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AO: 3 ERO
CDIGO: 2015-125027
GRUPO: A
TACNA PER
2017
PRACTICA N6
2. Objetivo general:
3. Objetivos especficos:
4. Marco terico:
Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa
la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas. La glucosa es un azcar que es
utilizado por los tejidos como forma de energa al combinarlo con el oxgeno de la respiracin.
Cuando comemos el azcar en la sangre se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre,
para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por el pncreas (islotes
pancreticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada
en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos.
Cuando la glucosa en sangre est muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra
hormona llamada glucagn que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre.
Cuando se tiene un exceso de glucosa en la sangre por arriba del lmite superior normal
para una edad, se presenta la hiperglucemia. Aunque los valores altos de glucosa srica
en ayunas se relacionan con suma frecuencia con la presencia de diabetes sacarina, el
nmero de enfermedades y trastornos fisiolgicos que pueden llevar a incrementos
mayores es vasto. El aumento de la concentracin de glucosa srica se da en: respuesta
a la tensin, enfermedad de Cushing, diabetes mellitus, acromegalia, hipertiroidismo,
pancreatitis crnica, administracin de algunos frmacos como diurticos clorotiacdicos
porque suprimen la secrecin de insulina, coma hiperosmolar no cetnico.
La hipoglucemia es un trastorno caracterizado por una concentracin de glucosa en
ayunas, menor al lmite inferior normal para el grupo de edad y esto sucede en:
enfermedad heptica, desnutricin, posgastrectoma, tolerancia deficiente a la glucosa,
administracin excesiva de insulina, hipoglucemia funcional o espontnea, ingestin de
alcohol en ayunas. Debido a que la concentracin de glucosa srica por lo general se
vuelve anormal slo cuando hay un trastorno grave de esta interaccin, el verificar la
glucosa srica ayuda a evaluar la funcin e integridad del sistema.
La prueba de glucosa en ayunas evala de modo aproximado la capacidad del cuerpo para regular
la glucosa y proporciona informacin acerca de la clase de anormalidad, si es que la hay. No se
tomarn alimentos ni bebidas, excepto agua, cuando menos por ocho horas antes de tomar la
muestra.
POD
2H2O2 + Fenol + 4-AF Quinona + 4H2O
6.1 Materiales:
6.2 Reactivos:
- Solucin de glucosa.
- H2O destilada
REACTIVOS PROVISTOS
Concentraciones finales
4-AF.......................................................................1,25 mM
Fenol......................................................................2,75 mM
pH..........................................................................7,4 0,1
REACTIVOS NO PROVISTOS
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10o C) hasta la fecha de vencimiento indicada
en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un ligero color rosado que no afecta su
funcionamiento siempre que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones y un
Standard peridicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O.
o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas.
1.MUESTRA
Suero o plasma
a) Recoleccin: se debe obtener suero o plasma de la manera usual. Cuando no es posible extraer
sangre venosa o en casos de extrema urgencia, la determinacin se puede realizar en sangre
capilar.
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros o plasmas con hemlisis visible o intensa deben
ser desproteinizados. No se observan interferencias por: bilirrubina hasta 200 mg/l, Glicemia
870560022 / 01 p. 2/9 cido ascrbico hasta 75 mg/l, cido rico hasta 200 mg/l, hemlisis ligera.
Referirse a la bibliografa de Young para los efectos de las drogas en el presente mtodo.
PROCEDIMIENTO
B S D1
STANDARD - 10 ul -
MUESTRA - - 10 ul
REACTIVO DE TRABAJO 1 ml 1 ml 1 ml
- Agitar o mezclar
- Incubar 10 minutos en bao de agua a 37 C.
- Luego leer en espectrofotmetro a 505 nm o en fotocolormetro con filtro verde (490-
530 nm) llevando el aparato a cero con el blanco
El color de reaccin final es estable 1 hora, por lo que la absorbancia debe ser leda dentro de
este lapso.
glucosa g/l = D x f
Aplicar la frmula:
glucosa g/l = D x f
donde f = 1,00 g/l
S
Donde:
- f: factor
- D: desconocido
- S: estndar
Flujo de procedimiento:
1. Toma de
muestra de sangre
venosa
8.Determinar la
concentracin de 2.Centrifugacin
la glucosa en cada de la muestra
tubo. 3000 rpm 3-5 min
3. Colocar en
7.Llevar al bao mara por
espectrofotmetro, 10 min para que
con una longitud de se coagule la
onda de 505 nm. muestra
4. Rotular los 4
6.Colocar en tubos de ensayo
bao mara por (TUBO :1,2,3,4)
10 min 5.Aadir a cada
tubo: 1ml Sol.
glucosa y 10 ul
del plasma
(Mezcla)
PLASMA
CAPA AMARILLA
(LEUCOCITOS)
HEMATIES(ERITROCITO)
2. Centrifugacin de la muestra 3000 rpm 3-5 min
3. Colocar en bao mara por 10 min para que se coagule la muestra
PLASMA SUERO
AADIR:
Sol. Glucosa 1 ml
Plasma 10 ul
6.Mezclar cada tubo
10. Llevar al
7. Colocar en bao
espectrofotmetr
mara por 10 min
o, con una 12.Determinar la
8. Sacar el tubo de 9.Observacin de longitud de onda concentracin de
ensayo del bao color de cada tubo de 505 nm. la glucosa en cada
Mara y tubo.
11.Observacion de
transportar con la
la Absorbancia de
gradilla
cada tubo
Aplicar la frmula:
glucosa g/l = D x f
Donde:
- f: factor
- D:
desconocido
- S: estndar
1. Tomar una de las cubetas y, tras llenarla con agua destilada, situar en el portacubetas
del espectrofotmetro y ajusta la lectura al cero de Absorbancia.
2. Llenar la otra cubeta con la dilucin previamente preparada, situar en el
portacubetas y espera unos segundos hasta que la lectura de absorbancia se
estabilice.
3. Selecciona en el espectrofotmetro una longitud de onda 505 nm y anotar el valor
de absorbancia
4. Seguir con el procedimiento ya conocido, medir la absorbancia de cada una de las 4
diluciones . La medicin de la absorbancia de los tres patrones debe realizarse en
orden creciente de concentraciones y utilizando una misma cubeta. Para ello,
despus de cada medida:
- Desechar la disolucin patrn ya medida
- Limpiar la cubeta con agua destilada varias veces
- Limpiar la cubeta con la nueva disolucin patrn una vez
- Llenar la cubeta con la nueva disolucin patrn y medir
PROCEDIMIENTO REACTIVO DE TRABAJO:
PROBETA;
50 + 5 + 5 + 40 + 0.3
Reactivos Provistos:
Reactivo de Trabajo:
son estables en refrigerador (2-10o C)
en refrigerador (2-10o C) y en frasco
hasta la fecha de vencimiento indicada
color caramelo es estable un mes a
en la caja. No mantener a temperaturas
partir de la fecha de su preparacin.
elevadas durante lapsos prolongados.
A. Reactivo A: solucin de 4-
aminofenazona 25 mmol/l en Buffer Tris
0,92 mol/l.
Observaciones:
Se realiz la muestra de sangre de una sola persona, se rotulo en diferentes tubos (Tubo :1,2,3, y
4) con lo cual se aadi la solucin de glucosa y el 10 ul del plasma en los cuatro tubos de ensayo,
lo que se diferencia en cada tubo con el otro es la medicin, precisin y desarrollo del manejo
adecuado de los materiales e equipos segn en los distintos estudiantes.
Observaciones:
Leer en espectrofotmetro con una longitud de 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco.
En cada tubo, el espectrofotmetro determin una absorbancia distinta a los dems.
Donde:
- f: factor
- D: desconocido (absorbancia)
- S: standard
Datos:
- B: 0,06 (blanco)
- St: 0.314 (standard + blanco)
- S : 0.314 0.06 = 0.308 (standard)
CONVERSION DE UNIDADES
- Glucosa (g/l) = Glucosa (mg/dl) x 0,01
- Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
PASO N3:
10. Grficas:
11. Anlisis de resultados y de grficas.
- El cuerpo humano requiere glucosa para algunas de sus funciones ms importantes. Este
azcar simple provee la energa necesaria para realizar procesos especializados como la
digestin y la respiracin celular. Los problemas con la cantidad de glucosa en la sangre
dan como resultado complicaciones que podran producir coma o incluso la muerte si no
se corrigen rpidamente.
- Conocer el nivel de glucosa en la sangre en un paciente puede ser muy eficaz para el
diagnstico y control de determinadas enfermedades
- El monitoreo frecuente de glucosa en la sangre es importante cuando empieza un plan
de control de la diabetes con medicamentos o cuando su profesional de salud cambia los
medicamentos o ajusta la dosis de los mismos.
- Muchos frmacos pueden afectar al nivel de glucosa en sangre, pero no todos afectan de
la misma manera. Si el medicamento tiende a elevarte o bajarte tu nivel de azcar.
Algunos medicamentos antiinflamatorios pueden elevar tus niveles de glucemia.
- La labor del farmacutico variar en funcin del resultado obtenido. Si el valor de glucosa
es normal y no existen otros factores de riesgo asociados, no ser necesario fijar una
fecha para un nuevo anlisis. Si el valor es correcto, pero existen antecedentes u otros
factores de riesgo, se recomendar repetir la prueba diagnstica pasado un tiempo. En
caso de que se obtengan valores ligeramente, convendr empezar un programa de
educacin sanitaria al paciente, a travs de consejos de prevencin, promocin de la
salud y seguimiento personalizado.
- La prescripcin de medicamentos est bajo la responsabilidad de los mdicos, y la
dispensacin de ellos corresponde slo a los farmacuticos. El sistema de produccin y
entrega de medicamentos, destinados a garantizar medicamentos que produzcan el
mayor y mejor efecto curativo con el menor riesgo posible.
- La posibilidad de realizar pruebas diagnsticas en la oficina de farmacia constituye una
herramienta til y necesaria para desarrollar una interesante vertiente de la Atencin
Farmacutica. El seguimiento de los principales indicadores de riesgo de las
enfermedades crnicas ms comunes en nuestra sociedad y la deteccin de problemas
de salud a travs de estas pruebas.
13. Conclusiones.
- La insulina acta como una llave que abre las puertas de las clulas y permite la entrada
de la glucosa. Sin insulina, la glucosa no puede penetrar en las clulas y permanece en el
flujo sanguneo. Como consecuencia, los niveles de azcar en sangre son mayores de lo
normal.
- En cuanto a cmo obtuvimos los resultados es muy importante recalcar que para
conseguir resultados precisos es necesario medidas precisas ya que cualquier error en
los calculo pueden afectar enormemente los resultados
- Esta prueba mide la cantidad de glucosa que hay en la sangre
- La determinacin de este parmetro se utiliza para el diagnstico de la diabetes y otras
enfermedades del metabolismo de la glucosa y para el clculo del ndice glucmico del
alimento
- Conocer el nivel de glucosa en la sangre en un paciente puede ser muy eficaz para el
diagnstico y control de determinadas enfermedades
- El monitoreo frecuente de glucosa en la sangre es importante cuando empieza un plan
de control de la enfermedad adyacente
Qu causa que la glucosa suba?
- Insuficiente comida
- Alcohol
- Mucha insulina o medicamentos (por va oral) para la diabetes
- Efectos secundarios de otros medicamentos
- Ms actividad fsica o ejercicio de lo usual, la actividad fsica hace que su cuerpo sea ms
sensible a la insulina y puede bajar sus niveles de glucosa en la sangre
14. Recomendaciones.
- El experimento tena que realizarse con mucha precisin en cuanto a las muestras .
- Como sabemos los niveles normales de glucosa en la sangre son de 80 120 Mg/dL,
observamos en la tabla niveles en algunos casos muy bajos.
- La tcnica utilizada en la determinacin de glucosa fue muy buena, pero hubo error al
tomar la cantidad de reactivo que se ha utilizado, hay que mejorar la tcnica de pipeteo
ya que al parecer es muy importante para poder obtener una buena fiabilidad en el
resultado.
- Tener cuidado al momento de usar la micropipeta para succionar el plasma y colocar
completamente en el tubo ya que esta tiende a quedarse pegada en las paredes de las
puntas.
- La dieta y la ingesta de lquidos pueden tener influencia en varias pruebas o exmenes
bioqumicas y hematolgicas.
- Ante cualquier extraccin sangunea es recomendable que el paciente realice un ayuno
previo de 8-12 horas, Tras una comida se observan notables variaciones en la
concentracin de diversos componentes, pueden dar lugar a interferencias en la medida
de algunos parmetros.
- El ejercicio fsico reciente, tambin puede alterar notablemente el resultado de algunas
pruebas biolgicas. Ello es debido a cambios hormonales, cambios en la distribucin de
volumen entre distintos compartimentos y a prdida de volumen por sudoracin
- La toma de determinados medicamentos puede interferir en el resultado de numerosas
pruebas biolgicas.
15. Bibliografa.
La Glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa al combinarlo con
el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la sangre se eleva, lo que se consume
desaparece de la sangre, para ello hay una hormona reguladora que es la insulina producida por
el pncreas (islotes pancreticos). Esta hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los
tejidos y sea utilizada en forma de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos. Cuando la glucosa en
sangre est muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada
glucagn que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre.
Enfermedades (su cuerpo descarga hormonas para combatir la enfermedad, y esas hormonas
suben su nivel de glucosa en la sangre)
Estrs (el estrs puede producir hormonas que suben su nivel de glucosa en la sangre)
Poco o largo tiempo con dolor, como por ejemplo de un golpe o quemadura de sol (su cuerpo
descarga hormonas que suben sus niveles de glucosa en la sangre)
Deshidratacin
Insuficiente comida (una comida con menos carbohidratos de lo usual, falta de una comida como
el almuerzo o la cena)