UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

Faculdade de Farmcia
Disciplina de Trabalho de Concluso de Curso de Farmcia

EXTRAO COM FLUIDO SUPERCRTICO E SUAS

APLICAES NA OBTENO DE PRODUTOS NATURAIS

Jaqueline Campiol dos Santos

Porto Alegre, junho de 2011.

 UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL
Faculdade de Farmcia
Disciplina de Trabalho de Concluso de Curso de Farmcia

EXTRAO COM FLUIDO SUPERCRTICO E SUAS APLICAES NA

OBTENO DE PRODUTOS NATURAIS

Jaqueline Campiol dos Santos

Trabalho de Concluso de Curso em Farmcia

Orientadora: Profa. Dra. Gilsane Lino von Poser

Co-orientador: Prof. Dr. Rubem Mrio Figueir Vargas

Porto Alegre, junho de 2011.

 SUMRIO

Resumo ............................................................................................................................... 3
1. INTRODUO ............................................................................................................. 4
2. OBJETIVOS .................................................................................................................. 6
3. MATERIAIS E MTODOS ......................................................................................... 6
4. PARTE 1: O PROCESSO DE EXTRAO SUPERCRTICA ............................... 7
4.1 Caractersticas dos fluidos supercrticos ......................................................... 7
4.2 Tipos de fluidos e modificadores (co-solventes) ............................................. 9
4.3 Instrumentao .............................................................................................. 10
4.4 Vantagens da extrao com fluido supercrtico ............................................ 12
4.5 Limitaes da extrao com fluido supercrtico............................................ 12
4.6 Parmetros que influenciam no processo de extrao supercrtica ............... 13
5. PARTE 2: APLICAES DA EXTRAO SUPERCRTICA NA OBTENO
DE PRODUTOS NATURAIS ........................................................................................ 14
5.1 Compostos Fenlicos .................................................................................... 15
5.2 Alcalides ...................................................................................................... 18
5.3 leos volteis e compostos relacionados ...................................................... 23
5.4 Lipdeos ......................................................................................................... 27
6. CONCLUSO.............................................................................................................. 29
7. REFERNCIAS .......................................................................................................... 29
 Resumo

Extratos vegetais e produtos naturais isolados so amplamente utilizados como matrias-

primas em produtos da indstria farmacutica, cosmtica e alimentcia. A extrao com
solventes orgnicos e a destilao por arraste a vapor constituem os mtodos mais
utilizados para a obteno de extratos. No entanto, a baixa seletividade, a utilizao de
solventes orgnicos txicos, a gerao de resduos e a degradao trmica dos compostos
de interesse constituem fatores limitantes destes mtodos. A extrao com fluido
supercrtico uma tcnica relativamente nova que representa uma alternativa aos
mtodos tradicionais de extrao, onde o solvente empregado em condies de
temperatura e presso acima do ponto crtico. Os fluidos supercrticos possuem
propriedades intermedirias entre quelas de substncias no estado lquido e no estado
gasoso, o que confere caractersticas nicas que fazem com que possam ser usados como
solventes. O dixido de carbono (CO2), por apresentar valores de presso e temperatura
crticos relativamente baixos (73,8 bar e 31,0 C), ser no txico, no inflamvel, no
txico e de baixo custo, o solvente de escolha em processos de extrao supercrtica. O
CO2 no estado supercrtico se mostra adequado para extrao de compostos hidrofbicos
ou levemente hidroflicos, no entanto, a adio de co-solventes polares, como o etanol,
pode ser feita visando ao aumento da solubilizao de compostos de maior polaridade.
Dentre as vantagens da extrao supercrtica destacam-se a menor ocorrncia de
degradao trmica dos compostos extrados, a ausncia de oxignio e luz durante o
processo de extrao, a ausncia de resduos de solventes nos extratos e, principalmente,
a possibilidade de ajuste das variveis do processo, podendo assim obter seletividade para
as substncias de interesse. Os objetivos deste trabalho foram realizar uma reviso sobre
os fundamentos da tcnica de extrao supercrtica, bem como apresentar alguns
exemplos de aplicaes na obteno de extratos e produtos naturais de origem vegetal.
1. INTRODUO

As plantas constituem uma das fontes mais importantes de recursos teraputicos e

alimentos para uso humano. Plantas medicinais tm sido utilizadas pelo homem para cura
de doenas e manuteno da sade desde a pr-histria. Apesar dos benefcios trazidos
pelo surgimento dos frmacos modernos, provenientes de sntese qumica ou muitas
vezes derivados de produtos naturais, o uso de plantas medicinais ainda representa o
nico recurso teraputico disponvel para cerca de 75% da populao mundial (Raskin et
al., 2002; Schmidt et al., 2008). Alm disso, devido a uma maior preocupao com a
sade e bem estar e a um melhor entendimento da qumica dos produtos naturais, o
interesse da populao pelo uso de fitoterpicos e alimentos funcionais tem aumentado,
causando assim um aumento na demanda de extratos vegetais e produtos naturais
isolados de plantas e fontes de alimento de interesse teraputico (Zhao, 2006). Uma vez
que compostos biologicamente ativos geralmente esto presentes nas plantas em baixas
concentraes, mtodos de extrao eficientes e seletivos so necessrios para a obteno
destes a partir dos materiais vegetais (Lang e Wai, 2001).

No contexto do estudo de produtos naturais, o termo extrao significa retirar, da

forma mais seletiva e completa possvel, as substncias ou a frao ativa contida no
material vegetal (Sonaglio et al., 2007). A extrao o primeiro passo para a obteno de
produtos naturais bioativos a partir de matrias-primas vegetais, sendo influenciada pela
natureza qumica destes, pelo mtodo de extrao empregado, pelo solvente, pelo
tamanho de partcula do material vegetal, pelo pH do meio extrator, pelo tempo de
extrao e temperatura utilizados, pelo emprego de agitao, assim como pela presena
de substncias interferentes (Stalikas, 2007).

A extrao slido-lquido empregando solventes orgnicos, tais como etanol,

metanol, acetato de etila, clorofrmio e gua, constitui o mtodo de extrao mais
tradicionalmente utilizado na obteno de substncias no volteis. Diversas tcnicas
podem ser empregadas, como extraes a frio, utilizando-se macerao (esttica ou
cintica), percolao e turbo extrao. As extraes a quente podem ser executadas em
sistemas fechados, como o caso da extrao utilizando-se aparelho de Sohxlet, ou em
sistemas abertos, como nos mtodos de decoco e infuso (Falkenberg et al., 2007).
 Existem, no entanto, diversos inconvenientes associados s tcnicas clssicas de
extrao por solventes, dentre os quais pode-se citar a possvel necessidade de elevao
de temperatura, o que pode prejudicar a integridade de substncias termolbeis, e a
possibilidade de alteraes qumicas das substncias de interesse, como reaes de
hidrlise (quando o solvente aquoso) ou peroxidao (no caso da utilizao de ter).
Alm disso, a extrao slido-lquido acarreta na utilizao de grandes quantidades de
solventes orgnicos, os quais muitas vezes apresentam toxicidade, para o manipulador e
para o ambiente. Outras desvantagens incluem a necessidade de eliminao do solvente, o
que tambm pode gerar necessidade no aquecimento do extrato, e a necessidade de
tratamento e eliminao de resduos, bem como a existncia de poucos parmetros que
possam ser ajustados a fim de controlar a seletividade do processo de extrao (Lang e
Wai, 2001; Herrero et al., 2010; Marstica Junior et al., 2010).

Produtos lquidos e volteis, como os leos volteis, so extrados por

hidrodestilao, em escala laboratorial, e por destilao arraste a vapor, em escala
industrial. Estes mtodos, apesar de serem largamente empregados, tambm possuem
desvantagens. A elevao de temperatura e o contato do material vegetal com a gua
podem causar modificaes qumicas nas substncias presentes nos leos volteis, como
degradao catalisada pela temperatura e hidrlise. Alm disso, a hidrodestilao pode
resultar na perda por evaporao de componentes altamente volteis e de outros
componentes solveis em gua (Oszagyh et al., 1996; Pourmortazavi e Hajimirsadeghi,
2007; Meireles, 2009).

A extrao com solventes apolares tambm utilizada para a obteno de leos

volteis, no entanto, alm das desvantagens j citadas para a extrao por solventes,
outros compostos lipoflicos so extrados dessa forma. A prensagem mecnica, outro
mtodo de obteno de leos volteis, encontra aplicaes mais restritas, como na
extrao de leos volteis de frutos ctricos (Maul et al., 1996; Simes e Spitzer, 2007).

A extrao com fluido supercrtico consiste em uma forma de extrao onde o

solvente lquido usual substitudo por um fluido supercrtico, ou seja, uma substncia
em condies de temperatura e presso acima do ponto crtico. Devido s vantagens
apresentadas por esta tcnica em relao aos mtodos de extrao por solventes na
obteno de extratos vegetais e produtos naturais isolados, diversos trabalhos cientficos
abordando aplicaes da extrao supercrtica nesta rea tm sido publicados (Reverchon
e De Marco, 2006; Pereira e Meireles, 2010).

2. OBJETIVOS

Este trabalho teve por objetivo realizar uma pesquisa bibliogrfica sobre os
fundamentos da tcnica de extrao com fluido supercrtico, bem como fazer um
levantamento de suas aplicaes na obteno de produtos naturais, especialmente os de
interesse farmacutico, buscando compreender como as variveis do processo
influenciam na extrao das diferentes classes de produtos naturais.

3. MATERIAIS E MTODOS

A reviso de literatura foi realizada na base de dados Scopus utilizando as seguintes

palavras-chave: supercritical extraction, supercritical extraction AND natural products,
supercritical extraction AND phenolic, supercritical extraction AND alkaloid,
supercritical extraction AND caffeine, supercritical extraction AND essential oil e
supercritical extraction AND lipids. Foram selecionados os artigos datados a partir de
1995 e de livre acesso. A seleo dos artigos baseou-se, inicialmente, na anlise dos
ttulos. Foi dada preferncia aos textos que abordavam aplicaes da extrao supercrtica
de matrias-primas vegetais contendo produtos com atividades biolgicas de interesse
farmacutico, mas alguns trabalhos incluindo aplicaes de interesse para rea
alimentcia tambm foram includos. Tambm foram consultados alguns dos principais
livros especializados no assunto. Uma discusso resumida dos resultados obtidos ser
realizada no decorrer deste trabalho.

De modo a facilitar a comparao dos diferentes resultados apresentados nesta

reviso, as unidades de presso foram padronizadas para a escala bar, enquanto as
unidades de temperatura foram padronizadas para a escala Celsius. Os dados levantados
permitiram dividir o trabalho em duas partes: na primeira apresentam-se aspectos
relacionados aos fundamentos da tcnica de extrao supercrtica, enquanto na segunda
parte apresentam-se algumas das aplicaes na obteno de produtos naturais de origem
vegetal.
4. PARTE 1: O PROCESSO DE EXTRAO SUPERCRTICA

4.1 Caractersticas dos fluidos supercrticos

Do ponto de vista termodinmico, o diagrama de fases de uma substncia uma

representao grfica que demonstra as condies de temperatura e presso em que as
diferentes fases de uma determinada substncia so termodinamicamente mais estveis.
As curvas que separam as regies de cada fase, denominadas curvas de equilbrio,
fornecem os valores de presso e temperatura nos quais as diferentes fases coexistem em
equilbrio, conforme pode ser observado na figura 1 (Atkins, 2001).

Se uma substncia no estado lquido aquecida em um recipiente fechado, e,

portanto, submetida a uma determinada presso, a presso de vapor da substncia eleva-
se continuamente com o aumento da temperatura. Assim, ocorre um aumento na
densidade do vapor, ao mesmo tempo em que ocorre uma diminuio da densidade do
lquido, em conseqncia do seu aumento de volume. H um ponto em que a densidade
do vapor se iguala do lquido remanescente e o limite entre as duas fases desaparece. O
ponto que limita a regio onde no h distino entre as fases de lquido e vapor
denominado ponto crtico ou estado crtico, sendo caracterizado pela temperatura crtica e
pela presso crtica, as quais so caractersticas para cada substncia (Atkins, 2003; Netz
e Ortega, 2002).

Figura 1. Diagrama de fases tpico de uma substncia pura (adaptado de Herrero et al., 2010).
 A presso crtica pode ser definida como a presso mnima requerida para
liquefazer um gs a uma determinada temperatura, enquanto a temperatura crtica pode
ser definida como a temperatura acima da qual impossvel liquefazer um gs por
compresso. Assim, uma substncia acima da temperatura crtica ainda se comportar
como um gs, independente da presso aplicada. Uma substncia que se encontra em
condies de temperatura e presso crticas dita estar no estado supercrtico, sendo
tambm denominada fluido supercrtico (Mukhopadhyay, 2000; Sinko, 2006).

No estado supercrtico, as substncias possuem caractersticas intermedirias entre

as de um gs e um lquido. Fluidos supercrticos possuem coeficientes de difuso
prximos aos de um gs. Sua capacidade de difuso chega a ser de uma a duas ordens de
magnitude maior que aquela dos lquidos, o que proporciona uma rpida e eficiente
transferncia de massa. Outras caractersticas dos fluidos supercrticos que remetem s de
um gs incluem a sua baixa viscosidade e a ausncia de tenso superficial, o que facilita a
penetrao dos fluidos supercrticos na matriz slida. Os fluidos supercrticos tambm
apresentam valores de densidade prximos aos de um lquido, o que proporciona um bom
poder solvente (Taylor, 1996; Luque de Castro et al., 2004). A tabela 1 apresenta um
comparativo de algumas caractersticas fsico-qumicas dos gases, lquidos e fluidos
supercrticos.

Tabela 1. Faixas de valores de algumas propriedades fsico-qumicas de gases, lquidos e fluidos

supercrticos (adaptado de Herrero et al., 2010).
Densidade Difusividade Viscosidade
Estado da matria
(, g/cm3) (DAB, cm2/s) (, g/s.cm)
Gs (P = 1 atm, T = 21C) 10-3 0,1 10-4
Lquido (P = 1 atm, T = 15-30C) 1 10-5 10-2
Supercrtico (P = Pc, T = Tc) 0,1 1,0 10-3 10-4 10-3 10-4
Pc: Presso crtica, Tc: temperatura crtica

Assim, o comportamento ambguo de substncias no estado supercrtico permite

que estas possam, devido viscosidade e difusividade anlogas s de um gs, penetrar
profundamente no material, e, devido capacidade de solvatao anloga de um
lquido, extrair as substncias de interesse presentes na matriz slida (Mukhopadhyay,
2000).
 4.2 Tipos de fluidos e modificadores (co-solventes)

Diversos compostos j foram estudados como solventes em processos de extrao

supercrtica de produtos naturais. Entretanto, a maioria deles, devido toxicidade,
reatividade, possibilidade de exploso, dano ao meio ambiente, alto custo ou condies
supercrticas extremas no chegou a ser adotada como solvente de escolha (Maul et al.,
1996; Smith, 1999). A tabela 2 apresenta as propriedades crticas dos principais
compostos j analisados como solventes supercrticos.

Tabela 2. Propriedades crticas de algumas substncias empregadas como solventes em processos de

extrao supercrtica (adaptado de Lide, 1997).
Substncia Tc (C) Pc (bar)
Xennio 16,6 58,4
Trifluormetano 26,2 48,6
Clorotrifluormetano 28,9 38,7
Dixido de Carbono 31,0 73,8
Etano 32,2 48,7
xido nitroso 36,4 72,6
Hexafluoreto de enxofre 45,5 37,7
Propano 96,7 42,5
Amnia 132,4 113,5
Dixido de enxofre 157,7 78,8
Triclorofluormetano 198,0 44,7
Metanol 239,4 80,8
Etanol 240,9 61,4
gua 374,0 220,6
Pc: Presso crtica, Tc: temperatura crtica

O dixido de carbono ou gs carbnico (CO2) tem sido at os dias de hoje o

solvente de escolha para emprego em processos de extrao por fluido supercrtico de
produtos naturais. Por possuir temperatura e presso crticas moderadas (31,04 C e 72,8
bar, respectivamente) permite que a operao de extrao supercrtica ocorra a
temperaturas mais brandas, o que um fator importante a considerar quando se trabalha
com produtos naturais, os quais muitas vezes podem sofrer reaes de degradao a altas
temperaturas. Alm disso, o CO2 um gs inerte, no inflamvel, no explosivo e
disponvel com alta pureza a baixo custo. Estas caractersticas fizeram com que o CO2 se
tornasse o solvente mais empregado em processos de extrao supercrtica. Aps o
trmino da extrao, o CO2, em condies de temperatura e presso ambiente,
facilmente separado dos extratos, no havendo restries quanto sua eliminao para
meio ambiente (Starmans e Nijhuis, 1996; Reverchon e De Marco, 2006; Abbas et al.,
2008; Cassel et al., 2008).

O dixido de carbono, pelo fato de ser uma molcula com momento dipolo igual a
zero, uma substncia apolar. Sua polaridade semelhante de outros solventes apolares
tipicamente utilizados em processos de extrao slido-lquido, como o hexano (Luque
de Castro et al., 2004; Rosa et al., 2009). Em geral, a solubilidade do soluto no CO2
supercrtico depende da presena de grupos funcionais na molcula, do peso molecular e
da polaridade da mesma. Assim, compostos orgnicos apolares ou levemente polares de
baixo peso molecular, como monoterpenos e sesquiterpenos, se mostram bem solveis.
Compostos polares e de maior peso molecular, como cidos fenlicos e flavonides no
glicosilados, em geral so moderadamente solveis, enquanto compostos altamente
polares e de maior peso molecular, como acares, polissacardeos, protenas e taninos,
so dificilmente solveis no CO2 supercrtico puro (Taylor, 1996; Mukhopadhyay, 2000;
Brunner, 2005).

No entanto, a adio de um solvente auxiliar ao CO2, denominado co-solvente ou

modificador, tem sido proposta com o intuito de aumentar a solubilidade de compostos-
alvo polares e tambm para possibilitar o controle da seletividade do processo de
extrao, proporcionando a utilizao de presses menos elevadas (Daz-Reinoso et al.,
2006; Sinko, 2006; Pereira e Meireles, 2010). Os co-solventes so selecionados de modo
a proporcionar o aumento das interaes moleculares do solvente supercrtico com os
compostos de interesse. Os solventes mais utilizados como modificadores em processos
de extrao com fluido supercrtico so o metanol e o etanol, os quais so capazes de
realizar interaes do tipo dipolo-dipolo e ligaes de hidrognio com molculas do
soluto contendo grupos funcionais polares (Hamburger et al., 2004; Kopcak e Mohamed,
2005; Azevedo et al., 2008). Diversos estudos abordando aplicaes da extrao
supercrtica empregando co-solventes polares tm sido publicados e alguns destes sero
discutidos ao longo do presente trabalho.
 4.3 Instrumentao

Um sistema de extrao supercrtica consiste basicamente nos seguintes

componentes: uma fonte de CO2, um compressor ou bomba de alta presso, um vaso
extrator, uma vlvula de descompresso (ou vlvula de expanso) e uma cmara de
separao, alm de diversos controladores de temperatura e presso. O CO2 pressurizado,
no estado lquido, fornecido ao sistema atravs do compressor, passando ento por um
pr-aquecedor, onde sua temperatura elevada, ocorrendo assim a sua passagem do
estado lquido para estado supercrtico. O CO2 supercrtico, medida que flui no sistema,
passa pela matriz slida localizada na cmara de extrao. Aps, a mistura soluto-
solvente submetida expanso ao passar pela vlvula de expanso. A presso e
temperatura reduzidas o extrato precipita no frasco coletor. O CO2, j no estado gasoso,
recircula no sistema, passando novamente pelo compressor e pelo trocador de calor antes
de chegar ao vaso extrator. Este procedimento usual em processos de nvel industrial. O
processo tambm pode operar sem a recirculao de CO2, o que bastante comum em
unidades laboratoriais e piloto (Mukhopadhyay, 2000; Jacques, 2005; Cassel et al., 2007;
2008; Rosa et al., 2009).
CO2

Vlvula de
expanso Separadores

Extratos obtidos

Vasos de extrao

Bomba Trocador de calor

Reservatrio de CO2

Figura 2. Diagrama esquemtico de um processo de extrao supercrtica (adaptado de Pereira e Meireles,

2010).

Os processos de extrao supercrtica podem ser divididos em trs escalas:

laboratorial ou analtica, piloto e industrial. Os equipamentos em escala laboratorial, onde
se incluem a maioria dos utilizados na pesquisa cientfica, so empregados diretamente na
preparao de amostras para anlise qumica. As unidades de extrao em escala piloto
em geral so empregadas no desenvolvimento de novas aplicaes da extrao
supercrtica, visando ao escalonamento para processos industriais, e tambm na obteno
de produtos de alto valor agregado que necessitam de volumes menores em relao
escala industrial, como na extrao de aromas e fragrncias. Os equipamentos em escala
industrial so utilizados em processos de grande escala na indstria farmacutica e de
alimentos. Dentre as principais aplicaes industriais da extrao supercrtica, destacam-
se a descafeinao do caf e ch, a extrao e processamento de leos vegetais (lipdeos e
leos essenciais), a produo de lpulo para cervejarias e a extrao da nicotina do fumo.
Diversas unidades industriais esto presentes em pases da Europa, sia e nos Estados
Unidos (Mukhopadhyay, 2000; Cassel et al., 2007; 2008).

4.4 Vantagens da extrao com fluido supercrtico

A extrao em meio supercrtico, alm de proporcionar a extrao com um

solvente de maior poder de solvatao em relao aos solventes lquidos, possui diversas
outras vantagens em relao s tcnicas convencionais de extrao. Talvez a principal
delas seja a possibilidade de ajuste das variveis do processo, a exemplo da temperatura e
presso, o que leva a alteraes nas propriedades fsico-qumicas do solvente utilizado,
como densidade, difusividade e viscosidade. Apesar do CO2 ser um solvente de baixa
polaridade, seu poder solvente e sua seletividade variam consideravelmente com a
densidade. Assim, a extrao supercrtica permite uma adequao das condies de
extrao de acordo com as necessidades especficas das substncias a serem extradas,
assim como o fracionamento de extratos (Mukhopadhyay, 2000; Abbas et al., 2008).

Outro aspecto muito explorado quando se trata das vantagens da extrao em

meio supercrtico o seu status de tecnologia limpa. O solvente mais comumente
utilizado, o dixido de carbono, uma substncia inerte, no inflamvel, que no agride o
ambiente e geralmente considerado seguro (GRAS generally regarded as safe), que ao
trmino do processo de extrao volatilizado, uma vez que um gs em condies
ambientes (Jarvis e Morgan, 1997; Bhardwaj et al., 2010).

4.5 Limitaes da extrao com fluido supercrtico

A principal limitao da tcnica de extrao supercrtica o alto custo do

investimento inicial do equipamento, sendo normalmente apontada como a razo pela
qual ainda no existem plantas industriais na Amrica Latina. A necessidade de
desenvolvimento e otimizao de mtodos tambm pode ser considerada como um fator
limitante. Assim, a utilizao da extrao supercrtica indicada apenas quando o
produto final possui alto valor agregado (Maul et al., 1996; Prado et al., 2010). Apesar
disso, alguns estudos tm revelado a viabilidade econmica da extrao supercrtica na
obteno de extratos de plantas medicinais e aromticas (Pereira e Meireles, 2007;
Mezzomo et al., 2011).

4.6 Parmetros que influenciam no processo de extrao supercrtica

A seletividade do processo de extrao supercrtica, ou seja, a extrao dos

compostos de interesse presentes no material vegetal, com um rendimento adequado, sem
a co-extrao de compostos indesejveis, depende de diversos fatores. Alm do tipo de
solvente utilizado no processo e da presena de co-solventes, pode-se destacar:
a) densidade: a propriedade responsvel pela capacidade solvente dos fluidos
supercrticos, sendo alterada por mudanas na presso e temperatura do sistema,
especialmente na regio prxima ao ponto crtico (Rosa et al., 2009);
b) presso e temperatura: em geral, um aumento na presso a temperatura constante
causa um aumento na densidade do fluido supercrtico, elevando assim o seu
poder solvente.
J o efeito da temperatura na densidade mais complexo. De maneira geral, pode-
se afirmar que, a presso constante, um aumento na temperatura leva a uma
diminuio na densidade do solvente supercrtico. Esse efeito, no entanto, no
linear. Mudanas na temperatura, alm de influenciarem na densidade do solvente,
tambm influenciam na presso de vapor e na energia cintica das molculas de
soluto. Em temperaturas prximas do ponto crtico, o efeito da diminuio da
densidade do solvente supercrtico mais pronunciado. A variao da densidade
do CO2 supercrtico em funo da presso e temperatura pode ser visualizada na
figura 3 (Rosa et al., 2009; Pereira e Meireles, 2010);
 Densidade do CO2 (g/mL)

Presso (bar)

Figura 3. Variao da densidade do CO2 em condies supercrticas e prximas ao ponto crtico (adaptado
de Bevan e Marshal, 1994).

c) vazo do solvente: geralmente, um aumento na vazo do solvente supercrtico

causa um aumento na capacidade de extrao. Entretanto, em alguns casos foi
observado que, para valores maiores de vazo do solvente, o tempo de contato
entre o soluto e o solvente, necessrio para que houvesse a saturao do solvente
com o soluto, acabou sendo insuficiente (Pereira e Meireles, 2010);
d) propriedades do soluto: algumas caractersticas do soluto influenciam diretamente
a sua solubilidade no fluido supercrtico. Em geral, quanto menor o peso
molecular, a polaridade e a presso de vapor do soluto, maior ser sua
solubilidade no CO2 supercrtico (Pereira e Meireles, 2010);
e) tamanho de partcula do material vegetal: em geral, a taxa de extrao aumenta
com a diminuio do tamanho de partcula da matriz slida, uma vez que ocorre
um aumento da rea disponvel para de transferncia de massa (Cassel et al.,
2008; Pereira e Meireles, 2010);
f) umidade do material vegetal: na maioria dos casos, a gua presente na matriz
vegetal compete com o soluto para interagir com o solvente, diminuindo assim o
rendimento do processo. Por esta razo, a secagem do material vegetal
recomendada. No entanto, em alguns casos, a presena de gua necessria para
permitir a interao do solvente com o soluto, como na extrao de cafena de
gros de caf verde, a qual ser discutida adiante (Pereira e Meireles, 2010).
5. PARTE 2: APLICAES DA EXTRAO SUPERCRTICA NA OBTENO
DE PRODUTOS NATURAIS

A extrao supercrtica de extratos vegetais e produtos naturais representa uma

das principais aplicaes na rea de fluidos supercrticos, sendo tambm a mais estudada.
A obteno da cafena a partir dos gros de caf foi a primeira aplicao em larga escala
da extrao com fluido supercrtico, sendo patenteada pela primeira vez no incio dos
anos 70 (Ramalakshmi e Raghavan, 1999). A maioria dos trabalhos encontrados na
literatura refere-se extrao de metablitos secundrios tais como compostos fenlicos,
alcalides, incluindo as metilxantinas, e leos essenciais, incluindo essncias e aromas.
Em relao aos trabalhos abordando a extrao de metablitos primrios, somente os
lipdeos so compostos de interesse para aplicaes de tcnicas de extrao supercrtica,
uma vez que polissacardeos so molculas muito polares e com peso molecular muito
elevado para serem extradas com o CO2 supercrtico.

5.1 Compostos fenlicos

Os compostos fenlicos constituem uma classe de produtos naturais bastante

diversificada, apresentando como caracterstica comum a presena de pelo menos um
anel aromtico, no qual ao menos um hidrognio substitudo por um grupamento
hidroxila livre ou outra funo derivada, como ster ou heterosdeo. Diversos grupos de
metablitos secundrios vegetais, como cidos fenlicos, cumarinas, xantonas,
flavonides e antocianidinas so classificados como compostos fenlicos, assim como os
polmeros taninos e lignanas (Bruneton, 2001; Carvalho et al., 2007). O interesse nessa
classe de compostos tem aumentado consideravelmente devido capacidade antioxidante
apresentada por estes (Daz-Reinoso et al., 2006; Stalikas, 2007).

Compostos fenlicos em geral so molculas muito instveis, sendo facilmente

oxidveis e suscetveis degradao. Os principais fatores que podem desencadear sua
degradao so temperaturas elevadas, valores de pH extremos e a presena de luz e
oxignio. A extrao com fluido supercrtico representa uma alternativa para a obteno
de compostos fenlicos, uma vez que proporciona a obteno de extratos relativamente
limpos, ou seja, sem a presena de acares, clorofilas e pigmentos, em temperaturas
relativamente baixas, o que garante a estabilidade destes (Stalikas, 2007; Marstica
Jnior et al., 2010).

Para a extrao supercrtica de compostos fenlicos, geralmente se faz uso de

presses mais elevadas, faixa de 150 a 450 bar, ou a adio de co-solventes polares.
Nesse caso, so empregadas presses um pouco menores, na faixa de 100 a 350 bar.
Entretanto, um aumento na presso pode resultar em uma menor seletividade. Em relao
temperatura, normalmente so empregadas temperaturas mais amenas, na faixa de 35 a
60 C, com o objetivo de evitar a degradao trmica destes. Tambm se tem empregado
o uso de co-solventes, como metanol e etanol. (Daz-Reinoso et al., 2006; Rosa et al.,
2009; Marstica Jnior et al., 2010; Pereira e Meireles, 2010). A extrao supercrtica de
duas espcies vegetais de interesse farmacutico, as sementes de uva (Vitis vinifera) e a
erva-de-So-Joo (Hypericum perforatum), so discutidas seguir.

5.1.1 Extrao supercrtica de compostos fenlicos presentes na semente de uva

A extrao com fluido supercrtico dos compostos fenlicos presentes nas

sementes de uva (Vitis vinifera) tem sido estudada. A semente de uva um subproduto da
produo industrial de vinho e suco de uva, sendo muitas vezes utilizada como matria-
prima na indstria alimentcia, cosmtica e farmacutica (Molero Gmez et al., 1996;
Yilmaz et al., 2011). Em relao composio qumica, a semente de uva uma matriz
complexa composta por aproximadamente 40% de fibras, 16% de leo, 11% de protenas
e 7% de compostos fenlicos (Murga et al., 2000). Os compostos fenlicos presentes na
semente de uva, como cidos fenlicos e proantocianidinas (taninos condensados), tm
demonstrado importante atividade antioxidante (Fiori, 2007; Spranger et al., 2008).

A extrao supercrtica das sementes de uva utilizando o CO2 puro como fluido
extrator resulta na obteno dos compostos lipoflicos somente. Para a extrao
supercrtica dos compostos fenlicos desta mesma matriz, se tem empregado a extrao
com CO2 supercrtico puro no pr-tratamento do material, visando retirada das
substncias lipoflicas, antes da extrao com CO2 contendo assim como a adio de
pequenas quantidades de modificador orgnico, uma vez que o uso deste acarreta na
extrao do leo concomitantemente com os compostos fenlicos (Marstica Jnior et al.,
2010). Palma e Taylor (1999) realizaram o fracionamento dos compostos de interesse
presentes em sementes de uva. Em um primeiro momento, o material vegetal foi
submetido extrao com CO2 supercrtico puro, a presso de 450 bar e temperatura de
35 C, resultando na obteno de um extrato contendo todos compostos de menor
polaridade. A partir do mesmo material vegetal, utilizando CO2 e metanol a 20%, nas
mesmas condies da primeira extrao, foi obtido um extrato contendo compostos mais
polares, onde foram identificados o cido fenlico cido glico e os monmeros de
proantocianidinas catequina e epicatequina.

Murga et al. (2000) aplicaram a extrao por fluido supercrtico em sementes de

uvas das quais o leo j havia sido pr-extrado por processo industrial, avaliando os
efeitos da variao da concentrao de co-solvente e da presso empregada. Utilizou-se
etanol como co-solvente nas concentraes de 5, 10 e 15% (v/v), a presses de 200 e 300
bar e temperatura de 40C, onde foram extrados os cidos fenlicos cido glico e cido
protocatquico e os monmeros de proantocianidinas catequina e epicatequina.

5.1.2 Extrao supercrtica de compostos fenlicos presentes em espcies do

gnero Hypericum

Fitoterpicos contendo extratos de Hypericum perforatum (Guttiferae), uma planta

nativa da Europa e sia, conhecida como erva-de-So-Joo, so amplamente utilizados
no tratamento da depresso leve a moderada. Apesar da atividade antidepressiva de H.
perforatum ter sido inicialmente atribuda s naftodiantronas hipericina e pseudo-
hipericina, evidncias experimentais e clnicas tm demonstrado que esta ao teraputica
dependeria de um sinergismo entre algumas classes de compostos fenlicos presentes na
planta, dentre eles os derivados do floroglucinol hiperforina e ad-hiperforina, os
flavonides e as xantonas (Heinrich et al., 2004; Mennini e Gobbi, 2004)

A extrao supercrtica dos compostos fenlicos de H. perforatum tem sido

estudada. Dimitrieska-Stojkovic e Zdravkovski (2003) realizaram a extrao com CO2
supercrtico em escala analtica dos flavonides quercetina e rutina a partir das partes
ares de H. perforatum, empregando presses na faixa de 93 a 383 bar, temperaturas de
40 C, 50 C e 60 C, tempo de extrao esttica de 30 minutos, tempo de extrao
dinmica de 60 minutos e utilizando metanol na concentrao de 15% como modificador
polar. A condio em que se obteve um maior rendimento de extrao para estes
flavonides foram presso de 332 bar e temperatura de 50 C, onde o rendimento para a
quercetina (96%) foi maior em relao ao rendimento de extrao para a rutina (74%).
Este resultado pode ser explicado pelo fato da rutina ser heterosdeo, e, portanto, possuir
maior polaridade e, consequentemente, menor solubilidade no CO2 supercrtico em
relao quercetina, uma aglicona.

Na espcie H. perforatum os derivados do floroglucinol hiperforina e ad-

hiperforina, representam as substncias ativas mais abundantes. Nas folhas e flores, por
exemplo, o contedo de hiperforina na droga vegetal seca pode chegar a 4%.
Diferentemente dos cidos fenlicos e flavonides, so compostos fenlicos que, por
apresentarem uma estrutura composta por um esqueleto floroglucinol substitudo por
cadeias de isopreno, apresentam carter lipoflico, mostrando- se assim adequados para a
extrao com CO2 supercrtico puro (Rmpp et al., 2004). So substncias facilmente
degradveis, suscetveis oxidao por ar e luz e at mesmo instveis na maioria dos
solventes orgnicos, o que tambm justifica a obteno destes utilizando tcnicas de
extrao supercrtica (Medina et al., 2006).

Rmpp et al. (2004) realizaram a otimizao da extrao supercrtica de

hiperforina a partir das folhas de H. perforatum em escala piloto, onde foram testadas as
presses de 90, 120 e 150 bar, temperaturas de 40 e 50 C e tempo de extrao de 1, 3 e
5h. Foi verificado que o maior rendimento de hiperforina, correspondente a uma
concentrao de 35,5% no extrato obtido, ocorreu na presso de 90 bar e temperatura de
40 C. Catchpole et al. (2005) extraram a hiperforina a partir das folhas de H.
perforatum, utilizando CO2 em condies subcrticas (70 bar e 20 C) e supercrticas (300
bar e 40 e 50 C). Cui e Ang (2002) realizaram a extrao em escala analtica de
hiperforina e ad-hiperforina a partir das folhas e flores de H. perforatum de maneira
seletiva, ou seja, sem a co-extrao de naftodiantronas e flavonides. A condio tima
de extrao foi determinada para a presso de 380 bar, a 50 C, e tempo de extrao de 90
minutos. Glisic et al. (2008) tambm extraram seletivamente a hiperforina e ad-
hiperforina a partir das folhas de H. perforantum, empregando presses de 100, 150 e 200
bar e temperaturas de 40 e 50 C. interessante notar que, mesmo tratando-se da mesma
espcie, diferentes autores empregaram condies de temperatura e presso muito
distintas na extrao supercrtica da hiperforina. Diversos fatores podem explicar tais
resultados, como a influncia de outros parmetros da operao e fatores ligados matriz
vegetal, como tamanho de partcula e contedo de umidade.

A extrao supercrtica de espcies do gnero Hypericum nativas do sul do Brasil

tambm tem sido estudada. Cargnin et al. (2010) realizaram a extrao com CO2
supercrtico das partes areas de H. polyanthemum, visando recuperao do derivado do
floroglucinol uliginosina B e dos benzopiranos HP1, HP2 e HP3. Utilizaram-se presses
de 90, 120, 150 e 200 bar e temperaturas de 40, 50 e 60 C, onde se determinou a
temperatura de 50 C como a melhor condio para a extrao dos benzopiranos e da
uliginosian B. Para a recuperao da uliginosina B a temperaturas mais elevadas foram
necessrias presses mais elevadas, devido ao seu alto peso molecular. Barros et al.
(2010) empregou a extrao com CO2 supercrtico nas folhas de H. carinatum, extraindo
os derivados de benzofenona carifenona A e carifenona B e o derivado do floroglucinol
uliginosina B, onde as condies timas de extrao para a obteno destes compostos
foram determinadas para a presso de 90 bar e temperatura de 40 C.

5.2 Alcalides

Os alcalides constituem um vasto grupo de metablitos secundrios com grande

diversidade estrutural, podendo ser definidos como compostos orgnicos cclicos de
origem natural contendo um nitrognio em estado de oxidao negativo e com
distribuio limitada entre os organismos (Pelletier, 1983). Por possurem diversas
atividades biolgicas de interesse farmacutico, os alcalides tm sido considerados
compostos-alvo para o desenvolvimento de metodologias de extrao por fluido
supercrtico (Kim et al., 2001). Apesar disso, muitos alcalides so demasiadamente
polares para serem suficientemente extrados pelo CO2 supercrtico puro. Alm disso, a
maioria dos alcalides est presente nos tecidos vegetais na forma de sal, a qual mais
solvel em solventes polares (Choi et al., 1999a).

Para contornar as limitaes da extrao de alcalides com CO2 supercrtico, co-

solventes polares tm sido empregados no intuito de aumentar a polaridade do CO2 e,
assim, aumentar a solubilidade dos alcalides na forma de sal no solvente supercrtico.
Metanol e etanol so os solventes mais utilizados com esta finalidade. Os alcalides
oxindlicos das razes de Uncaria tomentosa (unha-de-gato), mitrafilina e rincofilina,
foram isolados atravs de extrao por CO2 supercrtico por Lopez-Avila et al. (1997),
utilizando como co-solvente metanol 10%. Os parmetros empregados foram 253,3 bar
de presso, temperatura de 60 C e tempo de extrao de 30 minutos.

Colchicina, 3-demetilcolchicina e colchicosdeo foram extrados das sementes de

Colchicum autumnale empregando metanol como modificador polar, onde a
concentrao de 3% resultou em um maior rendimento de extrao, alm da presso de
247 bar, temperatura de 35 C, tempo de extrao esttica de 25 minutos e tempo de
extrao dinmica de 30 minutos. O mtodo de extrao por fluido supercrtico foi
comparado com o mtodo convencional de extrao com solventes orgnicos, onde os
dois mtodos apresentaram rendimentos semelhantes. No entanto, a extrao por fluido
supercrtico demonstrou ser mais rpida e apresentou melhor reprodutibilidade (Ellington
et al., 2003).

Pereira et al. (2004) extraram os alcalides indlicos coronaridina e voacangina

das partes areas de Tabernaemontana catharinensis (Apocynaceae), utilizando CO2
supercrtico contendo etanol 4,6%, onde as condies timas de extrao encontradas
foram 45 C e 250 bar. Os alcalides quinolizidnicos matrina e oximatrina, presentes nas
razes de Sophora flavescens (Leguminosae), uma planta da medicina tradicional chinesa,
foram isolados utilizando CO2 supercrtico com um fluxo de 2,0 L/min e etanol 75% em
gua com um fluxo de 0,04 mL/min, onde as condies que resultaram em um melhor
rendimento de extrao foram 250 bar e 50 C (Ling et al., 2007).

O mtodo de extrao de alcalides por fluido supercrtico utilizando

modificadores polares possui, no entanto, alguns inconvenientes, como a limitao da
percentagem de modificador adicionada e a possibilidade da presena de solvente
orgnico residual no produto final, fato que levou ao desenvolvimento de outros mtodos
de extrao de alcalides por fluido supercrtico (Kim et al., 2001). Choi e colaboradores
(1999a, 1999b, 2002) verificaram que as bases livres de alguns alcalides se mostraram
solveis no CO2 supercrtico puro, at mesmo em condies brandas de extrao (100 bar
e 40 C). Entretanto, estes mesmos compostos no foram extrados do material vegetal, o
que pode ser atribudo ao fato de que a maioria dos alcalides existe na forma de sal no
material vegetal. Assim, o uso de modificadores polares contendo substncias com
carter bsico foi investigado por este grupo. A extrao dos alcalides tropnicos
hiosciamina e escopolamina das razes e partes areas de Scopolia japonica (beladona
japonesa) foi realizada com CO2 puro e CO2 modificado com metanol, gua, dietilamina
10% (v/v) em metanol, dietilamina 10% (v/v) em gua, nas conc. de 1, 5 e 10% (v/v). A
mistura de dietilamina a 10% em metanol, na concentrao de 10%, a uma presso de 340
bar e temperatura de 60 C, aumentou consideravelmente o rendimento da extrao
desses alcalides, em relao extrao usando somente modificadores polares (Choi et
al., 1999b).

Os mesmos modificadores foram testados na extrao da efedrina e seus derivados

metilefedrina, norefedrina e pseudoefedrina a partir das partes areas de Ephedra sinica,
nas condies de extrao de 340 bar e 80 C. Com exceo da metilefedrina, a adio de
gua demonstrou no aumentar o rendimento de extrao dos alcalides, o que pde ser
atribudo baixa miscibilidade da gua no CO2 supercrtico. J o efeito da adio de
metanol resultou em pequenos aumentos na recuperao dos alcalides. A adio de
dietilamina a 10% em metanol ou gua resultou em aumentos significantes no rendimento
de extrao de todos os alcalides, onde os melhores rendimentos tambm foram
encontrados para a mistura de dietilamina a 10% em metanol na concentrao de 10%
(Choi et al., 1999a).

Para a extrao do alcalide indlico vimblastina a partir das partes areas de

Catharanthus roseus utilizou-se CO2 puro e CO2 modificado com metanol, dietilamina
em metanol (10%, v/v) e trietilamina em metanol (10%, v/v), nas concentraes de 1, 5,
10 e 20% (v/v). O rendimento de extrao foi maior para a mistura trietilamina em
metanol (10%, v/v) na concentrao de 20% (Choi et al., 2002).

5.2.1 Metilxantinas

As metilxantinas constituem o grupo de alcalides provavelmente mais conhecido

e utilizado popularmente, uma vez que so constituintes de espcies de plantas
largamente consumidas como o caf (Coffea arabica), o ch-da-ndia (Camellia sinensis)
e o guaran (Paullinia cupana) (Heinrich et al., 2004). A extrao por fluido supercrtico
de alcalides teve incio com a extrao da cafena de sementes de caf verde, em
processos industriais de descafeinao, onde atualmente ainda extensamente aplicada
(Taylor, 1996; Mukhopadhyay, 2000). As metilxantinas, por serem derivados do
metabolismo de bases pricas, e no dos aminocidos, como a maioria dos alcalides,
constituem um grupo de alcalides com algumas peculiaridades, como o carter anftero
e a solubilidade em gua quente e em solventes clorados (Bruneton, 2001).

A cafena, devido s suas propriedades teraputicas, como a atividade estimulante

do sistema nervoso central e a atividade vasoconstritora cerebral, o princpio ativo de
diversos produtos farmacuticos, cosmticos e alimentos funcionais. Teofilina e
teobromina, metilxantinas tambm presentes no caf e no ch-da-ndia, assim como em
outras plantas utilizadas devido sua ao estimulante, como as folhas de erva-mate (Ilex
paraguariensis) e as sementes de cacau (Theobroma cacao), tambm so empregadas
como matrias-primas em preparaes farmacuticas. Assim, a extrao de metilxantinas
a partir destas espcies vegetais constitui um processo economicamente atrativo para a
obteno destes compostos. Por outro lado, produtos desprovidos de metilxantinas, como
o caf descafeinado, atraem interesse dos consumidores que no podem ingerir cafena,
uma vez que seu consumo contraindicado em casos de doenas cardiovasculares
severas, lceras e insnia (Saldaa et al., 2002; Rates, 2007; Cassel et al., 2010).

A descafeinao do caf realizada tradicionalmente utilizando extrao slido-

lquido, na qual os solventes mais utilizados so a gua e alguns solventes orgnicos,
como acetato de etila e diclorometano. O diclorometano extrai seletivamente a cafena,
preservando no material extrado acares, peptdeos e outras substncias flavorizantes.
No entanto, alm de possuir propriedades carcinognicas, este solvente pode causar danos
ambientais, como danos camada de oznio. A extrao com acetato de etila,
inadequadamente referida como um processo natural, visto que um composto que
ocorre naturalmente em algumas frutas, possui todos os inconvenientes j citados da
extrao por solventes (Rates, 2007; Ramalakshmi e Raghavan, 1999).

O mtodo mais seletivo para remoo da cafena dos gros de caf, sem a
remoo de substncias que conferem odor e sabor, a extrao com CO2 supercrtico. O
processo de extrao supercrtica da cafena foi patenteado pela primeira vez no incio
dos anos 70, sendo desde ento utilizado para descafeinao de caf a nvel industrial. O
processo geralmente precedido por uma etapa de umidificao, onde as sementes de
caf so misturas com gua, de modo que seu contedo de umidade levado a cerca de
50%. Essa etapa essencial no processo de extrao da cafena, uma vez que esta se
encontra nos gros de caf complexada com cido clorognico e a gua atua liberando a
cafena em sua forma livre. Tambm pode ser empregado como fluido extrator o CO2
supercrtico saturado com gua. Em geral, os parmetros utilizados so presso de cerca
de 300 bar e temperatura de aproximadamente 70 C. No separador, a cafena removida
do CO2 utilizando gua. A gua contendo a cafena extrada ainda passa por um processo
de osmose reversa, onde a cafena concentrada (Taylor, 1996; Ramalakshmi e
Raghavan, 1999).

A extrao das metilxantinas presentes na erva-mate tem sido estudada. Saldaa et

al. (1999) extraram a cafena, teofilina e teobromina das folhas de erva-mate em escala
analtica e determinaram a solubilidades destas metilxantinas no CO2 supercrtico. Os
resultados indicaram uma solubilidade da cafena no CO2 muito maior em relao s
solubilidades da teofilina e teobromina (aproximadamente 1350,0 mg/kg para a cafena,
9,0 mg/kg para a teofilina e 3,0 mg/kg para a teobromina), o que foi atribudo presena
de um grupamento metila a mais na molcula da cafena, o que a torna mais apolar e,
portanto, mais solvel no fluido supercrtico. Cassel et al. (2010) realizaram a extrao
com CO2 supercrtico em escala piloto das metilxantinas presentes nas folhas de erva-
mate, empregando presses de 120, 150, 170 e 200 bar e temperaturas de 40, 50, 60 e 70
C. A condio onde se obteve a concentrao mxima de cafena nos extratos foi em 150
bar e 50 C, onde 33,6% (p/p) da cafena foi extrada a partir da folhas de I.
paraguariensis.
Apesar do CO2 supercrtico ser bastante seletivo para a cafena, a solubilidade
desta neste solvente mais baixa do que em solventes orgnicos, o que resulta na
necessidade de uso de grandes quantidades deste gs e consequente aumento nos custos
operacionais. A adio de co-solventes tem sido estudada a fim de aumentar a
solubilidade da cafena no CO2 supercrtico. Kopcak e Mohamed (2005) determinaram
experimentalmente a solubilidade da cafena no CO2 supercrtico contendo 5 e 10% de
etanol e 5% de isopropanol, a temperaturas de 50 e 70 C e presses de 150 a 300 bar,
onde verificou-se que a adio de co-solventes contribui substancialmente para o
aumento da solubilidade da cafena, o que pode ser explicado pelo aumento das
interaes intermoleculares entre soluto e solvente. A presena do etanol proporciona a
ocorrncia de ligaes de hidrognio entre as molculas de cafena e os grupamentos
hidroxila do etanol. Assim, a solubilidade da cafena aumenta com a quantidade de etanol
adicionada como co-solvente no processo de extrao com CO2 supercrtico.
 Saldaa et al. (2002) observaram que a modificao do solvente supercrtico com
diferentes quantidades de etanol resultou em um aumento na concentrao de cafena,
presente em extratos de sementes de guaran e de folhas de erva-mate, e de teobromina,
no extrato de sementes de cacau, obtidos por extrao supercrtica. A quantidade de
cafena extrada das sementes de guaran e das folhas de erva-mate utilizando CO2
supercrtico contendo 10% de etanol foi duas vezes maior em relao extrao
utilizando CO2 saturado com gua, enquanto a quantidade de teobromina extrada usando
a mesma mistura de solvente foi dez vezes maior em relao extrao com CO2
saturado com gua.

5.3 leos volteis e compostos relacionados

Os leos volteis, tambm denominados leos essenciais, podem ser definidos

como produtos volteis de origem vegetal obtidos por processo fsico, como destilao
por arraste a vapor ou outro mtodo adequado (BRASIL, 2007). O termo leo voltil
uma definio fsica, ou seja, define um grupo de substncias que apresenta volatilidade,
diferentemente das definies de grupos de metablitos vegetais. Em relao sua
composio, os leos volteis so misturas complexas de metablitos secundrios de
baixo peso molecular, volteis e lipoflicos (Simes e Spitzer, 2007). Apesar de
constiturem apenas uma pequena frao na composio total de uma planta, os
compostos presentes nos leos essenciais so os responsveis pelo aroma caracterstico
de cada material vegetal, o qual geralmente resultado de complexas interaes que
ocorrem entre um grande nmero de compostos (Reverchon, 1997; Pourmortazavi e
Hajimirsadeghi, 2007).

As classes de metablitos secundrios mais frequentemente presentes nos leos

volteis so os terpenides e os fenilpropanides. Os terpenides podem ser definidos
como um grupo de substncias de origem vegetal que so resultado da condensao de
um nmero varivel de unidades de isopreno. As unidades isoprnicas so produtos
compostos por cinco carbonos e derivados da via do mevalonato. Os compostos
terpnicos presentes nos leos volteis podem ser monoterpenos, compostos por 10
tomos de carbono, e sesquiterpenos, com 15 tomos de carbono, os quais podem ser
hidrocarbonados ou oxigenados. Reaes secundrias originam diversas molculas
funcionalizadas, como lcoois, aldedos, cetonas, fenis, steres e teres (Bruneton, 2001;
Simes e Spitzer, 2007). J os fenilpropanides so compostos fenlicos contendo uma
cadeia lateral de trs tomos de carbono ligada a um anel aromtico, formados a partir do
cido cinmico. Reaes enzimticas como as de reduo, oxidao e ciclizao desta
cadeia lateral do origem a compostos como propenilbenzenos, aldedos aromticos e
cumarinas (Bruneton, 2001; Simes e Spitzer, 2007).

O processo de extrao supercrtica de leos essenciais uma das aplicaes mais

largamente discutidas na literatura abordando fluidos supercrticos, sendo considerado
um campo promissor para aplicaes industriais desta tcnica (Reverchon, 1997). A
maioria dos inconvenientes encontrados nos processos convencionais de obteno de
leos volteis, como degradao trmica e hidrlise, o que resulta na modificao da
composio qumica dos leos volteis, contornada utilizando o processo de extrao
com CO2 supercrtico (Cassel et al., 2000; Mukhopadhyay, 2000).

A extrao supercrtica de leos volteis e compostos relacionados tm sido

aplicada na obteno de leos volteis de plantas de interesse farmacutico e na extrao
de aromas e fragrncias para emprego na indstria de alimentos, cosmticos e perfumaria.
Alguns trabalhos de reviso abordando o assunto tm sido publicados, onde
levantamentos das espcies vegetais estudadas e das condies aplicadas no processo de
extrao foram realizados (Reverchon e De Marco, 2006; Pourmortazavi e
Hajimirsadeghi, 2007; Pereira e Meireles, 2010). Os valores das condies de presso
normalmente empregadas se situam na faixa de 80 a 200 bar, enquanto as temperaturas
empregadas esto na faixa de 30 a 50 C. Os rendimentos das extraes com CO2
supercrtico de plantas aromticas geralmente so mais altos em relao aos de mtodos
de hidrodestilao e destilao por arraste a vapor, resultando na obteno de um extrato
semelhante s oleoresinas (extratos obtidos a partir da extrao com solventes orgnicos
de plantas contendo leos essenciais). Isso se deve ao fato de que a extrao com CO2
supercrtico resulta na co-extrao de substncias no volteis, como compostos
terpnicos de alto peso molecular (diterpenos e triterpenos), alguns lipdeos e parafinas
(compostos com frmula geral CnH2n+2, onde 20 n 40), constituintes das ceras
epicuticulares localizadas na superfcie do material vegetal (Pourmortazavi e
Hajimirsadeghi, 2007).
 Entretanto, resultados experimentais tm mostrado que o processo de obteno
dos componentes do leo essencial por extrao supercrtica pode ser otimizado de modo
a se extrair somente as substncias volteis. Os compostos de maior peso molecular
possuem maior solubilidade no CO2 supercrtico quando este possui densidades mais
elevadas. Assim, em condies de temperaturas de 40 a 50 C e presses menores que
100 bar, o que corresponde a valores de densidade do CO2 menores que 0,6 g/cm3, os
compostos no volteis, com exceo das parafinas, no so co-extrados com os
componentes volteis. Os compostos parafnicos, pelo fato de estarem localizados na
superfcie do material vegetal, e apesar de possurem uma solubilidade relativamente
baixa no CO2 supercrtico, so co-extradas com os compostos volteis em qualquer
condio de extrao pelo simples mecanismo de lavagem. Por outro lado, terpenos e
outros componentes volteis, localizados em estruturas internas do vegetal, como
glndulas secretoras, necessitam passar por complexos mecanismos de transferncia de
massa para serem extrados (Reverchon, 1997; Reverchon e De Marco, 2006).

Apesar disso, possvel separar as ceras epicuticulares dos extratos pela induo
da sua precipitao seletiva em dois ou mais separadores operando em srie. Como as
parafinas so insolveis em temperaturas na faixa de -5 a +5 C, e os compostos volteis
mantm uma boa solubilidade nestas condies, as condies de operao no primeiro
separador podem ser selecionadas de modo a promover a supersaturao e precipitao
dos compostos parafnicos, enquanto o leo essencial recuperado no segundo separador
(Reverchon, 1997; Reverchon e De Marco, 2006). Utilizando esta tcnica, diversos
estudos foram realizados resultando na separao das ceras epicuticulares do leo
essencial de vrias espcies vegetais, como Salvia officinalis, Syzygium aromatieum
(cravo-da-ndia), Foeniculum vulgare (funcho) e Mentha spicata (hortel-verde), entre
outras (Reverchon e Marrone, 1997; Reverchon et al. 1999a; 1999b; Marongiu et al.,
2001).

Dentre as espcies de interesse farmacutico para as quais a extrao supercrtica

dos componentes volteis tem sido estudada, destaca-se a camomila (Chamomilla
recutita), cujo leo essencial apresenta em sua composio alfa-bisabolol e camazuleno,
sendo este ltimo formado a partir da matricina durante o processo de destilao por
arraste a vapor, em uma reao catalisada pelo calor. Scalia et al. (1999) realizaram a
extrao supercrtica dos captulos florais de camomila. A condio de 90 bar e 40 C
resultou em um maior rendimento de extrao, onde o extrato obtido apresentou em sua
composio uma percentagem maior de alfa-bisabolol e matricina em relao ao mtodo
de destilao por arraste a vapor. Alm disso, o extrato apresentou colorao amarela
escura, indicando assim que no ocorreu degradao trmica da matricina a camazuleno,
o qual responsvel pela colorao azul do leo essencial de camomila obtido atravs de
destilao por arraste a vapor. No entanto, resultou na co-extrao de ceras, as quais
representaram cerca de 13% do extrato.

Terpenides de maior peso molecular, como os diterpenos e triterpenos,

compostos de 20 e 30 tomos de carbono, respectivamente, no esto presentes nos leos
volteis, no entanto, apresentam importantes atividades biolgicas (Heinrich et al., 2004;
Meireles, 2009). A obteno destes compostos atravs de extrao supercrtica tem sido
estudada. O alecrim (Rosmarinus officinalis) uma planta tracionalmente utilizada na
medicina popular e como condimento, cujos extratos e leo essencial tm demonstrado
possuir atividade antioxidante e antimicrobiana (Jiang et al., 2011). Os diterpenos
fenlicos presentes no alecrim, como o carnosol e o cido carnosico, tm sido
associados a estas atividades biolgicas. Cavero et al. (2005) realizaram a extrao com
CO2 supercrtico das folhas de alecrim empregando presses na faixa de 150 a 300 bar,
temperatura de 40 a 60 C e utilizando o CO2 puro e CO2 contendo etanol nas
concentraes de 4,0 e 7,0%. Carvalho Jr. et al. (2005), utilizando temperaturas de 30 e
40 C, presses de 100 a 300 bar e tempo de extrao de 3h, elaboraram curvas globais de
extrao (overall extraction curves) para a extrao das folhas de alecrim com CO2
supercrtico. Os rendimentos globais de extrao, bem como a concentrao de cido
carnosico nos extratos, aumentaram juntamente com o aumento da presso para ambas
as temperaturas, uma vez que o aumento na presso provoca um aumento nas interaes
soluto-solvente.

Os limonides, triterpenides altamente oxigenados presentes em frutos da famlia

Rutaceae, constituem um grupo proeminente de metablitos secundrios, os quais tm
demonstrado possuir diversas atividades biolgicas, como atividade anticncer, redutora
do colesterol e antiviral. O sabor amargo das frutas ctricas atribudo a limonides na
forma de agliconas, como a limonina, enquanto as atividades biolgicas tm sido
atribudas aos limonides na forma glicosdica (Hasegawa et al., 2000; Manners, 2007).
A extrao com CO2 supercrtico tm sido empregada na remoo desses compostos em
subprodutos da produo industrial de suco de frutas ctricas. Yu et al. (2006; 2007)
extraram a limonina 17--D-glicopiranosdeo do leo de bagao (molasse) e das
sementes de grapefruit (Citrus paradisi), onde o maior rendimento de extrao (0,61 e
0,62 mg/g) foi obtido na presso de 483 e 414 bar, temperatura de 50 e 60 C,
empregando etanol como co-solvente nas concentraes de 10% e 30% e tempo de
extrao de 40 minutos.

5.4 Lipdeos

Os metablitos primrios constituem um grupo de macromolculas amplamente

utilizadas como fonte de energia por todos os organismos, que incluem os lipdeos,
protenas e acares. Os lipdeos constituem uma classe de compostos provenientes do
metabolismo celular primrio, podendo ser definidos por suas caractersticas de
insolubilidade em gua, solubilidade em solventes orgnicos e no-volatilidade. O
conjunto de lipdeos presentes em um material vegetal denominado leo fixo, em
contraponto aos leos volteis (Bruneton, 2001; Moyna e Heinzen, 2007).

Os leos fixos, os quais geralmente esto localizados nas sementes, so compostos

por uma mistura de triglicerdeos e cidos graxos livres associados com outros
constituintes em menor quantidade, como esteris, ceras, pigmentos, protenas e alguns
compostos volteis, os quais conferem o sabor e odor dos leos. Devido presena
dessas outras classes de substncias, os leos vegetais em geral passam por processos de
refinamento para que se tornem adequados para consumo humano e para aumento do
valor nutricional, como no caso do aumento da concentrao de cidos graxos essenciais
(Del Valle e Aguillera, 1999; Mukhopadhyay, 2000). O uso da extrao com fluido
supercrtico largamente difundido em processos industriais de extrao, fracionamento
e refinamento de leos vegetais comestveis ou para uso em cosmticos. A extrao
supercrtica constitui uma alternativa promissora em relao s tcnicas industriais
tradicionais baseadas na extrao de leos vegetais com solventes orgnicos, como o
hexano (Sahena et al., 2009).

A extrao com CO2 supercrtico tem sido extensivamente empregada em

experimentos de extrao do leo de sementes de diversas espcies. Em relao aos
parmetros do processo, geralmente o CO2 supercrtico puro empregado com presses
na faixa de 200 a 600 bar e temperaturas de 35 a 70 C. Alguns exemplos de leos para
os quais a extrao com CO2 supercrtico tm sido aplicada incluem o leo de semente de
uva e o leo de amndoas doces (Prunus amygdalus), os quais encontram aplicaes na
indstria alimentcia e como matrias-primas em produtos cosmticos. O leo de
amndoas doces foi obtido Marrone et al. (1998) atravs de extrao supercrtica, onde as
condies de extrao foram presso de 350 bar a 40 C. O rendimento de extrao foi de
50% em relao massa do material vegetal submetido extrao, o qual correspondeu a
um rendimento muito prximo do obtido atravs de extrao com aparelho de Soxhlet e
hexano. O leo de semente de uva foi extrado com CO2 supercrtico por Molero-Gmez
et al. (1996), onde as condies de presso de 200 bar e temperatura de 40 C resultaram
em um rendimento de extrao de aproximadamente 7,0%, o qual se mostrou semelhante
ao da extrao com hexano, na qual rendimento de extrao foi de 7,5%.

Experimentos de extrao supercrtica de leos vegetais tambm so realizados

empregando co-solventes. Cocero e Calvo (1996) estudaram o efeito da adio de etanol,
na concentrao de at 20%, na extrao com CO2 supercrtico do leo de semente de
girassol (Helianthus annuus). As condies de presso e temperaturas empregadas foram
150 a 350 bar e 42 a 80 C. Os resultados indicaram que a solubilidade do leo de
girassol no CO2 supercrtico aumentou com a adio de etanol como modificador. Alguns
fosfolipdeos foram co-extrados com o leo, em quantidade diretamente proporcional
concentrao de etanol adicionada como co-solvente.

Os frutos de espcies de palmeiras nativas da regio amaznica, pertencentes

famlia Arecaceae, representam uma fonte abundante de leos vegetais de alto valor
nutricional (Prado et al., 2010). O leo da polpa e casca de buriti (Mauritia flexuosa) foi
extrado com CO2 supercrtico com presses de 200 e 300 bar e temperaturas de 40 e 55
C, onde obtiveram-se fraes de leo contendo carotenides e tocoferis (Frana et al.,
1999). O leo de pupunha (Guilielma speciosa) foi obtido por extrao supercrtica das
cascas e polpa dos frutos, onde se empregaram as condies de 250 bar e 50 C e 300 bar
e 35 C. Em comparao ao leo proveniente de extrao com hexano, o leo obtido por
extrao supercrtica apresentou menor contedo de cidos graxos saturados (Arajo,
2000).
6. CONCLUSO

A extrao com fluido supercrtico constitui uma tcnica promissora para

aplicao em processos de extrao, uma vez que proporciona a obteno de extratos de
maior qualidade com um solvente no txico, a baixas temperaturas e sem resduos de
solventes orgnicos. Neste trabalho foi realizada uma pesquisa bibliogrfica abordando os
princpios da tcnica de extrao com fluido supercrtico e suas aplicaes na obteno de
produtos naturais de origem vegetal de interesse para a indstria farmacutica, cosmtica
e de alimentos.

Ao final deste trabalho foi possvel compreender como as variveis do processo,

temperatura e presso, bem como o emprego de co-solventes, podem ser manipuladas de
modo a realizar a extrao seletiva dos principais grupos de produtos naturais, como
compostos fenlicos, alcalides, leos volteis e lipdeos, o que constitui uma importante
vantagem desta tcnica.

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