ANTIOXIDANTS & REDOX SIGNALING FORO DE ARTCULO DE

REVISIN
Volume 17, Number 5, 2012
Mary Ann Liebert, Inc.
DOI: 10.1089/ars.2011.4405

Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad

Patricia Boya

Resumen

Importancia: Los lisosomas son organelas en los que la degradacin celular se produce de una manera controlada,
separados de otros componentes celulares. Como diversas vas terminan en el lisosoma, la disfuncin lisosomal tiene un
profundo impacto en la homeostasis celular, dando como resultado mltiples situaciones patolgicas, incluyendo
enfermedades infecciosas, la neurodegeneracin, y el envejecimiento. Avances recientes: la biologa lisosomal
demuestra que adems de la regulacin de los pasos finales de los procesos catablicos, los lisosomas son moduladores
en fases anteriores esenciales de la autofagia y otras vas esenciales lisosomales. Orientaciones futuras y Temas
Crticos: permeabilizacin de la membrana lisosomal ofrece un potencial teraputico en el tratamiento del cncer,
aunque los reguladores moleculares de este proceso siguen siendo oscuros. Esta revisin se centra en los recientes
descubrimientos en la funcin y disfuncin lisosomal principalmente en situaciones in vivo.
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774.
(Traduccin libre para uso interno: Csar Amanzo).

Introduccin: El Lisosoma de la proteasa1 (S1P), una metaloproteasa embebida en la

Los lisosomas son organelas citoplasmticas rodeadas por
membranas que contienen enzimas hidrolticas que
degradan macromolculas y componentes celulares (38).
Estos orgnulos fueron descubiertos por Christian de Duve
hace ms de 60 aos, por el cual, entre otros
descubrimientos, recibi el premio Nobel en 1974 (5).
Desde hace algn tiempo el lisosoma se consider el
destino final de las vas degradativas. Sin embargo, el
inters en este orgnulo se ha reavivado debido a su
implicacin en una gran variedad de procesos importantes
en clulas y tejidos. En esta revisin se resumen algunos
de los hallazgos recientes que demuestran la importancia
de los lisosomas en muchas condiciones fisiolgicas y el
papel de la disfuncin lisosomal en condiciones
patolgicas.
Con la excepcin de los eritrocitos, los lisosomas se
encuentran en todos los tipos de clulas eucariticas. Sin
embargo, no todos los lisosomas son iguales y algunos
han adquirido funciones especficas en tipos celulares
dados, como melanosomas y grnulos lticos, que son
lisosomas tambin conocidos como orgnulos
relacionados con el lisosoma (38) modificadas.
Los lisosomas contienen muchas enzimas hidrolticas
diferentes, incluyendo proteasas, lipasas, nucleasas,
glicosidasas, fosfolipasas, fosfatasas, y sulfatasas, que
normalmente ejercen actividad enzimtica mxima a pH
bajo. Este medio cido de los lisosomas (pH 5) se
mantiene por una ATPasa vacuolar que bombea protones
desde el citoplasma hacia la luz lisosomales (38). Otros
componentes lisosomales importantes son protenas de la
membrana lisosomal que desempean funciones diversas
y cruciales en la homeostasis del lisosoma. Estas
protenas, tales como Lamp-1 y Lamp-2, estn altamente
glisosiladas y por lo tanto resisten la digestin, protegiendo
la membrana lisosomal de hidrolasas cidas (38) y
agentes que pueden daar el lisosoma (8). Las protenas
de la membrana lisosomal tambin regulan el movimiento,
la distribucin celular y la exocitosis (38).
Como ocurre la biognesis lisosomal no se comprende
totalmente (38). Un informe reciente muestra que el sitio
membrana del Golgi que regula el metabolismo del
colesterol, se requiere para la biognesis lisosoma. Las
clulas carentes de S1P muestran un defecto
caracterstico lisosomal; en lugar de ser dirigidas a la
organela, ciertas enzimas lisosomales son secretadas al
exterior de las clulas (22). La nueva evidencia muestra
que muchos genes lisosomales son regulados de manera
coordinada por el factor de transcripcin EB (TFEB) (42).
Este factor de transcripcin, que pertenece a la familia del
factor E de transcripcin-microftalmia, se une a una
secuencia palindrmica de 10 pares de bases (pb)
(conocido como el elemento CLEAR), que se encuentra en
muchos genes lisosomales, incluyendo catepsinas y las
protenas de membrana lisosomal (42). (N.T: secuencia
palindrmica: son las secuencias de nucletidos en el ADN o ARN
que son iguales si se leen en la direccin 5 3 o en la direccin
3 5. Por ejemplo: 5GAATTC3 y 3CTTAAG5 es una
secuencia palindrmica). La sobreexpresin de TFEB en
clulas HeLa induce una clara expansin del
compartimiento lisosomal y aumenta el nmero de
lisosomas por clula. Este factor de transcripcin se
transloca al ncleo despus de estrs lisosomal y exhibe
una distribucin predominantemente nuclear en MEFs de
pacientes con varias formas de enfermedades por
almacenamiento lisosomal (LSD) (42). (N.T.: Fibroblastos
embrionarios de ratn (Mouse Embryonic Fibroblasts, MEFs) se
utilizan a menudo como "clulas nodriza" en la investigacin con
clulas madre de embriones humanos). Adems de la
regulacin de genes lisosomales, TFEB tambin regula la
expresin de varios genes relacionados con la autofagia
en condiciones de deprivacin de nutrientes, en el que la
autofagia es activada como respuesta citoprotectora (43).
Curiosamente, TFEB tambin vincula mTOR a la
expresin V-ATPasa y la endocitosis (33). Por lo tanto,
mediante la regulacin de la biognesis lisosomal, TFEB
emerge como un coordinador esencial de la respuesta
autofagia -lisosomal despus del estrs.
Vas convergentes en lisosomas.
Diversas vas de degradacin convergen a nivel de los
lisosomas, incluyendo la endocitosis, la fagocitosis y la
autofagia (Fig. 1). Las dos primeras vas degradan los

Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 1
componentes desde el medio extracelular (heterofagia),
mientras que la macro-, la micro-, y la autofagia mediada
por chaperonas (AMC) degradan principalmente
componentes intracelulares (49). Durante la
macroautofagia componentes citoplasmticos, protenas
daadas y organelas enteras son degradadas y recicladas
para generar componentes bsicos para los procesos
anablicos (49). La AMC es un proceso por el cual las
protenas citoslicas que albergan un motivo con
secuencias de aminocidos especficas se incorporan en
los lisosomas a travs de la accin combinada de una
chaperona (por lo general Hcs70) y el receptor lisosomal
Lamp-2A. (N.T.: Motivo, motiv: un motivo estructural es una
estructura supersecundaria de las protenas y cidos nucleicos.
Los motivos no nos permiten predecir las funciones biolgicas: se
encuentran en las protenas y enzimas con funciones diferentes).
Mucho menos se conoce sobre la microautofagia,
mediante el cual las macromolculas son trasladadas
directamente dentro del lumen lisosomal para ser
degradadas (49). Como principal organela catablica en la
clula, los lisosomas degradan un gran nmero de
compuestos, incluyendo receptores de superficie,
macromolculas, organelas, y patgenos (Fig. 2), as
como algunas protenas de vida corta que anteriormente
se consideraban degradadas por el sistema proteasoma,
tales como p27 y la pequea GTPasa RhoB (9, 34).
FIG. 1. Vas convergentes en lisosomas.
Las modificaciones lipdicas en la secuencia de ocho
aminocidos del C-terminal de esta GTPasa de vida corta
median la rpida degradacin de ambas protenas
quimricas y RhoB que llevan esta secuencia, a travs de
la va lisosomal (34). Adems, los lisosomas tambin
degradan los organelos intracelulares que llegan al lumen
lisosomal a travs de la macroautofagia tales como las
mitocondrias (en un proceso que ahora se llama
mitofagia), ribosomas, peroxisomas, y retculo
endoplsmico. La alteracin en alguna de estas vas
puede tener implicancias importantes en enfermedades
como el cncer y la neurodegeneracin.
Funcin lisosomal: Nuevas Perspectivas
Diversos descubrimientos recientes han demostrado el
papel central de los lisosomas en el control de las
respuestas celulares a los nutrientes.
El objetivo mamfero del complejo 1 rapamicina (mTORC1)
es una quinasa que regula la respuesta celular a
aminocidos, factores de crecimiento y los niveles de
energa en el interior de la clula. mTORC1 se transloca a
la membrana lisosomal en presencia de aminocidos,
donde se activa por su modulador Rheb (41). Esta
Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad
translocacin est regulada por un complejo multiproteico
llamado regulador, que sirve como un sitio de
acoplamiento de cido amino-regulados corriente arriba
por mTORC1 sobre las membranas lisosomales. En esta
localizacin mTORC1 fosforila los efectores que modulan
el metabolismo celular y la autofagia. Un estudio reciente
por Narita et al. vincula los lisosomas adicionales y
mTORC1 (29), demostrando que vincula los lisosomas se
vinculan espacialmente con mTOR y la autofagia en un
compartimiento conocido como compartimiento de
acoplamiento espacial TOR-autofagia durante la
senescencia inducida por Ras. Esta cercana de
autolisosomas y el aparato de Golgi a mTORC1 vinculan la
degradacin de protenas dependiente de autofagia y la
sntesis de protenas de secrecin dependiente-mTOR.
Este fenotipo paradjico se observa en clulas
senescentes que muestran un alto nivel de induccin de la
autofagia y una amplia sntesis de protenas de secrecin
(29), lo que demuestra que los lisosomas se vinculan
espacialmente a mTOR y la autofagia en un
compartimiento conocido como compartimiento de
acoplamiento espacial TOR-autofagia durante la
senescencia inducida por Ras. Esta proximidad de
autolisosomas y el aparato de Golgi a mTORC1 vinculan la
degradacin de protenas dependiente de autofagia a la
sntesis de protenas de secrecin dependiente-mTOR.
Control de calidad de organela
Degradacin de macromolculas
Eliminacin de agregados
Homeostasis del colesterol
Autofagia
Homeostasis de pro-protenas
Supervivencia celular
Activacin de mTOR
Muerte celular por autofagia
Reciclaje de receptores de superficie celular
Presentacin de antgenos
Endocitosis/Fagocitosis
Degradacin de la matriz extracelular
Remocin de patgenos
Reparacin de la membrana celular
Erosin sea
Remodelacin tisular Exocitosis
Metstasis
Fertilizacin (acrosomas)
Permeabilizacin de membrana lisosomal Muerte celular
FIG. 2. Funciones lisosomales
Otros hallazgos han demostrado la importancia de la
compartimentacin y el posicionamiento lisosomal dentro
de la de clulas en el control de las respuestas a
nutrientes celulares (17). En condiciones de carencia de
nutrientes, los lisosomas agrupan en el rea perinuclear de
la clula, donde se localizan predominantemente
autofagosomas. La fusin lisosoma-autofagosoma permite
la degradacin y reciclaje para ofrecer nuevos bloques de
construccin y el mantenimiento de las funciones
celulares. En condiciones de abundancia de nutrientes, los
lisosomas se mueven a lo largo de los microtbulos a una
localizacin ms perifrica (17). El posicionamiento
lisosomal regula la sealizacin de mTOR; la recuperacin
despus de inanicin restaurando la localizacin lisosomal
de mTORC1 y de su actividad inhibidora de la autofagia
(17). La reversin, sin embargo, no es cierta; la actividad
de mTORC1 no influye en la localizacin o redistribucin
lisosomal, sealndose al lisosoma como regulador
contracorriente de este proceso (17). Yu et al.
adicionalmente vincula a de mTORC1 al lisosoma, lo que
demuestra que a pesar de un perodo inicial de inhibicin
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 2
de mTORC1 poco tiempo despus de la carencia de
nutrientes (2 h), la incubacin ms prolongada en estas
condiciones (ms de 6 h) induce la activacin de
mTORC1, como se evidencia por un incremento en la
fosforilacin de su objetivo S6K corriente abajo (50). Ms
importantemente, an es que este efecto depende de los
reguladores de autofagia Atg5 y Atg7 y de la protelisis
lisosomal, lo que indica que la autofagia y la degradacin
lisosomal regulan la activacin de mTORC1 para terminar
el proceso de autofagia (50). Por lo tanto los lisosomas
controlan tanto el paso final durante la carencia de
nutrientes (degradacin lisosomal) y la iniciacin del
proceso (induccin de autofagia).
Yu y sus colegas tambin proporcionan nuevas pistas
sobre el reciclaje de protenas lisosomales y la membrana
durante la inanicin. Ellos definen el concepto de reforma
lisosomal autofagia (RLA) como un mecanismo de
regeneracin conservada evolutivamente que controla la
deteccin de nutrientes y la homeostasis lisosomal tras la
deprivacin de de nutrientes (37, 50). Durante la activacin
mTORC1 despus de la inanicin prolongada, estructuras
tubulares sobresalen de las membranas autolisosomales,
creciendo para formar vesculas que por ltimo se
estrangulan para dar lugar a proto-lisosomas. Estas
nuevas organelas aisladas son positivas para los
marcadores de membrana lisosomal como Lamp-1,
aunque no se tien con la sonda cida roja Lyso Traker o
con dextranos endocitados, lo que indica que estas
estructuras permiten el reciclaje de la membrana
lisosomal, pero no del contenido autolisosomal (50). La
incubacin con rapamicina durante la inanicin previene, lo
que indica que este proceso depende de La RLA regulada
por mTORC1. La RLA regulada por mTORC1 proporciona
as la inhibicin por retroalimentacin para terminar la
autofagia despus de la inanicin prolongada, as como la
mediacin del reciclaje de las protenas de la membrana
lisosomal y de protetnas de membrana a travs de la
formacin de proto lisosomas de la membrana del
autofagolisosoma (50). Recientemente la permeasa
lisosomal Spinster fue identificada como reguladora de la
reactivacin de mTORC1 y de la RLA que sigue a la
inanicin prolongada (37). Tomados en conjunto, la nueva
evidencia apunta hacia los lisosomas, no reguladores
corriente arriba, como actores esenciales y activos en el
control de la respuesta celular al estrs nutricional.
Vas Lisosomales en el Desarrollo y Diferenciacin
Pocos estudios han abordado el rol de la funcin lisosomal
durante el desarrollo. La catepsina D (CD) y el cido-
ADNasa II parecen estar sobreexpresado en reas de
muerte celular prominente durante el desarrollo de las
extremidades y el corazn (27). La CD se expresa durante
la metamorfosis de los insectos de manera especfica en
una etapa del desarrollo y en tejidos especficos, y
regulado transcripcionalmente por la hormona ecdisona.
La deplecin de RNAi de CD detiene la metamorfosis de
larvasa pupas y suprime la fragmentacin del ADN (12). La
actividad de la catepsina durante el desarrollo del insecto
puede estar relacionado con la participacin de la
autofagia y la degradacin de lisosomal en la
metamorfosis de Drosophila, en el que tanto la autofagia y
las caspasas desempean papeles prominentes (24). Las
funciones de los lisosomas y la autofagia durante el
desarrollo parecen estar relacionados con la muerte
celular programada. De hecho, la autofagia es
indispensable para la eliminacin de las clulas
apoptticas durante el desarrollo de la retina (25), aunque
Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad
este efecto parece ser especfico de la muerte celular en
los neuroblastos y las neuronas de recin nacidos, sin
afectar a la eliminacin de cuerpos apoptticos de
neuronas maduras (26). Un fenotipo similar de
aclaramiento defectuoso ha sido descrito en un modelo en
Drosophila de una enfermedad por almacenamiento
lisosomal, la Mucolipidosis tipo IV (44).
Durante el desarrollo las decisiones del destino celular son
influidas por morfgenos que son necesarios para modelar
el embrin. La evidencia reciente demuestra que la ritmo al
que se internalizan los receptores de morfgenos
sensibles es el trfico hacia los lisosomas resultando
crucial para detectar gradientes de morfgenos sensibles
durante el desarrollo (32).
Otros estudios han demostrado la importancia de la va
endolysosomal para la bsqueda de caminos axonales y la
la formacin de sinapsis. La prdida de la subunidad a1 v-
ATPasa especfica neuronal en la metamorfosis de
Drosophila conduce a la acumulacin progresiva del
receptor de orientacin endosomal, alterando su volumen
de recambio y la de sealizacin despus de la
diferenciacin neuronal (47). Hallazgos recientes tambin
han demostrado un papel clave para lisosomas en la
remodelacin de la glndula mamaria despus de la
lactancia (vase ms adelante). Por lo tanto los lisosomas
juegan diferentes roles durante el desarrollo y la
diferenciacin, la deteccin de gradientes morfgenos, la
remodelacin de componentes intracelulares durante la
diferenciacin celular, y la participacin en muerte celular,
ya sea induciendo directamente a muerte celular
dependiente de catepsina o mediante la degradacin de
las clulas apoptticas.
Los Roles de los lisosomas en la muerte celular
programada: La Permeabilizacin de la Membrana
Lisosomal.
Teniendo en cuenta sus altos niveles de enzimas
hidrolticas, los lisosomas son potencialmente dainos
para la clula (3). El dao a la membrana lisosomal
produce la liberacin de su contenido en el citoplasma,
induciendo la degradacin indiscriminada de los
componentes celulares. Adems, la ruptura lisosomal
masiva puede inducir la acidificacin citoslica, que a su
vez puede inducir la muerte celular por necrosis (Fig. 3).
Este concepto fue descrito por primera vez por Christian
de Duve, que denomin 'bolsas suicidas' a los lisosomas ''
(5).
Sin embargo, como se discuti en la seccin de
procedimientos, la selectiva y parcial permeabilizacin de
la membrana lisosomal (PML) induce la muerte celular
controlada.
La PML provoca la translocacin de contenido lisosomal al
citoplasma. Las proteasas implicadas en la muerte celular
son catepsina que permanecen activas a pH neutro, tales
como catepsina B, CD, y catepsina L (3). Estas proteasas
desencadenan una cascada de eventos que culminan en
la activacin de efectores apoptticos (Fig. 3), incluyendo
las mitocondrias las caspasas y otros efectores an
desconocidos (3). Los mtodos especficos para identificar
La PML en las clulas y los tejidos han sido revisados
previamente (3, 13).
La lista de compuestos que pueden inducir la PML (3 10
14). Una relacin actualizada clasificada de acuerdo a la
familia se muestra en la Figura 4. Sin embargo, el papel de
estos compuestos en la induccin de la PML no ser
discutido aqu. Las clulas tambin contienen inhibidores
endgenos que pueden proteger contra el dao lisosomal;
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 3
la familia Hsp70 de las chaperonas ha mostrado proteger
las membranas lisosomal de los agentes perjudiciales (16).
Por otra parte mediante la unin a los lpidos fosfolpidos
aninicos bis (monoacilglicerol) fosfato lisosomales, la
Hsp70 recombinante puede revertir el fenotipo observado
en pacientes con la enfermedad de Niemann-Pick A, una
asociado con una disminucin de la estabilidad lisosomal
(16). La escisin mediada por calpana de Hsp70 fue
descrito recientemente en las neuronas CA1 del
hipocampo de monos despus de dao por isquemia-
reperfusin (39). Adicionalmente apoyan la funcin
protectora de la Hsp70 en la funcin la muerte celular
mediada por lisosomas, la 2-feniletinesulfonamida, un
inhibidor de la actividad de la Hsp70, que suprime el
desarrollo tumoral in vivo (20).
FIG. 3. Vas de muerte celular despus de
permeabilizacin de la membrana lisosomal.
Aunque numerosos estudios han demostrado la muerte
celular mediada por lisosomas en cultivo, no hay evidencia
clara de que la PML se haya reportado durante la muerte
celular fisiolgica. Recientemente, inducida por que la PML
ha sido implicada en la regresin de la glndula mamaria
luego de la lactancia (18). Este proceso se produce tras el
destete e implica la eliminacin controlada de clulas de la
glndula mamaria por la muerte celular programada. En la
primera fase de regresin post lactancia, los lisosomas se
vuelven goteras y las catepsinas B y L son translocadas al
citoplasma, induciendo la muerte celular independiente de
caspasas. La regulacin molecular de este PML sigue
siendo difcil de elucidar, aunque una disminucin en la
expresin de la protena de membrana lisosomal Lamp-2,
que precede a la PML en otros sistemas (7), se observa
despus de la lactancia. Adems de la mayor sensibilidad
a la PML durante la involucin de la glndula mamaria, el
perfil proteico de expresin de los precursores catepsinas
B y L aumenta bruscamente despus del destete,
acompaado por un aumento en la presencia de las
formas activas en el sobrenadante lisosomas purificados,
indicando fuga lisosomal (18).
Kreuzaler y sus colegas demostraron adems que Stat3
controla la expresin de estas protenas y que la supresin
especfica de este factor de transcripcin en la glndula
mamaria retrasa significativamente la regresin post
lactancia. Ms importante, la administracin in vivo del
inhibidor de catepsina B CA-074-Me que retrasa
significativamente la muerte celular y la regresin de la
glndula mamaria, lo que indica que la PML es un evento
crucial en este proceso (18). Estos hallazgos recientes
vinculan Stat3 con la PML dentro de un paradigma la
Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad
muerte celular fisiolgica. Si estos hallazgos pueden
ayudar a la bsqueda de nuevas terapias para tumores
mamarios an est por demostrarse. Mientras que las
caspasas se activan durante la involucin de la glndula
mamaria, el proceso de regresin post-lactancia es normal
en animales deficientes en caspasa, lo que sugiere que la
activacin de la caspasa durante este proceso puede ser
una consecuencia, en lugar de una causa, de la muerte
celular (18).
FIG. 4. Agentes que inducen la permeabilizacin de la
membrana lisosomal.
Adems de la morfologa clsica de las clulas
apoptticas, los estudios que utilizan la remodelacin de la
glndula mamaria bovina han identificado clulas cargadas
con autofagosomas que estaran clasificadas como de tipo
II o muerte celular autofgica acuerdo con las definiciones
morfolgicas antiguas de muerte celular.
La induccin de autofagia como es determinada por
microscopa electrnica, as como la regulacin positiva de
LC3 y beclin 1, es observada durante la remodelacin de
la glndula mamaria. Sin embargo, un examen cuidadoso
indica que el proceso de autofagia puede ser activado
como consecuencia de la inanicin celular o como un
mecanismo citoprotector para prevenir la muerte celular
(28). Si la autofagia tambin brinda un mecanismo
eficiente para la remodelacin celular durante la involucin
de la glndula mamaria est todava por dilucidar.
Relativamente pocos estudios in vivo han abordado la
relacin entre la desestabilizacin de la membrana
lisosomal y la muerte celular patgena [para los primeros
informes por favor consulte Ref. (3)].
Un informe reciente demuestra que la PML seguido por
muerte dependiente de macrfagos es esencial para la
eliminacin de la infeccin neumoccica in vivo (2).
Mientras PML claramente induce la muerte celular, los
eventos moleculares que conducen a la fuga de la
membrana lisosomal permanecen oscuros; PML puede
ocurrir por la rotura no selectiva de la membrana o
alternativamente a travs de la formacin de poros
especficos que permiten la translocacin selectiva de
molculas hasta de cierto tamao a travs de la
membrana lisosomal parcialmente permeable.
Los lisosomas en la terapia del cncer
La capacidad de los lisosomas para matar las clulas a
travs de de PML se ha aprovechada en el desarrollo de
tratamientos contra el cncer. Una amplia variedad de
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 4
agentes puede matar a las clulas cancerosas in vitro
[para revisiones ver Refs. (3, 10)] (Fig. 4).

Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 5
 Cuadro 1 Los modelos y Enfermedades recientemente descritas asociadas con la disfuncin lisosomal
Para desarrollar terapias no txicas y eficientes contra el
cncer, debe hacerse una distincin entre las clulas
sanas y tumorales, ya que todas las clulas contienen
lisosomas. Sin embargo, los lisosomas de las clulas
cancerosas exhiben varias propiedades que difieren de los
de las clulas no-transformadas, que pueden ser
aprovechadas en las estrategias teraputicas. Durante la
transformacin celular, las clulas cancerosas sufren
cambios lisosomales profundos, afectando el tamao, la
localizacin intracelular, la expresin de catepsina, y la
actividad enzimtica. Por otra parte, varios hallazgos
sugieren que los lisosomas de las clulas cancergenas
pueden ser ms susceptibles a la PML. Por ejemplo, el
aumento del tamao de los lisosomas en las clulas
cancerosas las hace ms susceptibles a los agentes
desestabilizadores (11). Adems, se encontraron
mutaciones que alteran los componentes de la ruta de
degradacin lisosomal para contribuir al desarrollo y
progresin del tumor en un tamiz gentico realizado en la
metamorfosis de Drosophila (4). Un informe reciente ha
demostrado que la induccin de la autofagia celular y
muerte celular dependiente de PML mata mediante los
efectos antitumorales de la delta (9)-cannabinoide-
tetrahidrocannabinol (THC) contra glioma (40). Adems,
una estrategia que combina la inhibicin de Akt con
agentes lisosomotrpicos que perturban la estabilidad
lisosomal (cloroquina) ejerce efectos antitumorales in vivo
(6). La explotacin de la muerte celular mediada por PML
para la terapia del cncer por tanto, representa una nueva
y potencialmente beneficiosa va teraputica para el
tratamiento de tumores humanos.
Disfuncin Lisosomal
Las Enfermedades por Depsito Lisosomal (EDL) son
patologas en las que un defecto lisosomales provoca
Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad
acumulaciones anormales intra-lisosomales de materiales
no digeridos.
Hasta la fecha, se han identificado ms de 50
enfermedades genticas monognicas humanos
asociadas con disfunciones lisosomales.
Aunque estas enfermedades son provocadas por una
mutacin monognica, los eventos moleculares y celulares
subyacentes son muy complejos y siguen sin estar claros
(46). Las mutaciones ms comunes en estas
enfermedades se encuentran en las enzimas lisosomales
solubles, protenas lisosomales no enzimticas (solubles o
unidas a la membrana), que regulan las funciones
lisosomales tales como el trfico de protenas lisosomales
(46).
Estas enfermedades se heredan de forma autosmica
recesiva, y la actividad residual de la protena mutada
determina la penetrancia de la enfermedad. Las
mutaciones nulas provocan sntomas in tero o durante la
primera infancia, mientras que las mutaciones ms leves
llevan a enfermedades de inicio juvenil o durante la adultez
(46). Las consecuencias corriente abajo de las EDL, por lo
general incluyen el trfico alterado de lpidos , la
homeostasis del calcio, y la inflamacin que contribuye a la
patognesis (46). Adems, dado que los lisosomas son el
paso final en el proceso de autofagia, las alteraciones
lisosomales tienen defectos profundos en la autofagia y la
acumulacin de autofagosomas, como se ha informado de
muchas Enfermedades por Depsito Lisosomal (EDLs)
(Tabla 1).
La neurodegeneracin asociada con la disfuncin
lisosomal y la autofagia ha sido bien documentada (31,
36). La enfermedad de Alzheimer (EA) es la causa ms
comn de demencia, la prevalencia de los cuales aumenta
con la edad. Varias observaciones sealan a la funcin
lisosomal defectuosa en esta enfermedad (30).
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 6
Adems, una relacin inesperada se ha informado entre la
EA y la proteolisis lisosomal defectuosa asociada con la
acidificacin reducida de los lisosomas (19). La protena
presenilina 1, que a menudo est mutada en la EA, es
esencial para la translocacin de la subunidad V0a1 v-
ATPasa a los lisosomas (19). Los niveles reducidos de
esta ATPasa lisosomal disminuye la acidificacin
lisosopmal, lo que dificulta la activacin de la proteasa
bloqueando la funcin lisosomal (19). En consecuencia, de
presenilina 1 reduce la degradacin de sustratos
autofgicos/lisosomales. Similares defectos de maduracin
del autolisosoma se han descrito en las neuronas de los
cerebros de modelos de ratn de hipofuncin PS1 y en
clulas de pacientes con EA con mutaciones de
presenilina 1. Una relacin adicional entre EA y la
actividad lisosomales es sugerida por la evidencia reciente
que demuestra truncamiento C-terminal anormal de tau y
acompaa a la activacin de caspasas de animales con
deficiencia de catepsina D (15). Por otra parte, en ratones
con delecin gentica de la cistatina B, un inhibidor
endgeno de proteasas cistena lisosomales, la
acumulacin anormal de pptidos amiloide-b, de protenas
ubiquitinadas, y otros sustratos autofgicos dentro
autolisosomas/lisosomas son atenuados, y la
neurodegeneracin asociada a defectos de aprendizaje y
memoria fue prevenida (48). En conjunto, estos resultados
apoyan el papel de la funcin lisosomal adecuada en la
prevencin de la neurodegeneracin.
En un modelo de ratn de la enfermedad de Parkinson
(EP), la acumulacin de autofagosomas y la muerte celular
dopaminrgica est precedida por una marcada
disminucin en los niveles de las protenas lisosomales
Lamp-1 y Lamp-2, y una reduccin en los lisosomas dentro
de las neuronas dopaminrgicas (7). La deplecin
lisosomal es secundaria a la permeabilizacin de las
membranas lisosomales inducida por el aumento de las
especies reactivas del oxgeno derivadas de la
mitocondria. La PML produjo en la limpieza defectuosa y la
subsiguiente acumulacin de autofagosomas no
degradados y contribuy directamente a la
neurodegeneracin por la liberacin ectpica subsiguiente
de proteasas lisosomales en el citoplasma (7). La ruptura
lisosomal y la acumulacin de autofagosomas tambin se
observa en muestras de cerebro con EP, en el que los
cuerpos de Lewy son fuertemente inmunorreactivas para
marcadores autofagosomas. Es importante destacar que la
induccin de la biognesis lisosomal por la activacin
gentica o farmacolgica de TFEB lisosomal restaura los
niveles lisosomales, aumenta el aclaramiento de
autofagosomas, y atena la muerte celular. La rapamicina
compuesto potenciador de la autofagia-atena la
neurodegeneracin dopaminrgica relacionada con EP,
tanto in vitro como in vivo, restableciendo los niveles
lisosomales. Cambios similares se producen en muestras
de cerebro con EP, en el que los cuerpos de Lewy parecen
derivar de autofagosomas no degradados (7). Estos
resultados indican que la acumulacin de autofagosomas
en EP resulta de una limpieza defectuosa lisosomal
aclaramiento mediada por autofagosomas secundaria a la
deplecin lisosomal. La restauracin de los niveles
lisosomales y la funcin puede as representar una nueva
estrategia neuroprotectora para el tratamiento de la EP
(45).
Acumulacin patolgica de la alfa-sinuclena es una
caracterstica de la EP y otras enfermedades
neurodegenerativas llamado sinucleinopatas.
Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad
In vivo, esta protena es degradada por las vas
lisosomales y en particular por CMA (21). Un vnculo entre
sinucleinopatas y LSD fue propuesto recientemente. La
acumulacin de a-sinuclena est asociada con una
reduccin en la expresin de la glucocerebrosidasa, la
enzima lisosomal mutada en la enfermedad de Gaucher
(23). El anlisis bioqumico ha demostrado que la
deficiencia de glucocerebrosidasa aumenta los niveles de
oligmeros solubles sinuclena, resultando en
neurotoxicidad dependiente de la agregacin. Este fue un
efecto especfico, como la inhibicin general lisosomal, con
leupeptina increment slo los niveles de formas
insolubles. Por otra parte, a-sinuclena inhibe la actividad
lisosomal de glucocerebrosidasa, generando un circuito de
retroalimentacin positiva y que conduce a la
neurodegeneracin. Tomados en conjunto, estos hallazgos
demuestran un papel clave de la deplecin de la
glucocerebrosidasa en la patognesis de sinucleinopatas
espordicas (23).
La enfermedad de Lafora es un trastorno gentico
autosmico recesivo fatal tambin conocido como
epilepsia mioclnica progresiva de Lafora. La enfermedad
se caracteriza por la presencia de cuerpos de inclusin,
conocidos como cuerpos de Lafora, dentro de las
neuronas y las clulas del corazn, el hgado y la piel. Las
mutaciones en esta condicin patgena se producen en
los genes EPM2A y EPM2B, que codifican las protenas de
laforina y malina, respectivamente. Los pacientes con la
enfermedad de Lafora sufren un trastorno
neurodegenerativo asociado con deterioro intelectual
progresivo y ataxia, adems de epilepsia.
Los cuerpos de Lafora se componen de acumulaciones de
glucgeno anormales llamadas poliglucosanos, que son
insolubles y por lo tanto precipitan dentro de las clulas.
Aunque la patognesis molecular de la enfermedad sigue
siendo poco conocida, se ha propuesto que es un
trastorno de aclaramiento defectuoso. Adems de la
degradacin enzimtica en el citosol, el glucgeno se
degrada en los lisosomas por la alfa-glucosidasa cida
(tambin conocido como de maltasa cida), a travs del
sistema de sustrato p62 de autofagia lisosomal. La
importancia de esta va de sustrato p62 de autofagia las
vas lisosomales de degradacin del glucgeno se ilustra
en la enfermedad de almacenamiento de glucgeno tipo II,
o enfermedad de Pompe, en el que esta nica enzima
lisosomal es deficiente (35). Los estudios recientes han
demostrado que deficientes de laforina regula sustrato p62
de autofagia de una manera dependiente de mTOR (1).
Adems, las clulas de pacientes-deficientes de laforina y
fibroblastos embrionarios de ratn de ratones -deficientes
de laforina exhiben niveles reducidos de LC3-II y
acumulaciones de protenas poli-ubiquitinadas y el sustrato
p62 de autofagia (1). En conjunto, estos resultados
demuestran el papel regulador de deficientes de laforina
en sustrato p62 de autofagia y sugieren que su ausencia y
los defectos asociados en sustrato p62 de autofagia
podran predisponer a los pacientes a la enfermedad de
Lafora a la neurodegeneracin. El efecto de mutaciones de
malin sobre el sustrato p62 de autofagia y las vas
lisosomales en la enfermedad de Lafora queda por
esclarecer. Por lo tanto la disfuncin lisosomal aparece
como una caracterstica comn en muchas condiciones
patolgicas, incluyendo enfermedades por depsito
lisosomal, la neurodegeneracin, y el envejecimiento.
Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 7
Comentarios finales y direcciones futuras
Los lisosomas ya no se consideran las bolsas de basura
en la que se depositan los desechos celulares, sino que
han surgido como reguladores cruciales de la homeostasis
celular. Los resultados recientes han demostrado el
acoplamiento de la biognesis lisosomal y la respuesta al
estrs a travs del factor de transcripcin TFEB, y nuevos
e inesperados vnculos entre los lisosomas y la quinasa
esencial mTORC1 han sido descritas. Los lisosomas
mTOR regulan la localizacin subcelular y la actividad,
formando as un circuito de retroalimentacin que conecta
seales ascendentes a reacciones catablicas fuertemente
reguladas. A su vez, mTOR controla el reciclado de la
membrana lisosomal y de protenas a travs de la va
reformacin lisosomal autofgica conservada
evolutivamente, generando un proto-lisosoma que da lugar
a un lisosoma maduro totalmente funcional. La
compartimentacin tambin emerge como un nuevo punto
de control regulatorio en la biologa del lisosoma. La
localizacin subcelular de los lisosomas controla su
actividad, y la proximidad fsica parece ser importante para
acoplar simultneamente la sntesis de protenas y la
degradacin, dos procesos que anteriormente se
consideraban incompatibles.
Nuevas evidencias han aportado la prueba de que la
Permeacin de la Membrana Lisosomal (PML) se produce
in vivo durante la muerte celular fisiolgica en la involucin
de la glndula mamaria.
Si esto puede ser aprovechado para nuevas terapias
contra otros tumores mamarios queda por demostrar.
La disfuncin lisosomal es una caracterstica comn
asociado con muchas enfermedades neurodegenerativas.
Por lo tanto, las terapias destinadas a restaurar la funcin
lisosomal pueden tener aplicaciones para el tratamiento de
enfermedades tales como la Enfermedad de Alzheimer
(EA) y la Enfermedad de Parkinson (EP). Adems la
comprensin del control lisosomal de otras funciones
celulares y la identificacin de reguladores moleculares de
la PML y la reformacin lisosomal autofgica ser esencial
para el desarrollo de nuevas terapias para el tratamiento
de enfermedades infecciosas, el cncer, la
neurodegeneracin, y el envejecimiento.

Referencias

Funcin y Disfuncin Lisosomal: Mecanismos y Enfermedad Antioxid. Redox Signal. 17, 766774. 8