INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

LABORATORIO DE ECOLOGA MICROBIANA

PRCTICA No. 10 Microorganismos del ciclo del

nitrgeno

4to semestre 4QM1 SECCIN 1

EQUIPO 2
CANO ALEJANDRA

EQUIPO 8
LUNA ZAGAL FRANCISCO MIGUEL
DANIEL GODINEZ DENIS IVAN

ABRIL 2017
 OBJEYIVOS:

1.-Determinar experimentalmente los principales procesos metablicos involucrados en

el ciclo del nitrgeno.

2.-Enumerar las formas fisiolgicas de las bacterias involucradas en estos procesos,

en diferentes muestras de suelo.

RESULTADOS:

AMONIFICACIN
TABLA 1: NMP/g de la prueba de amonificacin
LOG (NMP/
No. NMP/ g base NMP/ g base LOG (NMP/ g
Equipo Diluciones g base
caracterstico hmeda seca base seca)
hmeda)

1 10^-2 10^-3 10^-4 320 930 1.27x103 2.968482949 3.103803721

2 10^-2 10^-3 10^-4 310 4.3x102 4.57x102 2.633468456 2.65991662

3 10^-2 10^-3 10^-4 233 530 563.83 2.72427587 2.75114818

4 10^-2 10^-3 10^-4 313 1.6 x103 2.077x103 3.204119983 3.317436497

5 10^-2 10^-3 10^-4 21 93 94.89 1.968482949 1.977220447

6 10^-2 10^-3 10^-4 300 230 310.81 2.361727836 2.492494983

7 10^-2 10^-3 10^-4 333 1.1x104 1.264x104 4.041392685 4.101747074

8 10^-2 10^-3 10^-4 221 280 285.7 2.447158031 2.45591024

 FIGURA 1: Log (NMP/g) de la prueba de amonificacin.

DISCUSIN:

Se observa claramente con la grfica que la estacin con mayor presencia de

microorganismos amonificadores es la estacin siete en el caso especfico de las
estaciones cinco y seis presentan baja cantidad de estos microorganismos, sin
embargo no se presenta una variacin muy grande entre las estaciones uno a cuatro.

NITRIFICACIN FASE 1
No. NMP/ g base NMP/ g base LOG (NMP/ g LOG (NMP/ g
Equipo Diluciones
caracterstico hmeda seca base hmeda) base seca)
1 10^-1 10^-2 10^-3 333 >1100 >1506.8 3.041392685 3.178055612
2 2
2 10^-1 10^-2 10^-3 330 2.4x10 2.55x10 2.380211242 2.40654018

3 10^-1 10^-2 10^-3 333 >1100 >1170.21 3.041392685 3.068263805

4 10^-1 10^-2 10^-3 333 >1100 >1428 3.041392685 3.154728207

5 10^-1 10^-2 10^-3 333 >1100 >1122 3.041392685 3.049992857

6 10^-1 10^-2 10^-3 333 >1100 >1486.48 3.041392685 3.17215907

7 10^-1 10^-2 10^-3 331 460 5.28x102 2.662757832 2.722633923

8 10^-1 10^-2 10^-3 321 150 153.06 2.176091259 2.184861709

TABLA 2: NMP/g de la prueba de nitrificacin fase 1

 FIGURA 2: Log (NMP/g) de la prueba de nitrificacin fase 1

DISCUSIN:

Con la grfica observamos que las estaciones con mayor presencia de

microorganismos nitrificadores son la uno y tres a seis; en el caso de las estaciones
dos y ocho presentan baja cantidad de estos microorganismos, sin embargo no se
presenta una variacin muy grande entre lo cuantificado en base seca con respecto a
la hmeda.

DESNITRIFICACIN
TABLA 3: NMP/g de la prueba de desnitrificacin
No. NMP/ g base NMP/ g base LOG (NMP/ g LOG (NMP/ g
Equipo Diluciones
caracterstico hmeda seca base hmeda) base seca)

1 10^-3 10^-4 10^-5 311 7.5x103 1.027x104 3.875061263 4.011570444

2 10^-3 10^-4 10^-5 0 <300 <319.14 2.477121255 2.503981241

3 10^-3 10^-4 10^-5 0 <3 <3.1914 0.477121255 0.503981241

4 10^-3 10^-4 10^-5 0 <3 <3.89 0.477121255 0.589949601

5 10^-3 10^-4 10^-5 10 300 366.12 2.477121255 2.563623454

 6 10^-3 10^-4 10^-5 0 300 400 2.477121255 2.60205999

7 10^-3 10^-4 10^-5 200 9.1x102 1x103 2.959041392 3

8 10^-3 10^-4 10^-5 0 <3 3.06 0.477121255 0.485721426

FIGURA 3: Log (NMP/g) de la prueba de desnitrificacin.

DISCUSIN:

En la grfica observamos que la estacin con mayor presencia de microorganismos

desnitrificadores es la uno; en el caso de las estaciones tres, cuatro y ocho presentan
una muy baja cantidad de estos microorganismos; en esta prueba se obtuvieron muy
pocos resultados positivos lo que indicara que no en todos los ecosistemas se
encuentran este tipo de microorganismos.

PROTELISIS
TABLA 4: NMP/g de la prueba de protelisis
UFC/ g
UFC/ g LOG (UFC/ g LOG (UFC/ g
Equipo Diluciones No. Colonias base
base seca base hmeda) base seca)
hmeda
1 10^-3 3.5 3.5x105 4.8x105 5.544068044 5.681241237

2 10^-4 9 9x105 9.57x105 5.954242509 5.980911938

3 10^-5 4 4x106 4.25x106 6.60205999 6.62838893

4 10^-5 3.5 3.5x106 4.54x106 6.544068044 6.657055853

 5 10^-4 1.5 1.5x105 1.53x105 5.176091259 5.184691431

6 10^-5 7 7x106 9.45x106 6.84509804 6.975431809

7 10^-5 2 2x106 2.2x106 6.301029996 6.342422681

8 10^-5 4.5 4.5x106 4.59x106 6.653212514 6.661812686

FIGURA 1: Log (NMP/g) de la prueba de protelisis

DISCUSIN:

En la grfica se observa que la estacin con mayor presencia de microorganismos

proteolticos es la seis; en el caso de las dems estaciones presentan una muy baja
variacin en los resultados; en esta prueba se obtuvieron mayor cantidad de
microorganismo al cuantificarse, tal es el caso de que se obtuvieron logaritmos ms
altos a comparacin de las dems pruebas lo que indicara que hay mas presencia de
organismos proteolticos en el suelo pero no todos necesariamente deben de tener
relacin con el proceso del ciclo del nitrgeno dando una diversidad en todos los
ecosistemas.

CONCLUSIONES:
*Algunas bacterias presentes en la muestra de suelo de la prctica de campo llevan a
cabo activamente los procesos de proteolisis,amonificacin, nitrificacin y nitracin
que forman parte del ciclo del nitrgeno
*Las formas fisiolgicas de las bacterias que lleva a cabo los procesos del ciclo del
nitrgeno incluyen
CUESTIONARIO:
1.-Qu factores pueden alterar el nmero de microorganismos involucrados en el
ciclo del nitrgeno?
Hay varios factores ambientales que limitan la fijacin del nitrgeno. La nodulacin se ve afectada
por el exceso o carencia en determinados elementos minerales. Un defecto de Molibdeno influye
negativamente en la fijacin del nitrgeno. Otro elemento mineral es el Hierro, que sin embargo
cuando escasea no tiene un efecto directo sobre la fijacin del nitrgeno. El Hierro y el Molibdeno
son elementos constituyentes de la nitrogenasa.

La temperatura tambin es un factor ambiental limitante que afecta de forma indirecta. La

presencia de altas temperaturas incrementa la respiracin; esto hace que el carbono disponible
para la simbiosis sea menor. Con temperaturas inferiores a los 7 C la nodulacin es inexistente y
en el caso extremo de altas temperaturas, la probabilidad de nodulacin es menor, debido a la
reduccin de los pelos radiculares. El agua y la luz afectan tambin a la simbiosis. Cuando la
disponibilidad de agua es baja, la fijacin del nitrgeno es menor; mientras que la luz influye
indirectamente a travs de la fotosntesis. La fotosntesis produce los carbohidratos necesarios
para el desarrollo y funcionamiento del ndulo. Otros factores limitantes que actan en menor
medida son las enfermedades como hongos o virus y la diferente concentracin de gases que hay
en el terreno. Algunos de los nutrientes esenciales necesarios para el desarrollo de la actividad
nodular como son el Fsforo, Hierro, Calcio, Molibdeno, Cobalto y Zinc, son escasos. En lugares
con elevadas precipitaciones los procesos de lixiviado producen su escasez, por lo tanto, la
disponibilidad de elementos nutritivos y la actividad de los microorganismos fijadores son
esenciales para la fijacin biolgica del nitrgeno.

2.-La adicin de fertilizantes nitrogenados puede tener consecuencias en los procesos

globales de contaminacin.Indique cules considera usted son estas consecuencias

Ha sido demostrado que al aplicar nitrgeno en forma de fertilizante a las leguminosas (y por lo
tanto a la simbiosis leguminosa-rhizo-bium), la cantidad de nitrgeno que asimila la planta no
aumenta, sino que sta slo utiliza el que proviene del fertilizante y reduce la cantidad que el
rhizobium fija biolgicamente. Esto se debe a que el nitrgeno que se provee con el fertilizante
representa una fuente de nitrgeno disponible, para las bacterias fijadoras de nitrgeno, que
satisface sus requerimientos con un gasto energtico menor que los que tendra que realizar para
fijar el nitrgeno atmosfrico. As, paradjicamente, la aplicacin de fertilizante artificial impide, o
inhibe, el proceso natural de fijacin de nitrgeno. La planta sustituye, para su consumo nitrgeno
obtenido de fuentes energticas renovables por nitrgeno sinttico, que se produce a partir de
recursos no renovables esto modifica el ciclo normal de nitrgeno acumulando compuestos
nitrogenados en el suelo los cuales pueden ser txicos para otros microorganismos.

3.-Cules son las ecuaciones qumicas que se llevan a cabo en cada uno de los procesos
biolgicos analizados
Amonificacin:

Nitrification:

1. Nitritacin - NH3 + O2 NO2 + 3H+ + 2e

2. Nitracin - NO2 + H2O NO3 + 2H+ + 2e

Desnitrificacion:

2NO3- + 10e- + 12H+ N2 + 6H2O

4.-Qu funcin tienen los bacteroides y la leghemoglobina en la fijacin biolgica del

nitrgeno?

La fijacin biolgica del nitrgeno se realiza en los ndulos radiculares . Los ndulos son
el resultado de una perfecta relacin de simbiosis entre la planta y las bacterias. Cuando
ambos entran en contacto se produce un cambio de diferenciacin en la bacteria. sta se
modifica dando lugar a un bacteroide. El bacteroide con posterioridad expresa su
actividad nitrogenasa y gracias al complejo enzima nitrogenasa va a ser capaz de fijar el
nitrgeno. Un proceso en principio invasivo por parte de la bacteria, se transforma en un
proceso beneficioso para ambos simbionte

El complejo enzimtico nitrogenasa se inactiva irreversiblemente en presencia de

oxgeno. Por lo tanto, la presencia de grandes cantidades de oxgeno en el ndulo
radicular restringe la fijacin de nitrgeno. Para su mxima eficiencia la nitrogenasa debe
trabajar a muy bajas tensiones de oxgeno. La leghemoglobina acta como filtro de
oxgeno; adems este pigmento regula la tensin de oxgeno en el ndulo radicular. De
esta forma permite que la nitrogenasa desarrolle su actividad eficientemente, para lo cual
requiere gasto de ATP y es inhibida por ADP

Referencias:

/Dialnet-BacteriasSimbioticasFijadorasDeNitrogeno-3761553.pdf

http://www.divulgacion.ccg.unam.mx/webfm_send/109

https://www.ld-
didactic.de/software/524221es/Content/ExperimentExamples/Chemistry/PhysicalCh
emistry/Urease.htm