENSA)
Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa
Gua para la vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas

y otros eventos de importancia en salud pblica
Elena Campos, Hilda Ma. Bolaos, Grettel Chanto, Antonieta Jimnez,

Mara Teresa Acua, Francisco Duarte
Cita sugerida: Campos E, Bolaos H, Chanto G, Jimnez A, Acua MT, Duarte F. Gua para la
vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas y otros eventos de importancia en salud
pblica: Tres Ros, Costa Rica: INCIENSA, 2010.
Tres Ros, Costa Rica

Mayo 2010
CNRB-INCIENSA Gua para la vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas y otros eventos de importancia en salud pblica - 2010
Contenidos
Tema tratado Pginas
I. Introduccin 4-5
II. Agentes o eventos a vigilar
1. Enteropatgenos bacterianos causantes de diarreas, intoxicaciones alimentarias y otras 6-7
infecciones de importancia en salud pblica transmitidas por alimentos y su resistencia a
los antibiticos
a. Diagnstico de agentes causantes de diarrea e intoxicaciones alimentarias
Casos asociados a brotes 8-9
Defunciones con antecedentes de diarrea, vmito y/o deshidratacin 10
Manipuladores de alimentos 11
Anlisis microbiolgico de alimentos sospechosos 12
Instrucciones para la recoleccin y transporte de muestras de 13 - 14
alimentos relacionadas a brotes
b. Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos, con nfasis en:
Salmonella 15 - 17
Shigella 18
Vibrio cholerae O1 y O139 19
Escherichia coli O157:H7 20 21
Otros enteropatgenos 22
c. Confirmacin / tipificacin de Listeria monocytogenes 23 - 24
d. Diagnstico de brucelosis humana 25 - 26
2. Bacterias responsables de neumonas, meningitis y otras infecciones invasivas y su 27 - 28
resistencia a los antibiticos, con nfasis en:
Neisseria meningitidis 29
Streptococcus pneumoniae 30
Haemophilus influenzae 30
3. Agentes causantes de tos ferina 31 - 32
4. Resistencia a los antibiticos en grmenes comunitarios y nosocomiales 33 - 36
I. Anexos
Anexo 1. Servicios de diagnstico y confirmacin diagnstica / tipificacin que realiza el CNR- 37 - 41
Bacteriologa
Anexo 2. Boleta de notificacin colectiva VE-02 42
Anexo 3. Boleta de notificacin individual VE-01 43
Anexo 4. Embalaje y envo de material infeccioso al INCIENSA 44 - 45
Anexo 5. Boleta Para diagnstico de situacin inicial 46 - 47
Anexo 6. Boleta de notificacin de brotes 48 - 50
Anexo 7. Obtencin de muestras para estudio de Bordetella pertussis 51
2
Glosario de siglas
BLEE -lactamasa de espectro extendido

CA-MRSA Staphylococcus aureus meticilina resistente de la comunidad
CCSS Caja Costarricense de Seguro Social
CIM Concentracin inhibitoria mnima
CEI-10 Clasificacin Internacional de Enfermedades, 10 revisin
CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute
CNRB: Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa, INCIENSA
ETA Enfermedad transmitida por alimentos
HA-MRSA Staphylococcus aureus meticilina resistente intrahospitalario
hVISA Staphylococcus aureus vancomicina intermedio heterogneo
INCIENSA Instituto Costarricense de Investigacin y Enseanza en Nutricin y Salud
MBL Metalo--lactamasa
OMS Organizacin Mundial de la Salud
PCR Reaccin en cadena de la polimerasa
PFGE Electroforesis de campo pulsado
RNLB Red Nacional de Laboratorios de Bacteriologa
RBT Aglutinacin de Rosa de Bengala en lmina
RSI Reglamento Sanitario Internacional
SAT Aglutinacin en microplaca
VISA Staphylococcus aureus vancomicina intermedio
VRE Enterococcus vancomicina resistente
VRSA Staphylococcus aureus vancomicina resistente
3
I. Introduccin
El Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa (CNRB) del Instituto Costarricense de

Investigacin Enseanza en Nutricin y Salud (INCIENSA), es el responsable de coordinar a nivel
nacional la vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas de importancia en la salud pblica,
como son: las diarreas e intoxicaciones alimentarias y otras enfermedades transmitidas por alimentos
(ETA), meningitis, infecciones respiratorias e infecciones bacterianas invasivas, la resistencia a los
antibiticos, tanto en grmenes nosocomiales como comunitarios, as como de enfermedades
emergentes de origen bacteriano, incluyendo agentes relacionados al bioterrorismo y otros sujetos a
Reglamento Sanitario Internacional (RSI-2005).
Para ello, el CNRB coordina la Red Nacional de Laboratorios de Bacteriologa (RNLB), integrada por
ms de 75 laboratorios, incluyendo clnicos y ambientales, tanto pblicos como privados.
Dentro de la RNLB, la competencia de cada uno de los participantes en la vigilancia, se ha

organizado de manera que se logre mayor equidad en el acceso a un diagnstico oportuno y de
calidad para la toma de decisiones, tanto teraputicas, como de prevencin y control de eventos
prioritarios de salud pblica. A la vez, gracias al trabajo en redes es posible centralizar en el CNRB
aquellos anlisis de inters desde la perspectiva de la salud pblica y que por su alto grado de
complejidad, su costo, o la prevalencia de la enfermedad, no amerita que se realicen en el nivel local
(Anexo 1).
El CNRB tambin brinda capacitacin continua a los funcionarios que participan en las redes de
vigilancia y en el desarrollo de programas de mejoramiento continuo de la calidad para la RNLB.
Adems, realiza anlisis de la calidad microbiolgica de alimentos para investigaciones de brotes
ETA y para los programas de regulacin del Ministerio de Salud.
Adems, el CNRB es el punto focal de pas de las redes de vigilancia internacional del rea de su
competencia, lo que permite homologar y vincular la vigilancia de pas al contexto internacional y dar
cumplimiento a los compromisos en el marco del RSI-2005. En el 2009, el CNRB fue designado por
la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), como Centro de Excelencia Regional de la Red Global
Foodborne Infections para Mxico, Centroamrica y El Caribe de habla hispana, con lo que asume la
coordinacin de la red regional de laboratorios de salud pblica (de clnica humana, veterinaria y
alimentos) y su vinculacin con los epidemilogos.
4
Esta gua tiene el objetivo de facilitar la coordinacin entre el CNRB, la RNLB y los establecimientos
de salud en el quehacer de la vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas de importancia
en salud pblica. El documento est organizado por tipo de enfermedad o evento bajo vigilancia,
tomando en cuenta la Clasificacin Internacional de Enfermedades (10 revisin, 1995) y el Decreto
de Enfermedades de Notificacin Obligatoria (Decreto No. 30945-S, La Gaceta No. 18, lunes 27 de
enero de 2003). Incluye una breve descripcin del problema de salud bajo vigilancia e indicaciones
especficas para la recoleccin y referencia de muestras o cepas bacterianas de diferentes orgenes
al CNRB, de acuerdo a las competencias establecidas.
Para cumplir con su rol coordinador de la vigilancia basada en el laboratorio, el CNRB debe
seleccionar, recolectar, analizar, interpretar y comunicar, informacin y conocimiento actualizado,
oportuno y de calidad para la toma de decisiones y para la generacin de polticas pblicas,
orientadas a la promocin de la salud, prevencin, tratamiento y control de enfermedades y eventos
de importancia en salud pblica. Para esta labor, son fundamentales los procesos de diagnstico
(que consisten en llevar a cabo los anlisis de laboratorio especializados a muestras referidas ya sea
por la RNLB o por los establecimientos de salud) y confirmacin / tipificacin (consiste en
complementar con anlisis especializados de inters para la vigilancia, los diagnsticos establecidos
rutinariamente por los laboratorios de la RNLB).
Para que la vigilancia de laboratorio pueda ser de utilidad para la toma de decisiones de prevencin,
tratamiento y control, es indispensable que las muestras o cepas referidas al CNRB se acompaen de
la informacin clnico epidemiolgica correspondiente, preferiblemente en las boletas del INCIENSA
diseadas para tal fin que se indican a continuacin, las cuales se pueden obtener en la seccin
Boletas y formularios del sitio web del INCIENSA, cuya direccin es http://www.inciensa.sa.cr.
Diagnstico: Solicitud de Diagnstico por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA
Confirmacin diagnstica / tipificacin: Solicitud de Confirmacin y/o Tipificacin por Centro
Nacional de Referencia de INCIENSA
Alimentos: Solicitud de Diagnstico, Confirmacin y/o Tipificacin para Anlisis Microbiolgico
de Alimentos por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA
5
Agentes o eventos a vigilar
1. Enteropatgenos causantes de diarreas, intoxicaciones alimentarias y otras

infecciones de importancia en salud pblica transmitidas por alimentos
Importancia de esta vigilancia: En Costa Rica la enfermedad diarreica aguda constituye un

problema de salud pblica, siendo la segunda causa de consulta hospitalaria. Por otra parte, entre
las enfermedades infecciosas de notificacin obligatoria la muerte por diarrea ocupa el segundo lugar
despus del SIDA. Se estima que aproximadamente el 70% de las diarreas se deben al consumo de
alimentos y agua contaminados.
La enfermedad diarreica de origen infeccioso es causada por agentes tanto bacterianos, como virales
y parasitarios. Los mecanismos mediante los cuales estos agentes logran producir el cuadro
diarreico son muy variados; sin embargo, la mayor parte de la sintomatologa que presenta el
paciente, responde en gran medida a los factores de virulencia del patgeno involucrado. Sin
embargo, se debe tener presente que diferentes patgenos pueden producir un cuadro clnico similar,
por ejemplo, las diarreas secretoras pueden ser causadas por rotavirus, Escherichia coli
enterotoxignica, Vibrio cholerae, otros vibrios, Aeromonas, etc., mientras que los cuadros
disenteriformes se asocian a Shigella, Campylobacter y Escherichia coli enteroinvasiva, entre otros.
De ah que los laboratorios tienen un papel fundamental en la vigilancia de las diarreas, ya que para
determinar el agente etiolgico es indispensable el anlisis microbiolgico. Esto permite determinar la
circulacin de patgenos prevalentes, as como detectar y dar respuesta a la emergencia y re-
emergencia de microorganismos. De igual manera, la identificacin del agente etiolgico es una
informacin de apoyo a la investigacin epidemiolgica de brotes, para encaminar la bsqueda de las
fuentes de infeccin y mecanismos de transmisin.
Los laboratorios adems deben mantener una vigilancia activa sobre la aparicin de nuevos patrones
de resistencia a los antimicrobianos en estos enteropatgenos, con el fin de concebir planes de
tratamiento exitosos para cada paciente. Adems, desde la perspectiva de salud pblica, cuando
esta informacin es consolidada y analizada, es de mucho valor para las autoridades de salud en la
elaboracin de normas de tratamiento emprico y nuevas polticas sobre el uso de antimicrobianos.
En Costa Rica, los casos de diarrea e intoxicaciones alimentarias, se deben notificar al Ministerio de
Salud, en la boleta colectiva VE-02 (Anexo 2).
6
Adems, los casos de diarrea e intoxicaciones alimentarias debidos a algunos agentes infecciosos
especficos tambin estn incluidos en el Decreto de Notificacin Obligatoria (Decreto No. 30945-S,
La Gaceta No. 18, lunes 27 de enero de 2003), por lo que el laboratorio deber realizar la
notificacin correspondiente al Ministerio de Salud en la boleta individual VE-01 (Anexo 3),
como se indica en los cuadros que se presentan ms adelante.
Considerando lo anterior, en el CNRB se realiza:
a. Diagnstico de agentes causantes de diarrea e intoxicaciones alimentarias: El

diagnstico rutinario de las diarreas lo realizan los laboratorios de la RNLB; sin embargo, el
CNRB funciona como laboratorio de diagnstico, principalmente cuando por la ocurrencia de
un brote de diarrea o intoxicacin alimentaria, se genera un nmero inusual de muestras que
rebasa la capacidad de respuesta del nivel local. Para esto, el CNRB recibe muestras clnicas
(de pacientes y de manipuladores de alimentos) y las analiza utilizando metodologas para el
diagnstico de enteropatgenos, que por su baja prevalencia, costo o nivel de complejidad an
no estn disponibles en el nivel local, como son la determinacin de factores de virulencia de
Eschericia coli, la deteccin de toxinas de Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus y
Bacillus cereus y agentes virales como rotavirus y norovirus, los que frecuentemente se
asocian a brotes. El CNRB adems realiza anlisis microbiolgicos de alimentos y ambiente,
para determinar posibles fuentes o vehculos de transmisin, a fin de instaurar de manera
oportuna las medidas de prevencin y control.
El CNRB tambin apoya el diagnstico de enteropatgenos en muestras post-mortem de

de fallecidos con antecedentes de diarrea, vmito, deshidratacin.
b. Confirmacin y tipificacin de los enteropatgenos: corresponde a la confirmacin,

tipificacin (serolgica y/o molecular) y vigilancia de la sensibilidad a los antibiticos de los
enteropatgenos que rutinariamente diagnostican los laboratorios de la red, asociados a
diarreas, intoxicaciones alimentarias y otros cuadros (fiebres, septicemias, abscesos, entre
otros).
7
Diagnstico de agentes causantes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

Una vez reconocida la ocurrencia de un brote de diarrea en una comunidad o en un establecimiento, el personal de salud debe proceder a recolectar con
carcter de urgencia y previo a la administracin de antibiticos entre 10 y 20 muestras de heces de pacientes que presenten los signos y sntomas
representativos del problema. Una vez confirmado un patgeno asociado a un brote, las muestras para laboratorio se deben recolectar de manera selectiva
para no saturar estos servicios. Para esto, se recomienda trabajar con una definicin de caso y tomar muestras para laboratorio de casos que no sean
evidentemente asociados, a fin de detectar nuevos focos de la enfermedad.
En brotes de Muestra a referir al INCIENSA Exmenes que realiza el INCIENSA Observaciones

diarrea
Casos Heces diarreicas para coprocultivo, recolectadas en la etapa Estudio de heces, que incluye frotis y Los brotes de diarrea e
asociados al aguda de la enfermedad (en los primeros das de iniciada la tinciones, coprocultivo, estudio por intoxicaciones son sujeto
brote sintomatologa y previo a la administracin de antimicrobianos), rotavirus, norovirus y anlisis de notificacin obligatoria
siguiendo las medidas de bioseguridad recomendadas (Anexo coproparasitolgico (por inter-consulta inmediata al Ministerio de
4). al Centro Nacional de Referencia de Salud y a las comisiones
Parasitologa de INCIENSA) locales de vigilancia
Utilice un recipiente estril de boca ancha con tapa hermtica a
epidemiolgica, a fin de
prueba de derrames, que no contenga desinfectantes ni Diagnstico de enterotoxinas realizar la investigacin
residuos de detergentes. No se debe emplear papel bacterianas por mtodos inmunolgicos epidemiolgica y tomar
absorbente o muestras de heces de paales, porque pueden
contener residuos de desinfectantes u otros contaminantes. Deteccin y caracterizacin de factores las medidas de
de virulencia de enteropatgenos por prevencin y control
Las muestras se deben transportar al laboratorio en el menor mtodos moleculares (reaccin en correspondientes (Anexo
tiempo posible, a 4-8C (NO SE DEBEN CONGELAR). Lo ideal cadena de la polimerasa-PCR) 6).
es obtener una muestra fecal fresca, en lugar de un hisopado Si el laboratorio clnico
rectal, pero si no es posible, se puede enviar un hisopo fecal Determinacin de la relacin gentica
entre aislamientos bacterianos de identifica Shigella,
colocado en medio de transporte Cary Blair a temperatura Salmonella, Vibrio
ambiente; teniendo presente que esta muestra limita la diferentes orgenes, por mtodos
moleculares (electroforesis de campo cholerae O1 u O139, en
bsqueda de patgenos. las muestras de
pulsado-PFGE)
En general las muestras clnicas conteniendo probables agentes pacientes, se debe
bacterianos no se deben almacenar por ms de 24 horas, realizar la notificacin de
mientras que las que contienen agentes virales pueden NOTA: La bsqueda de los diferentes cada caso en la boleta
permanecer almacenadas por 2 3 das a 4C. enteropatgenos depender de las individual VE-01 (Anexo
caractersticas de la muestra y de la 3).
Cada muestra enviada al CNRB se debe acompaar con la informacin clnico-epidemiolgica
boleta Solicitud de Diagnstico por Centro Nacional de contenida en la boleta de solicitud de
Referencia de INCIENSA (disponible en la pgina web del anlisis.
INCIENSA). Junto con las muestras, para cada brote se debe
enviar al CNRB la Boleta Para Diagnstico de Situacin Inicial
(Anexo 5).
8
En el caso de sospecha de brotes de clera o que se desee conocer la exposicin previa de una poblacin a este
agente, en el CNRB se dispone de pruebas serolgicas, como se indica a continuacin:
Agente o evento Muestra para anlisis Muestra para referir al Exmenes que realiza el Observaciones
bajo vigilancia1 en laboratorio clnico CNRB INCIENSA
(diagnstico)
A00 Clera, Sangre sin anticoagulante Suero agudo (recolectado en Diagnstico serolgico de la infeccin Este anlisis se realiza en
incluye: para estudio serolgico el perodo agudo de la por V. cholerae O1: caso de pacientes en los
A00.1 Clera enfermedad) y convaleciente que no fue posible
debido a Vibrio (obtenido 15 a 21 das Determinacin de anticuerpos obtener una muestra de
cholerae O1, despus de iniciados los vibriocidas heces adecuada para
biotipo El Tor sntomas), siguiendo las cultivo y/o en apoyo a las
medidas de bioseguridad investigaciones de brotes
recomendadas (Anexo 4). de clera.
Las muestras se deben
acompaar con la Boleta
Solicitud de Diagnstico por
Centro Nacional de Referencia
de INCIENSA (disponible en la
pgina web de INCIENSA).
Contactos en el CNR-Bacteriologa:
Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

Laboratorio de Enteropatgenos Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa
e-mail: hbolanos@inciensa.sa.cr e-mail: ecampos@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126
1
Organizacin Panamericana de la Salud / Organizacin Mundial de la Salud. Clasificacin estadstica internacional de enfermedades y problemas relacionados con la salud.
10 revisin. Washington, D.C.:OPS, 1995.
9
Apoyo diagnstico del CNRB a la investigacin de defunciones con antecedentes de diarrea, vmito y/o deshidratacin
Evento bajo Muestra a referir al INCIENSA Exmenes que realiza el Observaciones
vigilancia INCIENSA
Defunciones con Muestras post-mortem: contenido intestino delgado, Estudio de heces, que incluye frotis En vista de que la muerte por
antecedentes de contenido intestino grueso, hisopado rectal en medio de y tinciones, coprocultivo, estudio diarrea se considera evitable,
diarrea, vmito, transporte Cary Blair, siguiendo las medidas de por rotavirus, norovirus y anlisis toda defuncin por esta
deshidratacin bioseguridad recomendadas (Anexo 4). coproparasitolgico (por causa debe ser investigada.
interconsulta con el Centro
Utilice un recipiente estril de boca ancha con tapa Por esto, toda muerte con
Nacional de Referencia de
hermtica a prueba de derrames, que no contenga antecedentes de diarrea con
Parasitologa de INCIENSA)
desinfectantes ni residuos de detergentes. agente identificado debe ser
En general las muestras clnicas conteniendo probables Diagnstico molecular de comunicada a la Direccin
enteropatgenos por reaccin en Regional correspondiente y a
agentes bacterianos no se deben almacenar por ms de
cadena de la polimerasa (PCR) la Direccin de Vigilancia de
24 horas, mientras que las que contienen agentes
la Salud del Min. Salud. En
virales pueden permanecer almacenadas por 2 3 das Diagnstico de enterotoxinas el caso de defunciones en
a 4C. bacterianas por mtodos menores de un ao de edad
Las muestras se deben acompaar con la Boleta inmunolgicos tambin se notifica a las
Solicitud de Diagnstico por Centro Nacional de Direcciones de Vigilancia de
Referencia de INCIENSA (disponible en la pgina web la Salud y de Garanta de
de INCIENSA) y con el Informe de Defuncin (Filiacin Acceso del Min. Salud.
del fallecido) correspondiente.
Toda defuncin en la que se
confirme Shigella,
Salmonella, Vibrio cholerae
O1 u O139, se debe notificar
al Ministerio de Salud en la
boleta individual VE-01
(Anexo 3).
Contactos en el CNR-Bacteriologa

10
Apoyo diagnstico del CNRB a la investigacin de brotes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

En brotes de Muestra a referir al INCIENSA Exmenes que realiza el Observaciones
diarrea INCIENSA
Manipuladores de En vista de que los manipuladores de alimentos pueden Estudio de heces, que incluye frotis Si se confirma Shigella,
alimentos ser sintomticos (casos) o asintomticos (portadores), y tinciones, coprocultivo, estudio Salmonella, Vibrio
es fundamental anotar esta informacin en la boleta. por rotavirus, norovirus y anlisis cholerae O1 u O139, en
Por lo anterior, la muestra a referir para coprocultivo coproparasitolgico (por inter- un manipulador
puede ser diarreica o formada, recolectada en consulta al Centro Nacional de sintomtico, se debe
recipientes estriles de boca ancha con tapa hermtica Referencia de Parasitologa de realizar la notificacin
a prueba de derrames, que no contengan desinfectantes INCIENSA) correspondiente en la
ni residuos de detergentes. Las muestras se deben boleta individual VE-01
Diagnstico de enterotoxinas
transportar al laboratorio en el menor tiempo posible, en (Anexo 3).
bacterianas por mtodos
refrigeracin (4 - 8 C), NO SE DEBEN CONGELAR.
inmunolgicos Los manipuladores de
De lo contrario, se deben colocar en un medio de
Deteccin y caracterizacin de alimentos positivos por
transporte (Cary Blair y mantener a temperatura
factores de virulencia de alguno de estos agentes
ambiente); sin embargo, este tipo de muestra limita la
enteropatgenos por mtodos deben recibir el
bsqueda de patgenos.
moleculares (reaccin en cadena tratamiento o profilaxis
Cada muestra enviada al CNRB se debe acompaar de la polimerasa-PCR) recomendado. Adems,
con la boleta Solicitud de Diagnstico Tipificacin por se debern separar de su
Centro Nacional de Referencia de INCIENSA Determinacin de la relacin cargo (incapacitar) hasta
(disponible en la pgina web de INCIENSA). gentica entre aislamientos tanto se negativice el
bacterianos de diferentes orgenes, coprocultivo.
Para la recoleccin de otras muestras de los por mtodos moleculares
manipuladores (uas, hisopado farngeo, lesiones en (electroforesis de campo pulsado-
piel), se debe coordinar con el responsable en el CNRB. PFGE)

11
Apoyo diagnstico del CNRB a la investigacin de brotes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

En brotes de Muestra a referir al INCIENSA Exmenes que realiza el INCIENSA Observaciones
diarrea
Alimentos Muestras de alimentos sospechosos 1. Presencia de: Las muestras de
sospechosos (ver instrucciones de recoleccin y Salmonella spp. alimentos se analizarn
transporte de muestras de alimentos en en el CNRB nicamente
los cuadros a continuacin). Listeria monocytogenes en aquellos casos en los
Vibrio cholerae y otros vibrios que haya mediado
En el caso de brotes de diarrea e
Escherichia coli O157:H7 coordinacin y valoracin
intoxicaciones alimentarias, las
previa por el CNRB.
muestras de alimentos se procesan Escherichia coli patgena Esto con el fin de
nicamente cuando se cuenta con
Staphylococcus aureus maximizar los recursos y
evidencia epidemiolgica que implique
Clostridium perfringens dirigir adecuadamente la
al alimento como sospechoso.
investigacin del agente
Cada una de las muestras se debe Enterobacter sakazakii involucrado en los
acompaar con la Boleta Solicitud de 2. Diagnstico molecular de enteropatgenos por reaccin en alimentos ms
Diagnstico, Confirmacin y/o cadena de la polimerasa (PCR) sospechosos.
Tipificacin para Anlisis Microbiolgico
de Alimentos por Centro Nacional de 3. Diagnstico de enterotoxinas bacterianas en alimentos por
Referencia de INCIENSA (disponible en mtodos inmunolgicos
la pgina web de INCIENSA), en la que NOTA: Los anlisis a realizar dependern del tipo de alimento
se debe realizar una descripcin y del agente identificado en las muestras clnicas relacionadas
detallada del alimento, as como de las al brote ETA.
condiciones de almacenamiento al
momento del muestreo, fecha de
recoleccin, lugar de muestreo, etc.
Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Responsable,

Laboratorio de Alimentos Biologa Molecular
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr e-mail: fduarte@inciensa.sa.cr
12
Instrucciones para la recoleccin y transporte de muestras de alimentos relacionadas a brotes
Tipo de muestra Cantidad Tipo de envase Recoleccin de muestra Manejo y transporte
Alimentos preparados Mnimo 100 g o 100 ml de Envase de boca Se debe dar prioridad a la Cada muestra se debe enviar
listos para consumir cada uno de los alimentos ancha estril o en recoleccin de muestras de sellada y empacada de
(pueden ser sobras bolsas de polietileno aquellos alimentos que fueron manera que el envase no se
NOTA: el anlisis de
de los alimentos pre-esterilizadas o consumidos por las personas que abra e introduzca
alimentos implica la
servidos, ya sea que bolsas tipo zip-lock enfermaron: contaminacin externa.
destruccin de la muestra.
se consumen crudos
Por lo que si se requiere Use instrumentos Alimentos slidos: transfiera Las muestras se deben
o cocinados)
hacer varios anlisis a estriles (cucharas, porciones de diferentes partes del transportar en hielera con gel
partir de un mismo cuchillos, esptulas, alimento para asegurar una refrigerante (4 8C), lo ms
alimento se recomienda pinzas) para obtener muestra representativa pronto posible luego de su
recolectar la mayor las muestras, o en su recoleccin. Si va a emplear
Alimentos lquidos: homogenice
cantidad de muestra defecto bolsas tipo hielo como refrigerante,
la muestra y transfiera una porcin
posible. zip-lock empquelo en bolsas
(por lo menos de 100 ml) a un
hermticas, de tal forma que
envase estril.
al derretirse, el agua no se
Si los alimentos estn congelados, introduzca en las bolsas o
NO LOS DESCONGELE. envases que contienen las
muestras de alimentos.
IMPORTANTE: Rotule
adecuadamente las muestras de
alimentos, indicando el tipo de
alimento muestreado, lugar, fecha
y hora de recoleccin del mismo,
responsable del muestreo,
condiciones de almacenamiento,
temperatura al momento del
muestreo.
Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Responsable,

Laboratorio de Alimentos Biologa Molecular
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr e-mail: fduarte@inciensa.sa.cr
13
Instrucciones para la recoleccin y transporte de muestras de alimentos relacionadas a brotes
Tipo de muestra Cantidad Tipo de envase Recoleccin de muestra Manejo y transporte
Alimentos enlatados o Mnimo 100 g o 100 ml Tal como se comercializa Si se trata de un lote del Las muestras mantenidas a
envasados (pueden ser del alimento en su (frasco, paquete, lata, producto es necesario contactar temperatura ambiente se pueden
sobras del alimento en envase original sellado y botella) al laboratorio para realizar un transportar en esas mismas
su envase original). que corresponda al lote muestreo representativo del condiciones; sin embargo, los
ingerido por los producto. productos perecederos se deben
pacientes. Enviar transportar en hielera con gel
tambin envases refrigerante (4 8C), lo ms
sellados (que no hayan pronto posible luego de su
sido abiertos) del recoleccin. Si va a emplear hielo
alimento del mismo lote. como refrigerante, empquelo en
bolsas hermticas, de tal forma
Agua envasada Recolecte de acuerdo a Envase sellado en su que al derretirse, el agua no se
la presentacin del presentacin original introduzca en las bolsas o envases
producto (botella, litro, que contienen las muestras de
galn, botelln, etc.). alimentos.
Cada muestra se debe enviar
sellada y empacada de manera
que el envase no se abra e
introduzca contaminacin externa.
Agua de la red de La recoleccin, manipulacin y transporte de estas muestras debe ser realizada nicamente por personal debidamente
distribucin capacitado.
En el caso de brotes en que se sospeche transmisin hdrica, es necesario conocer el origen del agua del lugar (Acueductos y
Alcantarillados, Municipal, Acueducto Rural). Adems, en el caso de viviendas o establecimientos, es necesario verificar si
cuenta con pozo y/o tanque de almacenamiento de agua. Lo anterior con el fin de dirigir de manera adecuada el muestreo de
las aguas.
NOTA: para otro tipo de muestreos de alimentos (en bodegas, frigorficos, por ejemplo), contacte al responsable en el
Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa.
14
Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Agente o evento Muestra para anlisis en laboratorio Muestra para referir al CNRB Exmenes que Observaciones
bajo vigilancia1 clnico (confirmacin / tipificacin) realiza el
(diagnstico) INCIENSA
A01 Fiebres tifoidea Sangre recolectada en pico febril para Bacteria con caractersticas Confirmacin / La fiebre tifoidea y
hemocultivo (preferiblemente durante las dos bioqumicas propias del gnero tipificacin hasta paratifoidea son
y paratifoidea, incluye
primeras semanas de iniciados los sntomas), Salmonella spp. en cultivo puro y serovariedad enfermedades de
A01.0 Fiebre tifoidea coprocultivo (en la segunda y tercera semana notificacin obligatoria
(infeccin debida a
fresco, inoculada preferiblemente Vigilancia de la en boleta individual
de la enfermedad) mdula sea (de utilidad en agar tripticasa soya, agar
Salmonella Typhi) resistencia a los
cuando el paciente ha recibido tratamiento nutritivo, agar semislido o en VE-01, tan pronto se
antimicrobianos
antimicrobiano), orina. algn medio de transporte establezca el
A01.1 Fiebre por Kirby Bauer
(ejemplo Cary Blair). diagnstico (Anexo 3)
paratifoidea A Nota importante: la prueba de Widal, que en agar Mueller
y se debe comunicar a
mide respuesta de anticuerpos a los Las cepas se deben transportar Hinton
A01.2 Fiebre la comisin local de
antgenos H y O de Salmonella puede preferiblemente a temperatura
paratifoidea B vigilancia
sugerir el diagnstico, pero los resultados entre 4 y 25C), siguiendo las
epidemiolgica, ya
A01.3 Fiebre no son definitivos y tienen que ser medidas de bioseguridad
que la investigacin
paratifoidea C interpretados con cautela, porque la prueba recomendadas (Anexo 4).
epidemiolgica de
es poco especfica y los ttulos de Cada muestra se debe estos casos se debe
A01.4 Fiebre
anticuerpos (an en sueros pareados), acompaar preferiblemente con realizar dentro de las
paratifoidea, no
tambin pueden haber aumentado en la boleta de Solicitud de 48 horas posteriores a
especificada (infeccin
respuesta a otras infecciones (incluyendo Confirmacin Diagnstica / la notificacin, con el
debida a Salmonella 2
malaria) . Por lo anterior, para confirmar el Tipificacin por Centro de fin de determinar si se
Paratyphi sin agente
diagnstico de fiebre tifoidea o paratifoidea, Referencia de INCIENSA trata de un brote e
especificado)
es necesario aislar e identificar el agente (disponible en la pgina web de identificar la fuente
hasta serovariedad. INCIENSA). probable de infeccin.
Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Dra. Elena Campos, Coordinadora, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,
Laboratorio de Alimentos Responsable, Centro Nacional de Referencia de Laboratorio de Antimicrobianos
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr Biologa Molecular Bacteriologa e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126 e-mail: fduarte@inciensa.sa.cr e-mail: ecampos@inciensa.sa.cr Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126
Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126
2
Organizacin Mundial de la Salud / USAID / CDC. 2004. Manual de laboratorio para la identificacin y prueba de sensibilidad a los antimicrobianos de patgenos bacterianos
de importancia para la salud pblica en el mundo en desarrollo. WHO/CDS/RMD/2003.6.
15

Agente o evento bajo Muestra para anlisis en laboratorio Muestra para referir al Exmenes que Observaciones
vigilancia1 clnico CNRB realiza el
(diagnstico) (confirmacin / INCIENSA
tipificacin)
A02 Otras Heces diarreicas para coprocultivo, recolectadas Bacteria con caractersticas Confirmacin / La enteritis debida a
en la etapa aguda de la enfermedad (en los bioqumicas propias del tipificacin hasta Salmonella
infecciones debidas
primeros das de iniciada la sintomatologa y gnero Salmonella sp. en serovariedad (salmonelosis) es una
a Salmonella, enfermedad de
incluye: previo a la administracin de antimicrobianos) cultivo puro y fresco, Vigilancia de la notificacin obligatoria
Lo ideal es obtener una muestra fecal fresca, en inoculada preferiblemente en resistencia a los
agar tripticasa soya, agar en boleta VE-01 (Anexo
A02.0 Enteritis debida a lugar de un hisopado rectal, pero si no es antimicrobianos
nutritivo, agar semislido o 3) tan pronto se
Salmonella posible, se puede enviar un hisopo fecal por Kirby Bauer en
en algn medio de establezca el
(salmonelosis) colocado en medio de transporte Cary Blair a agar Mueller
transporte (ejemplo Cary diagnstico y se debe
temperatura ambiente; teniendo presente que Hinton
Blair). comunicar a la comisin
esta muestra limita la bsqueda de otros local de vigilancia
patgenos. Las cepas se deben
epidemiolgica, en vista
transportar preferiblemente a
Utilice recipiente estril de boca ancha con tapa de que estos agentes la
temperatura entre 4 y
hermtica a prueba de derrames, que no mayor parte de las
25C), siguiendo las
contengan desinfectantes ni residuos de veces se presentan en
medidas de bioseguridad
detergentes. brotes.
recomendadas (Anexo 4).
No se debe emplear papel absorbente o La investigacin
Cada muestra se debe
muestras de heces de paales, porque pueden epidemiolgica dentro
acompaar preferiblemente
contener residuos de desinfectantes u otros de las 48 horas
con la boleta de Solicitud de
contaminantes posteriores a la
Confirmacin Diagnstica /
notificacin, con el fin
Inicie el procesamiento a la mayor brevedad Tipificacin por Centro de
de determinar si se
posible, de lo contrario mantenga a 4C, NO Referencia de INCIENSA
trata de un brote e
CONGELE (disponible en la pgina web
identificar la fuente
de INCIENSA).
probable de infeccin.
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr Biologa Molecular Bacteriologa e-mae-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
16

Evento bajo vigilancia Muestra para anlisis en Muestra para referir al Exmenes que Observaciones
segn CIE-101 laboratorio clnico CNRB realiza el
(diagnstico) (confirmacin / tipificacin) INCIENSA
A02 Otras infecciones La muestra a analizar depender del Bacteria con caractersticas Confirmacin / Ninguno de estos
debidas a Salmonella, foco de infeccin (sangre recolectada bioqumicas propias del tipificacin hasta cuadros clnicos
incluye: en pico febril para hemocultivo, orina, gnero Salmonella sp. en serovariedad producidos por
lquido articular, lquido cultivo puro y fresco, inoculada Vigilancia de la Salmonella estn
A02.1 Septicemia debida a cefalorraqudeo, material de absceso, preferiblemente en agar incluidos en el decreto de
resistencia a los
Salmonella etc.). tripticasa soya, agar nutritivo, Enfermedades de
antimicrobianos
A02.2 Infecciones agar semislido o en algn por Kirby Bauer notificacin obligatoria,
localizadas debidas a medio de transporte (ejemplo en agar Mueller por lo que no se debe
Salmonella (artritis, Cary Blair). Hinton llenar la boleta VE-01.
Sin embargo, s son
enfermedad renal Las cepas se deben
tubulointersticial, meningitis, objeto de la vigilancia
transportar preferiblemente a
neumona, osteomelitis) basada en laboratorio,
temperatura entre 4 y 25C),
por lo que los
siguiendo las medidas de
A02.8 Otras infecciones aislamientos deben ser
bioseguridad recomendadas
especificadas como debidas referidos al CNRB para
(Anexo 4).
a Salmonella su correspondiente
Cada muestra se debe serotipificacin y
(no incluidas en A02.2)
acompaar preferiblemente vigilancia de la
A02.9 Infeccin debida a con la boleta de Solicitud de resistencia a los
Salmonella, no especificada Confirmacin Diagnstica / antibiticos.
(o sea, las infecciones por Tipificacin por Centro de
Salmonella spp.) Referencia de INCIENSA
(disponible en la pgina web
de INCIENSA).
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr Biologa Molecular Bacteriologa e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
17

Agentes o evento bajo Muestra para anlisis en Muestra para referir al CNRB Exmenes que Observaciones
vigilancia1 laboratorio clnico (confirmacin / tipificacin) realiza el
(diagnstico) INCIENSA
A03 Shigelosis, incluye: Heces diarreicas para coprocultivo, Bacteria con caractersticas Confirmacin / Agentes de notificacin
recolectadas en la etapa aguda de la bioqumicas propias del gnero tipificacin hasta obligatoria en boleta
A.03.0 Shigelosis debida a enfermedad (en los primeros das de Shigella sp. en cultivo puro y serotipo VE-01 (Anexo 3).
Shigella dysenteriae iniciada la sintomatologa y previo a la fresco, inoculada preferiblemente Vigilancia de la En vista de que estas
A.03.1 Shigelosis debida a administracin de antimicrobianos). en agar tripticasa soya, agar resistencia a los bacterias la mayor parte
S. flexneri Lo ideal es obtener una muestra fecal nutritivo, agar semislido o en antimicrobianos de las veces se
fresca, en lugar de un hisopado rectal, algn medio de transporte por Kirby Bauer presentan en brotes, es
A.03.2 Shigelosis debida a (ejemplo Cary Blair). importante realizar la
pero si no es posible, se puede enviar en agar Mueller
S. boydii investigacin
un hisopo fecal colocado en medio de Las cepas se deben transportar Hinton
A.03.3 Shigelosis debida a transporte Cary Blair a temperatura preferiblemente a temperatura epidemiolgica dentro
S. sonnei ambiente; teniendo presente que esta entre 4 y 25C, siguiendo las de las 48 horas
muestra limita la bsqueda de otros medidas de bioseguridad posteriores a la
A.03.8 Otras shigelosis notificacin, con el fin
patgenos. recomendadas (Anexo 4).
A.03.9 Shigelosis de tipo no de determinar si se trata
Utilice recipiente estril de boca Cada muestra se debe
especificado (incluye las de un brote e identificar
ancha con tapa hermtica a prueba acompaar preferiblemente con
infecciones por Shigella la fuente probable de
de derrames, que no contengan la boleta de Solicitud de
spp.) infeccin.
desinfectantes ni residuos de Confirmacin Diagnstica /
Tipificacin por Centro de Shigella tambin puede
detergentes. No se debe emplear producir otros cuadros
papel absorbente o muestras de Referencia de INCIENSA
(disponible en pgina web de como infeccin urinaria,
heces de paales, porque pueden meningitis
contener residuos de desinfectantes u INCIENSA).
otros contaminantes.
Inicie el procesamiento a la mayor
brevedad posible, de lo contrario
mantenga a 4C, NO CONGELE.
Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora, Dra. Antonieta Jimnez,
Laboratorio de Enteropatgenos Centro Nacionalde Referencia de Bacteriologa Responsable,
e-mail: hbolanos@inciensa.sa.cr e-mail: ecampos@inciensa.sa.cr Laboratorio de Antimicrobianos
Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126 e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126
18

Agente o evento Muestra para anlisis en Muestra para referir al Exmenes que Observaciones
bajo vigilancia1 laboratorio clnico CNRB realiza el INCIENSA
(diagnstico) (confirmacin / tipificacin)
A00 Clera, incluye: Heces diarreicas para coprocultivo, Bacteria con caractersticas Diagnstico rpido Vibrio cholerae O1 y
recolectadas en la etapa aguda de la bioqumicas propias del gnero utilizando el Cholera O139 son agentes
A00.0 Clera debido a enfermedad (en los primeros das de Vibrio sp. en cultivo puro y de notificacin
SMART
Vibrio cholerae O1, iniciada la sintomatologa y previo a la fresco, inoculada obligatoria inmediata
biotipo clsico Confirmacin /
administracin de antimicrobianos) preferiblemente en agar tipificacin hasta en boleta VE-01
A00.1 Clera debido a tripticasa soya, agar nutritivo, (Anexo 3), ya que se
Lo ideal es obtener una muestra fecal serotipo
Vibrio cholerae O1, agar semislido o en algn trata de agentes de
fresca, en lugar de un hisopado rectal, Determinacin del
biotipo El Tor medio de transporte (ejemplo estricta vigilancia
pero si no es posible, se puede enviar gen de la toxina
A00.9 Clera no un hisopo fecal colocado en medio de Cary Blair). nacional e
colrica (ctxA) internacional.
especificado transporte Cary Blair a temperatura Las cepas se deben transportar
ambiente; teniendo presente que esta preferiblemente a temperatura Vigilancia de la La investigacin
muestra limita la bsqueda de entre 4 y 25C, siguiendo las resistencia a los epidemiolgica se
patgenos. medidas de bioseguridad antimicrobianos por debe realizar dentro
recomendadas (Anexo 4). Kirby Bauer en agar de las 48 horas
Utilice recipiente estril de boca ancha Mueller Hinton posteriores a la
con tapa hermtica a prueba de Cada muestra se debe
acompaar preferiblemente con notificacin, con el
derrames, que no contengan fin de determinar si
desinfectantes ni residuos de la boleta de Solicitud de
Confirmacin Diagnstica / se trata de un brote e
detergentes. No se debe emplear identificar la fuente
papel absorbente o muestras de heces Tipificacin por Centro de
Referencia de INCIENSA probable de
de paales, porque pueden contener infeccin.
residuos de desinfectantes u otros (disponible en pgina web de
contaminantes INCIENSA).
Inicie el procesamiento a la mayor
brevedad posible, de lo contrario
mantenga a 4C, NO CONGELE
Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora, Dra. Antonieta Jimnez,
Laboratorio de Enteropatgenos Centro Nacionalde Referencia de Bacteriologa Responsable,
e-mail: hbolanos@inciensa.sa.cr e-mail: ecampos@inciensa.sa.cr Laboratorio de Antimicrobianos
Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126 e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126
19
Agente o evento bajo Muestra para anlisis en laboratorio Muestra para referir al Exmenes que realiza el Observaciones
vigilancia1 clnico CNRB INCIENSA
A.04. Escherichia coli Heces diarreicas para coprocultivo, Heces diarreicas para Confirmacin / La referencia de este
O157:H7, incluye recolectadas en la etapa aguda de la coprocultivo, recolectadas en tipificacin hasta agente al INCIENSA se
enfermedad (en los primeros das de la etapa aguda de la serogrupo justifica bajo las
iniciada la sintomatologa y previo a la enfermedad (en los primeros siguientes condiciones:
A.04.3 Infeccin debida administracin de antimicrobianos). das de iniciada la Determinacin de los
a Escherichia coli genes de las Caso de diarrea
Lo ideal es obtener una muestra fecal sintomatologa y previo a la sanguinolenta en el
enterohemorrgica administracin de verotoxinas (stx1 y stx2)
fresca, en lugar de un hisopado rectal, pero de E. coli que el laboratorio
si no es posible, se puede enviar un antimicrobianos). Enviar las detecta Escherichia
muestras antes de 24 horas enterohemorrgica
hisopo fecal colocado en medio de coli como nico
transporte Cary Blair a temperatura despus de recolectadas, a 4- Determinacin del gen patgeno
ambiente; teniendo presente que esta 8C (NO CONGELE). h7 de E. coli Paciente con
muestra limita la bsqueda de patgenos. Tambin se puede enviar la enterohemorrgica sndrome urmico
placa de agar sangre o agar
Utilice recipiente estril de boca ancha con Determinacin del gen hemoltico en el que
Mc Conkey lactosa y/o Mc se cultiv E. coli como
tapa hermtica a prueba de derrames, que hlyA de E. coli
Conkey sorbitol, nico patgeno
no contengan desinfectantes ni residuos de enterohemorrgica
correspondiente al cultivo
detergentes. No se debe emplear papel original (el rayado con las Determinacin del gen Cepa asociada a
absorbente o muestras de heces de heces diarreicas), mantenidas diarrea identificada por
eae de E. coli
paales, porque pueden contener residuos a 4-8C (NO CONGELE). los equipos
enterohemorrgica
de desinfectantes u otros contaminantes automatizados como
Diez colonias sugestivas de
Inicie el procesamiento a la mayor Determinacin del gen probable E. coli
Escherichia coli obtenidas del
rfbO157 de Escherichia O157:H7
brevedad posible, de lo contrario mantenga aislamiento primario de un coli O157 Cepa aislada de un
a 4C, NO CONGELE caso sospechoso.
Vigilancia de la alimento
En el caso de este agente se
deben extremas las medidas resistencia a los
de bioseguridad antimicrobianos por
recomendadas (Anexo 4). Kirby Bauer en agar
Mueller Hinton
20

Agente o evento bajo Muestra para anlisis en Muestra para referir al Exmenes que realiza Observaciones
vigilancia1 laboratorio clnico CNRB el INCIENSA
Continuacin de: Cada muestra se debe E. coli O157:H7 no
acompaar preferiblemente aparece incluida en el
A.04.3 Infeccin debida a con la boleta de Solicitud de Decreto de Notificacin
Escherichia coli Confirmacin Diagnstica / Obligatoria; sin embargo,
enterohemorrgica Tipificacin por Centro de por el riesgo que
Referencia de INCIENSA representa, una vez
(disponible en pgina web de confirmada, se debe dar
INCIENSA). aviso urgente a la
comisin local de
vigilancia, al CNRB y al
Ministerio de Salud.
En vista de que en otros
pases E. coli O157:H7
con frecuencia se
presentan en brotes, es
importante realizar la
investigacin
epidemiolgica dentro de
las 48 horas posteriores a
la notificacin, con el fin
de determinar si se trata
de un brote e identificar la
fuente probable de
infeccin.
Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Responsable, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,
Laboratorio de Alimentos Biologa Molecular Laboratorio de Antimicrobianos
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr e-mail: fduarte@inciensa.sa.cr e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126 Telfono: (506) 2279 99 11, ext. 126
21
El CNRB tambin apoya a los laboratorios de la red en la confirmacin de otros enteropatgenos

causantes de infecciones intestinales, que a pesar de no ser sujeto de notificacin obligatoria, tienen
importancia en salud pblica y se encuentran asociados a casos y defunciones por enfermedad
diarreica en nuestro pas. Entre ellas:
A04.0 Infeccin debida a Escherichia coli enteropatgena (EPEC)
A04.1 Infeccin debida a Escherichia coli enterotoxignica (ETEC)
A04.2 Infeccin debida a Escherichia coli enteroinvasiva (EIEC)
A04.3 Infeccin debida a Escherichia coli enterohemorrgica (EHEC)
A04.4 Otras infecciones intestinales debidas a Escherichia coli (enteritis debida a Escheridha coli)
A04.6 Enteritis debida a Yersinia enterocolitica (excluye yersiniosis extraintestinal A28.2)
A04.5 Enteritis debida a Campylobacter
A04.8 Otras infecciones intestinales bacterianas especificadas (por ejemplo: infecciones por
especies de Aeromonas, Plesiomonas shigelloides y otras especies de Vibrio diferentes al V.
cholerae (como V. mimicus, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. vulnificus, entre otros)
22
c. Listeria monocytogenes
Importancia de esta vigilancia: La infeccin causada por la bacteria Listeria monocytogenes,

llamada listeriosis, haba sido hasta hace pocos aos una enfermedad poco comn. Sin embargo, a
partir de los 80, la enfermedad empez a manifestarse como una enfermedad de transmisin
alimentaria emergente. La listeriosis se puede presentar como casos aislados o en brotes asociados
al consumo de alimentos contaminados, entre ellos: productos listos para consumir, vegetales crudos,
leche, quesos frescos, pats y productos crnicos crudos o insuficientemente cocidos, como por
ejemplo salchichas. Estos alimentos rara vez son recalentados antes de ser consumidos, y si lo son,
no se llega a las temperaturas ideales para la eliminacin de las bacterias, por lo que son un peligro
potencial si estn contaminados por Listeria monocytogenes.
L. monocytogenes muestra resistencia a condiciones ambientales adversas tales como el pH bajo, las
concentraciones elevadas de NaCl y las temperaturas muy bajas, pudiendo llegar a crecer a 4 8 C,
lo que incrementa las posibilidades de infeccin, an cuando los alimentos se conserven en
refrigeracin.
La listeriosis, es una enfermedad de baja incidencia a nivel poblacional (4-8 casos por milln de
habitantes) pero con tasas de letalidad importantes (de un 25 - 30%), principalmente en mujeres
embarazadas, pacientes inmunosuprimidos (enfermos de SIDA, trasplantados, uso de
corticoesteroides, etc.), ancianos, fetos (ya que L. monocytogenes tiene la habilidad de atravesar la
placenta e infectar el producto) y nios menores de un ao. En mujeres embarazadas se manifiesta
como un cuadro pseudogripal (fiebre moderada acompaada o no de sntomas de ligera
gastroenteritis), de evolucin favorable. Es muy poco frecuente el desenlace fatal en la madre, pero
si no se instaura el tratamiento adecuado puede producir la infeccin del feto, causando aborto,
alumbramiento de un nio muerto o parto prematuro de un neonato que manifieste una infeccin
septicmica general que afecta a varios rganos y con formacin de lesiones granulomatosas
(granulomatosis infantisptica). En los adultos, sobre todo ancianos o inmunocomprometidos, L.
monocytogenes puede producir septicemia, meningitis y encefalitis. Un pequeo porcentaje de los
infectados presenta lesiones focales, que incluyen endoftalmitis, artritis sptica, osteomielitis,
pericarditis y endocarditis, sin septicemia manifiesta.
El tratamiento con antibiticos en mujeres embarazadas o personas inmunocomprometidas que han
ingerido alimentos contaminados por L. monocytogenes puede prevenir las consecuencias ms serias
de la listeriosis, pero slo si la infeccin es diagnosticada a tiempo. Estos grupos de riesgo deben
tomar precauciones para evitar la infeccin, tales como evitar el consumo de quesos blandos y de
leche no pasteurizada, as como evitar comidas que no son calentadas antes del consumo.
23
Confirmacin / serotipificacin de Listeria monocytogenes:
Evento bajo vigilancia segn Muestra para anlisis Muestra para referir al Exmenes que realiza Observaciones
CIE-101 en laboratorio clnico CNRB el INCIENSA
A32 Listeriosis, incluye Depende del foco de Bacteria con caractersticas Confirmacin y Ninguno de estos
infeccin: lquido bioqumicas propias del gnero tipificacin del agente cuadros clnicos
infeccin alimentaria debida a
cefalorraqudeo, sangre Listeria sp. en cultivo puro y hasta serotipo producidos por Listeria
Listeria: para hemocultivo, etc. monocytogenes estn
fresco, inoculada
A32.0 Listeriosis cutnea preferiblemente en agar incluidos en el decreto
tripticasa soya, agar nutritivo, de Enfermedades de
A32.1 Meningitis y notificacin obligatoria,
meningoencefalitis listeriana agar semislido o en algn
medio de transporte (ejemplo por lo que no se debe
A32.7 Septicemia listeriana Cary Blair). llenar la boleta VE-01.
Sin embargo, estos
A32.8 Otras formas de listeriosis Las cepas se deben transportar
agentes s son objeto
(arteritis cerebral, endocarditis, preferiblemente a temperatura
de la vigilancia basada
listeriosis oculoglandular) entre 4 y 25C, siguiendo las
en laboratorio, por lo
medidas de bioseguridad
A32.9 Listeriosis no especificada que los aislamientos
recomendadas (Anexo 4).
deben ser referidos al
Cada muestra se debe CNRB para su
P37.2 Listeriosis congnita acompaar preferiblemente correspondiente
diseminada con la boleta de Solicitud de serotipificacin y
Confirmacin Diagnstica / vigilancia de la
Tipificacin por Centro de resistencia a los
Referencia de INCIENSA antibiticos.
(disponible en pgina web de
INCIENSA).
Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Laboratorio de Alimentos

Telfono: 2279 99 11, exT 126
e-mail: macuna@inciensa.sa.cr
24
d. Brucelosis humana
Importancia de esta vigilancia: La brucelosis, fiebre de Malta o fiebre del Mediterrneo es una
enfermedad bacteriana zoontica causada por diferentes especies del gnero Brucella (B. melitensis,
B. abortous, B. suis y B. canis). El cuadro clnico es generalizado, de comienzo agudo o insidioso,
caracterizado por fiebre continua, intermitente o irregular, de duracin variable, cefalea, debilidad,
sudoracin profusa, escalofros, artralgias, depresin, prdida de peso y malestar general.
Ocasionalmente surgen infecciones supurativas localizadas en rganos, como el hgado y el bazo.
Tambin se han documentado cuadros sub-clnicos e infecciones crnicas localizadas.
El reservorio de la infeccin humana lo constituye principalmente el ganado vacuno, porcino, caprino

y ovino, aunque tambin se han dado casos por el contacto con perros.
El riesgo de contraer esta zoonosis es principalmente ocupacional, siendo los peones de ganadera,
granjeros, veterinarios y los trabajadores de mataderos los ms expuestos. En este caso la
transmisin se da a travs del contacto directo con materiales infectados con sangre o secreciones
animales. Tambin es posible la transmisin indirecta de la enfermedad, a travs de la ingestin de
leche o productos lcteos no pasteurizados.
Las fiebres de origen desconocido constituyen una causa importante de morbilidad en el pas.
Actualmente la RNLB realiza la prueba de screening (antgenos febriles), la cual tiene baja
sensibilidad y especificidad. Por lo anterior, el CNRB apoya a los servicios de salud del pas en el
diagnstico y la vigilancia de esta enfermedad, utilizando tcnicas serolgicas ms confiables como
son las tcnicas serolgicas de aglutinacin de Rosa Bengala en lmina (RBT) (Daz 1989) y la
aglutinacin en microplaca (SAT, Serum Agglutination Test)(Alton, 1988) para determinar los ttulos
de anticuerpos (IgM e IgG).
En el caso de la serologa para diagnstico de la brucelosis humana, un resultado positivo puede
indicar:
Infeccin activa
Anticuerpos que persisten despus de la recuperacin
Contacto accidental con el germen, no necesariamente seguido de enfermedad
Exposicin a un microorganismo que presente reaccin cruzada con Brucella sp.
En vista de lo anterior, los resultados serolgicos se deben analizar en muestras pareadas y en

conjunto con los datos clnicos y epidemiolgicos.
Se recomienda que toda muestra que presente un resultado positivo para Brucella por prueba de
antgenos febriles sea referida al CNRB para su confirmacin.
25
Apoyo del CNRB al diagnostico de la brucelosis
Evento bajo vigilancia Muestra para anlisis Muestra para referir al Exmenes que realiza Observaciones
segn CIE-101 en laboratorio clnico CNRB el INCIENSA
(diagnstico) (confirmacin /
tipificacin)
A23 Brucelosis, incluye: Sangre sin anticoagulante Sueros pareados (para Diagnstico serolgico de la Enfermedad de notificacin
recolectada en pico febril demostrar brucelosis: obligatoria en boleta VE-01
A23.1 Brucelosis debida a para estudio serolgico seroconversin), (Anexo 3).
Aglutinacin de Rosa
B. abortus siguiendo las medidas de La investigacin epidemiolgica
de Bengala en lmina
A23.9 Brucelosis no bioseguridad (RBT) se debe realizar dentro de las
recomendadas (Anexo 4). 48 horas posteriores a la
especificada Micro-aglutinacin en
Los sueros se deben placa (SAT) notificacin, con el fin de
acompaar por la boleta determinar la fuente probable
Solicitud de Diagnstico de infeccin.
por Centro Nacional de
Referencia de INCIENSA
(disponible en pgina web
de INCIENSA).
Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

Laboratorio de Bacteriologa Especial CNR-Bacteriologa
e-mail: gchanto@inciensa.sa.cr e-mail: ecampos@inciensa.sa.cr
Telfono: 2279 99 11, ext. 126 Telfono: 2279 99 11, ext. 126
26
1. Bacterias responsables de neumona, meningitis y otras infecciones invasivas,

incluyendo:
Streptococcus pneumoniae
Haemophilus influenzae
Neisseria meningitidis
Importancia de esta vigilancia: Segn la Organizacin Mundial de la (OMS), ms de 1.6 millones

de personas mueren cada ao de neumona o meningitis, de las cuales, un milln son nios menores
de cinco aos. Un estudio realizado por la OMS muestra que, entre 2000 y 2003, 73% de 10.6
millones de muertes anuales entre los nios menores de cinco aos son debidas a seis causas
principales: la neumona (19%), diarrea (18%), sepsis o neumona neonatal (10%), partos prematuros
(10%), malaria (8%) y asfixia al nacimiento (8%).
En Amrica Latina y el Caribe anualmente mueren ms de 80.000 nios menores de cinco aos a
causa de infecciones respiratorias bajas, de ellas, un 85% son debidas a neumona e influenza. Esta
mortalidad llega a representar para algunos pases de la Regin ms del 20% de las defunciones en
este grupo de edad.
Antes de la introduccin de las nuevas vacunas conjugadas, los cuadros de neumona ms graves se
asociaban con causas bacterianas, con predominio de Streptococcus pneumoniae, seguido por
Haemophilus influenzae. En el caso de las meningitis, el 95% de los casos en nios menores de dos
aos era causado por H. influenzae tipo b (principalmente en los menores de 3 a 15 meses);
Neisseria meningitidis (en menores de seis meses) y S. pneumoniae en nios mayores de dos
meses. Sin embargo, con la aparicin de nuevas vacunas conjugadas contra S. pneumoniae y H.
influenzae tipo b, el rol de N. meningitidis ha tomado mayor relevancia en los procesos invasores en
estos ltimos aos.
A la alta morbi-mortalidad asociada a estos agentes, se suma la emergencia de nuevos patrones de
resistencia a los antibiticos de primera eleccin, dificultando cada da ms el tratamiento de las
neumonas y meningitis, principalmente las causadas por S. pneumoniae.
En este contexto y considerando que la reduccin de la mortalidad infantil corresponde a uno de los
Objetivos de Desarrollo del Milenio, la vigilancia y el control de las neumonas y meningitis
bacterianas debera convertirse en un compromiso urgente de los pases para cumplir con las metas
propuestas.
El objetivo fundamental de esta vigilancia de laboratorio es generar la informacin necesaria que
apoye a las autoridades de salud:
27
En la valoracin y toma de decisiones para la introduccin de nuevas vacunas en los

esquemas nacionales o modificacin de las mismas
En la elaboracin de normativas relacionadas con el uso de antimicrobianos para el
tratamiento y/o profilaxis de estas infecciones.
Vigilancia de laboratorio: Entre los laboratorios que conforman la RNLB, los de hospitales son los
que en general realizan el diagnstico rutinario (aislamiento e identificacin) de las neumonas,
meningitis y otras infecciones bacterianas causadas por S. pneumoniae, H. influenzae y N.
meningitidis. Sin embargo, por la importancia de estos agentes, adems se han designado los
hospitales San Vicente de Pal, Nacional de Nios, Max Peralta y Blanco Cervantes, como sitios
centinela para la vigilancia integral de estas infecciones. En estos sitios centinela se debe seguir el
protocolo establecido para tal propsito.
El CNRB coordina a nivel nacional la vigilancia de laboratorio de estos agentes, realiza la
confirmacin, tipificacin, vigilancia de la resistencia a los antibiticos y funciona como laboratorio
diagnstico en caso de brotes. A la vez es el punto focal de pas para coordinar la vigilancia de estas
enfermedades a nivel internacional, dentro del Programa Regional de Vigilancia de Enfermedades
Producidas por Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae y Neisseria meningitidis
(SIREVA II).
Confirmacin y tipificacin de S. pneumoniae, H. influenzae y N. meningitidis: Todos los

laboratorios clnicos, incluyendo los designados como sitio centinela, deben referir al CNRB los
aislamientos de estos agentes, acompaado por la boleta Solicitud de Confirmacin Diagnstica por
Centro de Referencia de INCIENSA (disponible en la pgina web del INCIENSA), cuya informacin
clnico-epidemiolgica es indispensable para la interpretacin de resultados.
28
Confirmacin / serotipificacin de bacterias causantes de neumonas, meningitis y otras infecciones invasivas
Evento bajo vigilancia segn Muestra para Muestra para referir al Exmenes que Observaciones
CIE-101 anlisis en CNRB realiza el INCIENSA
laboratorio clnico (confirmacin /
(diagnstico) tipificacin)
A39 Infeccin Depende del foco de Cultivo puro y fresco en Confirmacin / Las meningitis
meningocccica, incluye: infeccin: lquido agar sangre o agar tipificacin hasta bacterianas son
cefalorraqudeo, chocolate, siguiendo las serogrupo enfermedades de
A39.0 Meningitis meningocccica sangre para medidas de bioseguridad notificacin obligatoria
Vigilancia de la
A39.1 Sndrome de Waterhouse- hemocultivo, lquido recomendadas (Anexo 4). resistencia a los en boleta individual VE-
Friderichsen articular, etc. Cada cultivo se debe antimicrobianos 01 (Anexo 3).
acompaar de la boleta de (CIM por En vista de que se
A39.2 Meningococcemia aguda
Solicitud de Confirmacin microdilucin o E- pueden presentar
A39.3 Meningococcemia crnica Diagnstica / Tipificacin test en sangre de brotes de esta
por Centro de Referencia de carnero) enfermedad, la
A39.4 Meningococcemia, no
INCIENSA (disponible en la investigacin
especificada Determinacin de
pgina web de INCIENSA). epidemiolgica se debe
-lactamasa
A39.5 Enfermedad cardaca debida realizar dentro de las 48
a meningococo (carditis, horas posteriores a la
endocarditis, miocarditis, notificacin, con el fin
pericarditis) de implementar las
medidas de prevencin
A39.8 Otras infecciones y control
meningocccicas (artritis pos- correspondientes.
meningocccica, artritis,
conjunctivitis, encefalitis, neuritis
retrobulbar)
A39.2 Infeccin meningocccica no
especificada
Contacto en el CNR-Bacteriologa
Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Laboratorio de Bacteriologa Especial Laboratorio de Antimicrobianos
e-mail: gchanto@inciensa.sa.cr e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
29
Confirmacin / serotipificacin de bacterias causantes de neumonas, meningitis y otras infecciones invasivas
Evento bajo vigilancia segn Muestra para anlisis en Muestra para referir al Exmenes que Observaciones
CIE-101 laboratorio clnico CNRB realiza el
(diagnstico) (confirmacin / INCIENSA
tipificacin)
A40.3 Septicemia debida a Depende del foco de Cultivo puro y fresco en Confirmacin / Las neumonas y
infeccin, para los agar sangre, siguiendo las tipificacin hasta meningitis
Streptococcus pneumoniae
aislamientos invasivos: medidas de bioseguridad serotipo bacterianas son
(septicemia neumocccica)
lquido cefalorraqudeo, recomendadas (Anexo 4). Vigilancia de la enfermedades de
J13 Neumona debida a sangre para hemocultivo, Cada cultivo se debe resistencia a los notificacin obligatoria
Streptococcus pneumoniae lquido pleural, lquido antimicrobianos en boleta individual
acompaar
articular, etc. (CIM por VE-01 (Anexo 3).
preferiblemente de la
boleta de Solicitud de microdilucin / E- La investigacin
Confirmacin Diagnstica / test y difusin en epidemiolgica se
Aislamientos no
Tipificacin por Centro de agar Mueller debe realizar dentro
invasivos: entre ellos se
Referencia de INCIENSA Hinton-sangre de las 48 horas
encuentran: esputo,
(disponible en la pgina carnero) posteriores a la
aspirados (endotraqueal,
web de INCIENSA). notificacin, con el de
A41.3 Septicemia debida a
nasofarngeo, farngeo, Confirmacin / implementar las
nasal), secreciones (ojo, tipificacin hasta
Haemophilus influenzae medidas de
odo, piel, heridas), serotipo prevencin y control
A49.2 Infeccin por abscesos, entre otros
Vigilancia de la correspondientes.
Haemophilus influenzae, sin otra resistencia a los
especificacin antimicrobianos
(CIM por
J14 Neumona debida a
microdilucin o
Haemophilus influenzae difusin en medio
HTM)
Determinacin de
-lactamasa
Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Laboratorio de Bacteriologa Especial Laboratorio de Antimicrobianos
e-mail: gchanto@inciensa.sa.cr e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
30
2. Agentes causantes de tos ferina
Importancia de esta vigilancia: La tos ferina es una enfermedad infecciosa causada por la bacteria
Bordetella pertussis. La vacuna contra esta enfermedad est disponible desde los aos veinte y se
incorpor en la rutina de los programas de inmunizacin infantil de muchos pases desde mediados de
1940. Aunque tericamente se podra considerar que esta es una enfermedad eliminable pues el
hombre es el nico reservorio y existe una vacuna disponible, la inmunidad que resulta, tanto de la
infeccin natural como de la inmunizacin, se pierde con los aos. Por lo anterior, la vacunacin en la
infancia provoc un desplazamiento de la enfermedad hacia los neonatos y lactantes que no han
completado el esquema de inmunizacin y hacia los adolescentes y adultos que han perdido la
inmunidad.
Debido a la reactogenicidad de la vacuna elaborada con clulas enteras, no se recomienda su
administracin en los adolescentes ni en adultos. A partir del 2005 se aprob una vacuna combinada
(Tdap), que puede aplicarse en individuos de 11 a 64 aos de edad, ofreciendo una alternativa de
inmunizacin a estos grupos en la poblacin. La administracin de esta vacuna en adolescentes y
adultos tiene el propsito de reducir el nmero de portadores y la exposicin de grupos de alto riesgo,
como neonatos y lactantes pequeos, as como evitar la diseminacin de la enfermedad entre el
personal y los servicios de salud.
En Costa Rica desde 1950 se introdujo la vacuna triple bacteriana (difteria- tos ferinattanos), en un
esquema de tres dosis (2, 4 y 6 meses). A partir de 1974, incorpor dos dosis adicionales, aplicadas a
los 15 meses y 4 aos de edad. A partir de la introduccin de la vacuna, ocurri un descenso marcado
en el nmero de casos, reduccin que se aceler con la incorporacin de los refuerzos en 1974. En el
2006 se detecta en el pas un incremento de casos de tos ferina, superior al observado en los aos
anteriores. Debido a la magnitud del brote, gravedad de los casos y elevada letalidad en los lactantes
menores de 6 meses, las autoridades del pas decidieron implementar una estrategia de vacunacin de
mujeres durante el post parto como una medida de prevencin y control.
Esta decisin se sustent en los mecanismos de transmisin de la enfermedad y la reconocida eficacia
y seguridad de la vacuna acelular contra B. pertussis que elevara, en un corto plazo, la inmunidad
materna en el post parto inmediato, reduciendo el rol de las madres como portadoras y brindando una
mayor proteccin al lactante a travs de la leche materna. La alta cobertura de parto institucional en
Costa Rica garantizara el xito de dicha intervencin. En vista de lo anterior, el objetivo fundamental de
esta vigilancia de laboratorio es generar la informacin necesaria para conocer el comportamiento y
tendencias de esta enfermedad y que apoye a las autoridades de salud en la valoracin y toma de
decisiones para la introduccin de nuevas vacunas en los esquemas nacionales o modificacin de las
mismas.
31
Diagnstico de tos ferina

Evento bajo vigilancia1 Muestra para referir al Exmenes que realiza el Observaciones
CNRB INCIENSA
(diagnstico)
A37 Tos ferina Aspirado nasofarngeo (ver Diagnstico de la tos ferina: Enfermedad de notificacin obligatoria
especificaciones para su Reaccin en cadena de en boleta individual VE-01 (Anexo 3).
A.37.0 Tos ferina debida a recoleccin en el Anexo 7). En La investigacin epidemiolgica se
la polimerasa (PCR)
Bordetella pertussis caso de muestras post-mortem debe realizar dentro de las 48 horas
para diagnstico de
A.37.1 Tos ferina debida a se prefiere el aspirado traqueal Bordetella pertussis y B. posteriores a la notificacin, con el fin
Bordetella parapertussis y la biopsia de pulmn en parapertussis de determinar si hay casos
solucin salina estril (NO relacionados que requieren de
A.37.2 Tos ferina debida a otras FIJAR NI TEIR). Inmunofluorescencia
directa para diagnstico tratamiento antimicrobiano, as como
especies de Bordetella Las muestras se deben el estado de vacunacin de los
de Bordetella pertussis y
A.37.9 Tos ferina, no recolectar, conservar y B. parapertussis contactos ms cercanos.
especificada transportar a 4-8C, en un Cuando se trata de casos en nios
perodo no mayor de 24 horas Cultivo e identificacin
de Bordetella pertussis y menores de 6 meses de edad, es
luego de su recoleccin necesario investigar si la madre
siguiendo las medidas de B. parapertussis
recibi la vacuna Tdap durante el
bioseguridad recomendadas post-parto.
(Anexo 4).
Cada muestra se debe enviar
acompaada por la boleta
Solicitud de Diagnstico por
Centro Nacional de Referencia
de INCIENSA (disponible en la
pgina web de INCIENSA).
Dra. Grettel Chanto, Responsable,

Laboratorio de Bacteriologa Especial
e-mail: gchanto@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126
32
3. Resistencia a los antimicrobianos en grmenes comunitarios y nosocomiales
Importancia de esta vigilancia: La resistencia a los antibiticos constituye uno de los principales
problemas de salud pblica a nivel mundial, agravado por el incremento en el uso indiscriminado de
los mismos en los ltimos 50 aos y con un impacto significativo, tanto a nivel econmico como
poblacional.
La resistencia a los antibiticos involucra cada da nuevas especies bacterianas y nuevos
mecanismos de resistencia y el problema se intensifica con la capacidad que tienen los
microorganismos de transmitir la resistencia no slo a su descendencia, sino tambin a otras
bacterias de la misma o de diferente especie.
Es importante sealar que el uso de antibiticos en clnica humana y veterinaria, as como en la
agricultura contribuye a la seleccin de bacterias resistentes, que se diseminan en los hospitales y la
comunidad. Esto hace que los frmacos elegibles para el tratamiento de infecciones comunes sean
cada vez ms limitados y caros o, en algunos casos, inexistentes.
Aunque no es factible eliminar la resistencia a los antibiticos, s es posible convertir esta amenaza
creciente en un problema manejable, mediante el diseo de estrategias integrales que incluyan el
establecimiento de programas que fortalezcan la vigilancia de los problemas de resistencia ya
existente y los emergentes.
Por lo anterior, el CNRB y la Caja Costarricense de Seguro Social (CCSS), vienen realizando
esfuerzos para fortalecer la vigilancia epidemiolgica de la resistencia a los antibiticos, iniciativa que
forma parte de los compromisos del convenio CCSS-INCIENSA.
De esta forma desde 1997 el INCIENSA ha recopilado la informacin de resistencia a los antibiticos
para las enterobacterias: Salmonella, Shigella y Vibrio cholerae, agentes de reporte obligatorio en el
pas. A partir del 2000, esta vigilancia se ampli a otras bacterias importantes como causa de
infecciones en la comunidad (Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae, Staphylococcus aureus ) y en los hospitales (Enterococcus spp., Klebsiella pneumoniae,
Escherichia coli, Acinetobacter spp., Pseudomonas aeruginosa, S. aureus, Enterobacter spp., Proteus
mirabilis, Morganella morganni y Serratia marscescens).
Actualmente se trabaja en la reorganizacin de la vigilancia de la resistencia a los antibiticos en

grmenes nosocomiales en el marco del Convenio CSSS-INCIENSA, con el fin de disponer de
informacin representativa de la realidad nacional, que pueda ser de utilidad para la toma de
decisiones en la elaboracin de normas para el tratamiento emprico de las infecciones causadas por
33
estos agentes y la generacin de polticas pblicas en el campo de la salud humana, veterinaria y la

produccin alimentaria.
En el cuadro a continuacin se resumen algunos de los perfiles de resistencia a los antibiticos, de
importancia en salud pblica, cuya vigilancia ha sido recomendada por la Red Latinoamericana de
Vigilancia de la Resistencia a los Antibiticos (RELAVRA), de la cual el CNRB es el punto focal de
pas. El cuadro incluye adems algunas de las tcnicas disponibles en el CNRB para detectar y
confirmar estos mecanismos de resistencia, con el fin de dar apoyo a los laboratorios de la RNLB que
as lo requieran.
34
Evento bajo vigilancia Muestra a referir al CNRB Exmenes que realiza el Observaciones
INCIENSA
Resistencia a meticilina en Cultivo puro y fresco en agar Confirmacin del perfil de CA-MRSA ocasiona infecciones en piel
Staphylococcus aureus fenotipo nutritivo. resistencia a meticilina por el (furunculosis y abscesos); sin embargo,
comunidad (CA-MRSA) e mtodo de Kirby Bauer tambin puede causar infecciones necrticas
Cada muestra se debe acompaar
intrahospitalario (HA-MRSA) de tejido, que a veces resultan fatales y
de la boleta de Solicitud de Deteccin de la protena PBP2, neumona fulminante en hospederos sanos.
Confirmacin Diagnstica / que confiere la resistencia a
Tipificacin por Centro de meticilina en S. aureus, HA-MRSA ocasiona infecciones severas a
Referencia de INCIENSA utilizando la prueba rpida de nivel hospitalario, como por ejemplo
(disponible en la pgina web de aglutinacin Slidex-MRSA septicemias y endocarditis. Con frecuencia
INCIENSA). En la Seccin presentan multiresistencia, lo que conlleva a
Patgeno Referido se debe anotar falla de tratamiento.
el gnero y especie del agente
Sensibilidad disminuida y referido. Tambin se debe aportar Confirmacin de resistencia a Cepas de S. aureus con fenotipo vancomicina
resistencia a vancomicina en la informacin de la prueba de vancomicina mediante CIM por intermedio (VISA, hVISA) y vancomicina
Staphylococcus aureus sensibilidad a los antibiticos E-test resistente (VRSA) se consideran un problema
obtenida por el laboratorio. de salud pblica, ya que estn relacionadas
con falla de tratamiento a vancomicina. Por
esto cepas de S. aureus vancomicina
intermedio o resistente deben ser verificadas
y ser referidas al CNRB para su confirmacin.
Resistencia a vancomicina en Cepas de Enterococcus resistentes a

Enterococcus spp. vancomicina (VRE) podran causar
infecciones nosocomiales en pacientes
inmunosupresos, por lo tanto, es importante
desde el punto de vista epidemiolgico
mantener la vigilancia de este fenotipo.
Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Laboratorio de Antimicrobiano
e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, extensin 126
35
Evento bajo vigilancia Muestra a referir al CNRB Exmenes que realiza el INCIENSA Observaciones
Sensibilidad disminuida a Cultivo puro y fresco en agar Confirmacin de sensibilidad disminuida o La vigilancia de la resistencia a
cefalosporinas de tercera y nutritivo. resistencia a cefalosporinas de tercera y carbapenemes es importante ya
cuarta generacin y cuarta generacin y/o carbapenemes por Kirby que por ser antibiticos de amplio
Cada muestra se debe acompaar
carbapenemes en: Bauer expectro representan en algunos
de la boleta de Solicitud de
casos la ltima opcin de
Pseudomonas spp. Confirmacin Diagnstica / Determinacin fenotpica de -lactamasa de tratamiento.
Tipificacin por Centro de espectro extendido (BLEE) por mtodos de
Acinetobacter spp. Referencia de INCIENSA Adems, la determinacin de BLEE
difusin:
Enterobacterias (disponible en la pgina web de
o Sinergia entre cido clavulnico y
y carbapenemasas es determinante
INCIENSA). para la eleccin del tratamiento.
cefalosporinas
En la Seccin Patgeno Referido
se debe anotar el gnero y especie o Disminucin del halo de inhibicin para
del agente referido. Tambin se cefalosporinas en presencia de cido
debe aportar la informacin de la clavulnico.
prueba de sensibilidad a los Determinacin fenotpica de carbapenemasas
antibiticos obtenida por el por el mtodo microbiolgico Hodge
laboratorio.
Deteccin de metalo--lactamasa (MBL) por
medio de la inhibicin de la enzima en
presencia de EDTA, utilizando E-test doble
para la deteccin de MBL y discos con EDTA
Determinacin de la CIM de colistina por E-test
para Pseudomonas multirresistente
Resistencia a macrlidos, Deteccin de mecanismo MLSb por D-test Los macrlidos, lincosaminas y
lincosamidas y estreptograminas son opciones de
estreptograminas (MLSb) tratamiento en algunas infecciones
en Staphylococcus y por Staphylococcus o
Streptococcus Streptococcus.
Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Laboratorio de Antimicrobianos
e-mail: ajimenez@inciensa.sa.cr
Telfono: (506) 2279 99 11, ext 126
36
ANEXO 1
Servicios de diagnstico y confirmacin diagnstica

que ofrece el Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa
Coordinacin del CNRB
Responsable: Dra. Elena Campos (ecampos@inciensa.sa.cr)
Enteropatgenos
Responsable: Dra. Hilda Bolaos (hbolanos@inciensa.sa.cr)
I. Diagnstico de bacterias causantes de diarrea por cultivo y tinciones: se refiere al diagnstico de

enteropatgenos en muestras de heces de pacientes o la bsqueda de portadores asintomticos
asociados a brotes de diarrea o defunciones por esta causa. La bsqueda de los diferentes
enteropatgenos depender de las caractersticas de la muestra y de la informacin clnico-
epidemiolgica contenida en la Boleta Solicitud de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional de
Referencia de INCIENSA, previa coordinacin con la persona responsable en el CNRB. Puede incluir
diferentes anlisis:
1. Frotis. Incluye los siguientes anlisis:
Observacin al fresco (salina, lugol, gruesa) de la nuestra para determinar presencia de
leucocitos, eritrocitos, parsitos, morfologa y motilidad bacteriana
Tincin de Gram para observacin de morfologas bacteriana predominantes (haciendo
nfasis en aquellos semejantes a Campylobacter, Brachyspira y esporulados)
Diagnstico parasitolgico (incluyendo helmintos y protozoarios ms comunes y otros
como Cyclospora, Cryptosporidium y Microsporidium). Estos anlisis los realiza por
interconsulta el CNR-Parasitologa del INCIENSA
2. Coprocultivo. Incluye el aislamiento, identificacin y tipificacin de:

Salmonella (especie, sub-especie y serovariedad)
Shigella (serogrupo y serotipo)
Vibrio cholerae (biotipo, serogrupo, serotipo, incluyendo O1, no O1, O139)
Otros vibrios (como V. parahaemolyticus, V. mimicus, V. vulnificus, etc.)
Especies de Aeromonas
Plesiomonas shigelloides
Listeria monocytogenes
Yersinia enterocolitica
37
Especies de Campylobacter
Recuento de Clostridium perfringens
Bacillus cereus
Staphylococus aureus
Escherichia coli patgena, incluyendo E. coli enterotoxignica (ETEC), E. coli
enteropatgena (EPEC), E. coli enterohemorrgica (EHEC), E. coli enteroinvasiva (EIEC),
ver seccin Epidemiologa Molecular)
Identificacin serolgica de Escherichia coli enteropatgena EPEC (antgenos somticos
y capsulares)
Identificacin serolgica de Escherichia coli enterohemorrgica (EHEC), incluyendo E.
coli O157:H7 (deteccin de antgenos somticos y flagelares)
3. Diagnstico rpido de Vibrio cholerae O1 (Cholera SMART)
4. Deteccin de rotavirus (ELISA)
5. Deteccin de norovirus (ELISA)
6. Otras pruebas especiales

Cuantificacin de anticuerpos vibriocidas contra Vibrio cholerae O1. Este anlisis se
realiza en caso de pacientes en los que no fue posible obtener una muestra de heces
adecuada para cultivo y/o en apoyo a las investigaciones de brotes de clera. Se requiere
de sueros pareados (agudo y convaleciente).
II. Identificacin y caracterizacin serolgica de entricos provenitentes de muestras clnicas:

corresponde a la confirmacin y serotipificacin de cepas como las que se describen en el
Coprocultivo (seccin I.2), referidas por los laboratorios de la Red, acompaadas por la Boleta
Solicitud de Confirmacin Diagnstica / Tipificacin por Centro de Referencia de INCIENSA.
Microbiologa de Alimentos
Responsable: Dra. Mara Teresa Acua Calvo (macuna@inciensa.sa.cr)
III. Anlisis microbiolgico de alimentos: El anlisis de la calidad microbiolgica de los alimentos se

realiza en apoyo a la investigacin de brotes de enfermedades transmitidas por alimentos y/o a la funcin
de regulacin del Ministerio de Salud, siguiendo las metodologas normalizadas por Food and Drug
1
Administration (FDA) y Association of Official Analytical Chemists (AOAC) .
En el caso de brotes de diarrea, las muestras de alimentos se procesan slo cuando se cuenta con
evidencia epidemiolgica que implique al alimento como sospechoso. Cada una de estas muestras
deben referirse acompaadas con la Boleta Solicitud de Diagnstico, Confirmacin y/o Tipificacin para
Anlisis Microbiolgico de Alimentos por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA, previa
coordinacin con el responsable en el CNRB.
Los anlisis para regulacin se realizan a solicitud de la Direccin de Registros y Controles del Ministerio
de Salud, previa coordinacin con el responsable en el CNRB. Se dispone de los siguientes anlisis:
1
Bacteriological Analytical Manual (BAM), Official Methods of Analysis of AOAC International (AOAC).
38
1. Recuento de:
Coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli
Total de mesfilos
De microorganismos especficos: incluye la cuantificacin de cualquiera de los indicadores que
se indican a continuacin, ya sea en muestras de agua o de alimentos:
Clostridium perfringens
Bacillus cereus
Staphylococcus aureus
Vibrio parahemolyticus
Hongos y levaduras
Listeria monocytogenes
Enterobacter sakazakii
2. Diagnstico de enterotoxinas bacterianas en alimentos por mtodos inmunolgicos y ELISA
Determinacin de toxinas diarrognicas (A, B, C, D) de Staphylococcus aureus

Determinacin de enterotoxina de Bacillus cereus
Determinacin de toxina A de Clostridium perfringens
3. Confirmacin de cepas bacterianas aisladas en alimentos y aguas

Salmonella (especie, sub-especie y serovariedad)
Escherichia coli patgena (EHEC), ver seccin Epidemiologa Molecular
Identificacin serolgica de Escherichia coli enterohemorrgica EHEC, incluyendo E. coli
O157:H7 (antgenos somticos y flagelares)
Listeria monocytogenes (serotipo)
Epidemiologa Molecular
Responsable: Dr. Francisco Duarte (fduarte@inciensa.sa.cr)
IV. Determinacin de factores de virulencia de enteropatgenos en muestras clnicas y de

alimentos: se refiere al diagnstico molecular de enteropatgenos o a la deteccin de enterotoxinas
bacterianas en alimentos o de cultivos por mtodo inmunolgicos, previa coordinacin con la persona
responsable en el CNRB.
1. Diagnstico molecular de enteropatgenos por reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Determinacin del gen de la toxina colrica (ctxA)

Deteccin del plsmido inv de Escherichia coli enteroinvasiva EIEC
39
Determinacin de los genes de toxina lbil (LT) y toxina estable (ST) de Escherichia coli
enterotoxignica ETEC
Determinacin los genes de las verotoxinas stx1 y stx2 de Escherichia coli enterohemorrgica
EHEC
Determinacin del gen rfb0157 de Escherichia coli O157:H7
Determinacin del gen h7 de Escherichia coli O157:H7
Determinacin del gen hlyA de Escherichia coli O157:H7
Determinacin de los genes eae y bfp de Escherichia coli enteropatgena EPEC
Determinacin del factor de virulencia pCVD432 de Escherichia coli enteroagregativa (EaggEC)
Determinacin molecular del gen para antgeno flagelar d de Salmonella
V. Caracterizacin molecular de enteropatgenos: se refiere a la caracterizacin molecular de los

enteropatgenos incluidos en las secciones IV.1, en cepas referidas por los laboratorios de la red,
acompaadas por la Boleta Solicitud de Confirmacin Diagnstica por Centro de Referencia de
INCIENSA. La bsqueda de los diferentes factores de virulencia depender de la cepa referida y de
las caractersticas clnico-epidemiolgicas del paciente, previa coordinacin con el responsable en el
CNRB.
VI. Electroforesis de campo pulsado (PFGE) para la subtipificacin molecular de patgenos

bacterianos transmitidos por alimentos, sean estos aislados de muestras clnicas, alimentos (para
consumo humano y animal), aguas, ambiente, animales. Herramienta de apoyo para el anlisis
epidemiolgico que permite relacionar aislamientos en caso de brotes de enfermedades transmitidas
por alimentos (ETA), infecciones respiratorias, meningitis, infecciones nosocomiales, estudios de puntos
crticos de produccin, etc.
Bacteriologa Especial
Responsable: Dra. Grettel Chanto (gchanto@inciensa.sa.cr)
VII. Diagnstico, confirmacin y tipificacin de bacterias causantes de meningitis e infecciones

invasivas por cultivo: Consiste en el aislamiento, identificacin y tipificacin de Neisseria meningitidis,
Haemophilus influenzae y Streptococcus pneumoniae en muestras clnicas en caso de brotes y
defunciones previa coordinacin con el responsable en el CNRB y acompaadas por la Boleta Solicitud
de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA y/o cepas referidas por
los laboratorios de la Red, con la Boleta Solicitud de Confirmacin Diagnstica por Centro de Referencia
de INCIENSA. Incluye:
Aislamiento e identificacin de agentes a partir de muestras clnicas
Determinacin de especie y serogrupo de Neisseria meningitidis
Determinacin del especie y serotipo de Haemophilus influenzae
Determinacin de especie y serotipo de Streptococcus pneumoniae (reaccin de Quellung)
Determinacin de gnero y especie de otras bacterias causantes de meningitis y septicemia
VIII. Diagnstico de tos ferina (Bordetella pertussis / parapertussis): Consiste en la deteccin de

Bordetella pertussis/parapertussis a partir de muestras clnicas referidas por los centros de salud,
acompaadas por la Boleta Solicitud de Diagnstico y/o Tipificacin por Centro Nacional de Referencia
40
de INCIENSA, previa coordinacin con el responsable en el CNRB. A continuacin se indican las

metodologas disponibles:
Cultivo a partir de hisopos o aspirados nasofarngeos
Diferenciacin bioqumica de especies
Diagnstico de tosferina por Inmunofluorescencia directa
Diagnstico molecular por PCR a partir de aspirados nasofarngeos
IX. Diagnstico y confirmacin de bacterias causantes de infecciones miscelneas por cultivo

Cultivo y confirmacin bioqumica de gnero y especie
X. Diagnstico de brucelosis humana: consiste en el diagnstico de infecciones por Brucella en muestras

clnicas referidas por los servicios de salud acompaadas por la Boleta Solicitud de Diagnstico y/o
Tipificacin por Centro Nacional de Referencia de INCIENSA. Se dispone de:
Diagnstico serolgico de brucelosis humana: para realizar este anlisis se requiere de sueros
pareados (agudo y convaleciente)
Antimicrobianos
Responsable: Dra. Antonieta Jimnez (ajimnez@inciensa.sa.cr)
XI. Determinacin de prueba de sensibilidad a los antibiticos en grmenes nosocomiales y

comunitarios: incluye la prueba de sensibilidad a los antibiticos por diferentes mtodos, siguiendo la
normativa recomendada por CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute, antes Nacional Committee
for Clinical Laboratory Standards-NCCLS):
Enteropatgenos y bacterias causantes de infecciones miscelneas por Kirby Bauer
Neisseria meningitidis por E-test (agar Mueller Hinton 5% sangre de carnero)
Streptococcus pneumoniae por Kirby Bauer y E-test (agar Mueller Hinton 5% sangre de carnero)
Haemophilus influenzae por Kirby-Bauer en agar HTM
XII. Determinacin de patrones inusuales de resistencia en grmenes nosocomiales y comunitarios:

siguiendo la normativa recomendada por CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute, antes
Nacional Committee for Clinical Laboratory Standards-NCCLS):
Confirmacin de -lactamasas (mtodo cromognico y doble disco)
-lactamasas de expectro extendido (BLEE), en enterobacterias ampicilino resistentes y que
presentan disminucin en los halos de inhibicin para cefotaxime y ceftazidime (Escherichia coli,
Klebsiella sp., Enterobacter cloacae, Proteus sp., Enterococcus sp.)
-lactamasas de expectro ampliado (BLEA), en enterobacterias ampicilino resistentes
Resistencia a macrlidos, lincosamidas y estreptograminaB (MSLB) en Staphylococcus aureus
Confirmacin de resistencia a vancomicina en Staphylococcus sp. y Enterococcus sp.
Confirmacin de Staphylococcus aureus meticilino resistente (en cepas que presentan resistencia a
oxacilina)
Deteccin de carbapenemasas (mtodo microbiolgico Hodge)
Deteccin de metalobetalactamasas
41
ANEXO 2
VE - 02
REGISTRO COLECTIVO DE CASOS DE ENFERMEDADES DE
NOTIFICACION OBLIGATORIA
ESTABLECIMIENTO:_______________________________________________
SEMANA # ________DEL ______/_____/_____AL_____/_____/_____
Provincia_________________________ Cantn ____________________
Distrito___________________*
Tipo de Grupos de edad

evento < 1 ao 1 a 4 aos 5a9 10 a 14 15 a 19 20 a 64 65 y ms Total
F M F M F M F M F M F M F M F M
Accidentes
ofdicos
Filariasis
Leishmaniasis
Conjuntivitis
hemorrgica
Enfermedad
diarreica
aguda (EDA)
Infeccin
aguda
respiratoria
superior (IRA)
Enfermedad
tipo influenza
estacional
(ETI)
* Los datos de provincia, cantn y distrito, corresponden a los personas enfermas no a la ubicacin
del establecimiento
Nombre del responsable que reporta: ____________________________________________
42
ANEXO 3
Boleta de Notificacin Individual de Vigilancia Epidemiolgica
Ministerio de Salud
V.E-01
Caja Costarricense Seguro Social
Boleta de Notificacin Individual de Vigilancia Epidemiolgica
Nmero de expediente:_______________________________
M
E Nombre del paciente:________________________________ CODIGOS
D
I Fecha inicio sntomas: Da______Mes______ Ao:_______
C
O Diagnstico:_______________________________________
Causa probable:____________________________________
Fecha de diagnostico: Da______Mes______ Ao:_______
Sexo: Masculino 1___ Femenino 2_____
Fecha de nacimiento: Da______Mes______ Ao:_______

Edad: Ao:______ Mes ______ Da______
Nombre del encargado (en caso de ser menor de 18 aos):
_________________________________________________
Residencia
Provincia:_________________________________________
Cantn:___________________________________________
Distrito:___________________________________________
Otras seas:_______________________________________
Telfono:__________________________________________
Lugar de trabajo:___________________________________
Establecimiento que informa:_________________________
Nombre del que informa:_____________________________
43
ANEXO 4
Embalaje y envo de material infeccioso al INCIENSA
Las cepas de agentes infecciosos y el material de diagnstico deben ser enviados del laboratorio local
al Centro de Referencia empleando idealmente un "sistema triple bsico de embalaje" para el
transporte de material infeccioso, de acuerdo a las recomendaciones de la Organizacin Mundial de la
Salud WHO/EMC/97.3.
Este sistema consta de tres envases, como se indica a continuacin a manera de ejemplo:
Recipiente primario: corresponde al tubo o vial que contiene la muestra, el cual debe ser
hermtico y bien cerrado y rotulado de tal manera que permita identificarlo y relacionarlo a la
solicitud de anlisis.
Recipiente secundario: a prueba de agua y derrames, de material resistente (podra emplear
un recipiente de plstico o metal).
Recipiente terciario: es el envoltorio externo, se usa para proteger el envase secundario
(puede emplear una hielera, caja de cartn, sobre de manila, bolsa de plstico).
La muestra se coloca en el recipiente primario, luego se introduce en el recipiente secundario. El
recipiente secundario se debe colocar dentro de una hielera (recipiente terciario), con o sin gel
refrigerante, para el transporte.
Los formularios con datos del paciente y de la muestra, notas u otro tipo de informacin no se deben
colocar dentro de los recipientes antes mencionados.
Consideraciones importantes:
En el caso de cultivos bacterianos, estos se deben referir en tubos con tapa de rosca conteniendo un
medio slido, o en viales sellados cuidadosamente con parafilm o cinta y acondicionados segn las
siguientes instrucciones:
Para los microorganismos que no presentan requerimientos nutricionales especiales se

recomienda referirlos inoculados en tubos con Agar Tripticasa de soya o Agar Infusin
Cerebro Corazn. Las cepas se deben transportar preferiblemente a temperatura entre 4 y
25C, NO CONGELE.
Torunda impregnada con la cepa en estudio en medio Cary Blair, la que puede ser
transportada a temperatura ambiente.
44
Placas de agar: esta forma de transporte no es la ms recomendable; sin embargo, puede ser
requerida para la referencia de bacterias anaerobias, microaeroflicas y otras con
requerimientos nutricionales exigentes (bacterias fastidiosas). En este caso, las tapas de las
placas de petri se deben asegurar con cinta adhesiva. Estas placas se deben colocar
individualmente en bolsas de plstico, dentro de una caja de proteccin y luego en una hielera.
Siempre se deben colocar las placas de manera que el agar quede en la base, para evitar que
ste se desprenda durante el transporte. Evite exponer las muestras a temperaturas elevadas.
45
ANEXO 5
ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO DE BROTE DE DIARREA: Preparado por Aprobado por: ECCH

DIAGNOSTICO DE SITUACION HBA y MTAC
21/09/2001 Revisin Pgina 1 de 2
01
ID BROTE
PARA DIAGNSTICO DE SITUACIN INICIAL

(Llenar una boleta por cada aviso de brote)
1. Persona que brinda la informacin:
Nombre: Cargo:
Direccin: Tel: Fax:
2. Los casos se estn presentando en:
__ una misma vivienda __ en una comunidad __ en una institucin __ Otro:
3. Sitio donde se presentaron los casos
Lugar: Contacto:
Direccin: Tel: Fax:
4. Forma en que aparecieron la mayor parte de los casos
__ mismo da __ durante varios das __ varias semanas __ Otro:
5. Fecha(s) en que aparecieron los primeros casos:
6. Personas que han: N Total Lugar donde fueron atendidos

recibido atencin mdica
sido hospitalizados
fallecido
Marque con x los sntomas que han presentado la mayora de los casos
__ nuseas __ vmito __ dolor de cabeza __ resfriado __ calambres (retortijones)
__ diarrea __ fiebre __ dolor de cuerpo __ tenesmo __ otros:
Observaciones:
8. Diagnstico clnico establecido hasta el momento:
9. Se obtuvieron muestras para anlisis?

No S :_________________________________________________________________________
(Anote el tipo de muestras y el nombre del laboratorio a donde se enviaron o procesaron):
10. Diagnstico de laboratorio establecido hasta el momento: (Anote el diagnostico y el nombre del
los laboratorio(s):
11. Se han administrado antibiticos?

No S :_________________________________________________________________________
(Anote el nombre de los antibiticos y la fecha de inicio):
-Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa INCIENSA
46
ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO DE BROTE DE DIARREA: Preparado por Aprobado por: ECCH

DIAGNOSTICO DE SITUACION HBA y MTAC
21/09/2001 Revisin Pgina 2 de 2
01
12. Se sospecha de que se trata de un brote de origen alimentario?

__ No __ S (Explique qu alimentos son sospechosos):
13. Dnde fueron preparados y/o distribuidos esos alimentos?
14. Se obtuvieron muestras de alimentos y/o utensilios para anlisis de laboratorio?

__ No __ S (Anote el tipo de muestras y la fecha de recoleccin)
15. Quin tom esas muestras y a que laboratorio fueron enviadas ?

Nombre: Institucin:
Cargo: Telfono: Fax:
Laboratorio donde se enviaron:
16. Fuentes de agua utilizadas para el consumo preparacin de alimentos en los lugares
en que se presentaron los casos
Nombre del lugar Tipo(s) de agua*
* (1) A y A, (2) Municipal clorada, (3) Municipal no clorada, (4) Pozo, (5) Ro quebrada.
17. El lugar cuenta con un tanque de almacenamiento ?
__ No __ S:
18. Se obtuvieron muestras de agua para anlisis de cloro residual ?

__ No __ S:
(Anote quin tom las muestras, fecha de los resultados si los conoce)
19. Se obtuvieron muestras de agua para anlisis microbiolgico ?
__ No __ S:
(Anote quin tom las muestras y los resultados si conoce)
20. Contactos realizados
Institucin Telfono Fax Persona contactada (via) Fecha
EBAIS
Hospital o Clnica
Epidemilogo Regional CCSS
Epidemilogo Regional Min. Salud
Centro Nac. de Referencia 2279-99-11
AyA 2279-51-18
Vig. Epidem. Nivel Central CCSS
Vig. Epidem. Nivel Central Min. Salud
21. Observaciones
Firma de la persona que enva esta notificacin Fecha / hora
47
ANEXO 6
Boleta de notificacin de alerta de brotes / epidemias
MINISTERIO DE SALUD
REPUBLICA DE COSTA RICA
Vigilancia de la Salud
NOTIFICACION DE ALERTA/BROTES/EPIDEMIAS
REGION:_________________________FECHA: _____________ SEMANA EPIDEMIOLOGICA: __________
AREA RECTORA DE SALUD: __________________________________________

PROVINCIA: __________________________________
CANTON: ______________________________________________________________
DISTRITO: ____________________________________
LOCALIDAD: ____________________________________________________________
LUGAR DE OCURRENCIA DE LA ALERTA:_________________________________________________________________________
DIAGNSTICO PROBABLE: _____________________________ FECHA DE INICIO DE BROTE/EPIDEMIA:___________
N DE CASOS IDENTIFICADOS: ________________________ ________

N DE DEFUNCIONES: ___________________
AGENTE CAUSAL: ___________________________________________

SOSPECHOSO: _______ CONFIRMADO:_____
FUENTE DE TRANSMISION PROBABLE: AGUA: AIRE:
ALIMENTO: SUELO:
VECTORIAL HUMANA:
OTROS (ESPECIFIQUE):_______________________________
GRUPO DE POBLACION MAS AFECTADO: ____________________________________________________________
ACCIONES REALIZADAS : ____________________________ _______________________________________________

____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
FECHA DE NOTIFICACIN: ______________________
NOTIFICADO POR: _______________________________________

CARGO: ___________________________________
48
ANEXO 7
Obtencin de muestras para estudio de Bordetella pertussis
Bordetella pertussis/parapertussis es una bacteria difcil de cultivar a partir de muestras clnicas. La

posibilidad de aislarla es mayor cuando: (a) el paciente cumple con la definicin de caso establecida,
(b) tiene menos de tres semanas de iniciada la tos, (c) no ha recibido tratamiento con antibiticos y
(d) la muestra se procesa inmediatamente despus de su obtencin.
Idealmente la inoculacin del medio de cultivo primario se debe realizar al pie de la cama del
enfermo; sin embargo, si esto no es posible, enve la muestra al laboratorio inmediatamente despus
de su obtencin (no ms de 48 horas). En este caso, los especmenes aceptables para cultivo son el
aspirado y/o el hisopado nasofarngeo, obtenidos de acuerdo a los procedimientos que se describen a
continuacin.
Nota: Siempre que sea posible, explique al paciente en qu consiste el procedimiento y que puede
sentir ganas de toser o lagrimeo. Utilice guantes para realizar estos procedimientos.
ASPIRADO NASOFARINGEO
El aspirado nasofarngeo es la muestra de eleccin para el aislamiento de Bordetella pertussis, pues
adems de mostrar tasas de recuperacin superiores o iguales a las que se obtienen con el hisopado
nasofarngeo, es la muestra ideal cuando se quieren aplicar otras metodologas diagnsticas como lo
son la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (PCR) o la inmunofluorescencia.
1. Conecte el catter o sonda de succin a una bomba de vaco, empleando una trampa intermedia
(estril) para colectar el moco. Si no cuenta con este equipo, puede usar una sonda de
alimentacin conectada a una jeringa para succionar.
2. Inmovilice la cabeza del paciente.
3. Inserte cuidadosamente la sonda de alimentacin, deslizndola sobre la base de la nasofaringe
hasta alcanzar la parte posterior de la faringe (esto puede provocar tos y lagrimeo).
4. Cuando alcance la parte posterior de la faringe empiece a succionar, sacando la sonda
lentamente hasta alcanzar la parte media de la cavidad nasal.
5. En este momento, deje de succionar y saque totalmente la sonda.
6. Enjuague la sonda aspirando 2-3 ml de solucin salina estril a travs de ella y recogiendo el
material en la trampa. Para el diagnstico de tos ferina, no se utiliza medio de transporte.
7. Selle la punta de la trampa, rotule la muestra con el nombre y cdula o expediente del paciente.
49
8. Complete el formulario de solicitud de anlisis y envelo inmediatamente al laboratorio junto con la

muestra, en donde se gestionar el envo al Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa del
INCIENSA (La boleta de diagnstico debe contener al menos la siguiente informacin: nombre
completo, nmero de expediente o cdula, direccin exacta, fecha inicio de sntomas, tratamiento
previo y fecha de toma de la muestra).
9. Deseche los materiales utilizados en una bolsa de bioseguridad para descartar en el laboratorio.
HISOPADO NASOFARNGEO
1. Inmovilice la cabeza del paciente.
2. Humedezca con agua estril o solucin fisiolgica la punta de un hisopo estril pequeo que sea
flexible y de alginato de calcio o dacrn (no algodn pues es inhibitorio para las
metodologas diagnsticas) e insrtelo con suavidad en uno de los orificios nasales. Mueva el
hisopo hacia atrs y hacia arriba a lo largo del tabique nasal hasta que una resistencia evidente
indique que se ha llegado a la parte posterior de la faringe.
3. Mantenga el hisopo en el lugar por 10 segundos (esto puede provocar tos y lagrimeo).
4. Remueva el hisopo lentamente.
5. Si durante la introduccin del hisopo se halla una resistencia indebida, repita el procedimiento a
travs del otro orificio nasal.
6. Inmediatamente, inserte el hisopo en un tubo estril y quiebre la porcin sobrante del palillo.
Tape el tubo y rotlelo con el nombre y cdula o expediente del paciente.
7. Complete el formulario de solicitud de anlisis y envelo inmediatamente al laboratorio junto con la
muestra.
8. Deseche los materiales utilizados en una bolsa de bioseguridad para descartar en el laboratorio.
Procesamiento inicial de muestras para estudio de Bordetella pertussis

El laboratorio recibir nicamente aspirados o hisopados nasofarngeos que cumplan con los
requisitos que se indican en las instrucciones para la obtencin de muestras para estudio de
Bordetella pertussis.
En este momento, los hospitales y clnicas mayores tendrn la responsabilidad de realizar el
procesamiento inicial que se indica a continuacin y referir inmediatamente las muestras al Centro
Nacional de Referencia en Bacteriologa del INCIENSA (Dra. Grettel Chanto, 2279-9911).
50
Una vez que reciba el aspirado o hisopado nasofarngeo, gestione el transporte de la muestra
con carcter de urgencia al Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa del INCIENSA.
Si esto no es posible, mantenga el aspirado en refrigeracin hasta su envo (no ms de 48
horas)
Anote en el tubo el nombre y nmero de expediente del paciente.
Empaque las muestras siguiendo las normas de bioseguridad establecidas (Anexo 4). Cada
muestra deber acompaarse con el formulario que incluye la informacin bsica del paciente.
Refiera la muestra al Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa del INCIENSA.
Deseche los materiales utilizados en una bolsa de bioseguridad para descartar en el
laboratorio.
Nota: Se aceptarn para cultivo nicamente aquellas muestras que tengan menos de 48 horas de
recolectadas y que hayan sido transportadas en condiciones adecuadas.
51

Guía de Vigilancia Basada en El Laboratorio de Enfermedades Bacterianas y Otros

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Instituto Costarricense de Investigacin y Enseanza en Nutricin y Salud (INCIENSA)

Centro Nacional de Referencia de Bacteriologa

Gua para la vigilancia de laboratorio de enfermedades bacterianas

Elena Campos, Hilda Ma. Bolaos, Grettel Chanto, Antonieta Jimnez,

Tres Ros, Costa Rica

Tema tratado Pginas

4. Resistencia a los antibiticos en grmenes comunitarios y nosocomiales 33 - 36

BLEE -lactamasa de espectro extendido

El Centro Nacional de Referencia en Bacteriologa (CNRB) del Instituto Costarricense de

Dentro de la RNLB, la competencia de cada uno de los participantes en la vigilancia, se ha

Agentes o eventos a vigilar

1. Enteropatgenos causantes de diarreas, intoxicaciones alimentarias y otras

Importancia de esta vigilancia: En Costa Rica la enfermedad diarreica aguda constituye un

Considerando lo anterior, en el CNRB se realiza:

a. Diagnstico de agentes causantes de diarrea e intoxicaciones alimentarias: El

El CNRB tambin apoya el diagnstico de enteropatgenos en muestras post-mortem de

b. Confirmacin y tipificacin de los enteropatgenos: corresponde a la confirmacin,

Diagnstico de agentes causantes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

En brotes de Muestra a referir al INCIENSA Exmenes que realiza el INCIENSA Observaciones

Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

Apoyo diagnstico del CNRB a la investigacin de brotes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

Dra. Hilda Ma. Bolaos, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

Apoyo diagnstico del CNRB a la investigacin de brotes de diarrea e intoxicaciones alimentarias

Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Responsable,

Instrucciones para la recoleccin y transporte de muestras de alimentos relacionadas a brotes

Tipo de muestra Cantidad Tipo de envase Recoleccin de muestra Manejo y transporte

Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Dr. Francisco Duarte, Responsable,

Instrucciones para la recoleccin y transporte de muestras de alimentos relacionadas a brotes

Tipo de muestra Cantidad Tipo de envase Recoleccin de muestra Manejo y transporte

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

Confirmacin / tipificacin de enteropatgenos

El CNRB tambin apoya a los laboratorios de la red en la confirmacin de otros enteropatgenos

Importancia de esta vigilancia: La infeccin causada por la bacteria Listeria monocytogenes,

Confirmacin / serotipificacin de Listeria monocytogenes:

Dra. Mara Teresa Acua, Responsable, Laboratorio de Alimentos

El reservorio de la infeccin humana lo constituye principalmente el ganado vacuno, porcino, caprino

En vista de lo anterior, los resultados serolgicos se deben analizar en muestras pareadas y en

Apoyo del CNRB al diagnostico de la brucelosis

Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Elena Campos, Coordinadora,

1. Bacterias responsables de neumona, meningitis y otras infecciones invasivas,

Importancia de esta vigilancia: Segn la Organizacin Mundial de la (OMS), ms de 1.6 millones

En la valoracin y toma de decisiones para la introduccin de nuevas vacunas en los

Confirmacin y tipificacin de S. pneumoniae, H. influenzae y N. meningitidis: Todos los

Confirmacin / serotipificacin de bacterias causantes de neumonas, meningitis y otras infecciones invasivas

Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Confirmacin / serotipificacin de bacterias causantes de neumonas, meningitis y otras infecciones invasivas

Dra. Grettel Chanto, Responsable, Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

2. Agentes causantes de tos ferina

Diagnstico de tos ferina

Dra. Grettel Chanto, Responsable,

Actualmente se trabaja en la reorganizacin de la vigilancia de la resistencia a los antibiticos en

estos agentes y la generacin de polticas pblicas en el campo de la salud humana, veterinaria y la

Resistencia a vancomicina en Cepas de Enterococcus resistentes a

Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Dra. Antonieta Jimnez, Responsable,

Servicios de diagnstico y confirmacin diagnstica

Coordinacin del CNRB

Responsable: Dra. Elena Campos (ecampos@inciensa.sa.cr)

Sexo: Masculino 1_ Femenino 2___

Fecha de nacimiento: DaMes Ao:___

diarrea fiebre dolor de cuerpo tenesmo __ otros:

DIAGNSTICO PROBABLE: ___________________ FECHA DE INICIO DE BROTE/EPIDEMIA:_

N DE CASOS IDENTIFICADOS: ________________

ACCIONES REALIZADAS : ___________________