INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE INGENIERA QUMICA E INDUSTRIAS

EXTRACTIVAS

DEPARTAMENTO DE INGENIERA QUMICA INDUSTRIAL

LABORATORIO DE ESPECTROSCOPIA MOLECULAR Y ATOMICA

PRCTICA 2
DETERMINACIN DE CAFENA EN REFRESCO DE COLA
Y T
ALUMNO:
ORANTES MONTES MAURICIO

SECCIN A
GRUPO: 3IM69

PROFESORA
JEMMIMA TAMARA VAZQUEZ RODRIGUEZ
Objetivo:
Manejar con mayor seguridad un espectrofotmetro UV-VIS
Determinar la concentracin de sustancias orgnicas en muestras problema por medio de una curva
de calibracin, aplicando la ley de Beer.
Consideraciones tericas:

La espectroscopia estudia la interaccin

Qu ES? de la radiacin electromagntica con la
materia a nivel de los electrones que
forman el enlace.

FUENTE
MONOCROMADOR
Partes de un AREA DE MUESTRA
ESPECTROFO DETECTOR
TOMETRO REGISTRO

Las fuentes ms comunes

FUENTE
son:
Deuterio UV
Tungsteno VIS
Espectro
UV-VIS. Cuenta con Rejillas de entrada
Rendijas de dispersin
Espejos
MONOCROMADOR Filtros
D
Rejillas de salida
Y su funcin es el de separar la a
la que trabaja el analito.

Celdas de cuarzo
AREA DE
MUESTRA Cubetas de cuarzo

DETECTOR Y Fototubos o
AREA DE Fotomultiplicadores
REGISTRO Computadora
 La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible, se
POR produce por lo general como consecuencia de la
QUE? excitacin de los electrones de enlace.
PRODE

Todos los compuestos orgnicos pueden absorber

radiacin electromagntica porque todos contienen
Compuestos electrones de valencia que pueden ser excitados a
Orgnicos niveles de energa ms altos.
Por qu
absorben?

Tiene aplicaciones algo limitadas en el

anlisis cualitativo debido a que en estos
Espectroscopia espectros existe un nmero relativamente
Ultravioleta escaso de mximos o mnimos. Las
visible
aplicaciones de los mtodos cuantitativos de
APLICACIONES absorcin ultravioleta-visible son numerosas
DETERMINACIN
y abarcan todos los campos en que se
DE CAFEINA
demanda informacin qumica cuantitativa.

Establece la cantidad de luz absorbida por la

muestra, aumenta a medida que se
Ley Lambert- incrementa la cantidad de dicha muestra o
Beer conforme es mayor el camino ptico de la
radiacin a travs de la misma.

Es un alcaloide del grupo de las xantinas, slido

cristalino, blanco y de sabor amargo, que acta
CAFEINA
como una droga psicoactiva, levemente
disociativa y estimulante por su accin
antagonista no selectiva de los receptores de
adenosina

QUE PASA SI Cuando abusamos de ella se puede volver en

TOMO nuestra contra. A corto plazo un abuso produce:
MUCHA nerviosismo, palpitaciones, temblores,
CAFEINA insomnio, falta de reflejos y en general
reduccin del rendimiento, ya que la persona al
estar inquieta se dispersa mucho
ms.
CLCULOS PREVIOS DE LAS SOLUCIONES
C1= 100 ppm
C1V1=C2V2
Despejando V1:
V1=C2V2/C1
Conociendo los valores de:
V1 [mL] V2 [mL] C2 [PPM]
0.5 10 5
1 10 10
1.5 10 15
2 10 20

Para 5 ppm:
V1= (5 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =0.5 mL

Para 10 ppm:
V1= (10 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =1 mL

Para 15 ppm:
V1= (15 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =1.5 mL
Para 20 ppm:
V1= (20 mg/L)(10 mL)/100 mg/L =2 mL
 DESARROLLO EXPERIMENTAL

PREPARACIN 1.PRENDER LA FUENTE 2. PRENDER ESPECTROFOMETRO 3. PRENDER EQUIPO DE COMP.

ESPECTROFOTOMETRO

3.APAGAR LA FUENTE 2.APAGAR ESPECTROFOMETRO 1. APAGAR EQUIPO DE COMP. APAGADO

ESPECTROFOTOMETRO
Desarrollo experimental:
DETERMINACIN DE
CAFENA

1. Encender la lmpara de Uv. PREPARACIN DEL 4. Seleccionar Velocidad de barrido de 120

2. Seleccionar el Modo ABS nm/min.
3. Colocar el intervalo de longitud 5. Colocar las ordenadas lmite entre 0 y 1.5
de onda entre 300 a 200 nm. EQUIPO
6. Velocidad de carta 60 nm/min
7. RUN
PREPARACIN DE ESTANDARES

Tener listo material

Tomar una Alcuota de la solucin

de cafena 100 ppm dependiendo
el estndar a preparar

0.5 ml, 1 ml, 1.5 ml o 2 ml

Colocar la muestra de cafena en un

matraz de 10 ml y aforar con la solucin
de etanol al 10% hasta 10 ml.

AGITAR PARA HOMOGENIZAR

 CURVA DE CALIBRACIN
CURVA DE CALIBRACIN

Ya que los estndares estn preparados se

procede a realizar la curva de calibracin
Tener ya con las caractersticas antes
mencionadas el equipo

1. EL EQUIPO TE IR PIDIENDO
ESTANDAR POR ESTANDAR

PREPARACIN DE SOLUCIONES

PREPARACIN DE MUESTRAS

Al tener todo el estndar ledo por el

espectrofotmetro te quedara un espectro de la
siguiente forma.
PREPARACIN DE MUESTRAS
ESPECTRO FINAL
CALCULOS
CLCULOS METODO GRAFICO
Concentraciones obtenidas con grfico:
Muestra Coca Cola
C1= 9 mg/L
Muestra T
C2=7 mg/L

Calculando Concentracin Real;

= = ( ) = /
.

= = ( ) = /
.

Clculos mtodo Matemtico

MUESTRA A V alicu b
Coca Cola 0.4 0.3 ml
1 cm
T 0.3 0.5 ml
A= abc
a = A/bc
a1=0.21/(1cm)(5mg/L)=0.042 L/mg x cm
a2=0.46/(1cm)(10mg/L)=0.046 L/mg x cm
a3=0.8/(1cm)(15mg/L)=0.053 L/mg x cm
a4=1/(1cm)(20mg/L)=0.05 L/mg x cm
aprom = 0.04775 L/mg x cm

Ccoca cola = Acoca cola/aprom x b =0.4/(0.04775 L/mg x cm) x (1 cm) = 8.38 mg/L
CT = AT/aprom x b =0.3/(0.04775 L/mg x cm) x (1 cm) = 6.28 mg/L

= = . ( ) = . /
.

= = . ( ) = . /
.
OBSERVACIONES
1. Durante el preparado de los estndares pudimos notar que la toma de volmenes de
la solucin madre, esto se observ de manera ms clara a la hora de realizar la curva
de calibracin.
2. Se present una mala elaboracin de estndares debido a que se not que dos
estndares eran iguales.
3. La alcuota de la coca cola fue muy pequea ya que si se tom en primera valores
ms grandes se podra salir de los valores de la curva de calibracin.

CONCLUSIN
La determinacin de cafena en bebidas es un estudio analtico muy cuidadoso que se debe
tener consiente que una mala preparacin de muestras o de estndares afectara en como
una interferencia en dicha experimentacin.

Usando como solvente una solucin de etanol al 10% y aforando las muestras a 10 ml, todo
estudio que se haga en la regin UV-VIS debe cumplir con la LEY DE LAMBERT-BEER, la cual
dice que al graficar la A vs C se obtendr una lnea recta, la preparacin de los estndares
deber ser exacta y precisa ya que no es recomendable realizar regresiones lineales para
corregir.

La coca cola siendo una de las bebidas ms populares de la sociedad mexicana y en general
del mundo tiene una mayor concentracin de cafena que el t que es un producto natural,
como se sabe la cafena en pequeas cantidades no es daina, pero tomarla en exceso puede
llegar a provocar problemas como alteracin o problemas de corazn.

Se tiene una relacin entre los valores en el mtodo grfico y con el matemtico siendo las
variaciones menores a 5 %.

Si la alcuota de la muestra es muy grande puede salirse de la curva de calibracin y esto no

permitira su cuantificacin, debido a esto las alcuotas fueron pequeas.

Se afecta por el factor de correccin ya que se aforo la muestra a 10 ml y no se tom directo

del envase.
CUESTIONARIO
1. Explique la ley de Lambert-Beer
R: Establece la cantidad de luz absorbida por la muestra, aumenta a medida que se incrementa la
cantidad de dicha muestra o conforme es mayor el camino ptico de la radiacin a travs de la
misma.
2. Diga cuales son las principales limitaciones de esta ley
R: Limitaciones Reales, Instrumentales y Qumicas.

3. En la ecuacin de Lambert-Beer. Explique que es el coeficiente de Absorcin Molar

R: Es el coeficiente que indica la capacidad que tienen las especies qumicas para absorber una
determinada onda de luz.

4. Explique en que consiste el mtodo de cuantificacin por curva de calibracin.

R: Consiste en graficar la A vs C y de ah obtener cada C del analito con la absorbancia medida a la
longitud de onda de cada analito.

5. Qu otro mtodo de cuantificacin existe y en qu casos puede ser utilizado?

R: Matemtico cuando se tienen los datos de absortividad y un promedio de ellas, o cuando la
curva no es una recta por una mala realizacin de estndares.

6. Defina los siguientes trminos:

Absorbancia: Medida que refleja cmo se atena la radiacin cuando se atraviesa un elemento.
Transmitancia: es una magnitud que expresa la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en la
unidad de tiempo.
7. Cules son los factores que influyen en los mximos de la absorbancia?
R: Ancho de celda, absortividad y concentracin

8. Mencione los factores que influyen en los corrimientos de la longitud de onda

R: la concentracin y el solvente

9. Qu caractersticas debe tener los disolventes empleados en la tcnica UV-VIS?

R: disolver a la muestra, que no reacciones con e analito y que no absorbe Radiacin
electromagntica a la misma longitud de onda que el analito.

Referencias
Department of Chemistry, U. o. (30 de SEPTEMBER de 2010). Espectroscopy ("filled-empty")
Orbital Interactions. Obtenido de http://chemistry.umeche.maine.edu/CHY252/HOMO-
LUMO.html

McBride, J. M. (2011). Espectroscopia UV-VIS. Obtenido de https://sstti.ua.es/es/instrumentacion-

cientifica/unidad-de-rayos-x-de-monocristal-y-espectroscopias-vibracional-y-
optica/espectroscopia-ultravioleta-visible.html