Professional Documents
Culture Documents
Las condiciones ambientales que limitan el cre- neos, generando as un fuerte impacto negativo
cimiento de las plantas tambin limitan su pro- en el ambiente.
ductividad y, por tanto, afectan el bienestar de la Los perodos de sequa son una caracters-
poblacin humana, no slo en lo que se refiere a tica inevitable y recurrente de la agricultura
la calidad y cantidad de alimentos sino tambin mundial y, a pesar de la capacidad de las socie-
en cuanto a la calidad de su medio ambiente. El dades humanas para mejorar la prediccin de
tan slo comparar la abundancia y diversidad en su arribo y para modificar su impacto, la sequa
253
la vegetacin de una selva tropical con la que se sigue siendo hasta ahora el factor ms impor-
pueda encontrar en un desierto helado (los po- tante para la seguridad alimenticia de la pobla-
los) o caliente (el Sahara, el de Sonora, etc.), nos cin humana.
lleva a deducir que la productividad de una es- Una de las estrategias para contribuir a la
pecie est ms ligada a la disponibilidad de agua solucin de esta problemtica mundial es im-
que a cualquier otro factor ambiental. El sector plementar sistemas de mejoramiento dirigidos
agrcola es uno de los que ms consumen agua, a la obtencin de cultivos resistentes a condi-
y dada la limitacin en sistemas de riego eficien- ciones ambientales que imponen una limita-
tes y de plantas de inters agrcola eficaces en su cin de agua. Por varios aos, en mi grupo de
uso del agua, o resistentes a sequa, a la fecha el trabajo hemos abordado la pregunta de cules
consumo total del agua en ciertas regiones de la son los mecanismos moleculares implicados en
Tierra ha llegado a alcanzar niveles alarmantes, la respuesta de las plantas a estas condiciones
cercanos al 30% de la porcin renovable. Esta de estrs ambiental, con la idea de conocer me-
situacin se ha agravado en los ltimos aos jor los elementos involucrados en esta respues-
por el calentamiento global que sufre nuestro ta para contar con un panorama lo suficiente-
planeta, por lo que muchas regiones del mundo mente claro que nos permita generar nuevas
han alcanzado el lmite de aprovechamiento del o mejores herramientas para el mejoramiento
agua, lo que ha llevado a la sobre explotacin de cultivos sensibles o insuficientemente resis-
de los recursos hdricos superficiales y subterr- tentes a diferentes grados de sequa.
bioqumicas que se pueden detectar en la plan- protenas modificadas y que se conocen como
ta ante la escasez de agua es el incremento en fosfatasas, de tal forma que as es posible mo-
los niveles del ABA. En consecuencia, se indu- dular la activacin de una va de transduccin
cen diferentes procesos, como la modificacin de seales y/o la induccin de la expresin de
de diferentes protenas, lo cual lleva a su acti- un gen. A la fecha se desconoce la identidad de
vacin o desactivacin, dependiendo de la pro- las molculas implicadas en el reconocimiento
tena de que se trate; situaciones como sta re- del dficit hdrico. Sin embargo, es abundante
sultan en, por ejemplo, la salida de potasio y la el conocimiento sobre diferentes molculas in-
entrada de calcio en las clulas de los estomas volucradas en diferentes vas de transduccin
(clulas guardia), provocando el cerramiento de de seales y sobre la posible organizacin de
los mismos. Tambin se inducen cambios en estas ltimas. Algunas de estas vas implicadas
la eficiencia de la sntesis de protenas y en la en la transduccin de seales en respuesta al
expresin de los genes, ya sea para aumentar ABA han sido caracterizadas en el caso de las
o disminuir su expresin. Estos ltimos proce- clulas de estomas, en donde la rpida respues-
sos, en general, dan como resultado la sntesis ta de cerrado derivada del estmulo estresante
de protenas necesarias para la produccin de es mediada esencialmente por esta fitohormo-
ciertos compuestos con actividad protectora, o na. Cabe hacer notar que, en este caso parti-
bien directamente a la produccin de protenas cular, la mayor parte de las vas identificadas
con capacidad de proteger diferentes tipos de implicadas en la induccin del cerramiento, o
macromolculas (cidos nucleicos, estructuras en la inhibicin de la apertura del estoma, dan
celulares como membranas, citoesqueleto, el lugar a la induccin de modificaciones post-
aparato traduccional o transcripcional, etc., as traduccionales; es decir, en modificaciones que
como a otras protenas). Por otro lado, se apa- alteran la funcionalidad de protenas con dife-
ga o se disminuye la expresin de otros genes rentes actividades, ya sea quinasas, fosfatasas,
cuyos productos ya no sern tan importantes transportadores de iones, fosfolipasas que de-
para las clulas vegetales en estas situaciones gradan ciertos lpidos para producir segundos
adversas. mensajeros como el inositol trifosfato (InsP3),
El funcionamiento de todos estos procesos enzimas que hidrolizan el ATP (ATPasas) y que
presupone que, en las diferentes clulas vege- estn implicadas en la generacin del gradien-
tales, se seleccionaron a lo largo de su evolu- te de protones necesario para la activacin de
cin mecanismos que les permiten detectar transportadores, factores transcripcionales,
las diferentes formas en las que se presenta etc. Actualmente, una de las vas de transduc-
el dficit hdrico; es decir, existen uno o varios cin de mayor inters inducida por el ABA, que
mecanismos por los que perciben que la can- ha sido identificada y caracterizada en estas
tidad de agua ya no es la ptima para seguir clulas, es aqulla en la que estn implicadas
creciendo. As mismo, existen mecanismos que las especies reactivas de oxgeno, en particular
permiten transmitir la seal detectada por las el in superxido (.O-2) producido por la acti-
clulas para que, finalmente, la clula establez- vacin, por fosforilacin, de la enzima NADPH
ca una respuesta que le permitir contender oxidasa, localizada en la membrana plasmti-
contra la situacin de alarma. A estos mecanis- ca. Se ha sugerido que estara involucrada en
mos se les conoce como las vas de transduc- la produccin de perxido de hidrgeno, el cual
cin de seales. En estas vas generalmente podra ser responsable de la modificacin por
participan protenas que modifican a enzimas oxidacin de ciertas enzimas, como las fosfa-
o a otras protenas; por ejemplo, modificacio- tasas, que a su vez tambin estn involucradas
nes por fosforilacin llevadas a cabo por las en la mediacin o regulacin de la respuesta al
quinasas. En este caso existen tambin aque- estrs a travs del ABA. ste es uno de los ejem-
llas enzimas que les quitan los fosfatos a las plos clsicos en la biologa vegetal en el que se
puede percibir la complejidad de los mecanis- los tantos factores que conforman las vas de
mos por los cuales una clula es capaz de cons- transduccin de seales, cuya funcin est li-
tituir una respuesta que le permitir sobrevivir gada a la hidrlisis de GTP a GDP y, en muchos
y realizar su funcin, y que a su vez le permitir casos, son las responsables de la activacin de
a la planta como un todo reaccionar oportuna y protenas que funcionan como receptores. A
adecuadamente ante los cambios en la hume- pesar de la abundancia de datos relacionados
dad del ambiente. Ntese que esta complejidad, con el papel del ABA en la respuesta al dficit
y su consecuente eficacia, slo implica cambios hdrico y, aun cuando se han identificado varios
a nivel post-traduccional y que, para ello, no se receptores de esta molcula, no est claro cul
requieren de modificaciones en el nivel de la es la seal que percibe la planta para determi-
expresin gentica. La induccin y/o represin nar que los niveles de agua no son ptimos y,
de la expresin gentica se llega a dar, pero a por tanto, inducir la liberacin, movilizacin y/o
tiempos ms tardos y estaran implicadas en produccin del ABA.
tratar de mantener la funcionalidad de estos ti- Aunque la mayora de la informacin con la
pos celulares, a travs promover la produccin que contamos en la actualidad se refiere a las
de molculas con la capacidad de proteger la respuestas de la planta que dependen del ABA,
actividad de aquellas protenas necesarias para tambin existen respuestas que son indepen-
llevar a cabo su funcin. dientes del ABA; es decir, aquellas en las que el
Aun cuando la respuesta a ABA en las c- ABA no acta como mediador. De estas ltimas
lulas guarda de los estomas ha sido la ms existe poca informacin disponible a la fecha;
estudiada y mejor caracterizada, otros tipos sin embargo, de los datos reportados se puede
celulares tambin son capaces de responder considerar que muchos de los elementos parti-
al dficit hdrico a travs de la mediacin por cipantes son molculas del mismo tipo. As, por
ABA, en esos casos, para inducir las funciones ejemplo, se han detectado igualmente quina-
especficas de los tipos celulares en cuestin. sas, fosfatasas, fosfolipasas, por supuesto fac-
Resulta sin duda asombrosa la versatilidad que tores transcripcionales especficos, etc. En este
se ha seleccionado en las clulas vegetales para caso se desconoce si existe alguna o algunas
reconocer la presencia del ABA ante diferentes molculas mediadoras particulares, y cules
condiciones, ya que hay evidencia que indica seran los mecanismos por los que las clulas
que el ABA puede ser detectado por receptores vegetales percibiran o detectaran cuando
localizados en la membrana plasmtica y/o en el agua est limitada. Hasta ahora, la mayor
el interior de las clulas. Por otro lado, se han re- contribucin al conocimiento de estas vas de
portado receptores de ABA de naturaleza muy respuesta se refiere a la identificacin de fac-
diversa; uno de ellos result ser una protena tores transcripcionales, que generalmente son
que se une a ARN y que interviene en la sea- las protenas en las que termina la cascada de
lizacin del estrs en el proceso de floracin; sealizacin y que se encargan de activar la
en tanto que otro corresponde a una protena expresin de los genes necesarios para conten-
de cloroplasto que forma parte de una que- der con el estrs. Cabe resaltar el hecho de que
latasa de magnesio y que es un componente una va o cascada de sealizacin determina la
clave para la sntesis de clorofila y para la se- activacin o represin no de un solo gen, sino
alizacin entre este plstido y el ncleo. Ms de grupos de genes; asimismo, un solo tipo de
recientemente se report un nuevo receptor factor transcripcional es capaz de activar la ex-
del ABA, en este caso se trata de una protena presin de ms de un gen. Por tanto, las vas de
de membrana que, por lo tanto, estara invo- transduccin ejercen un efecto amplificador
lucrada en la percepcin del ABA extracelular, ante una seal o estmulo particular.
y que corresponde a un receptor acoplado a Es posible vislumbrar que la respuesta p-
una protena G, las cuales constituyen otro de tima de la planta al estrs es el resultado del
buen funcionamiento de cada uno de los ele- resultados tambin son consistentes con el
mentos involucrados, as como de la coordina- hecho de que la obtencin de plantas transg-
cin entre ellos, la cual se da por la interaccin nicas que sobre-expresan solamente un gen
entre las diferentes vas de respuesta y con las particular, en algunas especies como tomate,
vas de sealizacin involucradas en el desa- arroz, tabaco, canola o Arabidopsis thaliana, re-
rrollo de la planta. En las plantas con semilla, sulta en la adquisicin de cierta tolerancia a la
o plantas superiores, esta intercomunicacin sequa, pero no en la resistencia a sequa que
entre las vas de sealizacin de los estmulos se espera desde el punto de vista agronmico.
estresantes y de los programas de desarrollo En algunos casos, las plantas pueden tolerar las
de la planta resulta una caracterstica sobre- condiciones de sequa hasta cierta fase de su
saliente, ya que, dado que las plantas son or- desarrollo, pero no producir semillas suficien-
ganismos ssiles (que no se mueven), en ellas tes o en cantidades, al menos, similares al cul-
se han seleccionado mecanismos de respues- tivo original no transgnico. En otros casos, las
ta rpidos y verstiles que favorecen su buen plantas transgnicas presentan caractersticas
desarrollo y reproduccin ante los mltiples y anormales o desventajosas, aun en condicio-
diversos cambios ambientales. As que bien po- nes ptimas de crecimiento. A pesar de que a
dramos afirmar, sin temor a equivocarnos, que la fecha se han sobre-expresado aproximada-
la adaptacin de las plantas al estrs es el re- mente de 60 a 70 genes diferentes implicados
sultado de una compleja red de mltiples inte- en la respuesta a sequa, slo en muy pocos
racciones entre molculas diversas implicadas casos, quizs 3 o 4, se han obtenido resultados
en los diferentes procesos importantes para su alentadores en cuanto a las caractersticas de
crecimiento, desarrollo y reproduccin. resistencia de las plantas a la sequa. Dada la
Adems de la importancia intrnseca que complejidad de la respuesta adaptativa de la
tienen las molculas participantes en las vas planta, se podra pensar que este tipo de in-
de transduccin desde el punto de vista biol- tentos en donde se incrementa la expresin
gico, stas han recibido particular atencin por de una sola de las protenas involucradas, por
el potencial que presentan como molculas ms importante que pudiera ser, rompe con
moduladoras de grupos de genes. Esto tiene el equilibrio tan fino que se ha logrado para
particular relevancia en el proceso de genera- mantener una homeostasis fisiolgica y me-
cin de herramientas para el mejoramiento de tablica que permita la mejor adaptacin de
la resistencia al estrs, en particular a la se- la planta a la sequa. As, otros intentos ms
qua, en diferentes cultivos. La razn de ello es exitosos han sido el sobre-expresar genes que
que, como se mencion al inici de este texto, codifican factores transcripcionales, ya que
la sequa se presenta de una forma compleja e, stos son responsables de, a su vez, inducir la
igualmente, la respuesta de las plantas es de expresin no de uno sino de varios genes que
una gran complejidad, producto de millones codifican protenas que permiten que se d un
de aos de evolucin. En su forma ms simple, balance ms cercano al ptimo para mantener
podemos decir que la resistencia a la sequa es el funcionamiento de protenas o enzimas cla-
el resultado de la activacin y represin de la ves en procesos esenciales para el crecimiento,
expresin de varios genes. Esto es consistente desarrollo y reproduccin de las plantas (en lo
con la observacin de que la resistencia a se- descrito hasta aqu consltese Ingram y Bar-
qua en cultivos de diferentes especies se com- tels, 1996, Bray, 1997, Shinozaki y Yamaguchi-
porta como un carcter cuantitativo; es decir, Shinozaki, 2000, Shinozaki, Yamaguchi-Shino-
que implica la suma de los efectos provocados zaki y Seki, 2003, Schroeder, Kwak y Allen, 2001
por la intervencin de diferentes loci. Dichos y Knight y Knight, 2001).
g\iZ\gZ`e
[\c\jkij
j\hlX
kiXej[lZZ`e[\j\Xc\j
X[XgkXZ`ep
jfYi\m`m\eZ`X
i\^lcXZ`ekiXejZi`gZ`feXc
i\^lcXZ`egfjk$kiXejZi`gZ`feXc
i\^lcXZ`ekiX[lZZ`feXc
i\jgl\jkXj
]`j`fc^`ZXj
i\^lcXZ`egfjk$kiX[lZZ`feXc
gifk\eXj[\
i\jgl\jkX
i\jgl\jkXj
d\kXYc`ZXj
encontr una alta correlacin con su sobre ex- Este ensayo se realiz tambin en presen-
presin en estados de desarrollo en los que se cia y en ausencia de las posibles protenas
transita por una fase de deshidratacin, como protectoras, con la finalidad de establecer si la
es el caso de las esporas o de los conidios en presencia de hidrofilinas interfiere con las mo-
los hongos. Estas evidencias son indicativas dificaciones conformacionales que pudieran
de que el criterio que define a las hidrofilinas sufrir las protenas blanco durante el proceso
es un excelente pronosticador de la sensibili- de prdida de agua. Los resultados obtenidos
dad de una protena a situaciones de dficit mostraron que la presencia de las hidrofilinas
hdrico; por lo tanto, hemos propuesto que las probadas previenen los cambios conformacio-
hidrofilinas representan adaptaciones anlo- nales inducidos por la disminucin del agua
gas a un problema comn en organismos tan disponible, lo cual nuevamente se correlacio-
diversos como procariotes y eucariotes (Garay na con la prevencin de la prdida de actividad
et al., 2000). Entre las preguntas que hemos enzimtica. Estos datos demuestran que tales
abordado estn: Tienen las hidrofilinas una protenas tienen la capacidad de proteger a
funcin protectora durante condiciones de otras protenas de los efectos deletreos cau-
dficit hdrico o deshidratacin? Cules son sados por la limitacin en la disponibilidad de
las caractersticas estructurales y fisicoqumi- agua y, adems, proporcionan una base para
cas en estas protenas esenciales para su fun- entender la funcin de las hidrofilinas en la
cin? respuesta adaptativa de diferentes organis-
Uno de los enfoques que hemos seguido mos ante condiciones de dficit hdrico. Re-
para tratar de contestar estas preguntas ha cientemente hemos realizado experimentos
sido el estudio de su posible papel como pro- en los que se demuestra que estas protenas
tectoras de actividades enzimticas bajo con- tambin ejercen un efecto protector ante ciclos
diciones de deshidratacin parcial, utilizando de congelamiento y descongelamiento (Reyes,
un ensayo in vitro. Los resultados obtenidos Arora y Covarrubias, en preparacin). Estos re-
demuestran que diferentes hidrofilinas per- sultados se suman a evidencias ms recientes
tenecientes al grupo de las protenas LEA son con las que demostramos el papel protector
capaces de proteger las actividades de enzi- que estas protenas pueden ejercer en las c-
mas como la lactato deshidrogenasa (LDH) y lulas vegetales ante situaciones donde el agua
la malato dehidrogenasa (MDH) cuando stas es limitada, utilizando plantas transgnicas
son expuestas a un proceso de desecacin de Arabidopsis que sobre-expresan una de las
controlada (Reyes et al., 2005). hidrofilinas del grupo de las protenas LEA de
Dichas protenas proporcionan una me- plantas (Y. Olvera, tesis doctoral en proceso).
jor proteccin cuando se comparan con otras Y, sin duda, la evidencia contundente que de-
protenas de diferente naturaleza. De manera muestra la relevancia de su papel en el proceso
significativa, hidrofilinas de levadura y de bac- adaptativo de las plantas al dficit hdrico es el
teria tambin mostraron una actividad protec- hecho de que plantas mutantes que carecen
tora en este ensayo in vitro (Reyes et al., 2005). de alguna de estas protenas se vuelven ms
Hemos determinado el grado de cambio sensibles a condiciones de sequa.
conformacional que sufren las enzimas blan- Tambin hemos abordado el estudio de los
co durante la deshidratacin parcial in vitro, mecanismos de regulacin, tanto a nivel trans-
y hemos demostrado que las enzimas blanco cripcional como post-transcripcional. En este
utilizadas sufren cambios conformacionales campo, nos hemos dado a la tarea de identifi-
durante el proceso de prdida de agua (en un car y aislar reguladores globales del estrs por
rango de 90 a 98% de prdida de agua), los sequa en frijol, con la idea de identificar fac-
cuales se correlacionan con la prdida en acti- tores claves o nodales que nos sirvan, a su vez,
vidad (Reyes et al., 2005). de anzuelo para identificar vas de respuesta
Bibliografa
Acosta y White, en Crop Sci., 35:199-204, 1997. Olvera, tesis doctoral en proceso.
Arenas, tesis doctoral en proceso. Reyes et al., en Plant, Cell and Environ., 28:709-718, 2005.
Baker, Steele y Dure, en Plant Mol. Biol., 11:277-291, 1988. Reyes, Arora y Covarrubias, manuscrito en preparacin.
Battaglia y Covarrubias, sometido para su publicacin, Rosales et al., en Agrociencia, 34:153-165, 2000.
2007. Schroeder, Kwak y Allen, en Nature, 410:327-330, 2001.
Bray, en Trends Plant Sci., 2:48-54, 1997. Shinozaki, Yamaguchi-Shinozaki y Seki, en Cur.Op. Plant
Garay et al., en J. Biol. Chem., 275:5668-5674, 2000. Biol., 6:410-417, 2003.
Ingram y Bartels, en Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Shinozaki y Yamaguchi-Shinozaki, en Cur. Op. Plant Biol.,
Biol., 47: 377-403, 1996. 3:217223, 2000.
Knight y Knight, en Trends Plant Sci., 6:262-267, 2001. Tern y Singh, en Crop Sci. 42:64-70, 2002.
Moreno y Covarrubias, en Plant Mol. Biol., 45:501-515,
2001.