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Braslia/DF 2015
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Esta diretriz se refere aos procedimentos de eutansia realizados em animais
includos em atividades de ensino ou de pesquisa cientfica.
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Alguns mtodos de eutansia requerem conteno fsica do animal, realizada de
acordo com a espcie, raa, tamanho, estado de domesticao, comportamento, presena de
dor ou doenas, grau de excitao cerebral. Por esta razo, a manipulao correta do animal
fundamental para minimizar a dor ou o sofrimento para garantir a segurana do pessoal
envolvido, para proteger terceiros e outros animais.
Em todos os casos anteriormente descritos, o mesmo mtodo deve ser utilizado para
causar a morte do animal, independente da razo, exceto, em condies excepcionais,
quando os animais so mortos como parte de um protocolo e o mtodo tiver de ser
compatvel com os fins da proposta. No caso especfico, o mtodo deve ser avaliado
cuidadosamente e autorizado pela Comisso de tica no Uso de Animais - CEUA da
Instituio, sem conflito com as diretrizes aqui estabelecidas.
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3. Condies necessrias para eutansia do ponto de vista do executor
A eutansia exige consideraes morais e ticas para que a prtica seja realizada de
forma humanitria. A exposio constante dos tcnicos ao procedimento de eutansia pode
afet-los psicologicamente sob diversas formas. Causar a morte de animais difcil do ponto
de vista psquico, particularmente quando ocorre de forma frequente e resulta no
envolvimento do executor com os animais. O efeito emocional da eutansia nas pessoas
ocorre mais intensamente quando h necessidade de causar a morte de um grande nmero de
animais e de forma repetida. Alguns indivduos podem estabelecer mecanismos psquicos de
defesa, de modo a reduzir a empatia e o respeito no manuseio dos animais, j outros podem
experimentar um sentimento de pesar e tristeza pela perda da vida. Os envolvidos no
devem trabalhar sob presso ou estar obrigados a praticar a eutansia, sugerindo-se que haja
uma rotatividade entre os seus executores. A pessoa responsvel pela eutansia deve ter
conhecimento tcnico, usar mtodos humanitrios de manuseio, entender o motivo pelo qual
o animal est sendo morto, estar familiarizado com o mtodo e informado sobre a finalidade
a que se destinar o cadver.
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conhecimento da(s) espcie(s), de mtodos humanitrios de conteno e das possveis
respostas que inter-relacionem os mtodos e as espcies.
A expresso da dor pode ser muito sutil nos animais. O fato de os animais no
aparentarem dor, no indica que estes no a esto sofrendo. necessria uma qualificao
especfica para o reconhecimento da dor, mesmo para tcnicos e profissionais experientes
com a espcie.
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A expresso facial e posturas corporais indicam vrios estados emocionais. Algumas
respostas comportamentais e fisiolgicas a um estmulo considerado nocivo incluem:
vocalizao, ato de se debater, tentativas de escapar, agresso, salivao, mico, defecao,
secreo de glndulas adanais, dilatao da pupila (midrase), aumento da frequncia
cardaca (taquicardia) e respiratria (taquipnia), sudorese, tremores, espasmos e contraes
musculares e, no caso dos ruminantes, timpanismo. O medo pode causar paralisia em certas
espcies, particularmente em coelhos, ovinos e aves. Esta ocorrncia no deve ser
interpretada como perda da conscincia. A vocalizao, a alterao de comportamento e a
liberao de odores ou feromnios por parte dos animais sob estresse podem causar
ansiedade e apreenso em outros animais, da a importncia da ausncia de outros animais
no ambiente. Da mesma forma quando do uso de cmaras de inalao, as mesmas devem ser
limpas aps a morte de cada animal ou grupo de animais, para assegurar que os demais no
se exponham a resduos que desencadeiem sinais olfatrios de alarme.
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5. Confirmao da morte do animal
imperativa a confirmao da morte antes do descarte do animal, pois animais
inconscientes podem parecer mortos, entretanto, podem se recuperar, o que inaceitvel.
Todos os sinais a seguir devem ser associados para confirmar a morte do animal:
ausncia de movimento respiratrio (apneia); ausncia de batimentos cardacos (assistolia),
preferencialmente, por meio do uso de estetoscpio, ou equipamento que o substitua, como,
por exemplo, doppler-ultrassom; ausncia de pulsao, mucosas plidas e perda do reflexo
corneal ou queles apropriados para a espcie. A confirmao da morte deve ser realizada
por profissional qualificado para este fim.
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4) produzir imediata perda da conscincia, seguido de parada respiratria e cardaca e
perda da funo cerebral;
12) realizar um rodzio entre profissionais treinados para este fim para assegurar que o
procedimento seja realizado de forma eficiente e humanitria.
Os agentes usados para a eutansia atuam por trs possveis mecanismos: 1) hipxia
direta ou indireta, 2) depresso neuronal e/ou 3) interrupo da atividade cerebral e
destruio de neurnios vitais.
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no so aceitos de forma isolada para eutansia. Outras tcnicas que induzem hipxia podem
desencadear atividade reflexa caracterizada por atividade motora aps a inconscincia, o que
no acarreta sofrimento no animal.
8. Mtodos de eutansia
Um mtodo adequado de eutansia deve garantir a perda da conscincia de forma
rpida, irreversvel e desprovida de experincia emocional ou fsica desagradvel, ou seja,
o animal no deve apresentar dor, estresse, apreenso ou ansiedade. Independente do
mtodo de eleio, a inconscincia deve anteceder a parada cardiorrespiratria, seguida da
perda da funo cerebral.
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So consideradas caractersticas inaceitveis nos mtodos de eutansia: mtodos
cruentos, uso de vcuo, uso isolado de miorrelaxantes e animal consciente antes da parada
cardaca e respiratria.
Como princpio geral, os animais devem ser mortos pelo mtodo mais humanitrio
para a espcie. Caso o mtodo de eutansia afete os resultados da pesquisa e possa
inviabilizar as avaliaes, pode-se usar um mtodo aceito com restrio, sob aval da CEUA
pertinente, desde que todas as precaues necessrias sejam tomadas para minimizar
qualquer impacto sobre o bem-estar do animal. Se houver suspeita, mas sem evidncia, que
um mtodo recomendado possa influenciar os dados, a necessidade de utilizar um mtodo
alternativo deve ser validada em um estudo piloto.
O mtodo aceito com restrio o que no atende a todos os critrios ideais, por
uma ou mais razes, descritas a seguir: no produzir inconscincia to rpida quanto
necessria; requerer habilidade e tcnica especficas e, portanto, maior possibilidade de erro;
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ser visualmente desagradvel; apresentar consideraes ocupacionais de sade e segurana
associadas ao mtodo; ou no haver documentao cientfica conclusiva sobre o mtodo.
Estes mtodos podem ser aprovados e autorizados pela CEUA da instituio se: plenamente
justificados para o objetivo cientfico; detalhadamente descritos na proposta enviada para
avaliao; a pessoa responsvel apresentar comprovada habilidade e qualificao para o
emprego do mtodo e for considerado o devido cuidado sade e segurana ocupacionais.
Outros mtodos alm dos citados nas Tabelas 1 e 2 podem ser utilizados em animais
inconscientes, desde que estes no restabeleam a conscincia antes do bito, podendo
tambm serem utilizados os mtodos usados para abate humanitrio, de acordo com
legislao especfica do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Sempre que possvel, ao se utilizar anestsicos, deve-se realizar jejum prvio, para
evitar regurgitao e aspirao do contedo gstrico. Cabe salientar que a necessidade de
jejum no se aplica a roedores.
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8.1.1. Agentes inalatrios
Pelo fato de o agente inalatrio ter de atingir uma concentrao alveolar para ser
efetivo, esta tcnica leva algum tempo para induzir a inconscincia no animal. Quando a
morte induzida pelos anestsicos inalatrios for lenta, um segundo mtodo deve ser aplicado
para garantir a morte rpida, antes que o animal restabelea a conscincia.
2) o equipamento usado deve evitar rudos que possam causar desconforto e ansiedade nos
animais;
4) este mtodo no deve ser utilizado em animais com hipoventilao ou que retm a
respirao (ex. rpteis);
7) no se recomenda para rpteis, anfbios, animais que mergulham e alguns mamferos que
podem reter a respirao e apresentar metabolismo anaerbico;
8) os agentes apresentam diversos riscos sade humana, como exploso (ter), narcose
(anestsicos inalatrios como o isofluorano), hipoxemia (nitrognio e monxido de
carbono), vcio (xido nitroso, isofluorano) e efeitos crnicos (teratogenicidade,
mutagenicidade), da a necessidade de se disponibilizar um sistema antipoluio;
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considerar a segurana do funcionrio e do local. Ao se utilizarem estes agentes para causar
a morte simultnea de um grupo de animais, recomenda-se que sejam introduzidos animais
de mesma idade e que se limite o nmero de animais na cmara. Agentes de efeito lento,
como por exemplo, o ter, no devem ser utilizados.
A cmara de eutansia deve ser grande o suficiente para permitir que o(s) animal(is)
apoie(m) os membros e tenha(m) espao para virar(em) e ajustar(em) a postura. O sistema
de fornecimento do gs ou anestsico inalatrio deve garantir um controle da concentrao
utilizada, particularmente com o uso de CO2.
O isofluorano apresenta efeito mais rpido que o halotano. Entretanto, seu odor
pungente desagradvel e os animais podem reter a respirao, o que prolonga um pouco o
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tempo at a perda da conscincia. Entretanto, a biotransformao do isofluorano quase
insignificante no ser humano (ao redor de 0,7%) e, portanto, mais seguro para o pessoal
envolvido que o halotano. Dada a sua menor potncia, necessita de concentrao em torno
de 60% maior que a do halotano para os animais atingirem a inconscincia.
O sevofluorano possui odor aceitvel, efeito mais rpido que o isofluorano e baixa
biotransformao para o ser humano, entretanto seu custo mais alto. O desfluorano
apresenta efeito mais rpido que todos os anteriores. Entretanto, sua baixa potncia, que
requer altas concentraes, odor pungente e custo alto, so fatores limitantes para o seu uso.
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Recomendvel: classes Amphibia e Reptilia, das espcies que no retm a respirao,
seguido de outro mtodo de eutansia; Osteichthyes (peixes sseos) e Chondrichthyes
(peixes cartilaginosos), seguido de outro mtodo de eutansia; classes Aves e Mammalia que
no retm a respirao.
Desvantagens: densidade maior que a do ar, o que torna necessrio o uso de uma cmara de
pequena altura, para evitar que os animais assumam posio bpede; concentraes acima de
40% levam formao de cido carbnico nas mucosas, o que causa dor e sofrimento; altas
concentraes (<80%) podem provocar leso do trato respiratrio cranial e do pulmo; altas
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concentraes causam estresse e sofrimento aos animais, por outro lado, baixas
concentraes no so eficazes; o tempo at o efeito prolongado em neonatos; alguns
animais, como os peixes, animais que mergulham e que se enterram, apresentam alta
tolerncia; no indicado para rpteis e anfbios, pois estes apresentam uma baixa frequncia
respiratria; o efeito mais lento que outros agentes inalatrios e intravenosos.
Recomendaes: O CO2 no deve ser usado quando outros mtodos puderem ser utilizados
para a pesquisa. O CO2 utilizado principalmente em roedores em cmaras especficas e s
pode ser utilizado desde que haja possibilidade de mensurar as concentraes de CO2. Para
causar a morte em roedores deve-se preencher a cmara com um fluxo de 100% de CO2 na
ordem de 20% do volume da cmara por minuto e manter o fluxo por pelo menos 1 minuto
aps a morte clnica. Quando do uso de CO2, o excesso de gs deve ser eliminado na poro
superior da cmara, paralelamente ao aumento gradual da concentrao de CO2, de forma
que no ocorra pressurizao interna, nem entrada de ar ambiente na cmara. Cmaras
grandes podem requerer mltiplas entradas de CO2 para garantir a distribuio homognea.
O uso de vlvulas de aquecimento em cmaras de fluxo contnuo e prolongado do gs evita
a formao de gelo seco dentro das vlvulas e sistemas de regulao. Deve-se confirmar a
morte dos animais antes de usar ou descartar o cadver, j que a reverso da conscincia
pode ser rpida. Alguns roedores podem apresentar apneia, conferindo a falsa impresso de
morte. A confirmao da morte deve ser realizada por mltiplos mtodos, como descrito
anteriormente. S pode ser utilizado quando armazenado em cilindros, em equipamentos
com programa regular de manuteno e desde que a concentrao de CO2 fornecida ao(s)
animal(is) seja mensurada.
Aceito com restrio (desde que as recomendaes anteriores sejam seguidas): Ave e
Rodentia (com exceo de neonatos)
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sobejamente o tempo at o bito, chegando a 51 minutos. Desta forma, o uso destas
substncias altamente questionvel do ponto de vista humanitrio, j que o nitrognio
causa morte lenta e sofrimento considervel e o argnio no indicado para roedores.
Aceito com restrio (desde que as recomendaes anteriores sejam seguidas): frangos.
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agente extremamente perigoso para o operador, devido alta toxicidade e dificuldade de
deteco, pelo fato de ser inodoro e incolor. Adicionalmente, a exposio crnica de baixas
concentraes desencadeia alteraes cardiovasculares e efeitos teratognicos. Mesmo
quando do uso de cilindros de CO, este mtodo deve ser evitado pelo alto risco sade dos
envolvidos.
Quando a via intravenosa for impraticvel para a eutansia, pode-se utilizar a via
intraperitoneal. Como pela via intraperitoneal os animais permanecem por tempo mais
prolongado no estgio II (de excitao), estes devem ser colocados em espaos pequenos e
em silncio para evitar traumas. As vias de administrao mais apropriadas para cada grupo
taxonmico esto especificadas para cada espcie neste documento.
Qualquer frmaco que produza um estado de anestesia geral pode ser utilizado. Entre
os de uso mais comum destacam-se o tiopental, o pentobarbital, a embutramina e o propofol.
Desde que a inconscincia tenha sido confirmada, os anestsicos gerais podem ser seguidos
por mtodos complementares, como bloqueadores neuromusculares e/ou cloreto de potssio,
que causam apneia e assistolia, respectivamente. Em nenhuma hiptese os bloqueadores
neuromusculares e/ou cloreto de potssio devem ser utilizados em animais sem a
confirmao da inconscincia.
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8.1.2.1 Barbitricos
Desvantagens: pode ocorrer respirao agnica em animais j inconscientes, o que pode ser
visualmente desagradvel e a permanncia do frmaco no cadver pode causar sedao nos
animais que consomem a carcaa. Desta forma, o descarte do cadver deve ser adequado.
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8.1.2.3. Agentes injetveis aceitveis apenas como mtodo complementar
O hidrato de cloral causa lenta depresso cerebral. Desta forma, a conteno pode
ser difcil para alguns animais. A morte ocorre por hipoxemia, resultante de depresso
progressiva do centro respiratrio, e pode ser precedida por respirao ofegante, espasmos
musculares e vocalizao. inaceitvel como mtodo nico, devido a seus efeitos adversos
importantes. Pode ser utilizado apenas aps anestesia geral ou associado com anestsicos
gerais em equdeos e ruminantes.
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e perfurao craniana no so aceitos de forma isolada, mas podem ser utilizados em
associao aos agentes anestsicos ou outros mtodos que causem inconscincia prvia.
Como a maioria desses mtodos envolve trauma, deve-se levar em conta o risco para
os animais e para o executor. Os cuidados devem ser extremos e a habilidade e experincia
do executor so essenciais. A qualificao prvia deve ser realizada em animais mortos ou
anestesiados e sob ensino e superviso de uma pessoa experiente, at que o aprendiz seja
proficiente.
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O posicionamento da pistola e a localizao correta do alvo variam de acordo com a
espcie. Nos bovinos, deve-se apontar para o osso frontal, na interseco das duas linhas
imaginrias, entre os cornos e os olhos contralaterais. O equipamento deve ser direcionado
em ngulo de 90 graus em relao ao osso frontal e em contato direto com o crnio do
animal. Nos equdeos, o alvo pouco acima da interseco das duas linhas imaginrias
traadas, entre a insero das orelhas e os olhos contralaterais. Nos sunos, traa-se uma
linha imaginria transversal no osso frontal que une a poro dorsal (superior) dos dois
olhos e a outra longitudinal na linha mdia frontal, formando uma cruz; a pistola
posicionada a 2 cm dorsal (superior) e 0,5 cm lateral para um dos lados do ponto de
interseco entre essas duas linhas imaginrias. Em ovinos e caprinos a pistola posicionada
no centro da linha imaginria que tangencia a borda caudal do corno em sentido paralelo ao
eixo longitudinal da cabea.
Recomendaes: pode ser usada em equdeos e ruminantes; aceito com restrio em sunos e
em outras espcies. No caso do uso de pistola de insensibilizao por ar (no penetrante),
necessrio complementar o procedimento com outra tcnica, j que a primeira s causa
inconscincia temporria do animal.
Aceito com restrio: animais de grande porte das classes Ave, Reptilia e ordens artiodactila
e perissodactila, bem como outros animais selvagens de grande porte.
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rapidamente. Caso o tiro no resulte em morte imediata, deve-se causar a morte por outro
mtodo o mais rapidamente possvel.
Para os demais grupos taxonmicos, deve ser usado apenas tiro na regio frontal do
crnio ou regio torcica, embasado nas mesmas consideraes da pistola de ar comprimido
e de dardo cativo. Deve ser empregado apenas em casos extremos, como, por exemplo, em
situaes de campo, em grandes animais domsticos ou silvestres, em que o sofrimento do
animal e a indisponibilidade de outros mtodos justifiquem a eutansia imediata do animal.
Quando o mtodo for empregado, um operador experiente e habilitado deve manusear a
arma com extremo cuidado. Deve-se evitar ao mximo a presena de espectadores e, quando
isto no for possvel, esses devem ser instrudos dos riscos e implicaes visuais
desagradveis.
A arma de fogo, bem como o seu porte deve estar legalizada pelas autoridades
competentes e o procedimento no deve ser realizado em ambiente fechado. Devem ser
utilizados calibres e tamanho de gro (no caso de cartucho) compatveis com os espcimes
que sero submetidos a eutansia.
Vantagens: perda da conscincia instantnea, desde que o tiro acerte o local correto;
necessrio em algumas situaes de campo, na ausncia da disponibilidade ou viabilidade de
outros mtodos.
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8.2.3. Deslocamento cervical
Pode ser usado para causar a morte de aves de at 3 kg, camundongos, ratos (abaixo
de 150 g) e coelhos (abaixo de 1 kg) imaturos. Para camundongos e ratos, o polegar e o
indicador devem ser colocados um de cada lado na regio cervical cranial (base do crnio)
ou um basto pressionado na base do crnio. Com a outra mo, a base da cauda ou
membros plvicos so tracionados caudalmente, para causar a separao das vrtebras
cervicais em relao ao crnio. Para coelhos imaturos, o crnio seguro com uma das mos
e os membros plvicos com a outra mo. O animal tracionado (esticado) e o pescoo
estendido e girado dorsalmente para separar a primeira vrtebra cervical do crnio.
Desvantagens: aspecto desagradvel; requer grande habilidade do executor; pode ser usado
apenas para algumas espcies.
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Aceito com restrio: coelhos abaixo de 1 kg previamente anestesiados; o mtodo poder ser
utilizado em aves de at 3 kg, camundongos e ratos abaixo de 150 g sem a necessidade de
anestesia prvia, desde que haja interferncia comprovada da anestesia sobre os resultados
da pesquisa.
8.2.4. Decapitao
Recomendaes: mtodo aceito com restries em pequenas aves, roedores, coelhos < 1 kg e
pequenos anfbios; preferencialmente deve ser utilizado aps a anestesia; o equipamento
deve estar em boas condies de uso, a lmina periodicamente amolada e a limpeza
realizada aps a morte de cada animal; o uso de cones plsticos para conteno fsica do
animal reduz o estresse do manuseio, melhora o posicionamento do animal e reduz a
possibilidade de injria no operador; o operador deve estar bem familiarizado com o
mtodo; deve ser utilizado exclusivamente com equipamento especfico para este fim; no
permitido exclusivamente o uso de lminas.
Aceito com restrio: pequenas aves, roedores, coelhos abaixo de 1 kg e pequenos anfbios
nas condies de pesquisa em que os objetivos do estudo no permitem outro mtodo de
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eutansia, ou seja, desde que haja interferncia comprovada da anestesia sobre os resultados
da pesquisa, plenamente justificvel.
8.2.5. Microondas
Aceito com restrio: uso em camundongos e ratos apenas com equipamentos especficos
disponibilizados comercialmente e desde que haja interferncia comprovada da anestesia
sobre os resultados da pesquisa.
8.2.6. Armadilhas
Apesar de poder ser usada para causar a morte de animais de vida livre de pequeno
porte para fins comercial, cientfico ou para proteo humana, o uso de armadilhas
mecnicas fatais bastante controverso, pelo fato de poder causar uma morte lenta e com
sofrimento, dada a dificuldade de seleo do equipamento, dependncia da proficincia do
operador e a possibilidade de causar intenso dano fsico em espcies que no sejam o alvo
da captura. prefervel o uso de armadilhas que mantenham o animal vivo, seguido de
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outros mtodos aceitveis de causar a morte. A armadilha deve ser criteriosamente
selecionada e testada cientificamente, de acordo com a ISO (International Organization for
Standardization), literatura disponvel, tamanho, conformao, local de colocao (cho
versus rvores), tipo de isca, tipo e sensibilidade do disparo. Em condies excepcionais,
pode ser aceito com restrio, desde que todos os mtodos possveis tenham sido testados e
falharam. Os animais que no apresentarem bito, aps a captura pela armadilha, devem ser
submetidos eutansia o mais rpido possvel por mtodos aceitos. O monitoramento deve
ser contnuo para evitar que animais sejam presos e continuem vivos.
Aceito com restrio: animais de vida livre de pequeno porte, com equipamentos especficos
disponibilizados comercialmente e desde que haja interferncia comprovada da anestesia ou
outros mtodos sobre os resultados da pesquisa.
Aceito com restrio: Para aves silvestres de pequeno porte (menos de 50 g de massa),
exclusivamente em condies de campo. S deve ser utilizado quando da impossibilidade de
realizao de mtodos recomendveis de eutansia.
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8.2.8. Resfriamento e congelamento
8.2.9.1. Exsanguinao
Realizada por meio da seco das artrias cartidas e veias jugulares. S pode ser
utilizada aps a inconscincia do animal, como, por exemplo, aps o atordoamento,
eletrocusso ou anestesia. Nunca deve ser usado isoladamente, nem como primeiro mtodo.
Animais podem ser atordoados por um golpe no crnio ou pelo uso de pistola no
penetrante. O uso de pistola j foi abordado anteriormente. Portanto, este item contempla
apenas o atordoamento por golpe no crnio. difcil avaliar a perda da conscincia aps o
atordoamento, mas se caracteriza por perda de reflexo corneal. A concusso cerebral (golpe
no crnio) s pode ser utilizada em circunstncias excepcionais, para alvio do sofrimento
em situao de emergncia, de animais intensamente traumatizados, quando no houver
outro mtodo disponvel no momento ou diante da total impossibilidade de uso de outros
mtodos que possam comprovadamente interferir nos resultados da pesquisa. Sempre deve
ser seguido por outro mtodo que assegure a morte, como decapitao, perfurao craniana
ou exsanguinao.
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Aceito com restrio: anfbios, rpteis e peixes sseos e cartilaginosos.
8.2.9.4. Eletronarcose
8.2.9.5. Eletrocusso
Realizada com corrente alternada, causa morte por fibrilao cardaca, seguido de
hipxia cerebral. Como a perda da conscincia ocorre apenas em at 30 segundos aps a
fibrilao, s aceito desde que o animal esteja previamente inconsciente, por outro mtodo,
inclusive eletronarcose. Desta forma, no pode ser usado como mtodo nico e sempre tem
de ser precedido por outro mtodo que cause inconscincia prvia.
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causar a morte, principalmente em animais abaixo de 5 kg, pois pode haver restabelecimento
do batimento cardaco; inadequado para animais com carapaa (e. g. tatus, jabotis).
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Preferencialmente, esta deve ser transparente para a visualizao do momento do bito do
animal, confirmado a seguir pela ausncia de reflexo corneal e batimentos cardacos.
A exsanguinao pode ser feita por puno cardaca, desde que o animal esteja sob
efeito de anestesia geral.
9.2. Coelhos acima de 1 kg, ces, gatos e fures ordens Lagomorfa e Carnvora.
No caso de coelhos acima de 1 kg, a exsanguinao pode ser feita por puno
cardaca desde que o animal esteja sob efeito de anestesia geral.
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Tambm aceita-se eletrocusso ou injeo de lidocana subdural na cisterna magna, desde
que realizada anestesia geral prvia.
9.4.1. Ruminantes
9.4.2. Sunos
Nessas espcies, deve-se utilizar sedao, que pode ser dispensada para os
neonatos, seguida de barbitricos por via intravenosa, ou intraperitoneal, nos recm-
nascidos, associados com anestsico local; outros anestsicos gerais intravenosos ou
ainda, anestsicos inalatrios. Estes mtodos devem ser utilizados at a confirmao da
morte ou seguidos de outros mtodos para assegurar a morte. Os mtodos aceitos com
restrio so os mesmos para os ruminantes.
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9.5. Animais selvagens
Para animais selvagens de vida livre, parte dos mtodos sugeridos anteriormente no
praticvel. Entretanto, as mesmas consideraes humanitrias dos animais em cativeiro
devem ser levadas em conta, no sentido de se evitar a dor e o sofrimento. Em alguns casos, o
uso de zarabatanas ou pistolas para atirar dardos contendo frmacos so extremamente teis
para conteno qumica, para que, a seguir, seja realizada a eutansia de acordo com os
mtodos anteriormente citados para animais domsticos ou de laboratrio. Neste caso,
fundamental a qualificao prvia do executor e o ambiente deveria ser evacuado de
expectadores, quando for o caso. Em situaes extremas, em que no seja possvel
aproximar-se dos animais para o uso de dardos, pode-se lanar mo de armadilhas
especficas para a espcie ou mesmo tiro com arma de fogo. Da mesma forma, os executores
que realizam o procedimento devem ter experincia com ambas as tcnicas e deve-se
atender legislao para o porte de armas de fogo.
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(com peso inferior a 50 gramas), aceitvel usar a compresso torcica. Desde que os
mtodos anteriores comprovadamente interfiram nos resultados da pesquisa, ou quando os
animais utilizados na pesquisa forem provenientes ou destinados ao abate, devem-se utilizar
os mtodos de abate humanitrio preconizados pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento ou outro substitutivo legal, ou seja, o uso de CO2 ou eletronarcose em
pequenas aves ou galinhas, seguido de exsanguinao ou outro mtodo que assegure a
morte. Aves grandes devem ser submetidas eutansia, utilizando-se anestsicos gerais,
como anteriormente descrito, ou em casos excepcionais pistolas de atordoamento ou de
dardo cativo.
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9.7.1. Agentes injetveis
O sulfonato metano de tricana ou MS222 pode ser administrado por diversas vias
para causar a morte. Para peixes e anfbios, pode ser colocado na gua. Os peixes grandes
podem ser removidos da gua e pode-se esguichar uma soluo concentrada da substncia
sob as brnquias. Dada a acidez do frmaco, quando usado em concentraes superiores a
500 mg/L, a soluo deve ser tamponada com soluo de bicarbonato de sdio saturada, o
que resulta em um pH da soluo de 7,0 a 7,5 e, desta forma, ser injetada nos espaos
linfticos e cavidades pleuroperitoneais.
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A eficincia deste anestsico varivel e pode apresentar alguns efeitos adversos
como perda de muco, irritao das brnquias e olhos, bem como danos a crnea. No homem,
causa irritao por contato na pele e por inalao, bem como danos na retina.
O eugenol e o leo de cravo da ndia podem ser utilizados para eutansia de peixes.
O leo de cravo da ndia contm de 70 a 90% de eugenol. O eugenol, da classe dos
fenilpropanoides, causa bloqueio neuromuscular competitivo, aparentemente potencializa o
acido gama aminobutirico (GABA) e antagonista de receptores NMDA. pouco solvel
em gua e solvel em solventes orgnicos, como o lcool.
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9.7.3. Agentes inalatrios
A maior parte de peixes, anfbios e rpteis pode ser submetida perfurao craniana
ou outro mtodo fsico, apenas aps a induo da inconscincia. A seco ou perfurao da
medula espinhal caudal ao crnio pode ser usada em alguns animais ectotrmicos,
eEntretanto, a morte s ocorre quando o crebro perfurado. Para estes animais, esta tcnica
deve ser seguida de decapitao e perfurao craniana ou por outro mtodo. A perfurao
necessita de destreza e habilidade e deve ser realizada apenas por executor com garantida
qualificao e competncia. Em anfbios, o ponto de perfurao o foramen magnum,
identificado por uma leve depresso da pele na linha mdia dorsal, com o pescoo
flexionado.
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movimentos operculares ou no caso de difcil visualizao do movimento opercular, como
em larvas de 4-7 dpf, por 20 minutos aps cessar qualquer movimento, para assegurar a
morte por hipoxia. No caso das larvas de at 15 dpf, para se assegurar o bito dos dois
mtodos descritos anteriormente, deve-se adicionar 1 parte de 6,15% de hipoclorito de sdio
para 5 partes de gua. Em caso de embries < 3dpf, aps a imerso em gua com gelo
durante 20 minutos, deve-se realizar imerso em soluo de hipoclorito de sdio (500 mg/L)
ou clcio (500 mg/L) a fim de garantir a morte.
A arma de fogo e seu porte devem estar legalizados pelas autoridades competentes e
os calibres devem ser compatveis com o grupo taxonmico.
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10. Consideraes finais e concluses
Australian Code of practice for the care and use of animals for scientific purposes. 84p. 2004
- http://www.nhmrc.gov.au/_files_nhmrc/publications/attachments/ea16.pdf
40
Canadian Council of Animal Care guidelines on: the care and use of fish in research,
teaching and testing, 87p. 2005 -
http://www.ccac.ca/Documents/Standards/Guidelines/Fish.pdf
Close, B. et cal. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 1.
Laboratory Animals, v. 30, 293-316, 1996 -
http://la.rsmjournals.com/content/30/4/293.full.pdf
Close, B. et cal. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2.
Laboratory Animals, v. 31, p.1-32, 1997. http://la.rsmjournals.com/content/31/1/1.full.pdf
Close, B.; Banister, K; Baumans, V.; Bernoth, E-M.; Bromage, N.; Bunyan, J.; Erhardt, W.;
Flecknell, P.; Gregory, N., Hackbarth, H.; Morton, D.; Warwick, C. Recommendations for
euthanasia of experimental animals: Part 2. LaboratoryAnimals, v.31, p.1-32, 1997.
Conselho Federal de Medicina Veterinria. Resoluo no 1000, de 11 de ,maio de 2012
Dispe sobre procedimentos e mtodos de eutansia em animais, e d outras providncias.
http://www.cfmv.org.br/portal/legislacao/resolucoes/resolucao_1000.pdf
Directive 2010/63/EU of The European Parliament and of The Council on the protection of
animals used for scientific purposes of 22 September 2010. Official Journal of the European
Union L 276/33-79.
Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. National Research Council (EUA)
2011 - http://grants.nih.gov/grants/olaw/Guide-for-the-Care-and-Use-of-Laboratory-
Animals.pdf
Luna, S. P. L. & Teixeira, M. W. Eutansia: consideraes ticas e indicaes tcnicas.
Revista CFMV (Braslia), v.13, p.60 - 69, 2007.
Matthews M and Varga Z. (2012) Anesthesia and Euthanasia in Zebrafish ILAR Journal
53(2):192-204.
National Institutes of Health (2009) Final Report to OLAW on Euthanasia of Zebrafish.
41
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupo taxonmico*
Classe/Ordem/Nome comum Mtodo
Classe Amphibia - Anfbios (de acordo com a espcie) - exemplo sapo
Recomendveis Sulfonato metano de tricana (TSS ou MS222) (imerso em soluo tamponada at o pH 7)
Benzocana (injeo nos sacos linfticos subcutneos ou imerso em soluo tamponada at o pH 7)
Barbitricos por injeo intravenosa, ou associado a lidocana, quando injetado nos sacos linfticos subcutneos ou
intra-abdominal
Anestsicos gerais intravenosos (exemplo: propofol)
Anestsicos inalatrios (para espcies que no retm a respirao, seguido de outro mtodo de eutansia)
42
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupos taxonmicos* (continuao)
Inaceitveis Atordoamento, CO, macerao para pintos e outros mtodos no descritos nestas diretrizes
43
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupos taxonmicos* (continuao)
Classe/Ordem/Nome comum Mtodo
Classes Osteichthyes (Peixes sseos) e Chondrichthyes (Peixes cartilaginosos)
Recomendveis leo de cravo da ndia ou eugenol (imerso)
Sulfonato metano de tricana (TSS ou MS222) (imerso em soluo tamponada at o pH 7)
Benzocana ou outro anestsico local (imerso em soluo tamponada at o pH 7)
Barbitricos por via intraperitoneal
Anestsicos gerais (propofol, etomidato, metomidato)
Anestsicos inalatrios, seguido de outro mtodo para assegurar a morte
Inaceitveis Deslocamento cervical, decapitao/seco da medula espinhal, hipotermia, macerao, CO2 e outros mtodos no
descritos nestas diretrizes
44
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupos taxonmicos* (continuao)
Classe Mammalia (Mamferos)
Ordem Rodentia - Roedores e pequenos mamferos camundongos, ratos, hamster, gerbil, cobaios
Recomendveis Barbitricos intravenoso ou intraperitoneal (a administrao intraperitoneal, deve serr precedida de anestsico local sem
ao vasoconstritora)
Anestsicos gerais intravenosos (exemplo propofol)
Anestsicos inalatrios (e. g. isofluorano, para espcies que no retm a respirao)
Sobredosagem da associao de anestsicos dissociativos (e.g. cetamina) e agonistas de adrenorreceptores alfa-2 (e.g.
xilazina) administrada pelas vias intravenosa, intraperitoneal ou intramuscular
Exsanguinao por puno cardaca aps anestesia geral
Aceitos com restrio CO2, desde que sejam seguidas as recomendaes desta diretriz referentes ao item 8.1.1.2
Deslocamento cervical (ratos <150 g, camundongos)
Decapitao com equipamentos comerciais de uso especfico (lminas e tesouras afiadas apenas em neonatos)
Micro-ondas especficos para esta finalidade (no aceito micro-ondas de uso domstico)
Congelamento rpido ou nitrognio lquido para fetos e neonatos de ratos e camundongos
Atordoamento, seguido de exsanguinao (apenas em animais silvestres em situaes de campo)
Aceitos com restrio Deslocamento cervical (<1 kg), apenas se previamente anestesiado
Decapitao com equipamento de uso especfico (<1 kg) - (no pode ser realizada com tesoura ou lmina)
Atordoamento por eletronarcose, seguido de outro mtodo que assegure a morte
Pistola de insensibilizao ou dardo cativo, seguido de outro mtodo que assegure a morte, em condies a campo e
realizado por operador experiente e capacitado (animais selvagens)
Inaceitveis Atordoamento e deslocamento cervical, CO2, nitrognio, argnio, CO e outros mtodos no descritos nestas diretrizes
45
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupos taxonmicos* (continuao)
Aceitos com restrio Eletrocusso, precedida de anestesia geral com perda de reflexo corneal
Tiro com arma de fogo em condies de campo, exclusivamente para animais selvagens
Inaceitveis Nitrognio, argnio, CO2, CO, atordoamento, e outros mtodos no descritos nestas diretrizes
46
Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupo taxonmico* (continuao)
Classe/Ordem/Nome comum Mtodo
Classe Mammalia (Mamferos)
Ordem Artiodactila Ruminantes bovinos, caprinos e ovinos
Recomendveis Sedao, se necessrio, seguida de barbitricos ou outros anestsicos gerais intravenosos, associados ou no a ter
gliceril guaiacol ou hidrato de cloral. Aps confirmao da inconscincia e perda do reflexo corneal, esses mtodos
podem ser complementados por aplicao de lidocana na cisterna magna, bloqueador neuromuscular e/ou cloreto
de potssio
Aceitos com restrio Eletrocusso, precedida de anestesia geral com perda de reflexo corneal
Pistola de dardo cativo ou de insensibilizao por ar comprimido (neste caso, seguido de exsanguinao), realizado
por operador experiente.
Atordoamento eltrico (eletronarcose), seguido de outro mtodo que assegure a morte
Tiro com arma de fogo (apenas em condies a campo e realizado por atirador experiente e habilitado)
Aceitos com restrio Eletrocusso, precedida de anestesia geral com perda de reflexo corneal
Pistola de ar comprimido ou de dardo cativo, seguido de exsanguinao ou de outro mtodo que assegure a morte
(em condies a campo e realizado por operador experiente)
Atordoamento eltrico (eletronarcose), seguido de outro mtodo que assegure a morte (realizado por operador
experiente)
Tiro com arma de fogo (apenas em condies a campo e realizado por atirador experiente e habilitado)
Inaceitveis Argnio, CO2, perfurao craniana, CO e outros mtodos no descritos nestas diretrizes
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Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupo taxonmico* (continuao)
Aceitos com restrio Pistola de insensibilizao por ar comprimido ou de dardo cativo, seguido de outro mtodo que assegure a morte
(apenas em condies a campo e realizado por operador experiente)
Tiro com arma de fogo (apenas em condies a campo e realizado por atirador experiente e habilitado)
Eletrocusso, precedida de anestesia geral com perda de reflexo corneal
Mamferos marinhos
Recomendveis Barbitricos intravenosos
Etorfina ou carfentanil
Aceitos com restrio Tiro com arma de fogo (apenas em condies a campo e realizado por atirador habilitado e experiente)
Inaceitveis CO2, CO, nitrognio, argnio e outros mtodos no descritos nestas diretrizes
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Tabela 1: Agentes e mtodos de eutansia por grupos taxonmicos* (continuao)
Classe Reptilia
Rpteis (tartarugas, jabotis, serpentes, lagartos)
Recomendveis Barbitricos (injeo intravenosa ou quando intraperitoneal associados com anestsico local)
Anestsicos gerais intravenosos (exemplo: propofol, embutramina)
Anestsicos inalatrios (para espcies que no seguram a respirao, seguido de outro mtodo de eutansia)
* Mtodos recomendveis causam pouco ou nenhum sofrimento e causam a morte de forma humanitria quando usados de forma isolada.
* Mtodos aceitos com restrio no atendem todos os critrios ideais, requerem habilidade e tcnica, podem apresentar consideraes ocupacionais
de sade e segurana ou podem no apresentar documentao cientfica conclusiva apenas podem ser aceitos pela CEUA, se: plenamente
justificados para o objetivo cientfico, ou seja, forem insubstituveis por outros mtodos que comprometam os resultados experimentais, o
responsvel apresentar comprovada habilidade e qualificao para o emprego do mtodo e se for considerado o devido cuidado sade e
segurana ocupacionais.
* Mtodos inaceitveis no se enquadram nos critrios ideais, no so humanitrios ou apresentam outros problemas significativos associados ao seu
uso.
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Tabela 2: Mtodos de eutansia e suas caractersticas.
Agente Modo de ao Tempo at efeito Praticidade Segurana Recomendvel Aceitos com Eficcia e
restrio comentrios
Barbitricos* Depresso direta Rpido para Conteno Seguro, exceto Todos os grupos No se aplica Altamente
do crtex anestesia necessria, pela taxonmicos efetivo
cerebral, habilidade para possibilidade
estruturas injeo intravenosa de uso como
subcorticais e ou intraperitoneal, entorpecente,
centros vitais, ou intra-abdominal controle pela
depresso do ou nos sacos vigilncia
miocrdio, linfticos sanitria
hipxia
Outros anestsicos Depresso direta Rpido para Conteno Seguro, exceto Todos os grupos No se aplica Altamente
gerais do crtex anestesia necessria, pela taxonmicos efetivo
intravenosos* cerebral, habilidade para possibilidade
(e.g. propofol) estruturas injeo intravenosa de uso como
subcorticais e entorpecente,
centros vitais, controle pela
depresso do vigilncia
miocrdio, sanitria
hipxia
Outros anestsicos Depresso direta Moderadamente Fcil utilizao em Seguro, exceto Todos os grupos No se aplica Altamente
gerais injetveis* do crtex rpido imerso; conteno pela taxonmicos efetivo
(e.g. metomidato) cerebral, necessria para possibilidade
estruturas injeo de uso como
subcorticais e intramuscular entorpecente,
centros vitais, controle pela
depresso do vigilncia
miocrdio, sanitria
hipxia
Anestsicos Dissociao do Moderadamente Conteno Seguro, exceto Roedores Outras Efetivo, desde
dissociativos crtex cerebral, rpido necessria para pela espcies que que se assegure
associados a depresso do injeo possibilidade no roedores a
agonistas de miocrdio, intramuscular de uso como irreversibilidad
50
adrenorreceptores hipxia entorpecente, e de retorno
alfa-2 (e.g. controle pela conscincia
cetamina e vigilncia
xilazina)* sanitria
Anestsicos Depresso direta Incio da Fcil utilizao em Usar com Anfbios e No se aplica Altamente
inalatrios* do crtex anestesia cmara ou sistema rpteis que no efetivo, desde
cerebral, moderadamente recipiente fechado antipoluio, retm a que os animais
estruturas rpido; pode ou mscara facial; para minimizar respirao, sejam expostos
subcorticais e ocorrer excitao borbulhamento na a exposio assim como aos anestsicos
centros vitais, na fase de gua para peixes dos operadores aves, peixes e em
hipxia induo mamferos que concentraes
no retm a adequadas
respirao
Sulfonato metano Depresso do Muito rpido Fcil utilizao Evitar o Peixes, anfbios No usado Efetivo
de tricana SNC; hipxia dependendo da contato com a em outras
tamponado dose pele e olhos e espcies
formao de
p e aerossis;
usar em local
com ventilao
adequada,
luvas, proteo
ocular e
mscara
Benzocana Depresso do Muito rpido Fcil utilizao Seguro Peixes e No se aplica Efetivo
tamponada SNC; hipxia anfbios
Atordoamento por Interrupo de Rpido Requer qualificao O uso de No se aplica Alguns peixes, Irreversvel,
concusso funcionamento e habilidade do guilhotina e de anfbios e contraes
cerebral seguido dos centros executor lminas rpteis musculares
de decapitao ou vitais, depresso arriscado para intensas
perfurao cerebral, hipxia o executor
craniana
Decapitao Interrupo de Rpido Requer qualificao O uso de No se aplica Pequenos Irreversvel,
funcionamento e habilidade do guilhotina e de anfbios, contraes
51
dos centros executor lminas pequenas aves, musculares
vitais, depresso arriscado para roedores e intensas
cerebral, hipxia o executor coelhos (<1
kg)
Pistola de dardo Destruio do Rpido Requer habilidade, Seguro, desde No se aplica Anfbios, aves, Perda da
cativo ou de ar tecido cerebral conteno fsica que manuseado rpteis e conscincia
comprimido adequada e alvo de forma mamferos de instantnea.
(neste caso (posicionamento) adequada e por grande porte Entretanto,
seguido de outro correto pessoa pode ocorrer
mtodo para competente atividade
assegurar a morte) motora; usado
em condies
de campo
Tiro com arma de Leso de rgos Rpido Requer, conteno Risco de No se aplica Mamferos, Perda da
fogo vitais fsica adequada e acidente no crocodilianos e conscincia
alvo executor e aves de vida instantnea,
(posicionamento) observadores livre, em entretanto pode
correto situaes ocorrer
excepcionais a atividade
campo (e.g. motora; atirador
espcies experiente
encontradas
apenas nas
copas das
rvores)
Deslocamento Interrupo de Rpido Requer qualificao Seguro No se aplica Aves pequenas Irreversvel,
cervical funcionamento e habilidade do e mdias, contraes
dos centros executor camundongos, musculares
vitais, depresso ratos (<200g); intensas
cerebral, hipxia coelhos (<1kg)
previamente
anestesiados
Compresso Hipxia Pode ser rpido Requer qualificao Seguro No se aplica Aves de Situaes
torcica e habilidade do pequeno porte excepcionais
52
executor (menos de 50 em vida livre
gramas) de
vida livre
Dixido de Depresso direta Moderadamente Uso em cmara Mnimo risco No se aplica Frangos e Inadequado
carbono do crtex rpido fechada pequenos para animais
(exclusivamente cerebral, roedores imaturos ou
acondicionado em estruturas neonatos;
cilindros e subcorticais e irritao das
seguindo as centros vitais, mucosas
recomendaes depresso do
desta diretriz miocrdio,
referentes ao item hipxia
8.1.1.2)
Argnio, Hipxia Rpido Fcil utilizao em Seguro, se No se aplica Frangos Efetivo, a no
nitrognio cmara fechada de houver boa ser em
rpido ventilao no neonatos;
preenchimento local outros mtodos
so preferveis
2 fenoxietanol Depresso do Muito rpido Fcil utilizao Seguro No se aplica Peixes Efetivo,
SNC, hipxia dependendo da mecanismo de
dose ao pouco
claro
leo de cravo ou Bloqueio neuro- Muito rpido Fcil utilizao Seguro Peixes No se aplica Efetivo,
eugenol muscular dependendo da mecanismo de
competitivo; no dose ao pouco
est claro se claro
causa anestesia
Micro-ondas Inativao das Muito rpido Requer qualificao Seguro No se aplica Camundongos Efetivo para
especfico para enzimas e equipamento e ratos necessidades
esta finalidade, cerebrais pelo altamente especiais
comercialmente aquecimento especializado
disponvel
Atordoamento por Destruio do Rpido Requer habilidade, Seguro No se aplica Roedores Deve ser
concusso, tecido cerebral conteno fsica silvestres em realizado
53
seguido de adequada e fora situaes propriamente
exsanguinao ou apropriada excepcionais e por executor
outro mtodo que a campo experiente
induza a morte
Eletronarcose Depresso Pode ser rpido Requer qualificao Risco aos No se aplica Coelhos, Contraes
cerebral do executor; nem envolvidos ruminantes, musculares
sempre de fcil sunos, peixes intensas; usado
realizao e galinhas em abatedouros
Hipotermia (gelo Depresso Moderadamente Fcil utilizao Seguro No se aplica Espcies de Questionvel e
e gua) cerebral, morte rpido peixes pouco
por estenotrmicos humanitrio
congelamento tropicais ou
subtropicais de
pequeno porte
Nitrognio lquido Depresso Rpido Fcil utilizao Seguro No se aplica Ratos, hamster Questionvel e
cerebral, morte e pouco
por camundongos humanitrio
congelamento at dois dias de
vida
Exsanguinao Choque Rpido Requer habilidade Seguro Pequenos No se aplica Efetivo
por puno hipovolmico roedores e
cardaca aps coelhos.
anestesia geral
* Os agentes anestsicos devem ser adquiridos e utilizados de acordo com a legislao vigente.
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