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Laboratorio de Microbiologa II
Prctica No. 12
Aislamiento de bacterifagos
Equipo: 12
Integrantes:
Resultados
Tabla 1.-
10-2 Incontables
10-3 Incontables
10-4
Tabla 1.-Muestra las placas de agar blando donde fueron vaciadas las soluciones
de caldo de bacterifago enriquecido proveniente de moscas junto con E. coli
despus de una incubacin a 37 por 24 horas. La presencia del bacterifago se
demuestra en las zonas de la placa con aclaramiento (encerradas en un crculo).
No se observaron calvas definidas, sino amplias zonas aclaradas que impidieron
su cuantificacin.
Imagen 1.-
Imagen 1.- Se muestran los tubos con caldo soya tripticasena y diferentes
concentraciones de bacterifagos y 0.1 mL de E. coli, la concentracin disminuye
de izquierda a derecha. Ningn caldo present turbidez.
Discusin
No fue posible determinar el ttulo de ninguna placa, ya que en todas las placas se
encontraron un amplio desarrollo del bacterifago, creando zonas de lisis muy
amplias que impedan el conteo de la UFP. En las primeras dos placas, las de
concentracin ms alta, las placas lticas fueron muy abundantes y se juntaron
entre s, impidiendo su conteo. En el caso de las ltimas dos placas, que tenan
menos concentracin del fago, este fenmeno pudo deberse a una mala
realizacin de la tcnica, debido a la rpida solidificacin del agar blando al
vaciarse, impidiendo que ste creara una capa homognea de agar y de igual
manera, impidiendo la distribucin del fago sobre sta. En el caso de los tubos
(Imagen 1), el aclaramiento del caldo es indicativo de que existe la presencia de
bacterifago en ellos, y de que se est llevando a cabo un ciclo ltico.
Esta prueba no permite la identificacin del fago, aunque como se us Eschericha
coli, la placa podra contener algn bacterifago de la serie T, junto con el
bacterifago lambda (Flint, 2015). Para su identificacin se puede aislar el
bacterifago de una nica placa bien formada, y su posterior caracterizacin a
travs de microscopa electrnica y secuenciacin del material gentico (Pelzek,
2013).
Los fagos pudieron ser aislados de las moscas ya que estos son unos parsitos
obligados, por lo que su distribucin y abundancia depende de su hospedero
(Clokie, 2011), en este caso la E. coli se puede encontrar en las moscas porque
stas son un vector natural de ella (Rochon, 1998).
Conclusiones
Referencias
Clokie MR, Millard AD, Letarov AV, Heaphy S. Phages in nature. Bacteriophage.
2011;1(1):31-45.
Flint J, Racaniello V. Principles of virology. 4th ed. Washington: ASM Press; 2015.