Antgenos Febriles
C Reactivos para la determinacin de anticuerpos
SIGNIFICACION CLINICA
Las Salmonellas se consideran patgenos entricos obliga-
dos. Los alimentos y el agua contaminados son los meca-
nismos de transmisin. La enfermedad puede presentarse
como gastroenteritis, septicemia con lesiones en diversos
rganos o fiebre tifoidea.
La Brucelosis se presenta en la mayora de los casos con
anorexia, fiebre, decaimiento y escalofros, pudiendo apare-
cer luego complicaciones importantes como son las seas
y neuropsquicas.
A pesar de que el mtodo definitivo para establecer la etio-
loga de estas enfermedades es a travs del aislamiento
del agente patgeno, esto resulta difcil debido a que la
investigacin se realiza frecuentemente en perodos tardos
de la enfermedad y luego de una terapia antibitica. Por este
motivo es de gran importancia diagnstica la deteccin de
los anticuerpos especficos producidos en el curso de cada
una de estas patologas. Una prueba aislada es de escaso
valor, siendo necesarias 2 o ms pruebas seriadas a fin
de poner en evidencia cambios en el ttulo de anticuerpos.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El suero del paciente se pone en contacto con antgenos
especficos. En este caso se utilizan suspensiones de Sal-
monellas o Brucellas muertos. Si la muestra contiene los
anticuerpos correspondientes se producir una aglutinacin
visible macroscpicamente.
REACTIVOS PROVISTOS
Antgenos Febriles Salmonella: suspensin en solucin
salina con conservantes apropiados, conteniendo los si-
guientes antgenos bacterianos:
- Antgenos Paratyphoid A (Salmonella, antgeno flagelar a).
- Antgenos Paratyphoid B (Salmonella, antgeno flagelar b).
- Antgenos Typhoid H (Salmonella, antgeno flagelar d).
- Antgenos Typhoid O (Salmonella, antgeno somtico D).
Antgenos Febriles Brucella: suspensin de antgenos
bacterianos (Brucella abortus, cepa 1119-3) en solucin
fisiolgica con conservantes apropiados. La concentracin
celular de los antgenos se encuentra entre el 4 y el 6%. Las
bacterias utilizadas se encuentran en fase lisa.
Antgenos Febriles Controles:
- Control Positivo: dilucin de suero humano inactivado positivo.
- Control Negativo: dilucin de suero humano negativo.
REACTIVOS NO PROVISTOS
Solucin fisiolgica.
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especficos contra Salmonella y Brucella
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Los reactivos se proveen listos para usar. Llevar a tempera-
tura ambiente y agitar vigorosamente antes de su empleo.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".
Los controles han sido examinados para HIV, HCV y HBV
encontrndose no reactivos. No obstante, deben ser em-
pleados como si se tratara de material infectivo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Cualquier contaminacin bacteriana de los reactivos produ-
cida durante el uso puede ser causa de deterioro. Desechar.
MUESTRA
Suero
a) Recoleccin: debe obtenerse suero lmpido en forma
estril. No inactivar ni calentar ya que los anticuerpos son
termolbiles.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemlisis visible
y los quilomicrones pueden dar reacciones inespecficas.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
muestras pueden conservarse 7 das en refrigerador (2-10oC).
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Placa de vidrio
- Micropipetas
- Tubos de hemlisis
- Varilla
- Reloj o timer
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA RAPIDA EN PLACA
Colocar en una placa una gota (50 ul) de suero y
agregar una gota (50 ul) de suspensin de Antgeno.
 Ttulos significativos pueden obtenerse en individuos inmuni-
Mezclar y agitar la placa en forma circular durante 2
zados por vacunas tifoideas. Pueden observarse reacciones
minutos.
inespecficas con antgenos de Salmonella O grupo D en
Observar la presencia o ausencia de aglutinacin utili-
suero de pacientes con influenza.
zando una luz indirecta sobre fondo oscuro.
Tambin se encontraron reacciones inespecficas en pacien-
II- TITULACION RAPIDA EN PLACA tes con enfermedad heptica crnica activa y consumidores
1) Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 de narcticos.
aproximadamente. Los antgenos de Brucella pueden dar reacciones cruzadas
2) Empleando las micropipetas apropiadas colocar en individuos vacunados contra clera.
en estos sectores 80 ul, 40 ul, 20 ul, 10 ul y 5 ul de
suero lmpido. Repetir el procedimiento para un control PERFORMANCE
negativo y uno positivo. Antgenos Febriles Salmonella: en un estudio realizado
3) Colocar 1 gota de Antgeno previamente agitado sobre 191 muestras, comparando con otro mtodo de simi-
sobre cada gota de suero. lar fundamento tomado como referencia, se obtuvieron los
4) Mezclar el suero y el Antgeno utilizando una varilla siguientes resultados:
abarcando un rea de 2 cm de dimetro aproximada-
mente. Debe emplearse una varilla distinta para cada Salmonella Paratyphoid A:
dilucin de suero o la misma varilla mezclando a partir Sensibilidad: 94,1%
de la muestra ms diluida. Especificidad: 98,8%
5) Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular. Salmonella Paratyphoid B:
6) Observar la aglutinacin utilizando luz indirecta Sensibilidad: 89,3%
sobre fondo oscuro. Especificidad: 100%
Salmonella Typhoid H:
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Sensibilidad: 86,2%
4+: todos los microorganismos aglutinan. Especificidad: 99,3%
3+: aglutinan aproximadamente el 75%. Salmonella Typhoid O:
2+: aglutinan aproximadamente el 50%. Sensibilidad: 95%
1+: aglutinan aproximadamente el 25%. Especificidad: 99,1%
Negativo: no aparece aglutinacin.
Antgenos Febriles Brucella: en un estudio realizado so-
Tcnica I: se indica solamente positivo o negativo. bre 203 muestras comparando con otro mtodo de similar
Tcnica II: el ttulo se considerar la ltima dilucin que da fundamento tomado como referencia, se obtuvieron los
aglutinacin del 50% (++). siguientes resultados:
Los resultados obtenidos en la titulacin en placa se aproxi- Sensibilidad: 100%
man a los de la prueba en tubo descripta en Bennett, C.W Especificidad: 100%
(ver Bibliografa), considerando las diluciones como se
muestra a continuacin: Debe tenerse en cuenta que debido a las limitaciones de
este tipo de reacciones serolgicas, el mtodo no sustituye
Volumen de Suero Dilucin aproximada en el aislamiento e identificacin del agente etiolgico.
(ml) la prueba en tubo
0,08 1:20 PRESENTACION
0,04 1:40 Salmonella (Cd. 1863151)
0,02 1:80 Paratyphoid A: 1 x 5 ml
0,01 1:160 Paratyphoid B: 1 x 5 ml
0,005 1:320 Typhoid H: 1 x 5 ml
Typhoid O: 1 x 5 ml
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Brucella (Cd. 1503151)
Antgenos Febriles Controles. Brucella abortus: 1 x 5 ml
VALORES DE REFERENCIA Controles (Cd. 1933151)
Generalmente ttulos de 1:40 1:80 son sospechosos de Control Positivo: 1 x 2 ml
enfermedad. Slo ttulos mayores de 1:80 pueden consi- Control Negativo: 1 x 2 ml
derarse probatorios de diagnstico de enfermedad cuando
estn acompaados de la sintomatologa clnica. Ttulos BIBLIOGRAFIA
mayores de 1:320, son concluyentes. - Widal, F. - Bull. Soc. Med. Hop. de Paris 13 (1896).
- Bennett, C.W. Clinical Serology, pg. 145, Charles Thomas
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Co. (1964).
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Huddleson, J.B. - J. Infect. Dis. 42:242 (1928).

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Smbolos
Los siguientes smbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnstico "in vitro"

Corrosivo / Castico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Lmite de temperatura (conservar a)

No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biolgico

Volumen despus de la reconstitucin

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Nmero de lote h Nmero de catlogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Tc.: Viviana E. Ctola

Wiener lab.
Bioqumica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Disp. N: 1889/89 - 4957/00-153/05
(Controles)
1889/89 - 4957/00-153/05-1733/13
(Brucella-Salmonella) 2000 Rosario - Argentina
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