Manual de Normas Internas e de Segurana do

Laboratrio de Neuroqumica e Biologia Celular e

Molecular do Instituto de Cincias da Sade da UFBA
(ELABORAO INICIAL NOLIO MENEZES-FILHO)
SUMRIO

1. Normas Gerais
2. Riscos Fsicos
2.1. Equipamentos de vidro (Vidraria)
2.2. Equipamentos para aquecimento
2.3. Equipamentos eltricos
2.4. Equipamentos com engrenagens
2.5. Equipamentos/instrumentos perfuro-cortantes
3. Riscos Biolgicos
4. Produtos Qumicos para desinfeco e esterilizao
5. Riscos Qumicos
6. Preveno e combate a incndios
7. Primeiros Socorros
8. Queimaduras por substncias qumicas
9. Referncias bibliogrficas

2
Seo A
Manual de Normas Internas e de Segurana do Laboratrio
Para a execuo de um trabalho de pesquisa que envolva o uso de produtos
qumicos e material biolgico, se fazem necessrios alguns cuidados especiais,
pois os mesmos apresentam riscos sade do pesquisador. Alm disso,
podemos elencar outros fatores como: o uso da chama do bico de Bunsen,
equipamentos eltricos ou com engrenagens ou mesmo a imprudncia do prprio
usurio, e que tambm podem trazer como conseqncia danos materiais, perda
de equipamentos fundamentais do laboratrio, perda de reagentes, ou mesmo,
acidentes pessoais.

A formulao desse documento tem como principal objetivo o estabelecimento de

regras que devem ser conhecidas e seguidas risca em todas as atividades
desenvolvidas no espao fsico do LabNQ.

Estas regras so baseadas na experincia de trabalho no prprio LabNQ e nas

regras mnimas estabelecidas pelo governo brasileiro nos departamentos do
Ministrio da Sade e do Meio Ambiente (ANVISA e Conama) e CTNBio
(Conselho Tcnico Nacional de Biosegurana), alm disso representa o consenso
das equipes que trabalham no Laboratrio de Neuroqumica e Biologia Molecular
e Celular - LabNQ do Instituto de Cincias da Sade da Universidade Federal da
Bahia.

3
1. SUBSEO

1 - NORMAS GERAIS:
1.1. Busque sempre trabalhar com objetivos definidos, com seriedade e
ateno. Os acidentes so causados por distraes, brincadeiras e
outras atitudes inconvenientes;
1.2. O Uso do fluxo s permitido com o uso do Jaleco de mangas longas e
devidamente fechado e de uso exclusivo para este fim, presente na
ante-sala do fluxo, as mos devem ser lavadas com gua e sabo e
borrifadas com lcool a 70%. Outros EPIs (Equipamentos de Proteo
Individual), alm do jaleco como: luvas, gorro, culos de proteo,
mscara, sapatilha so sempre necessrios quando for utilizar o
gabinete de biosegurana (fluxo);
Pargrafo primeiro. Sendo os culos e luvas utilizados a critrio do
pesquisador, mas obrigatrias nos casos de manipulao de clulas
e/ou substncias qumicas que possam ser potencialmente perigosas
ao mesmo;
Pargrafo segundo. No permitida a entrada no fluxo, sob nenhuma
hiptese, de pessoas com trajes curtos como shorts, bermudas ou
saias curtas e no uso de sandlias ou sapatos abertos ou usar o
celular;
Pargrafo terceiro. No permitido o uso do gabinete de
biosegurana (fluxo) utilizando colares longos sobre o jaleco, anis,
correntes ou relgio de pulso;
Pargrafo quarto. Realizar o agendamento do fluxo com antecedncia
preenchendo a ficha anexada na porta do mesmo;
1.3. Qualquer material que venha a ser danificado durante seu manuseio
dever ser relatado no livro de ocorrncias;
1.4. Dentro das dependncias do laboratrio no permitido beber, comer,
fumar ou aplicar cosmticos ou mesmo falar alto, h local para este fim,
alimentao e conversas mais acaloradas: copa e para cuidados
pessoais; utilize o sanitrio do ICS;
1.5. O local de trabalho deve estar limpo e organizado, antes, durante e
aps o uso. Ao final dos experimentos, todos os materiais devem ser
deixados no lugar em que foram encontrados de incio devidamente
limpos, os materiais de descarte devem ser colocados em seus locais
de destino;
Pargrafo nico. Todos os materiais provindos da manipulao de
clulas devero estar embebidos em hipoclorito a 1%;
1.6. Todos os seus reagentes devem estar bem identificados e alicotados
com seu nome, ou de sua equipe e com a data de sua produo. Rotule
os frascos sempre que necessrio para melhor organizao;

4
1.7. Todas as formulaes de reagentes devem seguir os protocolos de
consenso, salvo em condies especificas e devem ser identificadas na
sua etiquetagem com as iniciais PM (Protocolo Modificado);
1.8. Caso voc tenha alguma ferida exposta, protege-a, e se estiver com
alguma enfermidade, principalmente respiratrias ou oculares, evite
entrar na sala do fluxo;
1.9. Em caso de emprstimos de materiais e/ou equipamentos busque
comunicar a outras pessoas e em alguns casos, obtenha a autorizao
de um dos professores-orientadores do LabNQ;
1.10. Em caso de acidente, com ou sem vtimas, mantenha a calma. Pare
imediatamente o que estiver fazendo, isole a rea atingida e
comunique. S execute alguma tarefa ou socorra a vtima se tiver
certeza do procedimento adequado;
1.11. necessrio o uso de luvas e culos apropriados para preparar/
manusear tubos de resfriamento abaixo de -70 C ou retirados do
nitrognio lquido;
1.12. Nunca use nitrognio lquido para resfriar materiais inflamveis ou
combustveis em mistura com o ar. O oxignio da atmosfera pode
condensar e provocar risco de exploso;
1.13. Use luvas apropriadas ao manusear materiais criognicos;
1.14. Ao manusear sistemas de resfriamento contendo gelo seco+solvente
execute a adio lenta de pequenas quantidades de gelo seco ao
solvente para evitar que o solvente derrame;
1.15. Preocupe-se em replicar sua cultura de modo que o LabNQ tenha
sempre um estoque mnimo de culturas de clulas criogenizadas. Siga
o protocolo para estocagem de clulas a risca;
1.16. Em caso de contaminao de suas culturas de clulas, informe
prontamente a todos;
1.17. Se observar alguma no conformidade advirta o(s) responsvel(eis) e
anote no livro de ocorrncia, de forma a evitar maiores problemas para
todos;
1.18. Sempre que observar algum equipamento, material ou instrumento fora
do lugar ou esquecido ligado corrija e indique no livro de ocorrncias;
1.19. Organize sua rea de trabalho ao chegar e ao sair;
1.20. O ltimo a sair do LabNQ o responsvel por desligar os
equipamentos que devero ser desligados ao final do expediente do
dia e pelo trancamento do mesmo.

Estas normas foram planejadas para serem cumpridas e o seu no

cumprimento poder acarretar punio ao aluno ou equipe e em
conseqncia a todos do laboratrio.

5
2. SUBSEO

2 QUANTO AOS RISCOS FSICOS

1. VIDRARIA
a. Use somente materiais que voc tenha a certeza de estarem
limpos;
b. Observe se o material possui a resistncia mecnica, trmica e
qumica apropriada para uso desejado. Por exemplo, no
acondicione lcalis em vidros, pois causam corroso do frasco;
c. Evite usar peas de vidro trincado ou com bordas cortantes;
d. Utilize pinas e/ou luvas para manipular vidro aquecido ou com
substncias corrosivas;
e. Descarte vidro quebrado ou trincado em recipiente apropriado
(sucata de vidro), nunca no lixo comum.

2. EQUIPAMENTOS PARA AQUECIMENTO

a. Utilize bicos de Bunsen, chapas eltricas e lamparinas a lcool
distante de substncias volteis, inflamveis e de equipamentos ou
recipientes de plstico;
b. Utilize sempre luvas e/ou pinas adequadas ao aquecer materiais,
avalie a resistncia trmica dos materiais que sero aquecidos;
c. Desligue ou apague o equipamento de aquecimento logo que
terminar de utiliz-lo;
d. Indique que o material est aquecido para evitar acidentes de
terceiros;
e. Cuidado com peas do vesturio quando estiver manipulando
equipamentos que emitem chama.

3. EQUIPAMENTOS ELTRICOS
a. Verifique a voltagem do equipamento que venha a utilizar mesmo
que ele j esteja plugado a uma tomada, algum pode ter errado;
b. No utilize equipamentos eltricos sobre superfcies midas, como
cho molhado ou prximo a substncias volteis ou inflamveis;
c. Desligue o equipamento assim que terminar de utiliz-lo.

4. EQUIPAMENTOS COM ENGRENAGENS

a. Se tiver cabelos longos, prenda-os quando for operar motores e
mquinas com engrenagens, assim como peas de roupa, mangas
compridas, colares, etc.

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5. EQUIPAMENTOS/INSTRUMENTOS PERFURO-CORTANTES
a. Utilize luvas adequadas;
b. Descarte-o em um local especifico para este fim;
c. Busque adequar a iluminao do ambiente de trabalho.

6. RISCOS BIOLGICOS
a. Em decorrncia da manipulao de produtos de origem vegetal ou
animal nos expomos aos chamados riscos de contaminao. Para
nos prevenir devemos tomar algumas precaues para o manuseio
desses materiais como:
i. Use luvas adequadas;
ii. Efetuar a limpeza de materiais indesejados com detergente e
sob ao mecnica (esfregar pano umedecido com o detergente
escolhido sob a superfcie a ser limpa);
ii. Efetuar a desinfeco com a utilizao de processos fsicos e/ou
qumicos (bico de Bunsen, lcool a 70% / hipoclorito a 1%);
iii. Esterilizao com o uso da autoclave corretamente ou com
produtos como glutaraldedo com concentrao indicada de no
mximo 2%. Este processo s indicado para superfcies como
piso, bancadas e instrumentos cirrgicos.

7. RISCOS QUMICOS
a. A preveno sempre a melhor escolha para evitarmos acidentes,
mas mesmo assim eles so passveis de ocorrncia, desta forma,
preciso seguir as regras de laboratrio, e, principalmente a utilizao
dos EPIs de maneira adequada para: transportar, manusear, estocar
e preparar reagentes. Busque, sempre que possvel, utilizar os
reagentes em diluio mxima, para sua economia e quando for
descartada agrida o mnimo possvel o meio ambiente.

8. PREVENO E COMBATE A INCNDIOS

a. (1) Busque evitar o incndio e (2) combat-lo no incio e de maneira
adequada, para tanto preciso: Conhecer as causas de incndios
para utilizar o mtodo adequado para debel-lo e ter treinamento
para seu combate. Segue tabela de uso de extintores:

7
 Tipo do Indicado para uso nos
Contra indicado para:
extintor casos de incndio em:
Papel, tecido, alguns Eletricidade, metais e
gua
plsticos e madeira lquidos inflamveis.
CO2 Combustveis e eletricidade Metais alcalinos
P Inflamveis, metais e Combustes em
qumico eletricidade. profundidade
Espuma Inflamveis Eletricidade
BFC Inflamveis e eletricidade Papel, madeira e tecido.

Classe A combustveis comuns (Madeira, papel, tecidos, plsticos, etc);

Classe B lquidos combustveis e inflamveis;
Classe C fogo em equipamentos eltricos;
Classe D metais combustveis.
a. Responsabilidade no uso de bicos de Bunsen, mistura de reagentes
e adequado uso da rede eltrica;
b. Manter a calma e o equilbrio;
c. Isolar o local at a chegada de pessoal treinado e mantenha as
janelas prximas fechadas para evitar o aumento das chamas pela
incidncia do vento, mas mantenha o local o mais arejado possvel
para que haja a necessria dissipao da fumaa e odores fortes;
d. Informar a ocorrncia de imediato aos seus orientadores e/ou
colegas mais antigos no laboratrio;
e. Caso o fogo esteja em sua roupa ou em seu corpo, dirija-se at o
chuveiro existente na entrada do laboratrio sem correr abra-o e
incida a parte em chama sob a gua at que a mesma seja
totalmente debelada.

9. PRIMEIROS SOCORROS
a. S adote alguma providncia de primeiros-socorros se estiver
plenamente pronto para execut-la, desta forma voc evitar que o
quadro inicial seja agravado pela ansiedade em ajudar. Mas proceda
com as seguintes aes iniciais em caso de queimaduras por
substncias qumicas.
i. Lave a rea atingida com bastante gua e somente gua. Se a
rea atingida for os olhos, utilize o lava-olhos e soro fisiolgico;
ii. Retire o vesturio atingido, usando para isto luvas apropriadas
ou tendo o cuidado de no tocar diretamente no local atingido;
iii. Isole o local e se possvel remova o agente causador do local
lavando-o para uma rea longe da vtima e se possvel busque
neutraliz-la;

8
iv. Evite o mximo possvel remover a vtima do local at a
chegada do socorro, a menos que haja perigo iminente, como:
fogo, desabamento de estruturas, inalao de gases
venenosos (nesse caso busque utilizar os EPIs para sua
proteo e os EPCs necessrios), etc;
v. Avise IMEDIATAMENTE aos seus colegas e orientadores;
vi. Busque socorro mdico em casos realmente necessrios pelo:
193 (bombeiros) ou 192 (SAMU), mas obtenha o mximo
possvel de informaes para que o atendimento possa ser
direcionado pelos profissionais de emergncia solicitados.

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 Manual de Normas Internas de Uso do Gabinete de
Biosegurana do Laboratrio de Neuroqumica e Biologia
Celular e Molecular do Instituto de Cincias da Sade da
Universidade Federal da Bahia.
(ELABORAO INICIAL NOLIO MENEZES-FILHO)

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SUMRIO

1. Normas Gerais
2. Riscos Fsicos
Equipamentos de vidro (Vidraria)
Equipamentos para aquecimento
Equipamentos eltricos
Equipamentos com engrenagens
Equipamentos perfurantes

3. Riscos Biolgicos
4. Produtos Qumicos para desinfeco e esterilizao
Alcois, Formol, Cloro, Iodo
5. Riscos Qumicos
6. Preveno e combate a incndios
7. Primeiros Socorros
8. Queimaduras por substncias qumicas
9. Referncias bibliogrficas

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SEO B
Manual de Normas Internas de Uso do Gabinete de Biosegurana (fluxo) do
Laboratrio Neuroqumica do ICS

1. Normas e procedimentos gerais para:

1.1 Uso do fluxo;
(a) S permitido entrada com o uso do Jaleco de mangas longas e
devidamente fechado e de uso exclusivo para este fim, presente na
ante-sala do fluxo, as mos devem ser lavadas com gua e sabo e
borrifadas com lcool a 70%;
(b) Outros EPIs (Equipamentos de Proteo Individual), alm do jaleco
como: luvas, gorro, culos de proteo, mscara, sapatilha so
sempre necessrios quando for utilizar o gabinete de biosegurana
(fluxo).
Pargrafo primeiro. Sendo os culos e luvas utilizados a critrio do
pesquisador, mas obrigatrias nos casos de manipulao de clulas
e/ou substncias qumicas que possam ser potencialmente
perigosas ao mesmo;
Pargrafo segundo. No permitida a entrada no fluxo, sob
nenhuma hiptese, de pessoas com trajes curtos como shorts,
bermudas ou saias curtas e no uso de sandlias ou sapatos abertos
ou usar o celular;
Pargrafo terceiro. No permitido o uso do gabinete de
biosegurana (fluxo) utilizando colares longos sobre o jaleco, anis,
correntes ou relgio de pulso;
Pargrafo quarto. Realizar o agendamento para isso da sala de
fluxo com antecedncia preenchendo a ficha anexada na porta do
mesmo e prime pelo cumprimento do horrio pretendido. Nunca
pretender o horrio definido para a higienizao e desinfeco da
sala de fluxo;
Pargrafo quinto. Os EPIs (como por exemplo, jalecos, luvas,
culos, mscara, touca e sapatilha) no devem ser utilizados em
reas pblicas se tiverem sido utilizados em reas contaminadas ou
no. Em caso de certeza ou dvida de contaminao destes EPIs
os mesmos devem se forem:
i. Descartveis, levados para a rea de descarte especifica;
ii. Perenes ou de longa durao como: jalecos, levados para a
lavanderia ou rea de descontaminao especifica e posterior
lavagem.
(c) Os jalecos utilizados nas reas esterilizadas (fluxo), no devem ser
utilizados na rea externa ao fluxo ou em reas reconhecidamente
contaminadas no interior dele e vice-versa, ou seja, jalecos de uso
externo ao fluxo no devem ser utilizados para a entrada no mesmo,

12
 nem mesmo por curto espao de tempo. No laboratrio ou no fluxo,
o jaleco deve estar fechado com todos os botes de maneira a cobrir
todo o vesturio pessoal. Antes verifique se o jaleco est limpo.
(d) As luvas se apresentam em diferentes materiais e
conseqentemente apresentam diferentes nveis de proteo.
Escolha a mais indicada para a sua proteo, selecionado-a nos
catlogos dos fabricantes antes de sua utilizao. Verificar sempre a
integridade fsica da luva antes de sua utilizao. E aps seu uso
retire-a com a tcnica adequada antes de deixar o fluxo, considere-a
sempre como contaminadas e d o seu descarte em local
apropriado.
(e) Os culos e mscara devem ser utilizados sempre que haja o
contato com materiais txicos e de risco com a pele exposta ou com
os olhos. Entretanto para acesso ao fluxo se faz necessrio o uso de
mscara independente do material a ser manipulado ou mesmo se
ser utilizado o gabinete de biosegurana (fluxo) ou no. O uso de
culos passa a ser obrigatrio a todos os portadores de lentes de
contato, independente do material a ser manipulado.

(f) As sapatilhas descartveis so de uso obrigatrio, pois impedir que

agentes contaminantes tenham acesso ao piso do ambiente do fluxo
e depois sejam suspensos no ar e assim contaminar outras regies
do fluxo.

(g) O procedimento de lavagem das mos e borrif-las com lcool a

70% devero ser repetidos todas as vezes que for necessrio se
ausentar da sala de fluxo e, no caso, de sada ante-sala para o
ambiente do laboratrio devero ser trocados os jalecos e retiradas
s sapatilhas, luva, gorro e culos, protocolo repetido,
exaustivamente, sempre que ocorrerem re-entradas no ambiente,
para isso:
(i) Planeje as etapas necessrias para a realizao do protocolo a
ser realizado para evitar a sada do fluxo;
(ii) Coloque dentro do fluxo todo o material que ser utilizado
durante o experimento, como: aspirador com ou sem filtro,
frascos de descartes (metade de seu volume contendo
hipoclorito a 1%), pisseta com lcool a 70%, pipetas estreis,
pipetadores, papel toalha, tubos falcon, galerias, placas/frascos
de cultura, parafilme, fita adesiva, elsticos, meio de cultura, 02
pares de luvas, seus reagentes, etc.
(iii) Evite o mximo se movimentar quando estiver usando o fluxo
para que no haja a entrada de ar externo no fluxo;
(iv) Mantenha todos os instrumentos do lado de sua mo de maior
habilidade (esquerda ou direita) e os recipientes de descarte do
lado oposto.

13
2) SALA ASSPTICA
2.1. Fluxo Laminar

Os fluxos laminares so um dos principais equipamentos na conteno

fsica de agentes infecciosos. O LABNQ provido de dois gabinetes de
biosegurana, ou capela de fluxo laminar, ou simplesmente fluxo. Um
modelo horizontal e o outro vertical.

1. Manter a porta sempre fechada (sem correntes de ar); evitar a

permanncia de pessoas que no estejam diretamente envolvidas
no trabalho naquele momento.

Figura 1. Estrutura de um fluxo vertical

2. Retire anis e relgios antes de entrar no fluxo, lave as mos como
na figura 2.

Figura 2. Como lavar as mos.

14
3) Limpar os fluxos com lcool 70% antes do incio das atividades e ao
final de cada atividade;
4) Ligar a ventilao do fluxo, por pelo menos 03 minutos para fluxo
vertical e 05 para o fluxo horizontal, antes de ligar a UV, de forma a
possibilitar que todo o ar dentro fluxo tenha sido filtrado;
5) Permanecer com a UV ligada por aproximadamente 05 minutos para
que a superfcie e ar j filtrado sejam tambm esterilizados por
completo;
6) Desligar a UV e inserir os materiais inertes borrifados com lcool
70%, principalmente a base dos recipientes, ligue novamente a UV
por mais 5 minutos inclusive o par de luvas que voc ir utilizar;

Figura 3. Colocando os materiais

inertes no fluxo laminar.
7) Desligue a UV e com as mos borrifadas em lcool a 70% troque os
lados da luva;
8) Ligue a UV por mais 05 minutos;
9) Aps este prazo desligue a UV e permanecendo com a ventilao
ligada, insira todos os frascos de solues, reagentes e outros
materiais que sero usados no fluxo, (1) borrifando-os em todas as
suas dimenses com lcool 70%, inclusive suas mos e as (2)
placas de cultura na sua face superior e com auxilio de um papel
toalha umedecido em lcool a 70%; limpe a base da placa de cultura
para evitar que o lcool entre na placa, para frascos de cultura
proceda como no item (1).
10) As caixas de ponteiras devero ser sempre novas e permanecer
lacradas durante a incidncia da UV e SEMPRE fech-las com fita
adesiva, antes de retir-las de dentro do fluxo;
11) Borrifar lcool a 70% em suas mos, mangas do jaleco e em todos
os materiais que sero utilizados dentro do fluxo evitar a entrada e
retirada das mos durante a operao e conseqentemente

15
 diminuir a entrada de ar de fora do fluxo (contaminado/no
assptico);
12) Calce as luvas dentro do fluxo;
13) Sempre que destampar algo, tampe-o enquanto no o estiver
usando;
14) No jogue restos de: parafilme, fita adesiva e outros materiais no
cho da sala assptica; coloque-os no recipiente de descarte
especifico;
15) Todos os frascos de descartes devem ser de vidro e estarem com
at metade do seu volume contendo uma soluo de hipoclorito a
1%;
16) Nunca abrir o visor frontal durante o uso do fluxo;
17) Reduza ao mnimo os materiais que ficaro dentro do fluxo durante
o procedimento. Tais objetos devem ficar no fundo do fluxo sem
obstruir as sadas de exausto (grades na mesa);
18) No usar bico de Bunsen no fluxo, pois o ar quente distorce a
cortina de ar que o fluxo gera e pode ainda danificar os filtros;
19) Trabalhar usando o meio e a parte de trs do fluxo, de modo visvel
atravs do visor frontal e sem obstruir as passagens de ar;
20) O trnsito atrs do operador deve ser minimizado para evitar
correntes de ar formadas no deslocamento de pessoas;
21) Evite ao mximo o movimento de retirada e introduo das mos
no fluxo para evitar o influxo de ar gerado com esses movimentos;
22) Mantenha-se atento a linha de segurana do fluxo para evitar que
partes do seu corpo ultrapassem a linha externa do fluxo e
possibilite a re-contaminao do ar externo para dentro do fluxo;
23) Retirar todos os materiais ao final de cada procedimento, deixando
novamente limpa a rea de trabalho;
24) Manter o fluxo funcionando por pelo menos mais 5 minutos aps o
trmino do procedimento, antes de deslig-lo;
25) Quanto maior o tempo ligado maior ser a segurana oferecida e
maior a durabilidade dos filtros, portanto, evite ligar e desligar o
sistema de fluxo do ar;
26) Observar os prazos de assistncia tcnica para as visitas de
reviso e de trocas de filtros e lmpadas UV.

2.2. Pipetadores Manuais ou Automticos

a. O uso de pipetadores manuais ou automticos obrigatrio. A

pipetagem com a boca terminantemente proibida;
b. Todas as pipetas devem ter filtro na extremidade superior para
minimizar o risco de contaminao dos pipetadores;

16
 c. No pipetar alm da capacidade da mesma, caso ocorra descarte a
pipeta e verifique se o pipetador no foi contaminado pelo lquido;
d. No soprar ar com o pipetador, dentro de lquido contendo material
infectante para evitar a formao de aerossol;
e. Homogeneizar o material infectante aspirando e expulsando o mesmo
das pipetas com muito cuidado;
f. No expelir o contedo das pipetas com fora;
g. Preferir pipetas graduadas marca a marca para evitar a expulso da
ltima gota;
h. O recipiente para descarte das pipetas deve ficar dentro do fluxo
laminar durante o procedimento e no do lado de fora e com metade
do seu volume com hipoclorito a 1%;
i. No usar seringas e agulhas para aspirar lquido de frascos;
j. No retire, mesmo que momentaneamente, a pipeta ou o pipetador de
dentro do fluxo, caso isso ocorra no a re-inclua no fluxo;
k. No uso de pipetas descartveis proceda da seguinte forma:
l. No usar pipetas Pasteur de vidro
m. Para o uso de pipetas descartveis proceda da seguinte forma:

i. Borrife a embalagem com lcool a 70%,coloque-a no fluxo antes de

ligar a UV;
ii. No momento do uso segure-a firmemente com a mo contrria a sua
de maior habilidade e prxima a 05 cm da extremidade a ser
conectada ao pipetador, incline na direo contrria a sua mo livre;
iii. Na extremidade de conexo com o pipetador rompa o invlucro at
aproximadamente 03 cm, prenda-a ao pipetador e a retire da
embalagem sem tocar na pipeta;
iv. Descarte a embalagem do lado da mo que a segura.

n. Esteja atento para no tocar a pipeta, principalmente a ponta, em

qualquer local fora do recipiente ou na boca do mesmo, caso ocorra
descarte a pipeta juntamente com o lquido em seu interior.

2.3. Bomba de Vcuo

a. Use a bomba de vcuo sempre que necessitar retirar todo ou parte

do lquido de um recipiente, principalmente se o mesmo contiver
clulas ou produtos qumicos. Este procedimento evitar a
formao de aerossis com agentes contaminantes;
b. O uso da bomba evitar que parte do lquido fique na borda do
recipiente original ou caia na bancada do fluxo quando despejado
de um recipiente para outro;

17
 c. Para usar a bomba de vcuo insira uma pipeta estril, segurando-a
no local prximo a extremidade que ser conectada a mangueira
usada para a suco do lquido;
d. Ligue a bomba de vcuo;
e. Abra o recipiente, sem sacudi-lo, inclinando-o 45, de forma a evitar
a contaminao pelo ar criao de aerossis durante a
pipetagem;
f. Para abrir o recipiente use a mesma mo que a segura;
g. Insira a ponta da pipeta exatamente acima da superfcie do lquido
e na medida em que o liquido for sendo aspirado, mova a ponta da
pipeta no mesmo sentido;
h. Prximo ao fundo do recipiente, movimente levemente a ponta da
pipeta ao redor do plete sem toc-la at que todo o liquido tenha
sido aspirado;
i. Feche o recipiente a cada vez que retirar a pipeta do seu interior;
j. Ao final aponte a pipeta para cima, de forma que no haja nenhum
resto de lquido na pipeta;
k. Caso esteja aspirando lquidos potencialmente infecciosos, o
aspirador dever ser equipado com um filtro hidrfobo entre os
frascos e a fonte de vcuo impedindo que haja contaminao no
sistema de aspirao.

2.4. Uso da Estufa

a. Verificar a temperatura e a saturao de CO2, que devero estar

em: 37o C e 5% respectivamente;
b. No abra a porta da estufa de modo brusco, para no promover
efeito de suco do ar externo para dentro da estufa;
c. Evite permanecer com a porta da estufa aberta por tempo
prolongado;
d. Identifique suas placas/frascos de cultura colocando seu nome e
data da ltima manipulao de preferncia na lateral do recipiente
para evitar que seja desprendido muito tempo para que sejam
identificadas suas culturas e a porta da estufa permanea aberta
por longo perodo;
e. Verifique a periodicidade da limpeza da estufa;
f.Limpar as mos com lcool a 70% antes de abrir a estufa;
g. NO FALAR, enquanto estiver com a estufa aberta;

h. Ao devolver garrafas de cultura a estufa, limpe-as com lcool a

70%.

18
 2.5. Uso da Centrifuga (dentro da sala assptica)

Durante o procedimento de centrifugao h a formao de uma

nuvem de aerossol e para que no haja a disperso destas partculas
no ar necessrio que operem fechadas e cumprindo-se os prazos
previstos para sua abertura aps o procedimento de centrifugao, ou
seja, que a mesma esteja totalmente inativa.

Para garantir a segurana da centrifugao necessrio:

a. Verificar se as centrifugas esto calibradas e funcionando

adequadamente;
b. Se ao final do uso a centrfuga apresentar resduos no rotor um
sintoma de mau funcionamento mecnico. Neste caso chamar a
assistncia tcnica;
c. Inspecionar caapas e rotores para verificar possveis rachaduras e
corroso;
d. Os tubos devem ser colocados tampados no interior da centrfuga;
e. Ocorrendo quebra ou rompimento de tubos durante a
centrifugao, parar o procedimento e proceder de acordo com as
rotinas estabelecidas no manual de limpeza e desinfeco;
f.No abra o recipiente recm centrifugado, espere pelo menos 20
segundos at que o aerossol formado durante a centrifugao seja
decantado;
g. Aps o procedimento de centrifugao proceder a limpeza do tubo
com lcool a 70%.

3. O TRANSPORTE SEGURO DAS AMOSTRAS

Para que haja segurana no transporte das amostras entre os diversos

laboratrios do ICS da UFBA, algumas observaes devem ser feitas:

a. Prepare recipiente para o transporte borrifando-o com lcool a 70%

colocando-o na UV aberto com sua tampa voltada para cima, por no mnimo
15 minutos;
b. Certificar-se de que os recipientes esto bem fechados e que no h
vazamento do contedo, prefira os frascos de cultura s placas;
c. Retire as frascos/placas de culturas da estufa borrifando-as com lcool a
70% e leve-as para o fluxo.

4. DESCARTE DOS RESIDUOS SLIDOS

De acordo com a NBR 12808 da ABNT (Associao Brasileira de Normas

Tcnicas), os resduos de servio de sade so classificados como Resduos
infectantes, classe A tipo:

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A.1. Biolgico;
A.2. Sangue e hemoderivados;

A recomendao para o manuseio deste tipo de resduo o tratamento pela

esterilizao na unidade geradora antes de serem descartados ou
encaminhados para incinerao (ABNT, NBR 12809). A resoluo CONAMA
no. 5 de 5/8/93 recomenda a autoclavagem ou a incinerao para o tratamento
este tipo de resduo;

O resduo perfurante ou cortante (lminas, tubos, seringas, pipetas Pasteur de

vidro, bisturis, etc) deve ser descartado em coletor rgido. O coletor deve ser
colocado prximo ao local onde o procedimento realizado para evitar a
circulao com os perfuro cortantes nas mos ou em bandejas;

Os tubos, pipetas e outros materiais no descartveis, devem ser desprezados

em coletores plsticos que so recolhidos periodicamente das reas, por
funcionrios do laboratrio responsveis pela limpeza e esterilizao. Estes
coletores tm tampa e devem permanecer tampados;

A legislao brasileira no permite o despejamento de sangue ou cogulos nas

pias, portanto no despeje restos na pia;

Os resduos biolgicos dos laboratrios devem ser descartados em lixeiras com

sacos plsticos brancos leitosos, com espessura respeitando as exigncias
legais (ABNT, NBR 9091) e com smbolo de substncia infectante;

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5. REFERNCIAS

PIKE R.M. Laboratory-associated infections. Summary and analysis of 3921

cases. Health Lab. Sci., 13: 105-114, 1976.
BARKER, K. Na Bancada, Manual de Iniciao Cientfica em Laboratrio de
Pesquisas Biomdicas: ARTMED. 2002. Reimpresso 2006.
SEWELL D.L. - Laboratory-associated infections and biosafety. Clin. Micribiol.
Rev., 8: 389-405, 1995.
GERSHON R.M. and Zirkin B.G. - Behavioral factors in safety training. In D.O.
Fleming, J.H. Richardson, J.I. Tulis, and D. Vesley (ed.),Laboratory Safety:
principles and practices, 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington,
D.C., 269-277p. 1995.
FLEMING D.O. 1995. Laboratory biosafety practices, p.203- 218. In D.O. Fleming,
J.H. Richardson, J.I. Tulis, and D. Vesley (ed.),Laboratory Safety:principles and
practices, 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
NBR 12808 - Resduos de Servio de Sade. Classificao. ABNT - Associao
Brasileira de Normas Tcnicas, Janeiro de 1993.
NBR 12809 - Manuseio de Resduos de Servio de Sade. ABNT - Associao
Brasileira de Normas Tcnicas, Fevereiro de 1993.
Ministrio do Meio Ambiente - Conselho Nacional do Meio Ambiente - Resoluo
nmero 5, de 5/8/93. D.O.U. Executivo de 31/8/93.
Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. Centers for Disease
Control and Prevention and National Institutes of Health. 4th edition, 1999.
AQUINO, A. R. de. Segurana em Laboratrios Qumicos. [s.l.] [s.d.]. Apostila.
CIPA PUBLICAES. Segurana nas Universidades. Revista Cipa. [s.l]. ano XXII.,
no. 253. pp. 50-93. dez. 2000.
GDPQ/DCA. Segurana Laboratrio. So Paulo: Rhodia S.A. Diviso Fios, jun.
1992. Apostila.
SILVA, M. S. Segurana e Higiene Ocupacional nos Laboratrios do CEA/SENAC.
So Paulo: CEA/SENAC, [200-?]. Apostila.
WOLKSWAGEN DO BRASIL LTDA. Manual de Primeiros Socorros. [s.l.]: 1996, 2
ed. Parte do Manual do Proprietrio de veculos Volkswagen.
SMBOLO DE RISCO. Disponvel em: http://pt.wikipedia.org. Acesso em: 11-set-2006.
PULIDO, M. D. Manual de Laboratrio. So Paulo: Colgio Veruska, 2004 (apostila).
Online. Banco de Dados de Segurana Qumica da UNESP
http://www.qca.ibilce.unesp.br/prevencao. Acessado em agosto de 2010.
Instituto de Qumica de So Carlos
http://www.iqsc.usp.br/iqsc/ensino/graduacao/disc_online/licenciatura/quimica2/apostil
a.pdf. Acessado em agosto de 2010.

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