ESPECTROFOTOMETRIA

Ana Paula Dias Cano

Daniel Okita
Fabiana Costa
Mariana Brando
Roger Barbosa
 SUMRIO
Definies: Espectrometria e Espectrofotometria
Princpio da Espectrofotometria
Lei de Beer
Espectrofotmetro e Componentes
Aplicaes
Inovaes
 OBJETIVO

Entender os conceitos e definies envolvidas na espectrofotometria e o

funcionamento dos principais componentes de um espectrofotmetro,
correlacionar sua importncia e suas possveis aplicaes no mbito da
Engenharia Biomdica e conhecer as inovaes recentes na rea.
 ESPECTROSCOPIA
Espectro: luz de uma fonte decomposta em comprimentos de onda.

Espectroscopia: tcnica de aferimento de dados fsico-qumicos atravs da

transmisso, absoro ou reflexo da energia radiante incidente em uma amostra.

Espectrofotometria: tipo de espectrometria que mede as intensidades das

radiaes emitidas ou absorvidas pelos sistemas em anlise.
Identificar e quantificar substncias qumicas a partir de medidas da
absoro e transmisso de luz que passa atravs da amostra.
 PRINCPIO DA
ESPECTROFOTOMETRIA

Duas solues com intensidades de cores diferentes

Analogia com o princpio da espectrofotometria: a intensidade da cor
a medida da quantidade de um material em soluo

Quando um feixe de luz monocromtica atravessa uma soluo com

molculas absorventes, parte da luz absorvida pela soluo e o restante
transmitido. com o princpio da espectrofotometria: a intensidade da cor
da quantidade de um material em soluo
 PRINCPIO DA
ESPECTROFOTOMETRIA

O procedimento para escolha do melhor comprimento de onda simples e

consiste em submeter uma soluo a feixes de luzes monocromticas de
diferentes comprimentos de onda e verificar qual deles mais absorvido
pela soluo.

Figura 1: Espectro eletromagntico de luz visvel[1].

 PRINCPIO DA
ESPECTROFOTOMETRIA
O equipamento mede e compara a quantidade de luz que uma substncia
absorve.

Dessa forma possvel realizar uma anlise quantitativa e qualitativa,

identificando e determinando a concentrao das substncias conforme a
interao com a luz.
A representao grfica dos valores de comprimento de onda
() versus absorbncia denominada Espectro de Absoro
 A LEI DE BEER
Absorbncia = . .
a a constante, b o comprimento do caminho da amostra e c a
concentrao do elemento que absorve.
Condies de validade da Lei de Beer:
- A luz utilizada , aproximadamente, monocromtica.
- As solues a serem analisadas esto diludas (baixas concentraes).
- No deve estar presente na mesma soluo mais de uma substncia
absorvente de luz.
 DESVIOS DA LEI DE BEER
A principal causa de desvios da lei a utilizao de
solues concentradas. O aumento na concentrao
acompanhado pelo aumento crescente e proporcional
de A, at um ponto limite.

Para concentraes superiores ao limite de linearidade

observado no desvio da lei de Beer, deixa de existir a
proporcionalidade linear entre concentrao e
absorbncia.

Outras causas de desvio: luz dispersa e largura da banda Figura 2: Absorbncia x Concentrao[2].
espectral excessiva.
 ESPECTROFOTMETRO

a) Fonte de luz
b) Colimador
c) Monocromador
d) Fenda seletora
e) Cubeta
(compartimento da
amostra)
f) Clula fotoeltrica
g) Amplificador
Figura 3: Representao geral de um espectrofotmetro [2].
 COMPONENTES DO
ESPECTROFOTMETRO
Fonte de Luz:
- Lmpadas deutrio (UV)
tungstnio (luz visvel)

Monocromador:
- Diviso da luz incidida dispersa em diversos comprimentos de onda em
feixes monocromticos
 COMPONENTES DO
ESPECTROFOTMETRO
Amostra:
- Composto que absorve luz Possveis diluies.

Cubeta:
- Recipiente que contm a amostra a ser analisada.
- Cuidado no manuseio.
- Material: vidro (luz visvel), quartzo (UV) ou descartvel.
 COMPONENTES DO
ESPECTROFOTMETRO
Clula fotoeltrica: Fotomultiplicadores:
- Converso da luz em corrente eltrica
mensurvel.
- Fotoctodo dinodos nodo.

Figura 5: Representao do fotomultiplicador [4].

Figura 4: Representao do fototubo [3].
 APLICAES
A espectrofotometria muito utilizada em anlises de diversas reas, como
qumica, fsica, biologia, bioqumica, materiais, engenharia qumica e
aplicaes clnicas e industriais. Dentre as aplicaes esto:
- Medio de determinados ingredientes em uma droga.

- Medio do crescimento bacteriano.

- Determinao de reaes catalisadas por enzimas.

 APLICAES
- Quantificao do DNA e determinao de sua pureza depois de extrado.

- Exame do sangue ou tecidos para diagnstico clnico.

- Diagnstico de um paciente com base na quantidade de cido rico

presente em sua urina. As anlises podem ser quantitativas (identificao
da concentrao da substncia) ou qualitativas (identificao de uma
substncia desconhecida), j que cada substncia ir refletir e absorver a
luz de forma diferente.
 INOVAES
Evoluo dos espectrofotmetros no Brasil:
- Empresa FEMTO 800xi
Cirrus
Stratus

Figura 6: Espectrofotmetros da FEMTO [5].

 INOVAES

Empresa Cap-Lab:
- Foodlab
- Minifoodlab
- Identificao de diversos
compostos em alimentos.
Figura 7: Aparelhos da Cap-Lab [6].
 INOVAES

Empresa PASCO:
- Voltado para o ensino de estudantes
acerca dos princpios relacionados
espectrofotometria.

Figura 8: Espectrofotmetro da PASCO [7].

OBRIGADO!
 REFERNCIAS
[1] Espectro eletromagntico dos elementos qumicos. Disponvel em:
<https://goo.gl/Xe2brv>. Acesso em 24 jun. 2017.
[2] Espectrofotometria. Disponvel em: <https://goo.gl/6JwMTY>. Acesso em 24 jun. 2017.
[3] Opiniones de fototubo. Disponvel em: <https://goo.gl/ySNLn9>. Acesso em
24 jun. 2017.
[4] Nuclear medicine: gamma camera. Disponvel em: <https://goo.gl/pYa6eW>.
Acesso em 24 jun. 2017.
[5] FEMTO Espectrofotmetros. Disponvel em: <https://goo.gl/nzXLY7>. Acesso em: 24
jun. 2017.
[6] Cap-Lab. Disponvel em: <https://goo.gl/p1UdkG>. Acesso em: 24 jun. 2017.
[7] PASCO Educational Spectrophotometer. Disponvel em: <https://goo.gl/MPkRZS>.
Acesso em: 24 jun.2017.