4/30/2017

VRUS DA HEPATITE B
(HBV)

Famlia Hepadnaviridae

MSJ Nascimento 2017

VRUS DA HEPATITE B

*
genoma DNA , circular,

parcialmente cadeia dupla (3.2 kb)

invlucro, mas resistente aos
agentes fsicos e qumicos (grande
quantidade de protenas)

mltiplos sertipos (subtipos) e 8

gentipos A-H

*Dos vrus DNA conhecidos o que possui genoma mais pequeno

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DNA

As duas principais caratersticas da replicao do HBV

1-Transcrio reversa

Replicao
HBV

O DNA
obtido por
transcrio reversa
de um
Pr-genoma
RNA intermedirio
RNA - o pr-genoma

Lamivudina, tenofovir
(antiretrovricos)
inibidores da
polimerase HBV
(atividadeTR)

2- cccDNA (covalently closed circular DNA) forma que persiste no ncleo do hepatcito infetado

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Replicao do HBV

Esta estratgia de replicao nica

confere ao HBV
a capacidade de persistir nos
hepatcitos infetados
Alvo da nova teraputica

cccDNA (covalently closed circular DNA)

Ao contrrio do provirus DNA dos retrovirus o cccDNA no necessita de

se integrar no genoma celular

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Elevados nveis de produo de vrus +

grande turnover
+ transcritase reversa sem capacidade
proof reading

Grande n de substituies nucleotdicas

durante a replicao
1010 incorporaes incorretas
de nt / dia / doente

HBV circula como uma mistura complexa

de variantes geneticamente distintas mas
intimamente relacionadas que esto em
equilbrio em determinado momento
quasispecies

108-1010 viries/ml

22 nm

42 nm
22 nm

HBV soro de indivduo na fase aguda (imagem microscopia eletrnica)

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No soro de doentes infetados podem ser visualizados 3 tipos de partculas:

Constitudas
apenas por
S a AgHBs
partcula Dane e lpidos
infecciosa celulares

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Protenas do invlucro

Protena Major

Protena Mdia

Protena Grande

Todas possuidoras do determinante AgHBs

AgHBs
Possuidor de vrias especificidades antignicas que permitiram
a diferenciao em vrios (antes da classificao em gentipos)

SUBTIPOS

a Determinante antignico comum, especfico de grupo

d/y
Subdeterminantes antignicos presentes de modo alternado
w/r

adw
9 Subtipos: adr
ayw
ayr....

Os subtipos constituram um marcador epidemiolgico importante

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Mas os subtipos de AgHBs no refletem a verdadeira variao genotpica

Onovo sistema de classificao

baseado na sequncia nucleotdica do HBV

8 gentipos
Genotipagem A-H

No existe uma relao biunvoca entre subtipos (sertipo) e gentipos

Os gentipos so definidos com base > 8% diferena na sequncia genmica completa

8 gentipos

Os diferentes gentipos
tm uma distribuio
geogrfica distinta

Europa
EUA Gentipos B e C
frica So prevalentes na sia
ndia

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Distribuio geogrfica dos gentipos de HBV

Most commonly encountered genotypes are genotypes B and C

because more patients with chronic HBV infection are of Asian descent

Gentipos HBV / Implicaes clnicas

diferem na progresso da doena diferem na resposta ao tratamento

diferem na frequncia e nos padres de mutao

Mutantes AgHBe-negativo so mais frequentes nos gentipos B, C e D que no gentipo A

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GENOMA DO HBV
4 fases abertas de leitura (ORF) Protenas do
genes S, C, P, X invlucro
Pr-S2
Estratgia que permite ao Major - S
vrus codificar maior
S Mdia - pr-S2 / S
S
n de protenas Grande - pr-S1 / pr-S2 / S

Protenas da
nucleocpside
C
AgHBc - gene C
AgHBe - pr-C/C C
CC P DNA polimerase
X Transcritase reversa
RNAse H

Protena X
Transativador de
transcrio

GENOMA DO HBV

S C P X

Protenas do Protenas da DNA Protena X

invlucro nucleocpside polimerase (transativador de
transcrio)

AgHBc-gene C
*Major-gene S
AgHBe-pr-C/C
*Mdia-pr-S2/S
*Grande-pr-S1/ pr-S2 /S

*possuidoras do determinante AgHBs

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A existncia da fase de
transcrio reversa
durante a multiplicao do HBV
facilita a emergncia de mutantes virais

A seleo destes mutantes feita atravs da

presso seletiva endgena (resposta imunolgica do hospedeiro)
ou exgena (vacinas e antivricos)
que se exerce sobre o HBV

MUTANTES DO HBV

Mutantes do gene P (polimerase)

Mutantes do gene S
GENOMA DO
DO HBV
4 fases abertas de leitura (ORF) Protenas do
do
invlucro

Mutantes do gene C
genes S, C, P, X
Pr-
Pr-S2
S1
Estratgia que permite ao Pr- Major
Major -- SS
S Mdia
vrus codificar maior S Mdia -- pr-S2
pr-S2 // SS
n de protenas Grande
Grande -- pr-S
pr-S11// pr-S2
pr-S2 // SS

Protenas da
da
nucleocpside
C
AgHBc - gene C
AgHBe - pr-C/C C
CC Pr
-C P DNA polimerase
X Transcritase reversa
RNAse H

Protena X
Transactivador
Transactivador de
de
transcrio
transcrio

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MUTAES DO HBV - IMPLICAES CLNICAS

Mutaes do gene P (polimerase)

- Podem afetar a eficincia de replicao
- responsveis pela resistncia teraputica antiviral

Mutaes do gene S (pr-S/S) Escape mutant

- substituio de a.a. no determinante a do AgHBs levam a

alterao conformacional que afeta ligao dos Ac neutralizantes
- mutantes no neutralizados pelo anti-HBs
(explicam as infees por HBV na presena de ttulos elevados de anti-HBs)

145

G A nt 587

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Mutantes do gene C (pr-C)

- ausncia da sntese de AgHBe

mutantes AgHBe-negativo
GA nt 1896

HBV e MARCADORES SEROLGICOS

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MARCADORES SEROLGICOS

AgHBs Invlucro Antignios:

AgHBc AgHBe
AgHBs
AgHBe

AgHBc

DNA
Anticorpos:

Anti-HBs

Anti-HBe

Anti-HBc

Infeo Aguda pelo Vrus da Hepatite B

Sintomas
AgHBe anti-HBe

anti-HBc Total

AgHBs IgM anti-HBc anti-HBs

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100

Semanas aps exposio

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Progresso para Hepatite B Crnica

Aguda Crnica
(6 meses) (Anos)
AgHBe anti-HBe

AgHBs
anti-HBc Total

IgM anti-HBc

0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 Anos

Semanas aps Exposio

Hepatite B - Aspetos clnicos

Perodo de incubao
: Mdia 60-90 dias
(45-180 dias)
Doena clnica aparente <5 anos, <10%
itercia 5 anos, 20%-35%
(aumenta com a idade)
<5 anos , 30% - 90%
Infeo crnica
(diminui com a idade) 5anos , 2% -10%
Cura 90%
Mortalidade prematura
doena crnica figado 15%-25%

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Evoluo da Hepatite B versus Idade de infeo

100 transmisso perinatal 100

80 80

60 60
Infeo crnica

40 40

20 20

Infeo sintomtica
0 0
Nascimento 1-6 meses 7-12 meses 1-4 anos Jovens e
Adultos
Idade de Infeo

A patognese da
doena heptica o resultado do
equilbrio dinmico entre a
replicao do HBV
e a resposta imunolgica do
hospedeiro
O HBV no um vrus citoltico sendo a resposta imunolgica do hospedeiro,
tipicamente ineficiente e inapropriada, a responsvel pelo dano heptico
associado hepatite crnica.

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Evoluo da Infeo por HBV

Evoluo da Infeo pelo HBV

Fgado normal
Assintomtica 3000
90.000

100.000 infetados Hepatite crnica Hepatite crnica persistente

10.000 4000

Sintomtica
10.000
Hepatite crnica ativa
3000
Hepatite fulminante
Cirrose
100

Carcinoma hepatocelular

Hepatite aguda Hepatite crnica

0 6 meses 10-30 anos

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Concentrao do Vrus da Hepatite B

nos Vrios Fluidos corporais

Baixa/No
Elevada Moderada Detetvel

sangue smen urina

soro fluido vaginal fezes
exsudados feridas saliva suor
lgrimas
leite materno

Vrus da Hepatite B
Modos de Transmisso

Sexual
Parenteral
Perinatal

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Distribuio Geogrfica da Infeo Crnica por HBV

Prevalncia de HBsAg

8% - Alta
2-7% - Intermdia
<2% - Baixa

Padres da Infeo Crnica por HBV

Alta (8%): 45% da populao mundial

risco de infeo > 60%
maioria das infees ocorre na infncia
Intermdia(2%-7%): 43% da populao mundial
risco de infeo 20%-60%
infees ocorrem em todos os grupos etrios
Baixa (<2%) : 12% da populao mundial
risco de infeo <20%
maioria das infees ocorre em adultos de alto risco

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Infeo por HBV

Responsvel anualmente por 1-2 milhes de mortes np Mundo

2 Bilies INFETADOS POR HBV

257 Milhes CRNICOS EM TODO O MUNDO

20-25% progridem para doena severa crnica do fgado

(incluindo o cancro primrio do fgado)

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INFEO CRNICA POR HBV

Constitui o maior fator risco

no desenvolvimento do
carcinoma hepatocelular
(CHC)

A maior parte dos CHC

desenvolve-se aps
~ 30 anos
de infeo crnica

So fatores de risco de cirrose e CHC:

nveis elevados de HBV DNA

HBeAg status
nveis elevados de ALT

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Mecanismos de Oncognese
O mecanismo de oncognese
no
totalmente conhecido

Efeitos diretos
(ao direta do HBV)
Efeitos indiretos
(ao da resposta imunolgica e inflamatria)

Mecanismos de Oncognese

Efeitos diretos

Protena X e protena MHBs ativam a transcrio de genes

celulares (proto-oncogenes), quer alterando a ligao ao DNA
dos reguladores transcricionais celulares, quer ativando vias
de sinalizao (Nf-kb)

Estimulao da proliferao celular

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Mecanismos de Oncognese

Efeitos indiretos
A resposta imunolgica contnua conduz leso crnica celular
O processo de regenerao crnica aumenta a probabilidade
de mutaes espontneas, que podem alterar a expresso de
genes celulares e o mecanismo regulador da proliferao celular

Inflamao e fagocitose originam altas concentraes de

superxidos e radicais livres provocando danos no DNA do
hepatcito

HEPATITE B CRNICA

TRATAMENTO

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A TERAPIA ANTIVIRAL S INDICADA PARA A

HEPATITE B CRNICA

Objetivo do tratamento
Longo prazo
Prevenir a
Reduzir a
Supresso da evoluo para
inflamao
replicao viral cirrose e cancro
heptica
heptico

Imediatos
Seroconverso de HBeAg para anti-HBe

Nveis de DNA HBV indetectveis

Normalizao do nvel de ALT

Melhoria da histologia heptica

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Tipos de Resposta ao tratamento com IFN

Tipo I ............. 50% negativao HBV-DNA

Tipo II ............. 40% negativao AgHBe

Positivao anti-HBe
Lamivudina, adefovovir
Tipo III ............. 5-10% negativao AgHBs Seroconverso AgHBe:18% em 1 ano
Positivao anti-HBs Seroconverso AgHBs:rara

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O HBV no citoptico
a destruio do hepatcito
mediada por mecanismos
imunolgicos

A resposta imunolgica
A recuperao da infeo pelo HBVcontra o AgHBc decisiva
est dependente na eliminao do HBV
da
actividade conjunta do IFN e
do sistema imunolgico do doente

- As protenas da classe I HLA desempenham um papel fundamental no reconhecimento das Tc

(o hepatcito possui normalmente pequenas quantidades destas protenas)
- O IFN aumenta a sntese destas protenas
- O IFN importante na eliminao do HBV do hepatcito a facilitar o reconhecimento e a lise pelos TC

Diagnstico laboratorial da infeo por HBV

Ver o que foi dado nas aulas prticas

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