Observacin de la mitosis en clulas vegetales

1. Introduccin
La mitosis es un proceso de divisin celular mediante el cual, a partir de una clula
madre, aparecen dos clulas hijas con idntica dotacin cromosmica que su
progenitora. En la mitosis vegetal tenemos varias diferencias notorias, por ejemplo;
la primera sera que en las clulas eucariticas vegetales no existen los centriolos
lo que implica un proceso muy distinto al vegetal ya que los husos mitticos se
forman entre el centrmero y las membranas plasmticas. Tambin podemos decir
que la clula vegetal al poseer una pared celular tiene incluida otra etapa ms que
sera la divisin de esta ltima, hecha por la accin del aparato de Golgi el cual
comienza desde el centro de la clula hacia afuera sintetizando las paredes
celulares que han de formar las clulas hijas.
La divisin celular es el fenmeno citolgico por el que una clula origina dos clulas
hijas, cada una de las cuales recibe idntica informacin gentica.
Dentro de las funciones que realiza la clula eucariote, dos de las ms importantes:
La regulacin y reproduccin celular descansan en el ncleo.
El ncleo contiene la mayor parte de la informacin hereditario de la clula, es decir,
las instrucciones necesarias para el desarrollo y el metabolismo de las especies.
Este organelo es el encargado de duplicar su informacin gentica para trasmitirla
a las nuevas generaciones cuando la clula se reproduzca.
Los procesos que se manifiestan desde la formacin de una clula hasta su propia
divisin en dos hijas, son lo que se denomina ciclo celular. Este ciclo divide en dos
etapas principales: la interfase y la divisin celular, de acuerdo con los sucesos que
se presentan en la clula. La interfase se caracteriza por una serie de procesos que
implican la fabricacin activa de molculas tales como las protenas y la duplicacin
del DNA. Mientras que la divisin celular consta de la mitosis o cariocinesis en la
ocurre la condensacin y separacin de los cromosomas y de la citocinesis o
divisin citoplasmtica. La mitosis se subdivide segn los cambios que presente el
ncleo y la morfologa que presente los cromosomas en: profase, metafase, anafase
y telofase.
EL significado biolgico de la mitosis es asegurar la conservacin del patrimonio
hereditario nuclear en el proceso de formacin de un individuo adulto a partir de una
clula inicial o cigoto.
Objetivo
Hacer una preparacin microscpica de clulas meristemticas de la raz
de cebolla.
 Identificar diferentes fases del proceso mittico.
Materiales y equipo
Equipo e instrumental:
Microscopio
Estuche histolgico (pinzas, gotero, aguja histolgica, bistur)
Material de vidrio:
Cajas Petri
Portaobjetos y cubreobjetos
Mechero
Bao Mara
Pinzas de madera
Vidrio de reloj
Gotero
Reactivos:
cido Clorhdrico HCl
Safranina
Carnoy
Agua destilada
Violeta de genciana
Material vegetal:
Raicillas de cebolla( Allium cepa)
Procedimiento
Preparacin previa.
Tres o cuatro das antes de hacer la prctica se pone en bulbo de cebolla en un
vaso de precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte inferior del mismo
est en contacto con el agua. No permita que la cebolla caiga dentro del recipiente
sino que quede suspendida sobre el agua (si es necesario, inserte unos palillos de
dientes en los lados de la cebolla para que la sostengan).
Al cabo de esos tres o cuatro das se habrn formado numerosas raicillas cuyos
pices se utilizarn en esta prctica. Conviene realizar la prctica cuando las
raicillas todava no han crecido demasiado. Se debe cambiar el agua del frasco por
agua limpia, al menos dos veces, a los 3 y 4 das. La raz de la cebolla debe de estar
sumergida en agua hasta el momento de realizar la prctica.
Procedimiento:
Fijacin de la muestra:
1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su
longitud sea de unos 5 cm, ya que es en esta zona de la raz donde se
encuentran las clulas en divisin.
2. Enjuague los pices de cebolla (fijados) en agua destilada por 30 segundos.
3. Someter a solucin Carnoy.
Ablandado de la muestra
4. Medir a 20 ml. de HCl 1% en una probeta, colocar en un vaso de precipitado
de 100ml.
5. Posteriormente extrae las races previamente sumergidas en Carnoy, colocar
al vaso precipitado con los 200 ml de HCl.
6. Calentar en Bao a 60 grados centgrados durante 10 minutos.
Lavado de la muestra
7. Coloca las races previamente calentado en una capsula de Petri.
8. Agregar agua destilada para quitar residuos de HCl.
Coloracin de la muestra
9. Colocar las races en un vidrio de reloj, agregar safranina con un gotero hasta
que queden sumergidas.
10. Calentar Flameando sin dejar hervir durante aproximadamente un minuto.
11. Retirar el exceso de safranina con papel absorbente, volver a teir con
safranina y volver a calentar por un minuto flameando sin dejar hervir.
12. Quitar el exceso de safranina
Abatido de la muestra
13. Extraer las races y cortar el pice.
14. La muestra debe ser aproximadamente de 2 ml.
15. Colocar el corte del tejido de la raz en un portaobjetos, encima de la muestra
el cubreobjetos.
16. Coloque un trozo de papel toalla sobre el cubreobjetos; presione
cuidadosamente (Esta tcnica se llama extendido por aplastamiento o
squash). Recuerde que mientras est ms aplastado las clulas se
separarn ms unas de las otras y se encontrarn en el mismo plano
distinguindose menor las distintas etapas de mitosis.
17. Observe al microscopio (primero con el objetivo 4x localice el rea adecuada,
luego pase a la 10x y 40x para observar con detalles).
18. Encuentre las cuatro etapas de la mitosis, adems observe la apariencia de
las clulas que se encuentran en interface (aquellas que no estn en mitosis).
Realiza un conteo de campo.
Conclusiones
Cuestionario
1. Q