Microbiologa Ambiental sobre el estudio de

microorganismos en una COLUMNA DE

WINOGRADSKY
Crisht Martinez Gonzales.a*, Micol Aimituma Franco.a*,1 Vivian Lozano.a*, Karen Aire Lopez.a*, Jasmin Puente.a*
aEP. Ingeniera Ambiental, Facultad de Ingeniera y Arquitectura, Universidad Peruana Unin

Resumen

El objetivo del siguiente estudio tiene como objetivo diferenciar y reconocer los grupos
microbianos presentes en el microambiente para comparar la columna en diferentes de sus
tiempos para luego relacionar la diversidad microbiana presente en el mismo. La metodologa
que usamos para realizar este trabajo fue dividir el estudio por medio de una progresin
calendarizada. Para este estudio tambin se us: Rotulador, Microscopio, Porta objetos, cubre
objetos. La columna de Winogradsky es la representacin in vitro de un ecosistema. En ella se
establecen sistemas altamente especficos en donde los microorganismos crecen de acuerdo con
sus necesidades vitales. En estos se encontraron; la euglena, Paramecio, volvox y flagelados estos
son microorganismos que dependiendo de cul sea, pueden vivir en una zona aerobia, micro
aerobio y anaerobio. Por otro lado tambin se pudo contemplar los cambios fsicos y qumicos
que tuvo lugar a lo largo de la progresin calendarizada, donde se ve que nos encontramos frente
a un gradiente de oxigeno que implica gradiente de un potencial oxido reduccin y as tambin
gradiente de la energa solar dentro de la columna. Por lo cual deducimos que el uso de la energa
solar disminuye a medida que bajamos en la columna, presentndose en actividad fottrofos en
la superficie y una actividad quimiotrofos en la base.

Palabras Clave: columna de winogradsky; Microbiologia; cambio fsico; cambio qumico;

anaerobia; aerobia.

Abstract

The objective of the following study aims to differentiate and recognize the microbial groups
present in the microenvironment to compare the column in different of its times and then to
relate the microbial diversity present in the same. The methodology we used to carry out this
work was to divide the study by means of a timed progression. For this study we also used:
Pen, Microscope, Object holder, covers objects. The Winogradsky column is the "in vitro"
representation of an ecosystem. It establishes highly specific systems where microorganisms
grow according to their vital needs. In these they were found; the euglena, Paramecium, volvox
and flagellate these are microorganisms that depending on what, they can live in an aerobic
zone, micro aerobic and anaerobic. On the other hand it was also possible to contemplate the
physical and chemical changes that took place along the timed progression, where it is seen that
we are faced with an oxygen gradient that implies a gradient of a potential oxidation reduction
and thus also energy gradient Solar within the column. So we deduce that the use of solar
energy decreases as we go down in the column, with phottrophs on the surface and a
chemotrophic activity at the base.

Keywords: Winogradsky column; Microbiology; physical change; Chemical change; anaerobic;

Aerobic.

1. Introduccin:

La columna de Winogradsky es un dispositivo sencillo que permite el cultivo de una gran

diversidad de microorganismos. (Garca Fernndez, 2013-2014).

Adems de ello es til para estudiar y demostrar las relaciones entre diferentes tipos de

microorganismos en distintas comunidades, y constituye una forma de observar cmo los

microorganismos ocupan microespacios especficos, tomando en cuenta sus tolerancias

medioambientales y sus necesidades vitales, como los requerimientos de energa y carbono, as

como la interdependencia, de forma tal que la actividad metablica de un microorganismo

posibilita el crecimiento de otros y viceversa.

La columna de Winogradsky provee de una extremadamente sencilla pero efectiva va para

simular ambientes sedimentarios naturales en el laboratorio y provee la presin selectiva

necesaria para enriquecer un microorganismo especfico a partir de una microflora inicial diversa.

(Zuiga, 2004).

La columna aqu descrita se enfoca sobre todo al ciclo del azufre, pero se podra desarrollar

igualmente la reproduccin de otros ciclos biogeoqumicos equivalentes para nitrgeno, carbono

y otros elementos. (Prez, 2008)

Las columnas de Winogradsky se preparan mayormente con muestras de suelo colectadas en

ambientes hmedos, las cuales son enriquecidas con compuestos orgnicos e inorgnicos y

finalmente son expuestas a una fuente de luz natural. En ellas se observa que despus de 3 4

semanas de incubacin aumenta la cantidad de los distintos tipos de microorganismos, mismos

2
que de acuerdo con sus caractersticas fisiolgicas se establecen en las diferentes zonas a lo largo

de la columna, lo que se conoce como sucesin. De esta forma, el resultado es una columna

estratificada, tanto en el suelo como en el agua, donde cada estrato se relaciona con un proceso

qumico-biolgico. Una vez que se prepare la columna y se exponga a la luz solar, se desarrollar

una sucesin de comunidades bacterianas interrelacionadas metablicamente, de un modo similar

a lo que ocurre en la naturaleza, que se podrn observar fcilmente por su distinta coloracin.

(Prez, 2008)

En el presente trabajo se quiere llegara experimentar y obtener resultados para poder as observar

el contraste con otras columnas, adems de ello aplicamos toda la teora avanzada en clase, y

reconocer e interpretar los diferentes estratos de la Columna de Winogradsky, y sus

interrelaciones.

2. Materiales y Mtodos

La metodologa consiste en el estudio del cambio progresivo que se produce dentro de nuestra

columna de winogradsky. Por lo tanto los cambios producidos se tomaran en cuenta bajo una

progresin calendarizada que ser divido en 8 semanas, para la obtencin de resultados claros y

favorables con respecto a los ciclos y procesos encontrados.

2.1. Materiales

Una botella linpia de 1 L.

Carbonato de calcio 300 gramos.
Sulfato de calcio 150 gramos.
Agua.
Tierra de jardn o chacra.
Guano de oveja.
Celulosa 1 gramo (papel higinico).
Porta objetos.
Papel aluminio.
Varilla.
Bolsa negra.
Cinta maskin tape.
Papel aluminio.
3
 Rotulador.
Microscopio

Estos materiales fueron indispensables para el avance y recopilacin de datos del proceso de

cambio en la columna de winogradsky.

2.2. Procedimiento

Paso 1: Seleccionar la tierra, retirar todo lo que no pertenece (piedras pequeas,

astillas, basura, etc.)

Paso 2: Pesar 300 gramos de carbonato de calcio y 150 gramos de sulfato de calcio.

Paso 3: Cortar en trozos pequeos las hojas de papel Higinico que viene a ser la

celulosa.

Paso 4: Tomar la botella y agregarle tierra de jardn hasta que la botella se llene hasta

su cuarta parte.

Paso 5: Agregar los reactivos (Na2SO4, CaCO3) sobre el procedimiento anterior.

Paso 6: Agregar papel filtro o papel higinico cortado en trozos (fuente de celulosa).

Paso 7: Adicionar la otra porcin de tierra + (Guano).

Paso 8: Aadir una porcin de agua, solo lo suficiente como para que supere por 1 cm

la mezcla anterior.

Paso 9: Mezclar previamente el todo lodo con el carbonato de calcio, el sulfato de

calcio y los otros ingredientes movindola con la varilla hasta que quede una mezcla

homognea.

Paso 8: Una vez lista nuestra muestra se cubre con el papel aluminio, se envuelve con

la bolsa negra toda la probeta y con la cinta de embalaje se sella completamente.

4
 Paso 9: Despus de estar sellada se le deja 1 mes sin rayos del sol y sin oxgeno pero

tiene que estar en un ambiente temperado.

Pas 10: Luego de haber pasado 1 mes se le quita el sellado y se le saca a los rayos

de sol.

2.3. Anlisis de datos

2.3.1. Primera Semana:

El agua comienza a tornarse un color amarillento adems de que se observa la aparicin de

pequeas burbujas. (Fig.1)

F G . 1. E N ESTA MAGEN SE OBSERVA LOS CAMBOS QUE SUFRO NUESTRA

COLUMNA EN SU PRMERA SEMANA

2.3.2. Segunda Semana y tercera semana:

5
 El agua se torna de un color ms translucido y se tornan unas bandas oscuras (Fig. 2).

F G . 2.- OBSERVACN DE LA APARCON DE NUEVOS VAREDADES DE

COLOR Y FORMAS .

2.3.3. Cuarta semana:

Se divide en dos capas una negra y la otra gris, el gua se torna un caf muy oscuro, bandas

oscuras, cmulos negros (Fig. 3).

F G . 3.- E N ESTA MAGEN SE PUEDE VER LA FORMACON DE DOS

CAPAS AL SER VSTAS EN SU CUARTA SEMANA .

2.3.4. Quinta semana:

6
 Formacin de cmulos, agua mucho ms turbia y ya no existe rastro de papel en la mezcla

(Fig. 4).

F G . 4.-E STA MAGEN MUESTRA LA DESAPARECON DEL PAPEL Y OTROS

CAMBOS DURANTE LA QUNTA SEMANA .

2.3.5. Sexta semana:

La fase liquida se reduce considerablemente, aparece un posible desulfovibrio y aumenta en

gran cantidad la presencia de burbujas.

F G . 5.-E N LA SEXTA SEMANA SE OBSERVA DE DESAPARCON DEL AGUA

, APARCON E NCREMENTO DE BURBUJAS .

7
 2.3.6. Sptima semana:

Se observ que ambas capas se combinaron de una forma heterognea, adems de aumentar

la presencia de desulfovibrio, tomando as un aspecto muy disparejo.

F G . 6.-SE MUESTRA EL PUNTO CUANDO AMBAS CAPAS SE COMBNAN ..

2.3.7. Octava semana:

A este punto la mezcla obtiene un aspecto de uniformidad con respecto a la distribucin de

tierra entre el guano y se da la aparicin de una buena cantidad de biofilm..

2.3.8. Qu microorganismo encontramos en la columna winogradsky?

Al desmontar nuestra columna sacamos 2 porta objetos para as sacar algunas muestras y

poderlas observar con la ayuda de un microscopio.

Los microrganismos encontrados fueron:

2.3.8.1. La Euglena:

8
 Las euglenas son protozoos (Phylum Euglenozoa, Orden Euglenales) caracterizados por

presentar una cubierta celular o pelcula, algunas especies presentan en sus cloroplastos

pirenoides atravesados por varios tilacoides, manchas oculares y en general se mueven mediante

flagelos; tambin presentan movimiento euglenoide conocido como metabolia, que involucra

cambios de forma. La pelcula est integrada por la membrana plasmtica y por bandas proteicas

flexibles dispuestas en forma helicoidal conocidas como mionemas (Vismaraet al.

2000).(Sittenfeld, Vargas, Mora, & Serrano, 2004) (Fig. 7).

F G . 7.- E N ESTA MAGEN SE OBSERVACON DE LA EUGLE MEDANTE UN MCROSCOPO .

2.3.8.2. Paramecio:

9
 Organismo microscpico unicelular de forma ovalada, con cilios que le permiten desplazarse

y capturar las bacterias de que se alimenta; habita en aguas dulces estancadas (Fig. 8).

F G . 8.-V STA MCROSCOPCA DEL PARAMECO .

2.3.8.3. Volvox:

Alga de agua dulce que vive formando colonias en las que los individuos estn unidos entre

s por comunicaciones protoplasmticas que forman una intrincada red (Fig. 9).

F G . 9.-V STA MCROSCOPCA DEL ALGA VOLVOX .

2.3.8.4. Flagelado:

10
 (Protozoo) Que pertenece al subflum de los flagelados. Su principal caracterstica es la

presencia de uno o ms flagelos.

F G . 10.- VSTA MCROSCOPCA DEL PROTOZOO F LAGELADO .

2.4. Zonas de la columna de winogradsky

Esta se divide en tres zonas las cuales son: Aerobia, Microaerobia y Anaerobia.

La zona cercana a la superficie o zona aerbica dispone de una alta concentracin de este gas.

Inmediatamente debajo, se localiza la zona de microaerofilia, con una concentracin parcial de

O2. Por ltimo, la zona anaerbica o anxica, constituye el lecho de lodo (Prez lopez, 2008).

2.5. Las bacterias encontradas en la columna winogradsky

Se logr encontrar cianobacterias que se la localizo en la parte superior, seguida de una zona

de posibles sulfatos reductoras, amaebobacter o desufovibrio y por ltimo en la zona ms baja

desulfotomaculum o desulfomonas.

11
 F G . 11.- E STA MAGEN MUESTRA TODOS LOS TPOS DE BACTERAS
ENCONTRADAS EN LA ULTMA SEMANA DE OBSERBACON .

3. CONCLUSIONES:

Los distintos resultados que se encontraron en la columna de winogradsky nos dan a

conocer la diversidad microbiana presente en el micro ecosistema o microambiente creado, en

las condiciones especficas para que los micros bacterias puedan desarrollarse en los diferentes

ambientes (aerobio. anaerobio y microaerofilo).

El ambiente proporcionado por la columna, ayuda a los microorganismos a establecerse

en regiones diferenciadas segn su metabolismo, y constituye un modelo de ecosistema, similar

a los tapetes microbianos que se hallan en aguas dulces o saladas, donde proliferan

microorganismos del medio acutico y delos sedimentos.

Para poder generar los productos de fermentacin necesarios para las sulfo reductoras en

la columna, El nico requerimiento es la fuente de carbono orgnico.

Hemos diferenciado los grupos microbianos presentes en un microambiente tambin

12
pudimos comparar los microorganismos que crecen a lo largo de la columna en diferentes

tiempos, relacionando la diversidad microbiana presente en un microambiente con algunas de

sus caractersticas fisiolgicas.

Esta columna se mantiene en la oscuridad con el fin de poder determinar si en sta podrn

proliferar microorganismos en la misma cantidad o menor cantidad que en la columna expuesta

a la luz solar. Por otro lado, la columna en mencin se mantiene tapada para evitar la evaporacin.

En la zona ms alta se pueden ver flagelados, volvox, paramesios y cianobacterias; la

presin controla la cantidad de oxigeno disponible por los microorganismos.

La columna Winogradsky es un sistema complejo, y una excelente manera de mostrar a

los estudiantes que no todas las bacterias son patgenos y tienen un papel importante en el ciclo

geoqumico de la biosfera; tambin puede abarcar el nivel de investigacin con proyectos que

pueden ocupar la imaginacin y los estudios de los estudiantes durante meses.

4. Referencias

Garca Fernndez, R. (2013-2014). Biotecnologia y Energia Sostenible. 36.

Prez, J. P. (2008). LA COLUMNA DE WINOGRADSKY. UN EJEMPLO DEMICROBIOLOGA BSICA EN UN
LABORATORIO DE EDUCACIN.
Zuiga, F. B. (2004). Tecnicas de Muestreo para manejadores. En F. B. Zuiga.
Prez lopez, J. P. (2008). LA COLUMNA DE WINOGRADSKY. UN EJEMPLO DE MICROBIOLOGA BSICA EN UN
LABORATORIO DE EDUCACIN SECUNDARIA, 373.
Sittenfeld, A., Vargas, M., Mora, M., & Serrano, A. (2004). Una nueva especie de Euglena ( Euglenozoa:
Euglenales ) aislada de ambientes extremfilos en las Pailas de Barro del Volcn Rincn de la Vieja , Costa
Rica, 52(1), 2730.

13