1017 07 Fisiologìa 2

MAESTRA
EN DIABETES MELLITUS
Posgrado
Buenos Aires - 2017
Jos Esteban Costa Gil

Doctor en Medicina
Mdico Especialista Consultor en Nutricin y Endocrinologa
Una leccin de Claude Bernard Facultad de Ciencias Mdicas, UNLP
Len Lhermitte, 1889 Posgrado de Nutricin, Universidad Favaloro
Posgrado de Endocrinologa, UNT
Presidente de la SAD, 2007 2008 Presidente de FASEN, 1999 2002
Presidente electo de ALAD para 2019-2022
Ciudadano Ilustre de la Ciudad de La Plata
MAESTRA EN DIABETES MELLITUS - 2017 UNIVERSIDAD
FAVALORO
Principios esenciales de la fisiologa y del

metabolismo celular
El organismo humano es un sistema integrado con un

alto grado de control interno, el que adems posee
A mecanismos abiertos que comunican con el medio o
entorno para mantener el equilibrio interno o homeostasis
En las clulas ocurren en forma simultnea numerosas

reacciones qumicas en una red integrada y articulada
B que es el metabolismo, con secuencias vinculadas por
intermediarios comunes que son vas metablicas
Los seres vivos son estructuras complejas, ordenadas,

diferenciadas de su medio, con propia informacin, que
C requieren de energa o molculas combustible, para
para mantener estructuras, funcin y organizacin
Gonzlez-Calvar LI. Fisiopatologa Molecular y Clnica Endocrinolgica. Lilly, Ed 1015 JE Costa Gil
FAVALORO

metabolismo celular
Los organismos multicelulares tienen diferenciacin

celular con distribucin de funciones, que conforman
D tejidos con distintos requerimientos energticos y
patrones de metabolismo caractersticos y particulares
Las actividades metablicas de los rganos se integran y

coordinan a travs de las seales hormonales que
E regulan la distribucin de precursores y sustratos de
energa
Para que un ser sobreviva, mediante la alimentacin

restituye y acumula la energa en reserva como
F glucgeno y triglicridos, que utilizar durante el ayuno
o cuando lo requiera
FAVALORO

metabolismo celular
En el ayuno el organismo utiliza los combustibles

endgenos y moviliza sustratos desde sus reservas en el
G hgado y tejidos adiposo, para oxidar hasta dixido de
carbono y agua en presencia de oxgeno
El metabolismo intermedio tiene 2 fases: anablica, de

sntesis y reductiva con consumo de energa y
H catablica, con degradacin y oxidacin en la que se
libera energa (ATP o NADH, FADH2 y NADPH)
En el ayuno el organismo cambia de combustibles

exgenos a endgenos y se alternan siempre las fases
I anablicas y catablicas. El ATP posee alto potencial de
transferencia de energa para la funcin celular
FAVALORO
Integracin, balance y regulacin

metablica. Mecanismos principales
Nutrientes en la sangre, El Sistema Nervioso
cuyo nivel se modifica Central cuyas
de acuerdo de acuerdo seales neurales
al almacenamiento y a controlan el
la utilizacin metabolismo en
forma directa o
indirecta a travs de
hormonas
HOMEOS-
TASIS
METABLICA
Las hormonas que el

Las hormonas comunican organismo utiliza para la
a los tejidos especficos el homeostasis del
estado del organismo y el metabolismo son la
aporte y la demanda o insulina, el glucagn, la
requerimiento de los
adrenalina y el cortisol
nutrientes
JE Costa Gil
FAVALORO
Regulacin hormonal del metabolismo
Anablica, promueve el almacenamiento de

INSULINA energa como glucgeno heptico y muscular.
Favorece la formacin de protenas. Inhibe la
movilizacin de molculas de energa (lisis). Es
un potente factor de crecimiento.
Produce glucosa endgena para

Principales GLUCAGON rganos, por glucogenlisis y
gluconeognesis. Moviliza cidos
reguladores grasos como fuente alternativa de
hormonales energa.
del Actan sobre receptores a y b en
msculo, adipocitos e islote en respuesta
metabolismo a estrs y moviliza energa desde
intermedio ADRENALINA depsitos. Noradrenalina por efectos
circulatorios (neurotransmisor) facilita su
llegada a los tejidos
CORTISOL Ante estrs crnico disminuyen la sensibilidad

perifrica a insulina, estimula la liplisis y
protelisis y enzimas hepticas
neoglucogenticas
JE Costa Gil
FAVALORO
Funcin del islote normal:

Regulacin de la glucosa
Secrecin de insulina (Clula
beta)
Alta
Secrecin de Glucagon (Clula

alfa)
ISLOTE
Detecta cambios
en la glucosa
sangunea
Secrecin de insulina (Clula
beta)
Baja
Secrecin de Glucagon (Clula

alfa)
La somatostatina inhibe a la insulin y al glucagon

Adaptado de Matschinsky FM et al. Endocrinology vol.1, 2 Ed.1989:1290-1303 JE Costa Gil
FAVALORO
Estructura qumica de la insulina

Datos histricos
En 1951/52 determin la
secuencia de amino
cidos de la estructura
primaria molecular de la
insulina. Fue adems, la
1 protena a la que se
reconoci su disposicin
completa
En 1967 precis la
Doroty C. Hodgkin naci
Frederick Sanger naci el conformacin espacial el 12 de mayo en 1910
13 de agosto de 1918 en
Inglaterra. Fue laureado en
de la molcula de en El Cairo, Egipto.
2 oportunidades con el insulina por medio de Tuvo una vida azarosa y
Premio Nbel en estudios de difraccin por sus trabajos en
Bioqumica inglaterra fue laureada
de raxos-X. Tambin con el Premio Nbel
recibi el Premio Nobel
JE Costa Gil
FAVALORO
Insulina
Funcin
Es una hormona de ahorro, reserva y liberacin de energa
(oxidacin) y de anabolismo y crecimiento
Promueve el depsito de substratos
como macromolculas en tejidos y
rganos
Inhibe la ruptura y el catabolismo de
macromolculas de reserva
Interviene en la conducta alimentaria
Favorece el crecimiento somtico
(sistema de seales insulina/IGF) y el
desarrollo de tejidos como la propias
clulas del islote, las neuronas, el
sistema seo y la retina, entre otros.
Tiene vida media de 4.8 min y se degrada en hgado (tambin,
aunque menos, en rin)
JE Costa Gil
FAVALORO
Descubrimiento de la produccin de las

hormonas poli peptdicas
En 1967 Donald STEINER descubri que la insulina humana se

produce como una sola cadena que denomin proinsulina y que
nicamente en el islote se separa para liberar la molcula de insulina
de 2 cadenas y un pptido que conecta o pptido-C
Fue la primera demostracin inequvoca del procesamiento
postraduccional por enzimas proteolticas de un precursor de un
polipptido a la forma funcional madura de una hormona
JE Costa Gil
FAVALORO
Biosntesis de la insulina. Proinsulina y

formacin de hormonas polipeptdicas
DONALD F. STEINER MD
Professor Emeritus in the
Departments of Medicine and
Biochemistry and Molecular
Biology at the University of
Chicago
El Maestro Emrito y miembro de la Academia de Ciencias de EEUU

(1973) Don Steiner muri el 11 de noviembre de 2014, a los 84 aos
JE Costa Gil
FAVALORO
Preproinsulina
La glucosa estimula la sntesis

Cadena A de Preproinsulina en el RER
NH2 Proinsulina ingresa al
Sitios de
Pptido de Complejo de Golgi y se
Seal
conversin
COOH
empaqueta cubierta de
clatrina para continuar la
Cadena B
formacin de insulina
La cadena peptdica nica se
escinde en el Pptido de Seal
Pptido
por una peptidasa y produce
Conector proinsulina
Proinsulina (el doble de vida
Preproinsulina es una cadena nica de 86
amino cidos que contiene las secuencia de media que insulina) y pptido
las cadenas de insulina unidas por pptidos C se degradan en rin e
intermediarios y tiene un PM 9000
hgado
RER: Retculo endoplsmico rugoso JE Costa Gil
FAVALORO
Clivajes enzimticos en el grnulo

Sntesis de insulina desde proinsulina
Retculo Endoplsmico Rugoso Aparato de Golgi
Proinsulina (dividida 32-33) Desamido 32,33 Proinsulina
PC3 PC2
Endopepetidasa I Endopepetidasa II
Pptido C
Proinsulina
Arg31
Arg32
S S Lis64
Arg65
S S
S S S Insulina S
PC2 PC3
Endopepetidasa II Endopepetidasa I
Proinsulina (dividida 65-66) Desamido 65,66 Proinsulina
La insulina y el pptido C se excretan en forma equimolar

JE Costa Gil
FAVALORO
La Insulina y los pptidos empaquetados

en la clula beta
La Insulina en hexmeros se
empaqueta en grnulos de
250400 nm de dimetro
En el paquete con insulina est el Pptido C (sin actividad biolgica

conocida y degradacin heptica ms lenta que insulina) y otros,
que se liberan juntos a circulacin
En clulas muy activas se secreta hasta 20% de proinsulina (ndice
de estrs insular) pero tiene escasa actividad biolgica
http://www.peoriaendocrine.com/diabetes_book/islet.htm JE Costa Gil
FAVALORO
Estructura molecular primaria de la

insulina
Cadena A S S 21 AA
G I V E Q C C T S I C S L Y Q L E N Y C N
S S
S S
F V N Q H L A G S H L V E A L Y L V C G E R G F F Y T P K T
Cadena B 30 AA
Residuos que se preservan en las insulinas naturales

Residuos crticos para unir al receptor
Residuos que pueden varar en las insulinas de la naturaleza
Las modificaciones que se realicen en la molcula de la insulina

tendrn que localizarse en reas que no son contiguas a zonas de
interaccin con el receptor
JE Costa Gil
FAVALORO
La glucosa induce el cierre de los canales

de potasio en la clula beta (1984)
El aumento de la glucemia es el mayor
estmulo fisiolgico para la secrecin de
la insulina en clula b
Se asocia con actividad elctrica en la
clula y la glucosa despolariza en forma
lenta la membrana y siguen rfagas de
potenciales de accin
La despolarizacin por glucosa se
produce por cada en reposo de la
permeabilidad de membrana al K
Las respuestas dentro de la clula b
estn mediadas por el metabolismo del
azcar
El cierre del canal de K se inhibe por la
glucosa y modula por su metabolismo
Ashcroft FM, et al. Nature 1984;312(5993):446-448. JE Costa Gil
FAVALORO
Clula b el censor y el efector

exquisitamente sensibles
Los islotes monitorean la
glucemia, otro productos
metablico y seales, que
producen hormonas con
efectos opuestos si:
La glucemia se eleva por
una comida, las clulas b
secretan la insulina para
reducir la glucosa
Si esta desciende, la clula
a libera la hormona glucagon
Ambas hormonas se vuelcan en la vena porta y el hgado es el primer

rgano que recibe altas concentraciones de la insulina o del glucagon
JE Costa Gil
FAVALORO
Clula b el mejor censor
La clula b monitorea directa y

constantemente seales
Neurolgicas
De sustratos
Hormonas
Detecta mnimas diferencias de
glucemia
Tiene transportadores de glucosa
(GLUT1 en humanos y GLUT2
en roedores) y glucoquinasa que
permiten un veloz ingreso de
glucosa a la clula y metabolismo
que genera ATP
La glucoquinasa y la relacin ATP/ADP en la clula son los censores: el
ascenso de ATP es la seal para la secrecin de insulina
JE Costa Gil
FAVALORO
Insulina: Formas de secrecin
La produccin de insulina es esencialmente en forma de grnulos

secretorios que se desplazan por el citoplasma hasta la membrana
celular y se liberan por exocitosis al espacio extracelular (formacin,
traslacin, fusin, fisin, liberacin) Glucosa
GLUT 1
GLUT 2
Secreta por diferentes modos Glucosa SUR
Glucoquinasa
Pico de secrecin del perodo de Hexoquinasa
absorcin Glucosa 6P K+
Gluclisis
Oscilaciones Intrnsecas en Receptor
muscarnicoPi
NADH ATP/ADP
estado basal *: Piruvato Oxidacin
Rpidas: cada 5 - 15 min Acetilcolina
I3P Mitocondria Ca2+
DAG
(notables en porta) Otras seales
Ca2+
Oscilaciones lentas: cada GLP1 Quinasas

Canales
de Ca
GIP
80 - 150 min (notables en AMPc Voltaje -
dependientes
periferia)
* No todos los investigadores coinciden en el el
tipo y duracin de las ondas del ritmo oscilatorio Exocitosis
JE Costa Gil
FAVALORO
Vas de sntesis de la insulina: formacin,

traslacin, fusin, fisin, liberacin
Ncleo
transcripcin Transduccin
Retculo Preproinsulina
Endoplsmico
Rugoso 5 10 min
(microvesculas)
Aparato Proinsulina
de Golgi
30 min
Cis
Medial
Trans Proinsulina
Clatrina
Grnulos inmaduros
empaquetados
Cuerpos Insulina
Multigranulares Grnulos maduros con +
granulocitosis cristales de insulina Pptido C
(Crinofagia)
Regula el
almacenamiento
Membrana plasmtica Retculo filamentos de actina
Secrecin constitutiva a medida que
Seal o impulso Exocitosis regulada
se sintetiza y sin mediar estmulo
Modificado del Atlas de Diabetes. R Khan Ed. 2000. JE Costa Gil
FAVALORO
Mecanismo de secrecin celular

de insulina
Glucosa
Amino cidos SU
GLUT 1 (humano) Glucosa SUR Meglitinidas
Diaxzido
o GLUT 2 (roedor)
Glucoquinasa Canales
de Ca
Glucosa 6P Voltaje -
K+ dependientes
Gluclisis ATP/ADP
Receptor Pi NADH
muscarnico Depolarizacin
Piruvato Oxidacin
Acetilcolina
Norepinefrina I3P Mitocondria
Ca2+
DAG
Ca2+
Quinasas Otras seales Canales
Aumenta ms el Ca Ncleo de Ca
intracelular y activa Voltaje -
AMPc sinaptotagmina para dependientes
GLP1 liberar insulina RER
GIP
almacenada RER: Retculo Endoplsmitco Rugoso
I3P: inositol 1,4,5 trifosfato
Exocitosis DAG: Diacil Glicerol
Modificado del Atlas de Diabetes. R Khan Ed. 2000 y Fajan S NEJM 2001 JE Costa Gil
FAVALORO
Formas de secrecin de insulina

Modo bifsico
La administracin de glucosa libera insulina en 2 fases:
Primera (RAI): Rpida y corta (6 min Pico agudo (Respuesta aguda

de insulina= RAI)
insulina almacenada)
120
Frena la glucosa
heptica 100
Metaboliza los 80 Pico tardo
nutrientes alimentarios
60
Inhibe al glucagn
Baja la necesidad de 40
insulina 20
Segunda: Lenta y sostenida 0

10 20
En 45-60 min se elabora insulina de 30
40 50
acuerdo a la glucosa Mi nu t 60
os 70
Estabiliza la glucemia mientras se 80
90
absorben los nutrientes Normoglucemia
Curry DL, Bennet LL et al. Endocrinology 1968, 83:572-584 Garlan Publising 1998 JE Costa Gil
FAVALORO
Formas de secrecin de insulina

interprandial (basal): Modo pulstil
Glucosa En personas sin DM, los niveles de
insulina plasmtica oscilan tanto en
ayunas como al alimentarse
Pulsos coordinados de oscilacin
intrnseca peridica (de 5 - 15 min
en estado basal), notables en vena
porta y moderadas en la circulacin
perifrica de insulina
0 25 50 75 100 125 150 La insulina acta mejor en secrecin
Minutos
pulstil que continua: igual eficacia
En el hombre los pulsos son cada 10 requiere 30% menos de secrecin
min
Con glucosa aumenta la intensidad y
Con una carga de glucosa se elevan y frecuencia de los pulsos (c/5-7 min).
se hacen ms frecuentes
Para la ADA la cada de pulsatilidad
represent los 110 mg/dL de la GAA
Modificado de Porksen N et al. J Clin Invest. 1994 ;94:219-227 JE Costa Gil
FAVALORO
Oscilacin intrnseca peridica de la

secrecin de insulina (marcapaso insular?)
Tanto las clulas individuales como los islotes completos se comportan
como osciladores acoplados (sincrona de seales del ritmo secretor)
Se han evaluado:
En vivo
En pncreas perfundido
En islotes aislados
Las clulas b muestra oscilaciones
funcionales con variaciones intrnsecas
del ATP y Ca++ en el citoplasma
(despolarizacin peridica y cambios
electroqumicos)
Mecanismos posibles
Ondas en el Ca2+ citoslico
Glicolisis insular (respuesta a glucosa)
Transmisin neurolgica autonmica entre islotes
Hellman B. Upsala J Medical Sci 2009;114:193205 JE Costa Gil
FAVALORO
Clula b y sus relaciones en el islote
Clula ALFA Las uniones son especializaciones en

general de membrana lateral de una
clula, de 3 tipos
De oclusin (Tight) sellan las clulas
VASCULATURA
ENDOTELIO
Ncleo vecinas evitan el trnsito de molculas
GI De anclaje o adhesin: Sujetan sus cito-
esqueletos a clulas vecinas, (znula
adherens). Tambin, se encuentran las
Clula
desmosomas especializados conformados
BETA
por placas de unin
Oclusin Auto
Anclaje Comunicantes (Gap): Permiten el
GLUT-2 (Tight) comunicante
GAP intercambio de seales qumicas y
Clula BETA elctricas entre clulas
Las clulas b no actan aisladas sino en relacin a otras clulas,

estructuras y circulacin
Hace contacto por uniones (en general por membrana lateral)
enriquecida por GLUT-2
Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 2015;42, 406414 GI: Grnulo de insulina JE Costa Gil
FAVALORO
Clula b y sus relaciones en el islote
Clula ALFA
Las uniones comunicantes
Coordinan la actividad elctrica
en el islote, las respuestas de
calcio y secrecin hormonal
VASCULATURA
ante la heterognea
ENDOTELIO
Ncleo
GI
sensibilidad de clulas b a la
glucosa
Clula Homogeneizan la actividad ante
BETA diferentes estmulos
Oclusin Auto Permiten estimular a clulas b
Anclaje
GLUT-2 (Tight) comunicante de baja respuesta ante hipo o
GAP
hiperglucemias (acoplamiento)
Clula BETA
El islote tiene rica vascularizacin (5 a 10 veces ms volumen
circulatorio que el pncreas exocrino y varios puntos de contacto) el
endotelio es fenestrado (en forma de criba con diafragmas) que
permiten el paso solo de molculas pequeas
Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 2015;42, 406414 GI: Grnulo de insulina JE Costa Gil
FAVALORO
Las propiedades de interrelacin. Aspectos

crticos para la funcin normal del islote
b b a
d PP
b b e b d
b b b b
a b a
b b b b b
Tiempo
b d b PP
b a a
b e
Las clulas no estn aisladas sino
intercomunicadas Tiempo
INSULINA
Se compararon clulas b Intacto
aisladas y comunicadas Disociado
La respuesta fue diferente

en pulsos coordinados: el
contacto entre clulas es
Richard K. Benninger esencial. Ms en el ayuno GLUCOSA
JE Costa Gil
FAVALORO
Uniones comunicantes dentro del islote de

Langerhans
Las uniones comunicantes coordinan las respuestas bifsicas
prandiales y oscilatorias del estado de pos absorcin (mayor eficacia)
Insulina
Glucosa
Tiempo en minutos
En las uniones de las clulas la Conexina-36 coordina las

oscilaciones de calcio libre intracelular y la secrecin pulstil de
insulina en islotes aislados (no se ha demostrado en vivo)
La interrupcin de uniones sera un factor patogentico en la DMT2
Head WS et al. Diabetes. 2012;61:1700-1707 - Benninger RK et al. J Physiol. 2011;589:5453-5466 JE Costa Gil
FAVALORO
Modelo en roedor: estmulo acoplado de la

clula beta, por la glucosa
Glucosa
Hay un nivel y
a rango en el que la
d PP glucosa estimula GLUT2
e b d la secrecin de Glicolisis
b b insulina y para
GK
a b a una respuesta NAD
b b eficaz, las clulas
d b PP deben actuar Mitocondria
a a coordinadas NADH
e ADP
K-ATP ATP
Ca++
Ca-v Vm
Vm Cx36 Ca-v
Ca++ Los pulsos se coordinan

entre clulas por va de la
conexina-36
Richard K. Benninger GK: Glucokinasa

Head WS et al. Diabetes. 2012;61:1700-1707 - Benninger RK et al. J Physiol. 2011;589:5453-5466 JE Costa Gil
FAVALORO
Oscilacin intrnseca peridica de la

secrecin de insulina (marcapaso insular?)
Dentro de los islotes, las clulas de b se activan mutuamente en un
ritmo comn por uniones comunicantes y factores de difusin
Las clulas de los islotes aisladas

generan oscilaciones espontneas
de Ca++ con diferentes frecuencias
Pero en agregados, las clulas de b

toman un ritmo comn de cerca de
0.3/min
La sincronizacin de islotes se debera al ajuste de las oscilaciones
a la misma fase de salida neuronal de acetilcolina a diferencia del
ATP que se observa en el islote aislado
Se han observado ciclos invertidos de glucagn contra insulina y
somatostatina, que fundamentan la coordinacin entre hormonas
Hellman B. Upsala J Medical Sci 2009;114:193205 JE Costa Gil
FAVALORO
Conclusiones y principios esenciales de la

fisiologa y de la secrecin de insulina
La regulacin de la secrecin de insulina es compleja y

para ser segura responde a mltiples factores:
A metablicos (glucosa y otros nutrientes), neurales,
hormonales y farmacolgicos
En estado interprandial el ADP mantiene los canales de K

abiertos y el K fluye por la membrana. Si el ATP aumenta,
B algunos canales sensibles se inhiben (cierran), eleva
cargas + en la clula y despolariza la membrana celular
Ante el estmulo por glucosa, la exocitosis de insulina se

vincula al metabolismo intracelular de la glucosa y la
C glucoquinasa (enzima limitante mayor) produce glicolisis
oxidativa, libera ATP y eleva la relacin ATP/ADP
Grodsky GM, Batts AA et al, 1963 - Coore HG, Randle PJ, 1964] JE Costa Gil
Weir G. Nat Rev Endocrinol. 2016 Feb;12(2):72-4
FAVALORO

El ingreso del K revierte el potencial de la membrana con

un potencial de accin que dura en funcin de la
D concentracin de glucosa y con esto activa los canales de
Ca++ dependientes de voltaje
La secrecin de insulina, no solo depende de glucosa o

de la actividad de los canales de K-ATP sensibles (hay
E otros estmulos sobre los canales de K u otros
mecanismos que no usan estos canales)
La alta relacin ATP/ADP cierra los canales de K, pero

los estmulos independientes al metabolismo de glucosa
F y del canal K-ATP, generan seales diferentes sobre las
mitocondrias que estimulan la liberacin de insulina
Grodsky GM, Batts AA et al, 1963 - Coore HG, Randle PJ, 1964] JE Costa Gil
Weir G. Nat Rev Endocrinol. 2016 Feb;12(2):72-4
FAVALORO

El Ca++ es el mensajero imprescindible intracelular y no

hay secrecin de insulina sin Ca extracelular pues acta
G como seal que dispara la secrecin de insulina luego
que se despolariza la membrana
El Ca++ tiene muy baja concentracin en el citosol y se

distribuye a travs de membranas que separan
H compartimentos dentro de la clula por bombas o
transportadores que mueven el Ca++ contra gradiente
Un pequeo desplazamiento del Ca++ de un

compartimiento al citosol provoca grandes cambios en su
I concentracin, por lo que hay diversos mecanismos que
movilizan el Ca++ y favorecen la secrecin de insulina
Grodsky GM, Bennett LL, 1966 - Milner RDG, Hales CN, 1968 JE Costa Gil
FAVALORO

El metabolismo de la glucosa intracelular independiente

de canales KATP y tambin el ingreso de Ca++, operan
J sobre organelas cuya produccin de Ca++ en la clula y
favorece a la regulacin fina de la secrecin de insulina
La calmodulina (CM) es receptor del Ca++ citoslico y su

unin con el catin activa la protena quinasa Ca-CM
K que fosforila componentes del cito-esqueleto celular para
la exocitosis de insulina
El Ca++ citoslico alto activa sinaptotagmina que libera

insulina almacenada en vesculas e inhibe los canales
M de Ca++ sensibles a voltaje, activa los de K sensibles al
Ca++, sale el K celular y la clula beta se repolariza
Grodsky GM, Bennett LL, 1966 - Milner RDG, Hales CN, 1968 JE Costa Gil
FAVALORO
El islote de Langerhans
Celularidad y interrelacin
Islote pancretico
en el humano
ratn Inervacin (+)
Clula d
Clula a Somatos-
Glucagon tatina
(-)
(-) (-)
(+) (-)
Clula b
Venas Insulina
Aunque la glucosa es el estmulo principal para secretar

Arteriolas insulina, las clulas b reciben gran variedad de otros
estmulos: nutrientes, neuronales, hormonales, pero parte
Segregacin celular del core de de estas, tienen origen en el islote por secrecin paracrina
clulas beta con un manto de clulas Las clulas b son las nicas que producen una cantidad
no-beta (divisin anatmo funcional significativa de insulina que influye a su vez, sobre la
de los islotes) actividad de las otras hormonas en el islote
JE Costa Gil
FAVALORO
Posible flujo sanguneo y relaciones

paracrinas entre hormonas del islote
Secrecin Lquido Acino

Paracrina intersticial
Insulina
Glucagon
Clula b Clula a Clula d
Somatostatina
Existira una circulacin particular en el pncreas (modelo de ratn)

Las clula b con su secrecin de insulina tienen influencia (inhibitoria)
sobre las a (glucagon) y tal vez sobre las d (somatostatina)
En la diabetes explicara porque a pesar de la hiperglucemia aumenta
la secrecin del glucagon cuando falla la insulina
Modificado de Weir GC et al Atlas de Endocrinologa 2000. JE Costa Gil
FAVALORO
Clulas beta del islote: Insulina
Insulina
Efectos metablicos sobre
glucosa, grasas y protenas y
factor de crecimiento
Mayores Mayores
estimulantes inhibidores
Glucosa, amino
acidos, AGL. Somatostatina
Glucagon, GIP, Amilina
GLP1, CCK. Pancreastatina
SulfonIlureas Fibras
Fibras simpticas-
simpticas-
JE Costa Gil
Company Logo
FAVALORO
Respuestas a la Insulina: activacin de

vas de seal dentro de la clula
Insulina
-S-
S- ATP
Tir P
Ser
Tir-P ADP
Homeostasis metablica
IRS-1
Glucosa
Sntesis Complejo Ras

p110 p85 de 90 K
70 K
Protenas
y Lpidos MAP
Kinasa MAPKK RAF
PI 3 quinasa Glucgeno
sintasa Crecimiento
Vesculas GLUT4 y expresin
de genes
Glucosa GLUCGENO
JE Costa Gil
FAVALORO
Estmulos para la secrecin de insulina
La glucosa y los AGL son sustratos de energa del metabolismo en los

mamferos (80% del metabolismo oxidativo) y estmulos naturales para
la secrecin de insulina
Los AG accionan como molcula de seal en procesos celulares e
influyen sobre la funcin de la clula b (segn nivel, tipo y tiempo)
En niveles bajos y moderados estimulan la secrecin de insulina o
potencian la respuesta a la glucosa
Elevados (como en la IR) en forma sostenida son
perjudiciales
Los amino cidos aumentan la secrecin de
insulina (en presencia de glucosa)
Leucina tiene un efecto directo
Otros se metabolizan y producen ATP con cierre de
los canales de K (isoleucina)
Glucolipotoxicidad
JE Costa Gil
FAVALORO
cidos Grasos y secrecin de insulina
El aumento de la insulina en sangre por los cidos grasos

libres, se puede deber al estmulo de la produccin en la
A clula b y a la disminucin del aclaramiento plasmtico de
la hormona (pobre conocimiento del mecanismo)
La secrecin de insulina inducida por glucosa est

asociada con la inhibicin de la oxidacin de cidos grasos
B libres, aumento de la esterificacin y a la formacin de
lpidos complejos en la clula b
Una parte de la secrecin de insulina puede ser mediada

C tambin por los cidos Grasos, pero los mecanismos se
conocen solo en parte y existen fuertes controversias
JE Costa Gil
FAVALORO
Actividad de cidos grasos sobre la

secrecin de insulina mediada por glucosa
Glucosa AGL
ATP
Glicerol F TG
ADP
K+ATP
Piruvato
Fosfolpidos- IP3
DAG
Acetil-Coa
CPT-1 Acido
Ciclo Acido Quinasas
Graso
Tricarboxlico Acil Coa ?
(-)
FS
? ? Exocitosis
Citrato Acetil-Coa Malonil-Coa
ATP-Citrato- Acetil CoA
Lipasa Carboxilasa
VDCC
K+ATP Ca++
FOSFOLPIDO INOSITOL 1,4,5 TRIFOSFATO o IP3 JE Costa Gil

FAVALORO
cidos Grasos y secrecin de insulina
El metabolismo de glucosa elevara el citrato en el citosol,

que termina en acetil-CoA y trasforma en malonil CoA,
D que inhibira la oxidacin de grasas y a su vez aumentan
mediadores que favorecen la secrecin de insulina
Los cidos Grasos que ingresan tambin pueden hacer

de mediadores para la secrecin de insulina, como el IP3
E Fosfolpido Inositol 1,4,5 Trifosfato y el Diacilglicerol o
DAG
La formacin de steres de CoA cadena larga y los

productos que deriva son potentes reguladores de
F enzimas quinasas y de canales de K por lo que
produciran la exocitosis (emiocitosis) de insulina
JE Costa Gil
FAVALORO
Secrecin de insulina dependiente de

glucosa va receptor del GLP-1
PDX-1
+
PI3K PKC Familia
+ + MAPK
+
+
gg G + +
b
GLP-1
a B-Raf
cAMP Camp- Rap1A MEK
+ + GEF + ERK
AC + Rap1 +
PKA
ATP
Canal de
+ + Ca2+
[Ca2+] Ca2+
ADP
Exocitosis de
grnulos con
Insulina
Canal de KATP
K+
JE Costa Gil
FAVALORO
Insulina & Glucagon: secrecin y

homeostasis
Nutrientes
Frmacos
Glucosa AG - AA Clula b
GLP-1 (L) GIP (K)
Frmacos
Intestino
Insulina
Glucosa Glucosa
+ +
Insulina Insulina Glucagon Glucagon
- Glucosa
- Glucosa
JE Costa Gil
FAVALORO
Algunas conclusiones sobre insulina:

homeostasis y reguladores
A La glucosa es el principal regulador

Actividad biosinttica de insulina
Produccin
Secrecin
Funcin celular del islote
Masa de clulas beta
Replicacin celular y neognesis
Apoptosis
B Tambin estimulan AA, AG y las

incretinas
c
La insulina se almacena en grnulos de
secrecin y se libera en forma regulada
o a demanda
JE Costa Gil
FAVALORO
Acciones de la insulina circulante
En metabolismo de los hidratos de carbono

Promueve la sntesis de glucgeno heptico y muscular
(glucogenognesis),
Inhibe la formacin de glucgeno por sustancias no glucdicas en el
hgado (gluconeognesis)
Estimula el transporte de glucosa en tejidos perifricos (msculo,
adipocitos y cardiomiocitos) con un destino:
No oxidativo (depsito)
Oxidativo (generacin de energa)
JE Costa Gil
FAVALORO

(a modo de consignas)
A
En el metabolismo de las protenas
Es anablica
Fomenta la formacin de protenas por
captacin y almacenamiento de AA
Influye en la transcripcin de genes y
en la transduccin del ADN mensajero.
En el metabolismo de los lpidos:
Es lipogentica : favorece la sntesis
B de triglicridos hepticos y su depsito

en el tejido adiposo.
Evita la liplisis (antilipoltica) por
inhibicin sobre la lipasa hormono
sensible (adipocitos, hgado y
msculo).
c Afecta la regulacin del transporte de

iones
JE Costa Gil
FAVALORO

(a modo de consignas)
A
Es una seal para el desarrollo y el
crecimiento y comparte el receptor
IGF-1 (en el feto insulina/IGF
colaboran en el crecimiento somtico
y al nacer promueve el crecimiento y
manutencin de tejidos como las
clulas b, hueso, neuronas, etc.)
B Interviene en la trascripcin de genes

y el recambio de mRNA, la sntesis y
la sntesis de DNA.
Posee efectos mitognicos y por su
c influencia en la sntesis de ADN

evitara/retardara la apoptosis de la
clula b (receptores de insulina o IGF)
JE Costa Gil
FAVALORO
Mi primer pregunta fue cmo sabe el

msculo que la insulina est all?
Por el msculo pasan 10
millones de sustancias por
tanto debe haber algo que
reconoce que la insulina se
encuentra en ese lugar
Las hormonas polipeptdicas producen
respuestas metablicas y morfolgicas
en tejidos blanco
La 1ra interaccin de la hormona con el
tejido sensible debe ser la unin de la
hormona a algn componente celular.
Se estudi los efectos de TSH en rodajas
de tiroides y de la insulina en el msculo
esqueltico
Pastan I, Roth J, Macchia V. Proc Natl Acad Sci U S A. 1966;56:1802-1809. JE Costa Gil
FAVALORO
El receptor transforma la seal hormonal

en evento celular: J.Roth y R.Kahn (1972)
Kahn CR, Neville
DM Jr, Gorden P,
Freychet P, Roth J.
a -S-S- Insulin receptor
defect in insulin
S-S S-S resistance: studies
in the obese-
hyperglycemic
mouse.
b ATP Biochem Biophys
Res Commun. 1972
- Tir- 11;48:135-142
- Ser-
- Tir- La subunidad a contiene al ligando
IRS-1
IRS-1 Tirosina
La subunidad b tiene un ligando que
P
se activa por tirosino kinasa.
IRS-2
IRS-2 Serina P El receptor de insulina tiene sustratos:
Se activa por autofosforilacin de
Dmero (a y b), unidos por puentes
disulfuros (htero tetramero)
tirosina (PI 3K)
Se inhibe por activacin en serina
JE Costa Gil
FAVALORO
Receptor de insulina
Subunidad A Glicoprotena producto de gen
Dominio de
del brazo corto del crom-19
ligando Proviene de un precursor de
Dominio rico en
cistena cadena nica que cliva en 2
S S subunidades separadas, se
dimeriza, glicosila, acila y ubica
en la membrana plasmtica
S S
En subunidad A
S S
Dom. de ligando: provoca
Dominio modificacin que autofosforila
transmembrana
En subunidad B
Dom. Yuxtamembrana: Tir
Dominio Sitio liga ATP
yuxtamembrana
972 liga sustrato y se fosforila
Dominio Cataltico Dominio C-terminal Dom. Cataltico: actividad
Subunidad B quinsica en otras protenas
Citoplasma
JE Costa Gil
FAVALORO
El sustrato del receptor de insulina
Las protenas de los IRS no tienen

actividades catalticas intrnsecas o
propias pero poseen mltiples
dominios de interaccin y tirosinas
IRS fosforiladas.
P-Y-x-x-M
P-Y-x-x-M
Actan como molculas de amarre

P85a que reclutan diferentes molculas de
seal y conducen a la formacin de
Dominio SH2 Dominio SH2
complejos de seal intermediarios de
p110
la actividad de insulina
No se intercambian los roles de las
Hay 4 miembros de la diferentes molculas de IRS
familia de protenas IRS y
una protena relacionada
llamada Gab-1.
White MF. Mol Cell Biochem. 1998,182:3-11. JE Costa Gil
FAVALORO
Acciones de la insulina a travs de su

unin al receptor
Subunidad A
PROCESOS VAS
Dominio de
ligando Captacin de glucosa
Anabolismo Dominio rico en Glucogenognesis
Homeostasis metablica cistena Gluconeognesis
Metabolismo de lpidos S S Lipognesis
Metabolismo de protenas Lipolisis
Crecimiento Sntesis proteica
Mitognesis Expresin gnica
Reproduccin S S
Sntesis de DNA
Expectativa de vida S S Captacin de am.cidos
Fenmenos cognitivos Bomba de NA/K
Dominio Apoptosis
transmembrana Autofagia
El receptor de insulina
Aumenta
pertenece a la superfamilia
de receptor de tirosina Frena
Dominio Sitio liga ATP
kinasa (RTKs), enzima que
cataliza la transferencia de yuxtamembrana
fosfatos de ATP a residuos Dominio Cataltico Dominio C-terminal
de tirosina sobre sustratos
de protenas
Subunidad B
Citoplasma
Freychet P, Roth J and Neville DM Jr. Proc Natl Acad Sci USA 1971;68:1833-1837 JE Costa Gil
FAVALORO
PI 3,4P2 PI 3P
SHIP2
PI 3,4,5P3
PTEN
P-Y-x-x-M
P-Y-x-x-M
P85a
mTOR PDK1
Dominio SH2 Dominio SH2 PDK2
PHAS p70s6k PKCqz/PKCl PKB/akt

PHAS
JE Costa Gil
FAVALORO
Fisiologa: Receptor activador-proliferador

de peroxisoma o PPAR
PPAR es miembro de la familia de receptores hormonales

A nucleares de factores de transcripcin. Incluyen: PPARa,
PPARb, PPARg-1 y PPARg-2
El receptor PPAR existe como heterodmeros con

receptores de retinoides X (RXRs) y unido a elementos de
B respuesta PPAR (PPREs) dentro de los dominios
promovedores de los genes blanco
PPAR-RXR desplaza un co-represor y activa la

C transcripcin de ADN de genes insulino-sensibles
JE Costa Gil
Barroso I et al Nature 1999, 402:880-883
FAVALORO
Mecanismo molecular de accin drogas

tiazolidindionas como agonistas de PPAR
TZD o estmulo Insulina Se centra en la unin de
Membrana celular
Receptor la TZD con PPAR g
insulina
nuclear, de la familia de
factores de transcripcin
Membrana nuclear
Heterodimeriza con otro
PPAR g factor: el Receptor X de
cido retinoico
C/EBP a Factor de
transcripcin de La insulina inicia la seal
respuesta de
RXR insulina de transduccin
Interactan con secuencias
Promovedor/ de DNA que controlan los
Mejorador genes insulino sensibles
Mejorador Elemento de Tambin se activa C/EBP-a

respuesta a Gen involucrado en la
CCAAT Gen insulina insulino
sensible sensible diferenciacin a adipocito
C/EBP
JE Costa Gil
FAVALORO

Los activadores del PPARg incluyen prostanoides, cidos

D grasos, tiazolidindionas y anlogos N-(2-benzoilfenil)
tirosina
PPARg/RXR forman heterodmeros que regulan la

transcripcin de genes involucrados en la accin de
E insulina que influyen en la regulacin del metabolismo de
carbohidratos y grasas
La activacin del PPAR influye sobre actividad de

insulina en el metabolismo de HC y Grasas por: 1) el
F aumento de la captacin de glucosa en adipocitos y
msculo y 2) disminucin de gluconeognesis heptica
JE Costa Gil
Lenhard JM. Receptors Channels 2001;7:249-258
FAVALORO

PPAR g es un regulador central del desarrollo de tejido

adiposo y un modulador de la expresin de genes de
G clulas especializadas como adipocitos, epiteliocitos y
macrfagos
Las vas de seales del PPARg influyen tanto en las

clulas como en el metabolismo lipdico sistmico y lo
H vincula a la obesidad, diabetes y enfermedad
cardiovascular
Se han planteado polimorfismos o posible mutacin con

prdida de la funcin en la DMT2, enfermedad
I metablica e hipertensin arterial (sin evidencias
directas o completas en humanos)
Walczak R, Tontonoz P. J Lipid Res 2002;43:177-178 JE Costa Gil

FAVALORO
Vas de seal del receptor de insulina en

tejidos metablicos o vasculares
Tejido Metablico Tejido Vascular
Receptor Receptor
Insulina/IGF1 Insulina/IGF1
PI(3)K MAPK PI(3)K MAPK

Endotelio xido Ntrico
GLUT4 Genes Msculo liso Migracin (IGF-1) Migracin
Transporte Proliferacin vascular Quiescencia Proliferacin
de Glucosa Diferenciacin Monocitos
Celular macrfagos Evita la apoptosis Aumento CD36
Impacto vascular de la resistencia a la insulina

Sensibilidad Anti Pro
Neutral Normal aterognica
normal aterognica
Sensibilidad Pro Pro Pro Pro
disminuida aterognica aterognica aterognica aterognica
La activacin de la va de MAPK ante injurias (IR, etc.) en los vasos

favorece la proliferacin, la diferenciacin y la migracin celular
Modificado de Julie Nigro et Al. Endocrine Reviews 2006,27: 242259 JE Costa Gil
FAVALORO
Insulina: homeostasis (algunas

conclusiones)
A
La insulina interviene en la reserva
combustibles y energa y en el
crecimiento y la diferenciacin celular
B
Para que la insulina acte en los tejidos
perifricos se une a receptores y contina
con la fosforilacin de protenas
intracelulares
JE Costa Gil
FAVALORO
Mecanismo de accin de la insulina
Receptor
Insulnico
(tirosina-kinasa)
Fosforilacin Cascada
Cascada de de IRS-1 a 4 de la
la PI3K y Shc en Tir MAPK
Transporte de Sntesis de DNA-RNA-Sntesis Proteica

Glucosa glucgeno
JE Costa Gil

1017 07 Fisiologìa 2

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MAESTRA

Jos Esteban Costa Gil

Principios esenciales de la fisiologa y del

El organismo humano es un sistema integrado con un

En las clulas ocurren en forma simultnea numerosas

Los seres vivos son estructuras complejas, ordenadas,

Principios esenciales de la fisiologa y del

Los organismos multicelulares tienen diferenciacin

Las actividades metablicas de los rganos se integran y

Para que un ser sobreviva, mediante la alimentacin

Principios esenciales de la fisiologa y del

En el ayuno el organismo utiliza los combustibles

El metabolismo intermedio tiene 2 fases: anablica, de

En el ayuno el organismo cambia de combustibles

Integracin, balance y regulacin

Las hormonas que el

Regulacin hormonal del metabolismo

Anablica, promueve el almacenamiento de

Produce glucosa endgena para

CORTISOL Ante estrs crnico disminuyen la sensibilidad

Funcin del islote normal:

Secrecin de Glucagon (Clula

Secrecin de Glucagon (Clula

La somatostatina inhibe a la insulin y al glucagon

Estructura qumica de la insulina

Descubrimiento de la produccin de las

En 1967 Donald STEINER descubri que la insulina humana se

Biosntesis de la insulina. Proinsulina y

El Maestro Emrito y miembro de la Academia de Ciencias de EEUU

La glucosa estimula la sntesis

Clivajes enzimticos en el grnulo

La insulina y el pptido C se excretan en forma equimolar

La Insulina y los pptidos empaquetados

En el paquete con insulina est el Pptido C (sin actividad biolgica

Estructura molecular primaria de la

Residuos que se preservan en las insulinas naturales

Las modificaciones que se realicen en la molcula de la insulina

La glucosa induce el cierre de los canales

Clula b el censor y el efector

Ambas hormonas se vuelcan en la vena porta y el hgado es el primer

Clula b el mejor censor

La clula b monitorea directa y

Insulina: Formas de secrecin

La produccin de insulina es esencialmente en forma de grnulos

Oscilaciones lentas: cada GLP1 Quinasas

Vas de sntesis de la insulina: formacin,

Mecanismo de secrecin celular

Formas de secrecin de insulina

Primera (RAI): Rpida y corta (6 min Pico agudo (Respuesta aguda

Segunda: Lenta y sostenida 0

Formas de secrecin de insulina

Oscilacin intrnseca peridica de la

Clula b y sus relaciones en el islote

Clula ALFA Las uniones son especializaciones en

Las clulas b no actan aisladas sino en relacin a otras clulas,

Clula b y sus relaciones en el islote

Las propiedades de interrelacin. Aspectos

La respuesta fue diferente

Uniones comunicantes dentro del islote de

En las uniones de las clulas la Conexina-36 coordina las

Modelo en roedor: estmulo acoplado de la

Ca++ Los pulsos se coordinan

Richard K. Benninger GK: Glucokinasa

Oscilacin intrnseca peridica de la