Universidade Federal de Pernambuco

Centro de Tecnologia e Geocincias

Departamento de Engenharia Qumica

INTRODUO AOS MTODOS

INSTRUMENTAIS

Prof. Fernanda A. Honorato

CLASSIFICAO DOS MTODOS ANALTICOS

Os mtodos analticos so classificados como:

clssicos (ou de via mida) e instrumentais

 MTODOS CLSSICOS

A maioria das anlises eram realizadas por separao dos

componentes de interesse de uma amostra empregando-se
precipitao, extrao ou destilao.

Anlise Qualitativa
Anlise Quantitativa
Tratamento com reagentes,
Quantidade do analito
resultando em produtos
determinada por
reconhecidos por cores, pontos
medidas titulomtricas
de ebulio ou de fuso, suas
ou medidas
solubilidades, odores, atividade
gravimtricas.
ptica e ndices de refrao.
 MTODOS INSTRUMENTAIS

Incio do sculo XX surge interesse por fenmenos alternativos aos

utilizados pelos mtodos clssicos para resolver problemas analticos;

Anlise quantitativa: baseada em medidas das propriedades fsicas

do analito (condutividade, potencial de eletrodo, emisso e absoro
da luz, razo massa/carga);
Substituio da destilao, extrao e precipitao por tcnicas
eficientes de cromatografia e eletroforese;
Mtodos Instrumentais de Anlise: mtodos modernos de
separao e determinao de espcies qumicas.
TIPOS DE MTODOS
INSTRUMENTAIS
 Energia de excitao:
calor, REM, aplicao
de quantidades
eltricas (tenso,
corrente e carga), etc.

Mtodos de Separao!
INSTRUMENTOS PARA ANLISE
 INSTRUMENTOS PARA ANLISE

Um instrumento para anlise qumica converte a informao contida

nas propriedades fsicas ou qumicas do analito em informao que
pode ser manipulada e interpretada;

A informao desejada do analito obtida fornecendo um estmulo

do qual se obtm uma resposta do sistema em estudo;

A informao obtida est associada ao fenmeno resultante da

interao do estmulo com o analito.

Ex.: feixe de luz vsivel

Estmulo Resposta que passa por uma amostra

Fonte de Sistema Informao

energia em estudo analtica
 1. DOMNIO DE DADOS

Um instrumento para anlise qumica compreende uns poucos

componentes bsicos;

As relaes entre esses componentes e o fluxo de informaes do

analito, que so convertidas em sada grfica ou numrica pelo
instrumento, descrito pelo conceito de domnio de dados (diferentes
formas de codificar a informao eletricamente);

Os domnios de dados so classificados em: domnios no-eltricos e

domnios eltricos.
Classificao
Geral
 1.1. DOMNIOS NO-ELTRICOS

O processo de medida comea e termina em domnios no-eltricos;

As caractersticas fsicas e qumicas que so de interesse residem

nestes domnios;

possvel realizar uma medida inteiramente em domnios no-

eltricos normalmente associadas aos mtodos clssicos;

Em instrumentos eletrnicos a informao adquirida de domnios

no-eltricos processada em domnios eltricos e, finalmente,
apresentada em domnios no-eltricos dispositivos eletrnicos.
Objetivo final: resultado numrico propriedade do analito.
 1.2. DOMNIOS ELTRICOS

Os modos de codificar informao como quantidades eltricas

podem ser divididos em: domnios analgicos, domnios de tempo e
domnios digitais;

Qualquer processo de medida pode ser representado como uma srie

de converses interdomnios;

Exemplo (esquema a seguir): medida da intensidade da fluorescncia

molecular (347,5 nm UV) de uma amostra de gua tnica contendo
traos de quinino e com suas converses entre domnios;
Diagrama de blocos de um fluormetro determinao de quinino; (b) fluxo de informaes
dos vrios domnios de dados; (c) regras que governam as transformaes dos domnios de
dados durante o processo de medida
*Quinino: adicionado para conferir o gosto amargo (85 mg L-1).
*Quinino o sulfato da quinina (347,5 nm UV)
 1.2. DOMNIOS ELTRICOS

Transdutor de entrada: dispositivo que codifica informao

pertencente a domnio no-eltrico em domnio eltrico. Ex.:
fototransdutor ;
Funo de transferncia do transdutor: relao matemtica entre a
sada eltrica e a potncia incidente de entrada;

Transdutor de sada: dispositivo que converte dados de domnios

eltricos para domnios no-eltricos. Ex.: voltmetros, displays
alfanumricos, motores eltricos, telas de computadores;
 2. DETECTORES, TRANSDUTORES E SENSORES

Detector: Dispositivo mecnico, eltrico ou qumico que identifica,

registra ou indica uma mudana em uma das variveis do ambiente
(presso, temperatura, carga eltrica, REM, etc.);

Transdutor: Dispositivos que convertem informao de domnios no-

eltricos em informao de domnios eltricos e vice-versa.
Ex.: fotodiodos, fotomultiplicadoras, e outros fotodetectores eletrnicos
que produzem corrente ou voltagem proporcional potncia radiante da
REM incidente;

Sensor: Classe de dispositivos capazes de monitorar espcies qumicas

especficas de forma contnua e reversvel. Ex.: eletrodos de vidro,
eletrodos on-seletivos. Os sensores consistem de um transdutor acoplado
com uma fase de reconhecimento quimicamente seletiva;
 3. DISPOSITIVOS DE LEITURA

um transdutor que converte informao de um domnio eltrico a

um domnio que compreensvel a um observador humano.

O sinal de sada do transdutor tem a forma de uma sada

alfanumrica ou grfica em um tubo de raios catdicos, uma srie de
nmeros em um display digital, a posio de um ponteiro em uma
escala mtrica, uma curva em um papel registrador, podendo ser
preparado para fornecer a leitura da concentrao do analito
diretamente.
 4. COMPUTADORES EM INSTRUMENTOS

A maioria dos instrumentos analticos modernos contm ou est

conectada a um ou mais dispositivos eletrnicos sofisticados e a
conversores de domnios de dados (amplificadores operacionais,
circuitos integrados, conversores analgico-digital e digital-analgico,
contadores, microprocessadores e computadores).
SELEO DE UM MTODO
ANALTICO
SELEO DE UM MTODO ANALTICO
 DEFININDO O PROBLEMA

1. Exatido necessria: Determina o tempo de realizao da anlise

2. Quantidade de amostra disponvel: Determina a sensibilidade do mtodo

Determina a amplitude do intervalo

3. Intervalo de concentrao do analito:
de concentraes a ser utilizado

4. Componentes da amostra que causaro interferncia: Determina seletividade

do mtodo
Mtodos que se aplicam
5. Propriedades fsicas e qumicas da matriz da amostra: solues, amostras
gasosas e slidos
6. Quantas amostras sero analisadas? Custo da anlise
 Caractersticas qualitativas que podem ser consideradas na Escolha do
Mtodo

1. Velocidade
2. Facilidade e Convenincia
3. Habilidade requerida do operador
4. Custo e disponibilidade do equipamento
5. Custo por amostra
CALIBRAO DE MTODOS
INSTRUMENTAIS
 INTRODUO

Quase todos os mtodos analticos requerem algum tipo de

calibrao com padres qumicos (exceto os gravimtricos e alguns
coulomtricos).

CALIBRAO

Determinar a relao entre a resposta analtica e a

concentrao do analito.

Tipos mais comuns de calibrao: comparao com padres, mtodo

de padro externo, mtodo do padro interno e mtodo de adio de
padro.
 1. COMPARAO COM PADRES

Dois tipos: comparao direta e procedimento titulomtrico;

Comparao direta: compara uma propriedade do analito com
padres de forma que a propriedade que est sendo avaliada se iguale
ou quase se iguale quela do padro;
Titulaes: considera que a quantidade de reagente padro
necessria para se obter a equivalncia qumica est relacionada
quantidade de analito presente.
 2. CALIBRAO COM PADRO EXTERNO

Uma srie de solues padro com concentraes exatamente

conhecidas do analito so introduzidas no instrumento e suas respostas
so registradas;
Os dados so colocados em um grfico com a resposta do
instrumento versus a concentrao do analito (curva de calibrao) ;
A equao matemtica que relaciona o sinal analtico com a
concentrao do analito ajustada, normalmente, pelo mtodo dos
mnimos quadrados;
O sucesso do mtodo da curva analtica reside na exatido com que
so conhecidas as concentraes dos padres e quo prxima a matriz
dos padres est da matriz da amostra.
CURVA DE CALIBRAO
 Mtodo dos mnimos quadrados

Baseia-se na hiptese que

existe uma relao linear entre a
resposta medida e a
concentrao do padro, cuja
relao matemtica o modelo
de regresso;
Assume que o desvio dos
pontos individuais de uma linha
reta provm de um erro na
medida.
 Erros na Calibrao com Padro Externo

A resposta original do instrumento normalmente no utilizada;

A resposta analtica corrigida por meio da medida de um controle
(branco);
Branco Ideal: Idntico amostra, mas sem o analito;
Branco Real: Contm o mesmo solvente no qual a amostra
foi dissolvida mais os reagentes usados no preparo da amostra.

Efeitos de matriz, diferenas em variveis experimentais no

momento da medida do branco, da amostra e dos padres,
contaminao durante a amostragem ou nas etapas de preparao da
amostra, padres preparados incorretamente Erros sistemticos!
 Erros na Calibrao com Padro Externo

Erros aleatrios...

Fonte: Skoog (Pg. 180)

 Calibrao Multivariada

Relaciona respostas instrumentais mltiplas com um analito ou

mistura de analitos;
So mtodos inversos de calibrao (as concentraes so tratadas
como funes de resposta);
Mtodos: PLS, PCR, MLR
 CALIBRAO UNIVARIADA

Em i

Ai
Ad

i Cd
Comprimento de onda Concentrao dos padres(x)

y = bo + b1x + Calibrao
^ Previso
x = (y bo) /b1
CALIBRAO MULTIVARIADA

Comprimento de onda

Regresso Linear Mltipla (MLR)

y=Xb+ b = (XX)-1Xy
= y - y^
y^ = X b
3. MTODO DO PADRO INTERNO

Uma quantidade conhecida de uma espcie de referncia (o padro interno)

adicionada todas as amostra, padres e branco;

O sinal de resposta no do prprio analito, mas da razo entre o sinal do

analito e o da espcie de referncia (padro interno);

A curva analtica preparada usando nas ordenadas a relao do sinal do

analito pelo sinal do padro interno e nas abscissas as concentraes das
solues padro;
O mtodo pode compensar erros que influenciam tanto o analito como a
espcie de referncia na mesma proporo;

Mtodo no comumente utilizado - dificuldade de se encontrar espcies de

padro interno apropriadas.
 Determinao de Na por emisso em
chama sem e com padro interno (Li)

Mtodo do padro interno

 4. MTODO DE ADIO DE PADRO

til quando difcil ou impossvel reproduzir nos padres a matriz

da amostra;
Uma quantidade conhecida de soluo padro contendo o analito
adicionada a uma poro da amostra (adio de padro de um nico
ponto). As respostas antes e depois da adio so medidas e usadas
para obter a concentrao do analito;
Outra maneira fazer mltiplas adies a diversas pores da
amostra;
necessrio ter uma boa medida do branco e a curva analtica para
o analito deve ser linear na matriz da amostra;
Vantagem: compensao de efeitos de interferncias complexas
muitas vezes desconhecidas do analista.
Mtodo da adies mltiplas.

Mtodo da adio de padres de

um nico ponto.
Mtodo da Curva Analtica A: curva construda com solues padro preparadas em gua; B:
amostra com efeito de matriz positivo; C: amostra com efeito de matriz negativo; Qx: sinal da
amostra com efeito de matriz positivo; Qx: sinal da amostra com efeito de matriz negativo; V.E:
valor esperado para a concentrao do analito nas amostras; CX: concentrao encontrada para
amostra em ambiente com efeito de matriz positivo; CX: concentrao encontrada para amostra
em ambiente de matriz com efeito negativo.
Aplicao do MAA Curva A: amostra sem efeito de matriz; Curva B: amostra com
efeito de matriz positivo; Curva C: amostra com efeito de matriz negativo. .
Clculo da concentrao: ponto nico

Considere duas alquotas idnticas (VA) da amostra de concentrao CA

transferidas para bales volumtricos (V). Em um balo se adiciona um
volume (VP) mL de uma soluo padro do analito e afere-se o balo. A
absorbncia das solues ser:

A1 kCA kVAC A kVP CP

A2
V V

Resolvendo a primeira equao para k e substituindo o resultado na

segunda, encontra-se CA:

A1CPVP
CA
A2V A1VA

E para adies mltiplas???

 FIGURAS DE MRITO PARA MTODOS ANALTICOS

So caractersticas expressas em termos numricos que podem ser

utilizadas para decidir se um determinado mtodo adequado para um
problema analtico;
Permitem restringir a escolha a relativamente poucos instrumentos;
Exatido, preciso, sensibilidade, limite de deteco e faixa
dinmica.
SENSIBILIDADE

Em geral, sensibilidade de um instrumento ou de um mtodo uma

medida de sua habilidade em discriminar entre pequenas diferenas
na concentrao de um analito;
limitada por dois fatores: inclinao da curva analtica e a
reprodutibilidade ou preciso do dispositivo de medida

Dois mtodos com a mesma preciso: mais

sensvel ser o que apresenta curva analtica mais
inclinada; se mesma inclinao, mais sensvel ser o
de maior preciso.
 IUPAC: define como sensibilidade de calibrao como a inclinao
da curva analtica na concentrao de interesse;

Em Qumica Analtica, a maioria das curvas analticas linear,

dada pela equao
S mc Sbr
Onde,
- S o sinal medido;
- c a concentrao do analito;
- Sbr o sinal do instrumento para o branco (intercepto);
- m a inclinao da reta
* Falha em considerar a preciso individual das medidas.
 Mandel e Stiehler incluram a preciso e definiram como
sensibilidade analtica,
m

sS
Onde, m a inclinao da reta e SS o desvio padro da medida.
A sensibilidade analtica relativamente imune aos fatores de
amplificao e independe das unidades de medida de S, entretanto
dependente da concentrao, uma vez que SS pode variar com a
concentrao.
 FAIXA DINMICA

Faixa que se estende da menor concentrao nas quais as medidas

quantitativas so realizadas, o limite de quantificao (LOQ), at a
concentrao na qual as concentraes se afastam da linearidade, o
limite de linearidade ;
Limite de quantificao dez vezes o desvio padro das medidas
repetidas em um branco (LOQ = 10 sbr);
Para ser til, um mtodo analtico deveria apresentar uma faixa
dinmica de pelo menos duas ordens de magnitude.
RELAO SINAL-RUDO

A medida analtica constituda de dois componentes: o sinal, que

carrega a informao sobre o analito, e o rudo, composto de
informao espria que indesejada por afetar a exatido e preciso
de uma anlise, alm de estabelecer o limite inferior da quantidade de
analito que pode ser detectada;
Na maioria das medidas, a intensidade mdia do rudo N
constante e independe da magnitude do sinal S;

O efeito do rudo sobre o erro relativo de uma medida torna-se cada

vez maior conforme a quantidade medida decresce em magnitude.
 A relao S/N uma figura de mrito muito mais til que o rudo
sozinho para descrever a qualidade de um mtodo analtico ou o
desempenho de um instrumento.
S x 1

N s RSD

Efeito do
rudo sobre
uma medida
de corrente
 As anlises qumicas so afetadas por dois tipos de rudo: qumico
e instrumental;

Rudo Qumico: se origina de inmeras variveis incontrolveis que

afetam a qumica do sistema em anlise.
Ex.: variaes no-detectadas de temperatura ou presso, flutuaes
na umidade relativa, variaes na intensidade da luz, etc.;

Rudo Instrumental: o rudo est associado a cada componente de

um instrumento, ou seja, fonte, ao transdutor de entrada, a todos os
elementos que processam sinais e ao transdutor de sada. Os rudos
so de vrios tipos e se originam de vrias fontes.
 Para melhorar a relao S/N conta-se com mtodos de hardware e
de software;

Mtodos de hardware : efetuada incorporando-se componentes no

projeto do instrumento que removem ou atenuam o rudo sem afetar o
sinal.
Ex.: filtros, choppers (moduladores mecnicos), blindagem,
moduladores e detectores sncronos;

Mtodos de software : so baseados em algoritmos computacionais

que permitem extrair os sinais em meio a dados ruidosos.