Ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs es un ciclo metablico cuyo alimentador es acetil-CoA que es uno de los
productos finales de la degradacin de glcidos, aminocidos y lpidos. Este sustrato inicial
se degrada paso a paso en el ciclo quedando transformado en 2 CO2 con liberacin de
energa que queda contenida en los cofactores reducidos (un FADH2 y 3 NADH) y tambin en
un GTP. Adems, es una va que se relaciona con muchos otros procesos anablicos del
metabolismo de glcidos, protenas, cidos nucleicos, porfirinas y lpidos. Por eso se
considera al igual que la gluclisis (degradacin de la glucosa), una va central del
metabolismo.

Podemos plantear como reaccin global esquematizada del ciclo de Krebs:

En esta reaccin general podemos ver cul es el sustrato inicial, cules son sus productos
finales y los cofactores que participan.

Tipo de proceso del ciclo de Krebs

Es un proceso catablico pues su alimentador, acetil-CoA (grupo acetilo -compuesto de 2

carbonos- unido a la CoA) se degradar y se formar 2 CO2, compuestos ms pequeos, y
sus hidrgenos quedarn formando parte de los cofactores reducidos. Adems se forma el
GTP, que contiene la misma cantidad de energa que el ATP. Todo lo anterior podemos verlo
en la reaccin global anterior.

Localizacin del ciclo de Krebs

Este proceso se lleva a cabo en la matriz mitocondrial. All es donde se encuentran la

mayora de las enzimas que participan en l. Adems en la propia mitocondria es donde se
encuentran localizados los otros 2 procesos de la respiracin celular que forman la cadena
respiratoria. En la cadena respiratoria se van a utilizar los cofactores reducidos formados por
el ciclo de Krebs. La localizacin mitocondrial de ambos procesos facilita con una mxima
eficiencia la funcin de ambos procesos, que es otro de los principios de la Bioqumica: el
principio de la mxima eficiencia.

En cuanto a su localizacin hstica, se produce en todos los tejidos cuyas clulas tengan
mitocondrias. Por ello, el ciclo no se produce en los hemates, que carecen de mitocondrias.

Visin general de las reacciones del ciclo de Krebs

Se compone de 8 reacciones y cada una de ellas est catalizada por enzimas. Escojamos
como primera reaccin la entrada del acetil CoA (a) que se condensa con el cido oxalactico
(b). Las reacciones de xido-reduccin son la 3; 4; 6 y 8 (Fig. 7.11). Otra reaccin de
importancia es la 5 donde se forma GTP por una fosforilacin a nivel de sustrato. Es una va
cclica porque el cido oxalactico (b) que es el producto final de la ltima reaccin, la 8,
vuelve a ser sustrato de la primera reaccin. Este ciclo es globalmente irreversible, aunque
algunas de sus reacciones son reversibles (reacciones 2, 5, 6, 7 y 8). El grupo acetilo,
bicarbonatado, se oxida por pasos graduales en el ciclo de Krebs y como en cada vuelta del
ciclo se forman 2 CO2, se pudiera decir que el acetilo que est unido a la CoA se degrada en
cada vuelta del ciclo. Los otros productos de la va son los cofactores reducidos (3NADH.H + y
1FADH2) y un GTP.
Fig.7.11.Las reacciones del ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo de Krebs, a) acetil-coA,
b) cido oxalactico,(c) cido ctrico, d) cis acontico, e) cido isoctrico, f) cido ceto
glutmico, g) succinil coA, h) cido succnico, i) cido fumrico, j) cido L-mlico.

Origen del acetil-CoA

El acetil-CoA proviene del catabolismo de lpidos, aminocidos y glcidos; estos ltimos

constituyen su fuente principal en el cerebro, pero en otros tejidos como el hgado y
msculo, son los cidos grasos su fuente principal.

Reacciones del ciclo de Krebs

Primera reaccin: enzima cido ctrico sintasa.

Esta enzima cataliza la condensacin entre el grupo acetilo del acetil-CoA y el cido
oxaloactico. Este cido debe unirse a la enzima antes que el acetilCoA, debido a esto tienen
que encontrarse a concentraciones adecuadas para que se lleve a cabo la primera reaccin;
De esta forma se mantienen los niveles adecuados de los metabolitos del ciclo y se garantiza
la actividad del mismo. Adems es una de las enzimas reguladoras del ciclo y su regulacin
se trata ms adelante en este captulo.
Segunda reaccin: enzima aconitasa

La aconitasa cataliza una isomerizacin del cido ctrico en cido isoctrico, pues como vemos
en la figura 7.11 el grupo hidroxilo cambia de posicin.

Tercera reaccin: enzima isoctrico deshidrogenasa

En esta reaccin, el cido isoctrico se oxida y descarboxila. La enzima es dependiente del

NAD+ que debe estar unido a la enzima para que ella pueda realizar su accin. Los productos
son el CO2 y el cido alfa-ceto-glutrico. En esta reaccin ocurre la formacin del 1er cofactor
reducido, el NADH, como se observa a continuacin. Esta es otra de las enzimas reguladoras
importante del ciclo de Krebs.

Cuarta reaccin: enzima alfa-ceto-glutrico deshidrogenasa

La reaccin est catalizada por un complejo multienzimtico. Adems de las 3 enzimas que
lo forman, requiere de 5 cofactores; el pirofosfato de tiamina (PPT), el cido lipoico, la
coenzima A, el FAD y el NAD+. El cido alfa-ceto-glutrico se descarboxila y se oxida
transformndose en succinil-CoA. En esta reaccin ocurre la formacin del 2do cofactor
reducido, el NADH. La reaccin es irreversible.

Quinta reaccin: enzima succinil-tioquinasa o succinil CoA sintetasa

Esta reaccin es totalmente reversible y transfiere la energa contenida en el enlace toester

de la succinil-CoA al ltimo enlace anhdrido fosfrico del GTP. El tercer fosfato del GTP
puede ser transferido al ADP y formar ATP. Esta es la nica reaccin del ciclo donde se forma
un compuesto con energa semejante al ATP, es una fosforilacin a nivel de sustrato. El otro
producto de la reaccin es el cido succnico.

Sexta reaccin: enzima succnico deshidrogenasa

La succnico deshidrogenasa no es una protena simple, es una protena compleja (la

protena se encuentra unida a un grupo prosttico), es una flavo protena, cuyo grupo
prosttico es el FAD. Es una protena integral de la membrana interna de la mitocondria.
Participa en 2 procesos, en el ciclo de Krebs y lo relaciona con la cadena respiratoria.
Cataliza la oxidacin del cido succnico en cido fumrico, mientras que se forma el 3er
cofactor reducido, el FADH2. La reaccin es reversible.

Sptima reaccin: enzima fumarasa

Una molcula de agua se introduce en el doble enlace y se forma el cido mlico. Esta
reaccin es libremente reversible.

Octava reaccin: enzima mlico deshidrogenasa

Con esta reaccin se completa el ciclo y su producto es el cido oxalactico, iniciador del
ciclo. Tambin es la ltima reaccin de oxido-reduccin que se produce; se forma el 3er
NADH. Constituye una reaccin reversible, pero el equilibrio est desplazado hacia la
formacin de del cido mlico. Sin embargo, la propia marcha del ciclo, o lo que es lo mismo,
el consumo del cido oxalactico hace que esta reaccin se desplace en el sentido de la
formacin del cido oxalactico.

Regulacin del ciclo de Krebs

Varios tipos de mecanismos reguladores intervienen en el control de la velocidad del ciclo de

los cidos tricarboxlicos. Estos son la disponibilidad de sustrato, la inhibicin por producto o
inhibicin feedback por intermediarios del propio ciclo. Tambin, de gran importancia, est
presente la regulacin por efectores alostricos. Aun cuando todas las reacciones poseen
alguna regulacin, las que fundamentalmente determinan la velocidad de ciclo de Krebs son
las reacciones catalizadas por las enzimas ctrico sintasa e isoctrico deshidrogenasa.
Regulacin de la ctrico sintasa

Esta regulacin ocurre por el mecanismo de disponibilidad se sustrato. Un metabolito

importante que regula la actividad de la ctrico sintasa es uno de sus sustratos, el cido
oxalactico. Esta enzima normalmente trabaja a concentraciones no saturantes de sus
sustratos, por lo que su actividad vara en dependencia de los cambios de concentracin de
estos. Es indispensable la unin del cido oxalactico en el centro activo de la enzima para
que pueda unirse el acetil CoA y llevarse a cabo la reaccin. Si las concentraciones del cido
oxalactico son pobres esta primera reaccin del ciclo ocurre deficientemente.

Regulacin de la isoctrico deshidrogenasa

Est regulada por la disponibilidad de NAD+ e inhibida por su producto final, el NADH.

Tambin tiene regulacin alostrica por el ADP (su efector alostrico positivo) y el ATP (su
efector alostrico negativo). Las concentraciones de ATP y de ADP son reguladoras
importantes de varios procesos celulares. La relacin entre las concentraciones de ATP/ADP
nos dan un ndice del estado energtico de la clula, el llamado potencial energtico celular
(PEC). Si la concentracin de ATP se eleva, el PEC es alto e indica que en la clula no se
requieren en esos momentos mucho ATP y es el propio ATP el que inhibe los procesos que lo
forman. Esto sucede, por ejemplo, en el reposo. Si las concentraciones de ATP disminuyen y
se elevan las de ADP, esto es indicador de un bajo PEC, indica que se requiere del ATP, y el
ADP es el activador alostrico de los procesos formadores de ATP. Esto sucede, por ejemplo,
en el ejercicio. As sucede con la enzima isoctrico deshidrogenasa, enzima reguladora del
ciclo de Krebs. Al aumentar la concentracin de ADP, la enzima se activa y lo mismo ocurre
con el ciclo. Si aumentan las concentraciones de ATP, la enzima se inhibe y tambin el ciclo.
Se considera a esta enzima como la marcapaso del ciclo.

El resumen de la regulacin del ciclo lo podemos observar en la figura 7.12.

Fig.7.12. Esquema de la regulacin del ciclo de Krebs. La activacin fundamental de la

enzima ctrico sintasa se debe a los aportes de cido oxalactico y del acetil-CoA a partir de
la pirvico deshidrogenasa. La isoctrico deshidrogenasa es activada alostricamente por el
ADP e inhibida por el ATP.

Relacin del ciclo de Krebs con otros procesos metablicos

Algunos metabolitos del ciclo de Krebs participan en procesos de biosntesis. Se observa en

la figura 7.13, que a partir de los intermediarios se forman aminocidos, grupos hemo y
otros compuestos.

Fig.7.13. Participacin de los intermediarios del ciclo de Krebs en los procesos biosintticos.
El cido oxalactico y el cido alfa-ceto-glutrico se pueden transformar en sus aminocidos
correspondientes que son el cido asprtico y el cido glutmico respectivamente. Estas
reacciones, de transaminacin, se estudiarn en el captulo del metabolismo de los
compuestos nitrogenados de bajo peso molecular (captulo 10). Los aminocidos pueden
utilizarse en la sntesis de protenas, pero adems ellos intervienen en la sntesis de las
bases nitrogenadas tan necesarias en la sntesis de los cidos nucleicos, y en la de algunos
cofactores.

El succinil~CoA es un precursor de la sntesis del grupo hemo, importante grupo prosttico

que forma parte de la mioglobina, hemoglobina y otras hemo-protenas como los citocromos.
Estos ltimos compuestos los veremos cuando se trate la cadena transportadora de
electrones.

El cido mlico, en determinadas condiciones fisiolgicas, se incorpora al proceso de

gluconeognesis.

El cido ctrico, al acumularse en momentos de alto potencial energtico celular, sale de la

mitocondria y en el citoplasma constituye la fuente de acetil-CoA citoplasmtico, precursor
para los procesos de la sntesis de los cidos grasos y colesterol.

Por supuesto, los cofactores reducidos relacionan al ciclo con el resto de los procesos de la
respiracin celular, pues son los sustratos de la cadena transportadora de electrones donde
se reoxidan y as podrn ser utilizados de nuevo por el ciclo de Krebs. En la figura 7.13
podemos ver las relaciones que tiene el ciclo de Krebs con otros procesos metablicos a
travs de sus intermediarios.

Funciones del ciclo de Krebs

De todo lo planteado anteriormente el ciclo de Krebs tiene 2 funciones importantes. Una de

ellas es la formacin de los cofactores reducidos que sern sustratos de la cadena
respiratoria y se emplean en la formacin de ATP. La segunda funcin importante es que a
partir de sus metabolitos intermediarios se sintetizan compuestos como son los aminocidos,
grupos hemo y cidos grasos, Esto hace que este ciclo tenga relaciones con el metabolismo
de protenas, con el de las hemoprotenas, los cidos nucleicos, los glcidos y los lpidos.
Adems es sumamente importante la relacin que tiene con otros procesos de la cadena
respiratoria.

Anaplerosis

En las reacciones del ciclo de Krebs, al producirse el catabolismo de la acetil-CoA se

regeneran todos los intermediarios, pero como estos adems se escapan del ciclo al participa
en otros procesos de sntesis, entonces al ciclo de Krebs le faltaran las cantidades necesarias
de sus metabolitos intermediarios para realizar sus funciones. Las cantidades de cido
oxalactico disminuidas no se corresponden con las requeridas para su condensacin con las
de acetil-CoA lo que implicara un deficiente funcionamiento de este proceso.

Esto no sucede realmente porque existen ciertas reacciones que reponen los metabolitos del
ciclo; son las reacciones de anaplerosis, palabra que proviene del griego y que quiere decir
rellenar. Las propias transformaciones de los metabolitos del ciclo en aminocidos son
reversibles y pueden aportar intermediarios a este ciclo. Pero la reaccin de relleno
fundamental es la catalizada por la enzima cido pirvico carboxilasa, enzima localizada en la
mitocondria.
En esta reaccin el cido pirvico se carboxila y se transforma en cido oxalactico y el ATP
aporta la energa necesaria para que ocurra la reaccin. Esta enzima tiene un activador
alostrico, el propio acetil-CoA. Se comprende la importancia de esta regulacin que activa la
formacin del cido oxalactico, sustrato imprescindible para que ocurra la primera reaccin
del ciclo.

El aporte del cido oxalactico es suficiente para rellenar de metabolitos el ciclo, pues este
cido se transforma en los otros metabolitos en las subsiguientes reacciones (Fig. 7.14).

Fig.7.14. Se representa un ciclo metablico de 3 componentes (B, C y D). El rojo ms fuerte

representa una concentracin ms alta del componente que el del color ms plido. En a) A
se ha transformado en B y as se aument su concentracin, B y C se encuentran a
concentraciones muy bajas. Al funcionar el ciclo (b), B se transform en C y este
componente tambin aument su concentracin a partir de B. Finalmente en c) vemos como
ya los 3 componentes del ciclo se encuentran a concentraciones aumentadas. Y todo esto
ocurri slo por la formacin de B a partir de A.

Transformacin del piruvato en acetil CoA. Una vez formado el piruvato, este se
transloca hacia el interior de la mitocondria, en donde ser transformado por accin del
complejo enzimtico piruvato deshidrogenasa ( piruvato dehisrogenasa, dihidrolipoil
deshidrogenasa y dihidrolipoil transacetilasa) en Acetil CoA, va un reaccin de tipo
descarboxilacin oxidativa.

Piruvato + CoA + NAD+ acetil-CoA + CO2 + NADH

Las coenzimas y grupos protticos requeridos en esta reaccin son pirofosfato de

tiamina (TPP), dinucletido de flavina y adenina (FAD), dinculetido de niacina y
adenina (NAD+) y lipoamida (cido lipico). La descarboxilacin oxidativa del
piruvato, dirige a los tomos de carbono de la glucosa a su liberacin como CO2 en el
ciclo de Krebs (ciclo del cido ctrico) y por consiguiente, la produccin de energa.

El ciclo de Krebs. Este proceso, se inicia con la condensacin irreversible de las

molculas de Acetil-CoA y oxaloacetato, esta reaccin es catalizada por la enzima
citrato sintasa y su producto es el citrato. A partir de citrato, se despliega una serie de
reacciones irreversibles, que culminan con la generacin de otra molcula de
oxaloacetato, pasando por la formacin de -cetoglutarato y su tranformacin en
succinil CoA + NADH + CO2, reaccin catalizada por un complejo enzimtico
denominado complejo del -cetoglutarato deshidrogenasa que requiere como coenzimas
y grupos prostticos a TPP, FAD, NAD+ y lipoamida, igual a los requeridos por el
complejo de la piruvato deshidrogenasa. Otros intermediarios son: la formacin de
succinato y liberacin de un GTP a partir de succinil CoA y por consiguiente la sntesis
de fumarato a partir de succinato, reaccin el la cual se libera un FADH2, existe
tambin en el ciclo de Krebs un sitio mas de descarboxilacin oxidativa, en donde se
forma NADH + CO2 y otro donde nicamente se libera NADH. La estiquiometra del

ciclo de Krebs es:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O

2CO2 + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H+ + CoA

El ciclo de Krebs es la va comn para la oxidacin aerbica de los sustratos energticos,

condicin que convierte a este proceso enzimtico en la va degradativa ms importante para
la generacin de ATP. Los 3NADH y el FADH2 liberados en el ciclo de Krebs, son reoxidados por
el sistema enzimtico transportador de electrones (Figura 1), estableciendo as un flujo de
electrones, los cuales son dirigidos hacia el O2 como aceptor final, los productos de este
proceso son una molcula de agua y una gran cantidad de energa liberada, energa que es
utilizada para sintetizar ATP. Al acoplamiento entre la oxidacin de los equivalentes reductores
(NADH, FADH2) y la sntesis de ATP (ATP sintetiza) se les conoce como fosforilacin oxidativa

Cadena transportadora de electrones. La cadena transportadora de electrones es una serie de

cuatro complejos (I, II, III, IV) a travs de los cuales pasan los electrones. Los electrones son
llevados del Complejo I y II al Complejo III por la coenzima Q (CoQ o ubiquinona) y del
Complejo III al Complejo IV por la protena citocromo c

Los electrones del NADH mitocondrial son transferidos al FMN uno de los grupos prostticos
de la NADH-Q oxidorreductasa (Complejo I), posteriormente los electrones se transfieren a un
segundo tipo de grupo prosttico el de las protenas hierro-azufre y de aqu pasarn a la
coenzima Q (QH2 o ubiquinol), quien tambin recibe electrones de la succinato-Q reductasa
(Coplejo II) a este complejo pertenece la enzima del ciclo de Krebs succinato deshidrogenasa la
que genera FADH2, quien cede sus electrones a protenas hierro-azufre y de aqu a la coenzima
Q para formar QH2 . La funcin del Complejo III identificado como Q-citocromo c
oxidorreductasa es catalizar la transferencia de electrones desde QH2 al citocromo c oxidado
(cyt c). La etapa final de la cadena transportadora de electrones consiste en la oxidacin del cyt
c reducido generado por el Complejo III y la consiguiente reduccin del O2 a dos molculas de
H2O. Esta reaccin es catalizada por la citocromo c oxidasa (Complejo IV). Durante el flujo de
electrones por la cadena respiratoria se realiza una transferencia de protones (H + ) va los
Complejos I, III y IV que va desde la matriz de la mitocondria hacia la zona localizada entre la
mambrana mitocondrial interna y externa (espacio intermembranal).

Complejos de la cadena respiratoria.

La coincidencia de un flujo de electrones y de protones a travs de una membrana lipdica

ocasiona la generacin de un gradiente de pH y un potencial de membrana, ambas condiciones
constituyen una fuerza protn-motriz que se utiliza para dirigir la sntesis de ATP va la enzima
ATP sintasa (Figuras 1 y 2).

ADP3 + HPO4 2 + H+ ATP4 + H2O

Un flujo de H + a travs de la ATP sintasa ocasiona la liberacin del ATP hacia la matriz
mitocondrial. La fuente inmediata de estos protones es el espacio intermembranal, en donde
se localizan los protones que fueron translocados a travs de los Complejos I, III y IV de la
cadena transportadora de electrones
Hasta ahora se ha considerado la oxidacin del NADH y FADH2 formados en la mitocondria
(transformacin del piruvato en acetil CoA y ciclo de Krebs), sin embargo, NADH citoslico
liberado durante la reaccin catalizada por la gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa debe ser
reoxidado para que contine la gluclisis, por lo que deber ser transferido a la mitocondria
para su oxidacin a nivel de la cadena transportadora de electrones, pero debido a que este
equivalente reductor no puede atravesar por s mismo la membrana mitocondrial, la clula
contempl la reduccin de un sustrato por el NADH en el citoplasma, una vez reducido este
sustrato, es transportado hacia la matriz mitocondrial por un acarreador especfico , ya dentro
de la mitocondria, el sustrato reducido ser oxidado y devuelto al citoplasma para
experimentar de nuevo el mismo ciclo. A este sistema de transporte especfico, se le conoce
con el nombre de lanzadera, para el NADH de citoplasma son dos las lanzaderas reportadas,
uno es el de la dihidroxiacetona fosfato/glicerol-3-fosfato que genera dentro de la mitocondria
FADH2 y que es especialmente activa en el cerebro, y el otro sistema de transporte es el de la
lanzadera malato/aspartato principalmente activa en hgado y corazn, y que produce NADH.

FORMACIN DE LACTATO

Cuando la cantidad de oxgeno disponible para la clula es limitada, como ocurre en el

msculo durante la actividad intensa, el NADH generado durante la gluclisis no puede
reoxidarse a tasas comparables en las mitocondrias y con la finalidad de mantener la
homeostasis, el piruvato es entonces reducido por el NADH para formar lactato, reaccin
catalizada por la lactato deshidrogenasa esta desviacin metablica del piruvato mantiene a la
gluclisis operativa bajo condiciones anaerbicas. La reaccin global de la conversin de
glucosa a lactato es:

Glucosa + 2Pi + 2ADP 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O