UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARTIN

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERIA

SENSIBILIDAD ANTIMICROBIANA

INTEGRANTES
ANDRES MORENO ROJAS
MARIA JUNELLY GUERREO
LUZ CLARITA VENTURA RENGIFO
LORENZA JHANETH YNOAN GARCIA
SANDY NOEMI GUERREO JIMENEZ
ABIGAIL GERALDINE ACUA MORENO

DOCENTE

Blog. YONI MENI RODRIGUEZ ESPEJO

Tarapoto - 2017
 RESUMEN

El estudio de la sensibilidad de los microorganismos a los antimicrobianos es

una de las funciones ms importantes de los laboratorios de microbiologa. Su
realizacin se desarrolla mediante las pruebas de sensibilidad o antibiograma,
cuyo principal objetivo es evaluar en el laboratorio la respuesta de un
microorganismo a uno o varios antimicrobianos, traduciendo, en una primera
aproximacin, su resultado como factor predictivo de la eficacia clnica.

El antibiograma define la actividad in vitro de un antibitico frente a un

microorganismo determinado y refleja su capacidad para inhibir el crecimiento
de una bacteria o poblacin bacteriana. Su resultado, la farmacologa del
antimicrobiano, en particular en el lugar de la infeccin, y los aspectos clnicos
del paciente y de su infeccin, sustentan la eleccin de los antimicrobianos en
el tratamiento de las enfermedades infecciosas. Asimismo, ofrece, en su
conjunto, elementos objetivos de actuacin en los tratamientos empricos. El
panorama actual de las resistencias de los microorganismos a los
antimicrobianos hace ineludible su determinacin, incluso en aquellos casos en
los que la sensibilidad se considera universal y no se han descrito, por el
momento, mecanismos de resistencia. Cada laboratorio de microbiologa
establecer segn su estructura, demanda asistencial y Poltica de Antibiticos
un esquema de organizacin y tcnicas de trabajo que aseguren la realizacin
e informacin posterior de los antibiogramas.

Palabra clave: antimicrobiano, tcnicas, sensibilidad, tratamiento,

enfermedades.
 Abstrac

The study of the sensitivity of microorganisms to antimicrobials is one of the

most important functions of microbiology laboratories. Its accomplishment is
developed by sensitivity tests or antibiogram, whose main objective is to
evaluate in the laboratory the response of a microorganism to one or several
antimicrobials, translating, in a first approximation, its result as a predictive
factor of clinical efficacy. The antibiogram defines the in vitro activity of an
antibiotic against a given microorganism and reflects its ability to inhibit the
growth of a bacterium or bacterial population. Its outcome, the pharmacology of
the antimicrobial, particularly at the site of infection, and the clinical aspects of
the patient and their infection, support the choice of antimicrobials in the
treatment of infectious diseases. In addition, it offers, as a whole, objective
elements of action in the empirical treatments. The current picture of resistance
of microorganisms to antimicrobials makes their determination inescapable,
even in cases where sensitivity is considered universal and resistance
mechanisms have not yet been described. Each microbiology laboratory will
establish according to its structure, health care demand and Antibiotic Policy a
scheme of organization and work techniques that will ensure the realization and
subsequent information of antibiograms.

Key words: antimicrobial, techniques, sensitivity, treatment, diseases

I. Introduccin

La prueba de sensibilidad antimicrobiana es una de las tantas armas con

las que se cuenta en un laboratorio para ayudar a los profesionales en
medicina a fin de controlar los procesos infecciosos que se desarrolla en
los pacientes.

Pero para poder desarrollar se debe cumplir con un requisito

fundamental el cual es, lograr el aislamiento del agente productor del
cuadro clnico mediante los cultivos correspondientes. Ya que existe un
dicho que se debe tener en cuenta que es, Primero cultivar y luego
medicar.

En tal sentido, antes de medicar (antibiticos) a un paciente, se debe

asegurarse de que ya se hayan recolectado las muestras para realizar
los cultivos que requiere un buen diagnstico. Esto asegurar hasta un
mximo las posibilidades de aislar el agente etiolgico.

Una vez que se ha logrado obtener al agente microbiano en el

laboratorio se puede hacer uso de las diferentes tcnicas que se han
desarrollado para guiar de la mejor manera posible al mdico a fin de
que este pueda escoger el antibitico a emplear en el control del proceso
infeccioso.

La razn fundamental de una prueba de sensibilidad es la de realizar

una prediccin a travs de una prueba in vitro, observar la respuesta del
paciente a un determinado antibitico, la evolucin de la infeccin y
detectar una resistencia relevante del organismo que est causando este
proceso infeccioso.

Es as, que en un principio las pruebas de difusin por disco ha sido

utilizado por ms de 70 aos en los laboratorios de microbiologa.
Alexander Fleming utiliz una variante de esta tcnica cuando trabajaba
con la penicilina en los aos cincuenta. En ese tiempo, haba tantos
procedimientos diferentes en uso como microbilogos. Los doctores
Bauer, Kirby, Sherris y Turck probaron minuciosamente todas las
variables involucradas en el proceso, tales como los medios de cultivo, la
temperatura y el espesor del agar. (1)

En 1966, los doctores Bauer, Kirby, Sherris y Turck, publicaron su

estudio cimero describiendo la prueba que se usa en la actualidad. El
NCCLS adopt los pasos bsicos del procedimiento descritos en el
estudio de Bauer como el mtodo de referencia para difusin por disco.
Estos pasos deben seguirse en forma minuciosa para obtener resultados
precisos (2).

Bajo este contexto, como alumnos de la carrera profesional de

Enfermera realizamos una investigacin en laboratorio sobre la
sensibilidad antimicrobiana cuyo objetivo fue determinar la situacin
actual de los patrones de sensibilidad antimicrobianos de las bacterias
multirresistentes ms frecuentes en los canales de agua de la
comunidad de Shuspishia.

Par realizar el trabajo, se utiliz el mtodo de prueba en disco y el

mtodo de coloracin de GRAM, teniendo como resultado que las
bacterias no fueron resistentes a los antibiticos, as como tambin se
encontr bacterias Gram negativo los cuales son: bacilos y
estreptobasilos.
II. Marco Terico

2.1. Mtodo del antibiograma disco-placa

El antibiograma disco-placa basado en el trabajo de Bauer, Kirby y
colaboradores es uno de los mtodos que el National Committee for
Clinical Laboratory Standards (NCCLS) recomienda para la
determinacin de la sensibilidad bacteriana a los antimicrobianos. El
antibiograma disco-placa consiste en depositar, en la superficie de agar
de una placa de petri previamente inoculada con el microorganismo,
discos de papel secante impregnados con los diferentes antibiticos.

Tan pronto el disco impregnado de antibitico se pone en contacto con la

superficie hmeda del agar, el filtro absorbe agua y el antibitico difunde
al agar. El antibitico difunde radialmente a travs del espesor del agar a
partir del disco formndose un gradiente de concentracin. Transcurridas
18-24 horas de incubacin los discos aparecen rodeados por una zona
de inhibicin (3).

La concentracin de antibitico en la interfase entre bacterias en

crecimiento y bacterias inhibidas se conoce como concentracin crtica y
se aproxima a la concentracin mnima inhibitoria (CMI) obtenida por
mtodos de dilucin. Sin embargo, los mtodos disco-placa no permiten
una lectura directa del valor de la CMI. Para cuantificarla, basta con
haber contrastado previamente el sistema disco-placa con un gran
nmero de cepas de CMI conocidas que han estado previamente
determinadas por otros mtodos de determinacin de la sensibilidad a
los antimicrobianos (ej.: mtodo de dilucin). (4)

Esta determinacin se realiza con cientos de bacterias para minimizar

errores. Se mide el dimetro de la zona de inhibicin obtenida por cada
una de tales cepas y se grafica dicha medida frente a la CMI,
obtenindose la lnea de regresin o "recta de concordancia" que
proporciona la correspondencia entre las CMI y los dimetros de
inhibicin.
 Para determinar la CMI de una cepa se procede a medir el dimetro de
la zona de inhibicin y luego extrapolarlo en el grfico para obtener la
CMI. Existen, por tanto, unos dimetros de inhibicin, expresados en
mm, estandarizados para cada antimicrobiano. La lectura de los halos de
inhibicin debe interpretarse como sensible (S), intermedia (I) o
resistente (R) segn las categoras establecidas por el NCCLS

2.2. Indicaciones y limitaciones

El antibiograma est indicado cuando se asla una bacteria responsable
de un proceso infeccioso y no puede predecirse su sensibilidad,
especialmente si se sabe que este tipo de bacteria puede presentar
resistencia a los antimicrobianos ms habituales.

Estas pruebas de sensibilidad tambin son tiles en estudios

epidemiolgicos ya que el resultado del antibiograma puede ser
considerado como el primer marcador epidemiolgico de que se
dispone. El mtodo de disco-placa es fcil de realizar, rpido y barato.
Es una metodologa aplicable a una amplia variedad de bacterias,
fundamentalmente bacterias aerobias no exigentes de crecimiento
rpido como Enterobacteriaceae, Pseudomonas spp.,
Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia, Acinetobacter
spp., Staphylococcus spp. y Enterococcus spp. Adems, con ligeras
modificaciones, puede ser aplicado a Haemophilus spp., Neisseria
gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae y Streptococcus spp. (apartado
D). (5)

2.3. Procedimiento
A fin de realizar el presente trabajo se procedi a seguir los siguientes
pasos.

En primer lugar se limpia el campo en donde se va realizar el cultivo,

utilizando para ello alcohol yodado y alcohol puro, luego se coloca
los cuatro mecheros a los extremos para que el campo este estril.
 Foto 1: procediendo a limpiar el campo de trabajo
Fuente: propia

En segundo lugar se agrega 2ml de solucin Salina fisiolgica a la

muestra N2 en condiciones estriles y luego homogenizamos para
que se suspendan, luego hacemos soluciones para echar 3ml en
cada vial de solucin salina.

Foto 2: agregando solucin salina a la muestra

Fuente: propia
 Sacar de la primera muestra N2 1ml y echar al primer vial y
homogenizar, sucesivamente hacemos el mismo procedimiento con
el segundo y tercer vial.

Foto 3: Sacando muestra del N2

Fuente: propia

Rotular las placas con los respectivos nombres de los medicamentos

(Amoxicilina, Fluconazol, Cloranfenicol.)

Foto 4: Rotulando muestra

Fuente: propia
 Echamos el agar MH en las placas de Petri al ras, para luego, poner
1ml de la muestra N3 y de la N2 igual, una vez realizado esto, se
coloca en la incubadora por el periodo de 15 minutos

Foto 5: Colocando las muestra para ponerlos en la incubadora

Fuente: propia

2.4. Resultado
Con la experimentacin de sensibilidad antimicrobiana con discos los
resultados obtenidos, nos dieron a conocer que la bacteria no fueron
resistente al antibitico.

Con el mtodo de coloracin de GRAM por el intento de identificar los

microorganismos existentes en las muestras de agua de canal, se
encontr bacterias Gram negativo los cuales son: bacilos y
estreptobasilos.
III. CONCLUSIONES

La sensibilidad antimicrobiana que presentaron las cepas de N2

obtenidas del canal de agua de la comunidad de shupisia que se
aislaron para poder observar que tipos de bacterias y microorganismos
podemos encontrar en el laboratorio de microbiologa, se pudo observar
que las bacterias no son resistentes a los antibiticos (amoxilina,
fluconzaol, diclosina, cloranfenicol).

Tambin se ha llegado a la conclusin que el agua del canal de esta

comunidad, representan un riesgo para sus habitantes, y en especial la
salud de los nios ya que son vulnerables a las diversas enfermedades y
que hasta podra provocarnos la muerte.
IV REFERENCIAS BIBLIOGRAFICA

1. M. EI&P. Agentes Antifngicos y Pruebas de Susceptibilidad Washington

DC: American Society of Microbiology; 1995.

2. Swenson J. HJ&PL. Prueba Especial para Detectar Resistencia a

Antibacterianos Microbiologa SAd, editor. Washington DC; 1995.

3. MENSURA G. Recomendaciones del grupo MENSURA para la seleccin de

antimicrobianos en el estudio de la sensibilidad y criterios para la
interpretacin del antibiograma: Rev Esp Quimioterap; 2000.

4. Baker CN SSCD. Comparacin de E-test con dilucin en agar, caldo

Microdilucin y pruebas de susceptibilidad a la difusin de agarUtilizando un
conjunto de desafos especiales Washintong DC; 1991.

5. HD I. Manual de procedimientos de microbiologa clnica Washington:

Sociedad Americana de Microbiology; 1992.