Macroinvertebrados marinhos

Bioactividade de Matrizes Naturais

5 Ano

David Pereira

Breve histria da medicina

OMS (1985)

65% da populao recorre a produtos naturais enquanto opo teraputica

1
 Drug Discovery a partir de fontes naturais

Entre 1981 e 2006:

60 % dos novos frmacos derivam ou so inspirados em produtos naturais

75 % no caso de molculas utilizadas em quimioterapia

Enorme potencial para novas molculas

Fontes de Novas Molculas

Tradicionalmente Fontes emergentes

Plantas Organismos Marinhos

Microorganismos terrestres Microorganismos marinhos
Extremfilos
Microorganismos simbiontes

2
 Fontes de Novos Medicamentos

Cancro Inflamao

Paclitaxel Vincristina cido saliclico

Camptotecina

Infeces Analgsicos

Penicilina

Morfina
Vancomicina

Screening de atividade anti-tumoral:

Taxa de Sucesso de hits

Terrestres Marinhas
0,1% 1%

3
 Ambiente marinho como fonte de leads

Baixas temperaturas
Elevadas presses Presso selectiva
Pouca luz

5% explorado
Metabolitos secundrios
(deep sea: 0,01%)

90% das espcies descritas

Palmerolide A
Loihichelins AF

Synoicum adareanum

Halomonas sp
T > 400C
IC50: 18 nM pH
H2S

4
Diversidade invertebrados = diversidade microbiana

5
 Diversidade de habitat = diversidade qumica

Os metabolitos de Myrmekioderma sp. so dependentes da profundidade

2010
2007
2004
1976
1969

6
Citarabina

2010
2007
2004
Tethya crupta
1976
1969

2010
2007
2004
1976
1969 Vidarabina

Tethya crupta

7
 Conus magus

2010
2007
2004
1976
1969

-conotoxina

100-1000x mais potente que a morfina

Conus sp.
No causa dependncia

Codificado por genes hipervariveis

8
 2010
2007
2004
1976
O
O

1969 O H
HO

N
S
N
O H
O OH
Trabectadina O
O
O
NH
Ecteinascidia turbinata
HO

2010
2007
2004
1976
1969

9
10
 NF-B Pathway
IB-

p50 p65

IKK

P P
Proteasomal degradation

IB-

p50 p65

COX-2
p50 p65
iNOS
IL-6

11
Porifera (esponjas)

Demosponges (95%)

Hexactinellida

Existe maior diversidade qumica nas esponjas do que em todos os

restantes grupos taxonmicos marinhos juntos

Porifera (esponjas)

Spongia officinalis

12
Porifera (esponjas)

Esterides

Molculas clssicas (prximas do colesterol)

Molculas raras

- 19-noresterides

- Abeoesterides (3-hidroximetil-A-noresterides)

Modificaes da cadeia lateral

Existem muitos compostos sulfatados

Esterides halogenados e alcalides esterodicos

so raros

Porifera (esponjas)

Terpenos

Heteronemina
Sesterterpeno
escalareno

Heteronemin

Ncleo escalareno
4,4,8,17,18-pentametilhomoandrostano

13
Porifera (esponjas)

Linha celular K562

Porifera (esponjas)
cidos gordos
Saturated Fatty Acids
12:0 lauric
14:0 myristic

16:0 palmitic

18:0 stearic

20:0 arachidic
22:0 behenic

24:0 lignoceric

26:0 cerotic

28:0 montanic
30:0 melissic

Unsaturated Fatty Acids

palmitoleic 16:1 9
oleic 18:1 9

cis-vaccenic 18:1 11

linoleic 18:2 9,12

-linolenic 18:3 9,12, 15
-linolenic 18:3 6,9,12
gadoleic 20:1 9
gondoic 20:1 11
arachidonic 20:4 5,8,11,14

eicosapentaenoic 20:5 5,8,11,14,17

cetoleic 22:1 11
erucic 22:1 13
docosapentaenoic 22:5 7,10,13,16,19
docosahexaenoic 22:6 4,7,10,13,16,19

14
Porifera (esponjas)
cidos gordos

Non-methylene interrupted FA

20:2 5,11

20:2 5,13

22:2 7,13

22:2 7,15

20:3 5,11,14

20:4 5,8,11,14

26:2 5,9

30:3 5,9,23

Porifera (esponjas)

Methoxylated FA
2-methoxy-Hexadecanoic (16:0)

2-methoxy-5-hexadecenoic acid (16:1 5)

2-methoxy-6-hexadecenoic acid (16:1 6)

15
Macrlidos
Halicondrina B

Halichondrin B

Halichondria okadai

16
Cnidaria

Exclusivamente aquticos

Maioritariamente martimos

Poucos halogenados

Esterides

17
Cnidaria

18
Cnidaria

Esterides

O-sulfatao nunca est presente

Gorgosterol Yonarasterol I

19
 Cnidaria

Esterides

Secoesterides

Nicobarsterol (9-11 secoesterol)

Ecdiesterides

Zoanthusterone

Cnidaria

Terpenos

Os octocorais so muito ricos em terpenos

Mais de 50 ncleos descritos

Alguns ncleos so, at data, exclusivos destes organismos

20
Cnidaria

Terpenos

MDTFC
Furano-sesquiterpeno

Sinularia kavarittiensis

Cnidaria

Terpenos

THP-1

21
Cnidaria

Terpenos

Mollusca

7 classes taxonmicas

Gastrpodes

Bivalves

Cefalpodes

22
Mollusca

Jeunicin Planaxool

Ncleo cembrano

Mollusca

Aplysia sp. Dolabella sp.

Aplysiatoxin
Dolabella auricularia

23
Dysidea avara Avarol Avarona
Sesquiterpeno (hidroquinona) Sesquiterpeno (quinona)
Alvo molecular : PLA2 Alvo molecular: PLA2

Amig et al., Life Sci, 2008

Modelos animais de inflamao

Bolsa de ar Edema plantar

Controlo Carrageenan-induced

24
 Bolinaquinona
Sesquiterpeno (quinona/hidroquinona)
Alvo molecular: PLA2
5-LOX; iNOS

Pigmentos
Grupo de compostos heterogneos, qumica e biossinteticamente

Denominador comum: presena de cromforos

Presentes em praticamente todos os grupos taxonmicos, das bactrias aos

animais

Vantagem evolutiva: cripsis, mimetizao e aposematismo

Impacto econmico: indstria alimentar, cosmtica e farmacutica, crescimento

anual de 10-15%.

25
 Pigmentos marinhos
Carotenides
Carotenoproteinas
Tetrapirris
Quinonas
Azulenos
Melaninas
Indigos

Carotenides

Daucus carota

carotenos

Carotenos Hidrocarbonetos
Xantofilas Derivados oxigenados dos carotenos
Apo / Diapo - carotenides Remoo de fragmentos terminais
Homocarotenides Mais de 8 unidades de isopreno
Norcarotenides C37, C38, C39
Carotenides aromticos Grupos terminais aromticos
Norisoprenides Fragmentao C13

26
Carotenides

Estrutura bsica reflecte a via biossinttica e consiste em 8 unidades de isopreno

Ligaes duplas conjugadas constituem o cromforo

Carotenides
Incolores Fitoeno
Amarelo - Lutena
Laranja -caroteno
Vermelho Astaxantina, Licopeno
Rosa Bacteriorubirina
Azul - Crustacianina

Carotenides

Estrutura bsica reflecte a via biossinttica e consiste em 8 unidades de isopreno

Ligaes duplas conjugadas constituem o cromforo

Astaxantina

Lutena

27
Carotenides

Actualmente, a identificao de carotenoides deve ter em conta vrios dados:

1 Perfil cromatogrfico (Ex: colunas C18 vs C30)

2 Espectro UV-vis (estrutura fina; intensidade do pico cis)
3 Espectro de massa
4 RMN (apenas quando se pretende diferenciao de estereoismeros)

C18 300
C30

Detector Response (mAU)

200
7

100
3

2 8 11
6
9
1 13 19
12 14 1516 17 20
18
0 10

0 10 20 30 40 50
Time (min)

Carotenides

28
Carotenides

C40

Phytoene

Phytofluene

-carotene

Neurosporene

Lycopene

Tetrapirrois

4 unidades pirrol

Vrias molculas essenciais vida:

hemoglobinas, hematinas e porfirinas

(8) Heme c

(7) Chlorophyll a

COOH COOH

Estruturas abertas - Ficocianobilinas

NH N H
N O
O N

(10) Phycoerythrobilin
Estruturas fechadas - Clorofilas
(9) Phycocyanobilin

(11)

29
 OH O

Quinonas
Quinonas preniladas, hidroquinonas e meroterpenos O

(12) Naphthoquinone (13) Juglone (14) Naphthazarin

(15) Spinochrome C (16) Spinochrome D

(17) Spinochrome E (18) Echinochrome A

(19) Trimethylechinochrome A (20) Dehydroechinochrome

Azulenos
Responsveis pelas cores azuis de muitos organismos marinhos

Linderazuleno e guaiazuleno

No exclusivos do ambiente marinho

(25) Linderazulene (26) Guaiazulene (27) Echinofuran

(28) iso-Echinofuran (29) 2,3-Dihydrolinderazulene (30) 8,9-Dihydrolinderazulene

30
Azulenos

Indigos

Antique purple ou tyrian purple (Sc. XIII A.C.)

Friedlander (1909) - 1.4 g a partir de 12,000 indivduos de Murex brandaris L.

31
Indigos

Mistura de vrios compostos estruturalmente relacionados 6,6-dibromoindigo

6-bromoindigo, 6,6'-dibromoindirubina, indirubina e monobromoindirubinas.

Obtidos por ruptura das glndulas hipobranquiais: contacto de sulfatos indoxlicos e

uma enzima dessulfatante

Cromforo: Ligao dupla, azoto e grupo carbonilo

(33) 6,6-dibromoindigo

(34) (35)

Indigofera tinctoria
Baptisia sp.

http://www2.britishmuseumshoponline.org/?tag=indig
o-egyptian-mummies-to-blue-jeans

32
33