La integracin entre la gluclisis y el flujo del ciclo de la glutamato

glutamina puede explicar el aumento glucoltico preferencial durante la

activacin cerebral, que requiere glutamato

La observacin de 1988 por Fox et al. (1988) que la intensa activacin cerebral breve
aumenta la gluclisis (formacin de piruvato a partir de glucosa) mucho ms que el
metabolismo oxidativo ha sido confirmado en abundancia. El aumento especficamente
glucoltico fue inesperado porque la cantidad de ATP que genera es muchoms pequeo
que el formado por el subsecuente metabolismo oxidativo del piruvato. El presente
artculo muestra que la gluclisis preferencial puede explicarse por procesos
metablicos asociados con la activacin del ciclo glutamato-glutamina. El flujo en este
ciclo, que es esencial para la produccin de glutamato transmisor y GABA, equivale al
75% de la utilizacin de glucosa en el cerebro y cada turno se asocia con la utilizacin de
~ 1 molcula de glucosa. Alrededor de la mitad de la asociacin entre el flujo del ciclo y
el metabolismo de la glucosa se produce durante la conversin neuronal de glutamina a
glutamato en un proceso similar al del malatoaspartato (MAS), excepto que el
glutamato se suministra a partir de glutamina, no formada a partir de -cetoglutarato
(KG) como durante la operacin de MAS convencional. La funcin MAS regular se
desencadena por un proceso oxidativo en el citosol durante la gluclisis que causa
NAD+ reduccin a NADH. Dado que el NADH no puede atravesar la membrana
mitocondrial (MEM) para la oxidacin, NAD + se regenera mediante la conversin de
oxaloacetato citoslico (OAA) en malato, que entra en la mitocondria para su oxidacin
y en un proceso cclico regenera OAA citoslica. Por lo tanto, tanto el MAS como el
"pseudo-MAS" necesario para la formacin de glutamato neuronal solo pueden
funcionar junto con la reduccin citoslica de NAD + a NADH. El principal proceso que
causa la reduccin de NAD + es la gluclisis, que por lo tanto tambin debeocurre
durante la conversin neuronal de glutamina a glutamato y puede energizar la
captacin de glutamato vesicular que preferentemente utiliza energa derivada de
glucoltico. Otro importante contribuyente a la asociacin entre el ciclo glutamato-
glutamina y la utilizacin de glucosa es la necesidad de que el piruvato astroctico
genere glutamato. Aunque se produce algo de metabolismo oxidativo durante la
formacin de glutamato, es solo la mitad de eso durante la funcin del ciclo normal del
cido tricarboxlico (TCA). La estimulacin del receptor de glutamato conduce al ion
potasio (K +) liberacin y absorcin astroctica, alimentada preferentemente por
gluclisis y seguida de liberacin y recurticin neuronal. La gluclisis preferencial
inducida por la activacin disminuye con la activacin continua y es seguida por una
relacin aumentada entre el metabolismo oxidativo y la gluclisis, lo que refleja la
oxidacin del glutamato generado y el lactato acumulado.

Correlacin entre la utilizacin de glucosa en el cerebro y el ciclo

glutamato-glutamina
El flujo sanguneo al cerebro es mucho ms alto que el correspondiente a su volumen o
peso ( Xing et al., 2017 ). En condiciones de reposo, el metabolismo cerebral en el
cerebro adulto ocurre casi exclusivamente como metabolismo oxidativo completo de la
glucosa ( Siesj, 1978 ; Shulman et al., 2001 ; Patel et al., 2014) en neuronas y
astrocitos, que muestran tasas similares de metabolismo oxidativo de glucosa (revisado
por Hertz, 2011 ). Estos dos tipos de clulas estn conectados por el ciclo glutamato-
glutamina, que transporta glutamato sintetizado en astrocitos a las neuronas para
cubrir todo el suministro de glutamato transmisor y GABA, que no pueden sintetizarse
en las neuronas ( Bringmann et al., 2013 ;Schousboe et al., 2013 ; Hertz y Rothman,
2016 , 2017 ). Este ciclo proporciona un excelente ejemplo de cmo se integran
procesos metablicos especficos en diferentes tipos de clulas cerebrales para permitir
comportamientos complejos, y se describir con ms detalle ms adelante. Aqu basta
con mencionar que: (i) su ndice es muy alto ya que corresponde a ~ 75% del
metabolismo total de la glucosa en el cerebro; y (ii) la utilizacin de aproximadamente
una molcula de glucosa ocurre durante cada vuelta del ciclo ( Sibson et al.,
1998 ; Hyder et al., 2013 ; Hertz y Rothman, 2016 ).

La gluclisis aumenta de forma preferencial durante la activacin cerebral

breve
El metabolismo de la glucosa es un proceso de dos etapas en el cual la glucosa
inicialmente se convierte en piruvato durante la gluclisis y posteriormente el piruvato
se oxida por completo en el ciclo del cido tricarboxlico (TCA). La cantidad de piruvato
que se encuentra en el cerebro es pequea porque la mayora generalmente se
metaboliza rpidamente, y la pequea cantidad presente est en el potencial redox
convertido en lactato, que est presente en al menos 10 veces la cantidad (~ 1 mM) que
el piruvato.

Slo cuatro molculas de ATP se forman durante la gluclisis, y dado que la conversin
inicial de glucosa a glucosa-6-fosfato por hexoquinasa consume una molcula de ATP y
la formacin de fructosa 1,6-bisfosfato de fructosa 6-fosfato, otro ATP es el rendimiento
neto de ATP. bajado a dos ATP por cada molcula de glucosa. Se genera mucho ms
ATP por metabolismo oxidativo, donde el mximo terico es 36 ATP, que generalmente
se reduce a 30 debido a una eficacia de fosforilacin oxidativa inferior al 100%. Sin
embargo, durante la activacin cerebral breve, la utilizacin de la glucosa se regula
preferentemente por incremento en comparacin con el consumo de oxgeno a pesar
del suministro de oxgeno adecuado, como se analiza a continuacin. Esto se puede
expresar como una disminucin en el ndice de oxgeno-glucosa (OGI), que indica la
tasa metablica cerebral de oxgeno (CMR O2)) dividido por la tasa metablica cerebral
para la glucosa (CMR glc ), es decir, CMR O2 / CMR glc . En condiciones de reposo, OGI
generalmente est cerca (o ligeramente por debajo) del valor terico de 6, lo que indica
la oxidacin completa de la glucosa casi exclusivamente por gliclisis al piruvato y la
posterior oxidacin del piruvato en el ciclo de TCA. Tambin se esperara a priori que
este sea el caso durante la activacin cerebral que requiere energa debido al
rendimiento de ATP mucho mayor durante la oxidacin de piruvato.

Sin embargo, Fox et al. (1988) mostraron que la estimulacin visual intensa, que segn
la informacin del autor dur 40 s, aumenta la captacin de glucosa (medida con 18 F-
fluorodesoxiglucosa) en un 51% y el flujo sanguneo (medido con agua 15 O) en un 50%
en humanos cerebro, pero el consumo de oxgeno (medido con 15 O 2 ) en solo 5%. Los
aumentos en el flujo sanguneo y CMR glc sin aumentos correspondientes en CMR O2 ,
que indica esta gran disminucin en OGI, fueron muy poco probables por Sokoloff
(2008) que afirm que los cambios intracelulares debido a la mayor actividad funcional
que estimulan CMR glctambin estimula CMR O2 . Sin embargo, como sealan Fox et
al. (1988) su hallazgo es consistente con un aumento previamente observado en el
lactato en el cerebro activado ( Hossmann y Linn, 1987 ; Prichard et al., 1987 ), que
luego se confirm durante la estimulacin visual ( Prichard et al., 1991 ). Adems, se ha
demostrado la salida de lactato al lquido extracelular, la sangre y el sistema linftico
( Dienel y Cruz, 2016 ) como se discutir ms adelante, y se ha confirmado
abundantemente una disminucin en OGI en muchas regiones cerebrales especficas
durante la estimulacin cerebral breve ( Lear y Ackermann, 1989 ; Adachi et al.,
1995 ; Madsen et al., 1995, 1998 , 1999 ; Schmalbruch y otros, 2002 ; Cruz et al., 2007 ),
recientemente revisado en detalle por Dienel y Cruz (2016) . Schmalbruch y
col. (2002) realizaron la importante observacin adicional de que la disminucin de
OGI en el cerebro de rata se previene con propranolol, un inhibidor de los receptores
1 -adrenrgico y 2 -adrenrgico. Este hallazgo es consistente con estudios previos
de MacKenzie et al. (1976a , b)que la noradrenalina causa una disminucin de la IOG
despus de la inyeccin o infusin intraventricular en la arteria cartida de los
mandriles anestesiados con una barrera hematoenceflica alterada, mientras que la
infusin del antagonista -adrenrgico propranolol aumenta la IOG. El 1 -
adrenrgicos estimula la glucogenlisis en el cerebro ( Xu et al, 2014. ; Hertz et al,
2015d. ), Que es importante para el ciclo glutamato-glutamina, ya que se requiere para
la sntesis de glutamato ( Gibbs et al., 2007 ; Obel et al., 2012 ) y, por lo tanto, la
sntesis del glutamato transmisor. Estos transmisores son esenciales para la activacin
cerebral, incluido el aprendizaje y la plasticidad inducida por la experiencia ( Ng et al.,
1997 ;Gibbs y Hertz, 2005 ; Guzmn-Ramos et al., 2012 ; Wassum et al., 2012 ; Hasan
et al., 2013 ; Banks et al., 2014 ; Barker y Warburton, 2015 ; Chen et al., 2016 ; Hertz y
Chen, 2016a ; Wijtenburg et al., 2017 ). Sin embargo, Schmalbruch et al. (2002) no
investigar si la actividad de propranolol fue 1 - o? 2 mediada.

Parte del desajuste entre CMR glc y CMR O2 puede explicarse por el aumento del lactato
cerebral durante la estimulacin breve ( Sappey-Marinier et al., 1992 ) y por la
liberacin de lactato desde las clulas cerebrales ( Dienel y Cruz, 2016 ). Durante una
activacin cerebral de 6 minutos, las ratas despus de la apertura de su jaula fueron
estimuladas por suaves caricias bilaterales con pequeos pinceles en la cara, bigotes,
cuerpo, patas delanteras, espalda y cola, Madsen et al. (1999)observ una duplicacin
del lactato cerebral, mientras que el glucgeno disminuy, lo que indica que la
glucogenlisis se haba activado. La disminucin inducida por la activacin en OGI
tambin se asocia con la eliminacin del lactato de la regin activada e incluso de las
clulas cerebrales y el cerebro mismo. As, en la va auditiva, la estimulacin unilateral
aumenta CMR glc en bandas tonotpicas en el colculo inferior activado en un 35% -85%
en comparacin con el tejido contralateral, la eliminacin del lactato marcado con 14 C
del colculo inferior aumenta en un 21% y los niveles de colgeno extracelular lactato
dobles ( Cruz et al., 2007 ). Adems, las vas perivasculares que drenan hacia los
ganglios linfticos ( Bradbury y Cserr, 1985)) eliminan grandes cantidades de lactato
del cerebro durante la estimulacin acstica ( Ball et al., 2010 ). La liberacin de lactato
a la sangre tambin se incrementa durante la actividad cerebral. Por lo tanto, el nivel de
lactato arterial aument de 0.5 a casi 2 mM en los experimentos de Madsen et
al. (1999) , y se produce una salida masiva de lactato a la sangre durante la expansin
de la depresin, una situacin asociada con la prdida intensa de K + intracelular y
posterior recaptacin mediada por Na + , K + -ATPasa ( Cruz et al., 1999 ).

Madsen et al. (1999) tambin investigaron el metabolismo 15 minutos despus del final
de la estimulacin y encontraron un aumento en OGI a 7.7. Un enfoque diferente para
investigar los efectos retardados ha sido comparar las alteraciones en la relacin entre
los cambios relativos inducidos por la activacin cerebral en la tasa de CMR O2 con los
inducidos en el flujo sanguneo cerebral (CBF), que fue encontrado por Fox et
al. (1988) para ser alterado en paralelo con CMR glc . Lin et al. (2009) mostraron que el
gran aumento preferencial inicial en el flujo sanguneo y por lo tanto en la gluclisis es
transitorio y casi abolido despus de ~ 20 min (Figura 1) Esto se hizo comparando la
relacin entre el flujo sanguneo cerebral relativo (CBF) y la tasa metablica cerebral
relativa de oxgeno (CMR O2 ) durante la estimulacin visual continua (21 min a 8 Hz)
con resonancia magntica funcional (fMRI) y simultneamente la medicin de la
sangre seales dependientes del nivel de oxigenacin (BOLD), CBF y volumen de
sangre cerebral (CBV). El CMR O2 se determin mediante un modelo de un solo
compartimento (SCM) recin calibrado y un modelo de compartimento mltiple
(MCM), y los resultados acordados entre estos dos modelos y con estudios previos de
topografa de emisin de positrones (PET) de Mintun et al. (2002) . Sin embargo, el
curso temporal de los cambios relativos en CMR O2y el acoplamiento del flujo sanguneo
en la corteza motora humana durante el punteo intenso prolongado de los dedos es algo
diferente ( Vafaee et al., 2012 ).
FIGURA 1
Figura 1 . Cociente de acoplamiento ( n ) entre el aumento del flujo sanguneo cerebral
(CBF) en la corteza visual primaria humana (flujo sanguneo cerebral relativo [CBF]) y
el aumento concomitante en la tasa cerebral de consumo de O 2 (tasa metablica
cerebral relativa de oxgeno [CMR O2 ]) , en diferentes momentos durante la
estimulacin visual intensa prolongada. Tenga en cuenta la disminucin constante ( r =
-0.97) en ncon el tiempo, aunque sigue siendo positivo. Los resultados de la resonancia
magntica (MRI) analizados por un modelo de compartimento nico (SCMnew) y un
modelo de compartimientos mltiples (MCM) se obtuvieron en ocho voluntarios
mediante MRI en el laboratorio de los autores y se analizaron mediante dos
procedimientos diferentes para los clculos. Resultados de topografa de emisin de
positrones (PET) virtualmente idnticos observados por Mintun et al. (2002) tambin
se presentan para comparacin. Modificado de Lin et al. (2009) con permiso.

Durante el intervalo de tiempo en el que la estimulacin visual aument de forma

preferencial CMR glc, se duplic aproximadamente la tasa relativa de CMR O2 ( Lin et al.,
2009 ), lo que indica que el aumento preferencial de CMR glc disminuye, pero no se
suprime, durante la activacin prolongada . Las mediciones de glucosa y lactato
cerebral en la corteza visual tambin han indicado un aumento duradero de
CMR glc ( Prichard et al., 1991 ; Sappey-Marinier y otros, 1992 ; Chen y otros,
1993 ; Frahm et al., 1996 ). .
Procesos fisiolgicos que contribuyen a la disminucin de OGI inducida
por la activacin
Esta parte del artculo explicar por qu la gluclisis per se es ms importante que el
ATP para el flujo del ciclo al intentar identificar los procesos metablicos que
contribuyen a la disminucin de la OGI durante la activacin cerebral breve. Varios de
estos procesos metablicos han sido identificados como discutidos en detalle por Dienel
y Cruz (2016) . Shulman et al. (2001) fueron los primeros en considerar que la
integracin entre la gluclisis y el ciclo glutamato-glutamina podra jugar un papel
importante en la reduccin de OGI. Como se muestra en la Figura 2 , se sabe que
aproximadamente una molcula de glucosa se degrada durante el flujo del ciclo
glutamato-glutamina en todos los niveles de su actividad entre la anestesia profunda y
la actividad de activacin ( Sibson et al., 1998 ;Hertz y Rothman, 2017 ).
FIGURA 2

Figura 2 . Tasa del ciclo de glutamato / glutamina frente a la oxidacin de la

glucosa. La correlacin medida entre la velocidad del ciclo de glutamato / glutamina en
la corteza cerebral de rata y humana frente a la oxidacin de glucosa neuronal se basa
en 12 estudios publicados en roedores (rojo) y nueve en humanos (azul). La relacin es
casi lineal en todo el rango con una pendiente de aproximadamente 1: 1. Modificado
de Hertz y Rothman (2016) con permiso.

En el momento del estudio de Shulman et al. (2001) se crea que el propsito de esta
utilizacin de glucosa era proporcionar energa derivada de glucoltico para la
amidacin de glutamato en astrocitos durante el flujo de ciclo de astrocitos a neuronas
y para su absorcin en astrocitos durante el Flujo de retorno, un concepto basado en
experimentos de cultivo de tejidos por Pellerin y Magistretti (1994) y Pellerin et
al. (1998) . Ahora sabemos que este concepto es incorrecto, ya que la absorcin de
glutamato en los astrocitos es alimentada por la oxidacin misma del glutamato
( McKenna, 2012 , 2013 ; Whitelaw y Robinson, 2013; Jackson et al., 2014 ). Shulman
et al. (2001)la hiptesis de que se debera utilizar glucosa adicional si este lactato se
form a partir de la glucosa a travs del glucgeno, es decir, utilizando la derivacin de
glucgeno, con la liberacin de lactato derivado de glucgeno, causando la cada de la
OGI. Que esto podra ser al menos parcialmente el caso fue sugerido por la disminucin
del contenido de glucgeno encontrado durante la activacin cerebral temprana
por Madsen et al. (1999) . El metabolismo a travs de la derivacin de glucgeno
aumentara la gluclisis porque aunque la degradacin del glucgeno proporciona una
molcula ms de ATP por unidad de glucosa que la glucosa, un requerimiento de dos
ATP por molcula de glucosa incorporada en el glucgeno causa que el flujo de glucosa
a travs del glucgeno proporcione menos ATP que la gluclisis.

Como se mencion anteriormente, el metabolismo del glucgeno es necesario para la

formacin de glutamato a partir de glucosa ( Gibbs et al., 2007 ; Obel et al., 2012 ). Esto
es probablemente para apoyar la sealizacin necesaria para la carboxilacin de
piruvato, que proporciona la molcula "extra" de los constituyentes de TCA utilizados
para la sntesis de glutamato astroctico (Figura 3 ; Hertz y Rothman, 2016 ), cuyos
detalles se describen en la leyenda de la figura. La cantidad de glucgeno desglosado
probablemente sea pequea ( Khowaja et al., 2015)), ya que es poco probable que el
glucgeno en el cerebro de un mamfero adulto sea la fuente de las dos molculas de
piruvato utilizadas para la sntesis de una molcula de glutamato. Sin embargo, la tasa
de glucogenlisis vara con el estmulo y la regin del cerebro y puede ser considerable
( Dienel et al., 2002 ). En consecuencia, el papel de la derivacin de glucgeno para la
disminucin de OGI puede ser menor. Sin embargo, si la glicogenlisis se haba
agregado a la glucosa consumida y se usaba para volver a calcular OGI en los
experimentos de Fox et al. (1988) y Lin et al. (2009) , la relacin glc CMR O2 /
CMR habra cado an ms. Ms recientemente, un clculo de Massucci et al. (2013)ha
indicado que un aumento en el flujo del ciclo glutamato-glutamina se asocia con una
disminucin en OGI. Esto es importante, ya que el flujo del ciclo aumenta en paralelo
con la actividad cerebral ( Sibson et al., 1998 ; Hertz y Rothman, 2016 ) como se
muestra en la Figura 2 . Massucci et al. (2013) tambin encontraron mayores
disminuciones en OGI a mayor CMR glc . Debido a la considerable evidencia encontrada
de una asociacin entre el flujo del ciclo y el OGI, analizaremos a continuacin el
posible efecto de cada proceso en el ciclo glutamato-glutamina sobre: (i) la utilizacin
de glucosa; y (ii) OGI.
FIGURA 3

figura 3. Dibujo esquemtico del metabolismo de la glucosa a travs de piruvato en las

neuronas (izquierda-N) y astrocitos (derecha-A) y del ciclo glutamina-glutamato
(GABA). Una molcula de glucosa se metaboliza mediante gluclisis en el citosol a dos
molculas de piruvato en una ruta compleja y estrictamente regulada, donde un
proceso oxidativo requiere la transferencia de equivalentes reductores a las
mitocondrias mediante la transferencia de malatoaspartato (MAS). Tanto en neuronas
como en astrocitos metabolismo de piruvato a travs de acetil Coenzima A (ac.CoA)
conduce a la formacin de citrato por condensacin con oxaloacetato preexistente
(OAA) en el ciclo del cido tricarboxlico (TCA), un resultado final del ciclo anterior del
ciclo . La oxidacin de citrato en el ciclo de TCA incluye dos descarboxilaciones, lo que
lleva a la produccin de grandes cantidades de energa (ATP) en la cadena de
transporte de electrones y al final del ciclo a la reconstruccin de OAA que permite otro
giro del ciclo. La carboxilacin de piruvato, que es activa en los astrocitos, pero ausente
en las neuronas, crea una nueva molcula de OAA, que despus de la condensacin con
ac.CoA, derivada de una segunda molcula de piruvato, forma una nueva molcula de
citrato. Esto permite la utilizacin de un componente del ciclo de TCA para la
formacin de glutamato y su exportacin a las neuronas en el ciclo glutamato-
glutamina. La formacin de las dos molculas de piruvato requiere el uso de glucosa y
contribuye a la asociacin entre el ciclo glutamato-glutamina que se muestra en la
figura que despus de la condensacin con ac.CoA, derivado de una segunda molcula
de piruvato, forma una nueva molcula de citrato. Esto permite la utilizacin de un
componente del ciclo de TCA para la formacin de glutamato y su exportacin a las
neuronas en el ciclo glutamato-glutamina. La formacin de las dos molculas de
piruvato requiere el uso de glucosa y contribuye a la asociacin entre el ciclo glutamato-
glutamina que se muestra en la figura que despus de la condensacin con ac.CoA,
derivado de una segunda molcula de piruvato, forma una nueva molcula de
citrato. Esto permite la utilizacin de un componente del ciclo de TCA para la
formacin de glutamato y su exportacin a las neuronas en el ciclo glutamato-
glutamina. La formacin de las dos molculas de piruvato requiere el uso de glucosa y
contribuye a la asociacin entre el ciclo glutamato-glutamina que se muestra en la
figura2y a la gluclisis preferencial inducida por activacin. Sin embargo, solo
alrededor del 25% del glutamato / glutamina transportado en el ciclo normalmente se
sintetiza nuevamente, aunque la sntesis puede aumentar durante la estimulacin
intensa. Para la sntesis de glutamato -cetoglutarato (KG), un intermediario del ciclo
de TCA, se forma a partir de citrato a travs de isocitrato, y la descarboxilacin nica
que est involucrada reduce pero no elimina el efecto sobre la gluclisis preferencial,
porque ocurren dos descarboxilaciones en el TCA completo ciclo. KG puede
abandonar el ciclo para formar glutamato (glu), catalizado por aspartato
aminotransferasa. El metabolismo adicional por la enzima citoslica y enzima
especfica de los astrocitos glutamina sintetasa conduce a la formacin de glutamina
(gln). En las neuronas glutamatrgicas, todo el glutamato formado por la desamidacin
de la glutamina, se muestra en rojo,5 . Este requisito puede explicar aproximadamente
la mitad de la asociacin del ciclo con la utilizacin de glucosa y debe ser un
contribuyente principal a la gluclisis preferencial inducida por la activacin. Le sigue
la acumulacin de glutamato en las vesculas, que tambin se muestran en rojo, que en
gran medida utiliza ATP glucolticamente derivado. En las neuronas GABArgicas, la
va a travs de las mitocondrias solo se usa para algunos glutamato, a partir de los
cuales se forma GABA, mientras que el resto entra directamente en el citosol. El
glutamato liberado acta sobre los receptores de glutamato para causar estimulacin
neuronal, acompaada de liberacin de K + y posterior recaptacin inicialmente en
astrocitos y, posteriormente, en neuronas. Al menos, la absorcin astroctica depende
en parte de la energa derivada de glucolticos (vanse las Figuras 4A, B), que puede
contribuir sustancialmente al aumento preferencial inducido por la activacin en la
gluclisis. El glutamato extracelular se vuelve a acumular casi cuantitativamente en
astrocitos, junto con al menos parte del GABA liberado [lnea superior del ciclo
glutamina-glutamato / GABA (ciclo glu-gln)] y se vuelve a acumular en el citosol
astroctico. Aqu, aproximadamente el 75% se convierte en glutamina y vuelve a entrar
en el ciclo glutamina-glutamato / GABA. El ~ 25% restante se degrada de manera
oxidativa a travs de una de las dos vas parcialmente diferentes. En ambos, KG se
reconvierte a malato. En un malato sale al citosol, se descarboxila por enzima mlico
citoslica a piruvato, que se oxida en el ciclo de TCA a travs de ac.CoA. La oxidacin de
glutamato y piruvato derivado de glutamato puede explicar parte del aumento post-
estimulante en el metabolismo oxidativo en relacin con la gluclisis observada
porMadsen et al. (1999) . En el otro malato no sale del ciclo de TCA, pero puede
metabolizarse ms a KG despus de la condensacin con ac.CoA, lo que permite la
resntesis de otra molcula de glutamato a partir de una sola molcula de piruvato. En
cualquier caso, el glutamato degradado debe reemplazarse por una produccin
cuantitativamente similar de glutamato a partir de glucosa, en el primer caso
por sntesis completa de novo a partir de una molcula de glucosa, en el segundo a
partir de la mitad de una molcula de glucosa. Modificado de Hertz y Rothman
(2016)con permiso.

La mera formacin de las molculas de piruvato necesarias para la sntesis de un

"nuevo" constituyente de TCA requiere gliclisis y, por lo tanto, representa parte de la
utilizacin de glucosa asociada con el flujo en el ciclo glutamato-glutamina. Sin
embargo, debido a que solo una cuarta parte del glutamato transportado en el ciclo
glutamato-glutamina se sintetiza nuevamente ( Rothman et al., 2011 ; Hertz y
Rothman, 2016 ), la produccin astroctica de piruvato puede, en condiciones de
reposo, explicar la utilizacin de 0,25 molculas de glucosa para cada vuelta del
ciclo. Este valor puede ser algo mayor durante la actividad intensa que se asocia con un
aumento en el contenido de glutamato en el cerebro ( Gibbs et al., 2007 ; Mangia et al.,
2012).) Dado que una de las dos oxidaciones en el ciclo de TCA (del compuesto 6-
carbono citrato (o ms bien isocitrato, que no se muestra en la Figura 3 ) ocurre antes
de la produccin de -cetoglutarato (KG), el precursor inmediato de glutamato,
glutamato La nica molcula de ATP requerida para la sntesis de glutamina contribuye
poco a la asociacin entre la oxidacin de la glucosa y el ciclo glutamato-glutamina y no
se sabe que muestre ninguna preferencia por la derivacin glicoltica. Sin embargo, la
posible absorcin de NH 4 + liberado neuronalmente por la Na + , K + -
ATPasa astroctica puede requerir cierta energa derivada de glucolticos, ya que
K+ absorcin en astrocitos cultivados por la misma enzima es ms eficiente con la
glucosa como sustrato que con el piruvato como sustrato (Figura 4A), cuando dura
menos tiempo, tal vez porque se necesita glucosa para la formacin continua de
glucgeno. Dado que 2 K + son transportados por cada ATP, la gluclisis asociada con
NH 4 + debe ser mnima. Sin embargo, la gluclisis tambin es esencial para una parte
de la recaptacin de K + del fluido extracelular en el cerebro intacto ( Raffin et al.,
1992 ), como veremos ms adelante.
FIGURA 4
Figura 4 . (A) Requisito metablico para la absorcin de K + en astrocitos
cultivados. El aumento de K + intracelular mediante la adicin de KCl 10 mM, medido
en valores arbitrarios, por fluorescencia de un frmaco sensible a K +, se elimina
mediante la inhibicin del metabolismo de glucosa por 2-desoxiglucosa (2 DG), pero se
restablece mediante la adicin de piruvato. Sin embargo, la captacin finaliza antes
cuando se inhibe el metabolismo de glucosa y se agrega piruvato e incluso despus de la
adicin de piruvato a un medio con glucosa (que puede disminuir la utilizacin de
glucosa), quizs porque la captacin de K + en las clulas requiere glucogenlisis ( Xu et
al. , 2014 ), que depende del metabolismo de la glucosa. (SEGUNDO)Relacin entre la
vida media para la primera (T 1/2 OFF) y la segunda (T 1-1 / 2 OFF) la mitad de la
recaptacin de K + y la gluclisis en cerebro de rata despus de aumentos en
la concentracin de K + extracelular (K+oKo+), creado al variar la intensidad del
estmulo y medido utilizando microelectrodos llenos de lquido de doble can. El
aumento de la vida media para la recaptacin indica una tasa de eliminacin
reducida. Rastros principales: cambios de voltaje del microelectrodo sensible a K + en
respuesta a la estimulacin cortical directa administrada en las lneas verticales en
diferentes grados de aumento de K + durante las condiciones de control y durante la
exposicin a cido yodoactico (IAA) 5 mM, un inhibidor de la gluclisis. Los parntesis
pequeos por encima de las lneas indican un aumento mximo, los parntesis de
tamao medio devuelven la mitad de los valores mximos y los parntesis grandes
vuelven por completo. Grficos de barras: tiempos hasta la eliminacin
de K + expresada como un porcentaje de los tiempos mximos en cada animal ( n = 11;
el efecto de IAA es significativo para T1/2 OFF ( P <0.001) pero no para T 1-1 /
2 OFF). Podra argumentarse que IAA al inhibir la gluclisis tambin previene la
actividad del ciclo de TCA, pero IAA desaceler la eliminacin de K + en animales sin
cambios significativos en los niveles tisulares de ATP, lactato o piruvato ( Raffin et al.,
1992 ). (C) Resultado similar durante la presin de O 2 severamente reducida (35-40
mm Hg; n = 11; el efecto de IAA ahora es significativo para T 1-1 / 2 OFF ( P <0.001) pero
no para T 1/2 OFF ) Ahora se sabe que K +el aclaramiento ocurre inicialmente en los
astrocitos y ms tarde en las neuronas y en que la absorcin astroctica requiere
glucogenlisis (revisada por Hertz y Chen, 2016b ), lo que hace probable que la
absorcin dependiente de la gluclisis ocurra en los astrocitos. Tambin se sugiri que
la parte inicial de la captacin podra ser astroctica en base a los resultados en (B, C) y
se muestra en (D) . Esta cifra es consistente con el conocimiento presente, excepto por
la implicacin indicada del buffer espacial dependiente de Kir.4.1 en lugar del
transporte activo en la absorcin astroctica de K + . (A) Modificado de Hertz et
al. (2015c) con permiso; (B-D) modificado de Rosenthal y Sick (1992) con permiso.

Existe evidencia de que la captacin neuronal de glutamato depende de la gluclisis

( Schousboe et al., 2011 ) pero no se sabe si esto tambin se aplica a la glutamina, e
incluso si la captacin neuronal de glutamina debe ser dependiente de la gluclisis, la
funcin cuantitativa debe ser menor . Por el contrario, la conversin de glutamina en
glutamato desempea un papel muy importante en la utilizacin preferencial de la
gluclisis. Como se indica en la Figura 5 y se describe con ms detalle en su leyenda,
este no es un proceso citoslico simple, pero el glutamato formado dentro de la
membrana mitocondrial (MEM) se libera inicialmente en las mitocondrias
( Palaiologos et al., 1988 , 1989 ; Bak et al. ., 2008) Desde aqu se transfiere al citosol en
un proceso que es idntico al traslador malatoaspartato (MAS) con la nica excepcin
de que la glutamina se libera dentro de la membrana en lugar de formarse a partir de
KG en el citosol. La ventaja de esta va es, probablemente, que el MAS es un proceso
altamente regulado ( Del Arco et al., 2016 ). El MAS se conoce mejor desde el
metabolismo de la glucosa hasta el piruvato, durante el cual hay un proceso oxidativo
en el citosol (conversin de gliceraldehdo-3-fosfato en 1-3-bifosfoglicerato catalizado
por gliceraldehdo fosfato deshidrogenasa) que conduce a la conversin de NAD + a
NADH. Como estas coenzimas no pueden cruzar el MEM, NAD +se vuelve a generar
mediante la reduccin de oxaloacetato (OAA) en el citosol a malato que ingresa a las
mitocondrias en MAS de la misma manera que en la Figura 5 y en un proceso cclico se
reconvierte a OAA. Al igual que el MAS, durante la transferencia de glutamato al citosol
neuronal tambin debe haber una formacin de NADH, normalmente causada por la
gluclisis y seguida por la resntesis de NAD +de NADH con conversin simultnea de
OAA a malato. Este es probablemente el principal contribuyente a la gran disminucin
en OGI durante la parte inicial de la activacin cerebral, y representa la mitad de los
requerimientos de glucosa durante el flujo del ciclo glutamato glutamina. La gluclisis
evocada puede admitir energa que requiere procesos neuronales, como la captacin de
glutamato vesicular. Tambin se ha encontrado que este proceso es impulsado
preferentemente por la gluclisis y la gliceraldehdo fosfato deshidrogenasa as como la
3-fosfoglicerato quinasa, que forma 3-fosfoglicerato a partir de 1-3-bifosfoglicerato y en
el proceso las formas ATP de ADP estn enriquecidas en vesculas sinpticas ( Ikemoto
et al., 2003) El requerimiento de energa para la captacin de glutamato vesicular sera
ideal para suministrar la molcula de NADH necesaria para la conversin de glutamina
a glutamato como se muestra en rojo en la Figura 5 . Estos mecanismos son
consistentes con el hallazgo de Bak et al. (2008) que la formacin de [U- 13 C]
glutamato a partir de [U- 13C] glutamina exgena en las mitocondrias del cerebro se ve
disminuida por la inhibicin de la captacin mitocondrial de glutamina con
histidina. Tambin estn de acuerdo con el requisito de glucosa para la actividad
sinptica en neuronas glutamatrgicas cultivadas ( Bak et al., 2006 ) y con la
atenuacin de potenciales de campo evocados de clulas granulares dentadas a una
concentracin de glucosa baja incluso en presencia de piruvato (Cox y Bachelard,
1982 ). Adems, existe evidencia morfolgica de que muchos terminales presinpticos
carecen de mitocondrias ( Chavan et al., 2015 ). La acumulacin de glutamato en
vesculas sinpticas depende de la actividad de la H + -ATPasa de tipo vacuolar , que
impulsa protones a la luz generando un gradiente electroqumico de protones a travs
de la membrana, que conduce el glutamato a la vescula ( Ikemoto et al., 2003 ; Farsi et
al., 2017 ). Esto tiene la consecuencia prctica de que se necesita un ATP para cada
molcula de glutamato acumulada en vesculas en lugar de los 2 K +tomados y 3
Na + extruidos para cada molcula de ATP utilizada por el Na + , K+ -ATPase. En
consecuencia, la captacin de glutamato vesicular podra contribuir considerablemente
a la asociacin entre CMR glc y el ciclo glutamato-glutamina y
CMR glc preferencial durante la activacin cerebral, ya que regular positivamente la
gluclisis en neuronas y puede generar lactato y contribuir a la cada de OGI,
dependiendo de su vinculacin con el MAS y la oxidacin.
FIGURA 5

Figura 5 . El dibujo esquemtico de las reacciones citoplasmticas y mitocondriales

concluy durante la biosntesis del glutamato transmisor de la glutamina en el ciclo
glutamato-glutamina debido a la inhibicin de la sntesis de glutamato en neuronas
glutamatrgicas cultivadas por el cido aminooxiactico inhibidor de la transaminacin
(AOAA) y por el fenilsuccinato, un inhibidor del portador de cetodicarboxilasa
( Palaiologos et al., 1988 , 1989 ). Sobre la base de consideraciones funcionales, la
glutaminasa activada con fosfato (PAG) se ha localizado en la superficie externa de la
membrana interna mitocondrial como lo sugiere Kvamme (1983). El glutamato
generado (Glu) se transporta a las mitocondrias a travs de la membrana mitocondrial
interna (MEM, la parte del MEM que es impermeable a menos que se utilicen
portadores especficos) por el portador de glutamato de aspartato (1), en aralar cerebral
y transaminado a -ketoglutarato (KG), que se transporta al citosol por el
transportador de cetodicarboxilato (2). Al mismo tiempo, OAA se transamina en la
mitocondria a aspartato que es transportado a travs del MEM interno por el portador
aspartato-glutamato a cambio del glutamato que ingresa a la mitocondria. En el citosol,
KG se vuelve a transaminar a glutamato, con la transaminacin concomitante de
aspartato a OAA. Despus de su liberacin en el citosol, este glutamato se acumula en
vesculas para formar un transmisor de glu
tamato (que se muestra en azul y no forma parte del proceso que forma el glutamato a
partir de la glutamina). OAA se reduce en el citosol a malato (MAL) que se transporta a
travs del MEM por el transportador de cetodicarboxilato a cambio de KG y en las
mitocondrias oxidadas a OAA. Todo este proceso es idntico al MAS, con la excepcin
de que el glutamato en el MAS no se libera en el citosol, sino que es la fuente del
glutamato que en la Figura se genera a partir de la glutamina. El NAD+ y NADH que se
muestran en rojo no participan directamente en la formacin de glutamato, pero la
oxidacin y la reduccin son procesos citoslicos y mitocondriales necesarios para la
formacin del glutamato. Sin ellos, OAA no podra convertirse en malato en el citosol y
malato a OAA en la mitocondria. Es probable que sean el resultado de la gluclisis, que
en muchos casos tambin puede proporcionar la molcula de ATP requerida para la
captacin de glutamato vesicular que se muestra en azul. El requisito para la gluclisis
concomitante cuando la glutamina se convierte en neuronas al glutamato es una razn
importante para la asociacin del ciclo glutamato-glutamina con la utilizacin de
glucosa y, por lo tanto, probablemente tambin para la gluclisis preferencial durante
la activacin cerebral intensa. El proceso fue mostrado en neuronas cultivadas
por Palaiologos et al. (1988, 1989) , y la evidencia de apoyo fue obtenida por Bak et
al. (2008) en mitocondrias cerebrales aisladas. Modificado de Palaiologos et
al. (1988)con permiso.

Tambin es probable que el glutamato liberado contribuya al uso preferencial de la

energa derivada de gliclisis ya que su estimulacin de los receptores de glutamato
conduce a la estimulacin neuronal postsinptica y la liberacin de grandes cantidades
de K + , tanto en respuesta a la estimulacin del receptor como durante la propagacin
del potencial de accin. La posterior recada de K + ocurre inicialmente en astrocitos y
posteriormente en neuronas ( Hertz y Chen, 2016b ) despus de la salida del
K + acumulado astrocticamente a travs de los canales Kir4.1 ( Bay y Butt,
2012 ). Como se muestra en la Figura 4Ala absorcin astroctica se mantiene mejor
cuando la energa derivada de glucoltico est disponible que cuando el piruvato es el
sustrato. Esto es probablemente debido a la necesidad de glucogenlisis para
la absorcin de K + en los astrocitos ( DiNuzzo et al., 2012 , 2017 ; Xu et al., 2014 ) y la
posible deplecin de glucgeno en ausencia de glucosa. La importancia cuantitativa de
la gluclisis para la captacin de K + en el cerebro es imposible de calcular porque la
absorcin de glutamato en los astrocitos puede eliminar la necesidad de glucogenlisis
para la absorcin de K + astroctica ( Hertz et al., 2015b ; Larsen et al., 2016).), y se
acumulan grandes cantidades de glutamato en los astrocitos durante la activacin
cerebral. Sin embargo, parece haber tambin un requisito para la glucogenlisis ( Hertz
y Chen, 2016b ). Adems, Rosenthal y Sick (1992) han demostrado que la mitad inicial
de K + re-acumulacin despus de la excitacin neuronal se retrasa mucho con el
yodoacetato, un inhibidor de la gluclisis, pero casi inafectado por la hipoxia severa
(Figuras 4B, C ), mientras que lo contrario es cierto para la segunda mitad de la
aceptacin. Con base en estos resultados, los autores sugirieron ya en este momento
temprano que la absorcin de K + dependiente de la gluclisis ocurri en los astrocitos
(Figura 4D ), una sugerencia en completo acuerdo con la Figura 4D .4A y con el
conocimiento actual ( Hertz y Chen, 2016a ).

La re-acumulacin de glutamato ocurre casi exclusivamente en astrocitos ( Danbolt et

al., 2016 ). Su metabolismo oxidativo a travs de KG da lugar a la segunda oxidacin
en el ciclo de TCA (Figura 3 ) donde KG se descarboxila a compuestos de 4 carbonos,
incluyendo malato, que puede abandonar el ciclo de TCA y convertirse por enzima
mlica en piruvato, que se metaboliza an ms ( Hertz y Rothman, 2016 , 2017 ). Este
proceso proporciona una cantidad sustancial de energa ( Hertz et al., 2007 ) sin
ninguna utilizacin de glucosa. El metabolismo del glutamato puede contribuir as al
aumento de OGI encontrado por Madsen et al. (1999)despus de la estimulacin y
probablemente tambin del aumento reducido de OGI encontrado por varios autores
durante la estimulacin de larga duracin. Al mismo tiempo se reduce el contenido de
aspartato ( Mangia et al., 2007 , 2012 ), lo que refleja que la oxidacin del glutamato a
travs de la aspartato aminotransferasa produce aspartato ( Hertz y Rothman,
2017 ). El aumento en el contenido de glutamato sugiere que la produccin de
glutamato astroctico de novo aumenta y por lo tanto contribuye ms a la gluclisis que
en condiciones de reposo cuando la sntesis de novo y la degradacin del glutamato son
similares. Incrementado de novola sntesis de glutamato en astrocitos tambin est
indicada por una mayor tasa de utilizacin de glucosa pero no de formacin de lactato
en astrocitos cultivados a una concentracin de glucosa alta ( Schousboe et al.,
1997 ). No se ha informado sobre un fenmeno similar en el tejido cerebral intacto,
pero el metabolismo astroctico es menor que el metabolismo neuronal y la
concentracin de glucosa extracelular se altera mucho ms fcilmente en clulas
cultivadas que en vivo . Por otro lado, el restablecimiento de un contenido reducido de
glucgeno aumentar CMR glc, pero se produce ms lentamente que la oxidacin de
glutamato ( Madsen et al., 1999 ).

Una posibilidad alternativa es que malato no sale del ciclo TCA pero se metaboliza a
KG despus de la condensacin con acetil coenzima A (ac.CoA), lo que permite volver
a la sntesis de otra molcula de glutamato a partir de slo una piruvato molcula. Esto
reducira pero no eliminara la estimulacin relativa de CMR O2 .

Posible relacin con la enfermedad neurodegenerativa

En consonancia con el metabolismo reducido de la glucosa durante la epileptognesis
inducida por litio-pilocarpina ( Lee et al., 2012 ), un estudio reciente del grupo Zilberter
mostr que incluso una pequea inhibicin crnica de la gluclisis cerebral inicia
ataques epilpticos ( Samokhina et al., 2017 ). Adems, el metabolismo reducido de la
glucosa en la enfermedad de Alzheimer prodrmica y temprana ( Mosconi et al.,
2010 ; Hertz et al., 2015a ) es probable que cause deterioro de la memoria a travs de
los mecanismos descritos en este artculo y por Hertz y Chen (2017)mucho antes de que
ocurra cualquier muerte celular. Finalmente, la enfermedad de Parkinson idioptica y
el parkinsonismo atpico (atrofia multisistmica y parlisis supranuclear progresiva) se
asocian con una disminucin del metabolismo de la glucosa con una distribucin
regional que vara entre las tres enfermedades. Estas observaciones llevaron a Zilberter
y Zilberter (2017) a concluir que corregir esta deficiencia metablica sera un
tratamiento eficiente de las enfermedades neurodegenerativas, una propuesta que
podra conducir a un progreso importante en el tratamiento de estas enfermedades
devastadoras.

Actualmente no se sabe que ninguna intervencin teraputica sea capaz de corregir el

metabolismo deficiente de la glucosa en la enfermedad neurodegenerativa. Tampoco se
ha establecido si una de las principales razones del efecto devastador de estas
enfermedades es la incapacidad del cerebro para regular positivamente la gluclisis
durante su activacin. Sin embargo, pueden representar una cruel demostracin por
parte de la naturaleza de la importancia del aumento de la gluclisis. Dado que los
cuerpos cetnicos pueden sustituir a la glucosa en algunos pero lejos de todos sus roles
en el ciclo glutamato-glutamina ( Hertz y Rothman, 2016 ) tambin puede explicar por
qu la dieta suplementada con compuestos cetognicos ( Reger et al.,
2004 ; Henderson, 2008 ; Hertz et al., 2015a ; Cunnane et al., 2016) tiene un efecto
teraputico limitado en pacientes con Alzheimer, que podra aumentar con el
tratamiento temprano. Esto tambin se aplica a la enfermedad de Parkinson ( Veech et
al., 2001 ; Vanitallie et al., 2005 ; Hashim y VanItallie, 2014 ). La cantidad de cuerpos
cetnicos utilizados es relativamente pequea, lo que es consistente con el hecho de que
los cuerpos cetnicos solo en un grado menor pueden reemplazar a la glucosa en el
ciclo glutamato-glutamina ( Hertz y Rothman, 2016) Esto contrasta las grandes
cantidades de cuerpos cetnicos en la dieta cetognica que pueden tener un efecto
teraputico en la epilepsia. Esta aparente paradoja puede interpretarse como un efecto
inhibitorio sobre el ciclo glutamato-glutamina durante las condiciones de hipoglucemia
en pacientes con dieta cetognica que impide la capacidad del cerebro para
convulsionar ( Hertz et al., 2015a ) sin afectar el trastorno metablico que inicialmente
caus la epilepsia

Observaciones finales
El propsito del presente artculo ha sido proporcionar informacin sobre los procesos
que se producen durante el flujo del ciclo glutamato-glutamina que requieren
glucogenlisis sin tratar de revisar este ciclo o la disminucin de OGI durante la
activacin cerebral en detalle. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que
CMR glcaumenta en ambas neuronas y astrocitos. Parece razonable que el ciclo
glutamato-glutamina sin el cual la actividad glutamatrgica sea imposible, pueda jugar
un papel importante durante la activacin cerebral. La aparente interaccin metablica
entre la formacin de glutamato neuronal a partir de la glutamina y la captacin de
glutamato vesicular es especialmente intrigante y podra, por s misma, representar la
mitad de la utilizacin de glucosa durante el flujo de glutamato. Durante el flujo de
ciclo, la gluclisis como tal es obviamente ms importante que la produccin de
energa, como lo demuestra la acumulacin y liberacin de lactato. Esto hace que
factores como la acumulacin de ADP que regulan la gluclisis y el metabolismo
oxidativo sean irrelevantes para el control de los aumentos en el flujo sanguneo y
CMR glc. La falla en la capacidad para aumentar la gluclisis puede ser un factor
importante en enfermedades neurodegenerativas como la enfermedad de Alzheimer y
la enfermedad de Parkinson, una posibilidad que debe ser investigada urgentemente.