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MXICO
FACULTAD DE QUMICA
INTEGRANTES:
- ALEJANDRA SNCHEZ PIA
- JANETTE MARIE ARIZMENDI BECERRA
- ADRIANA PLATA BECERRIL
- YARITZA GONZALEZ CEDILLO
GRUPO: 42
LICENCIATURA: QUIMICO FARMACUTICO BILOGO
FECHA: 20/MARZO/2016
OBJETIVO
Cuant if icar la prot ena obtenida en la pr ctica nmero 6 (la fraccin gama -
globulina obt enida del suero sanguneo) por el mtodo de Lowr y.
MARCO TEORICO
Mtodo de Lowry
Gamma globulina.
REACTIVO A REACTIVO B
es una mezcla de Carbonato de es el reactivo de Folin-
Sodio al 2% en NaOH 0.1N con Cicalteau con agua en
el Sulfato de Cobre y el Tartrato una relacin de1:1.
de Sodio y Potasio en una
relacin de 10:0.1:0.1
OBSERVACIONES
Al agregarle a los tubos (con 0.2 mL. de solucin de ACB) el reactivo A, se observ un color
lila, que se fue diluyendo desde el tubo 1 al tubo 6, el tubo 7 fue lila intenso.
- CONCENTRACIONES TUBO 4
TUBO 1 0.0055g 1mL
22g 100mL Xg 0.5mL
Xg 0.1mL X= 0.00275g
X= 0.022g
TUBO 5
TUBO 2 0.00275g 1mL
0.022g 1mL Xg 0.5mL
Xg 0.5mL X= 0.001375g
X= 0.011g
TUBO 6
TUBO 3 0.001375g 1mL
0.011g 1mL Xg 0.5mL
Xg 0.5mL X= 0.0006875g
X= 0.0055g
- CURVA PATRN
Concentracin Absorbancia
0.022 0.77
0.011 0.425
0.0055 0.316
0.00275 0.254
0.001375 0.221
0.0006875 0.133
Absorvancia
0.9
0.8
ABSORVANCIA 0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025
CONCENTRACIN
CONCLUSIONES
Una desventaja que presenta es que la intensidad del color vara con las diferentes
protenas. En este sentido es menos constante que la reaccin de Biuret pero ms que la
absorcin a 280nm.
CUESTIONARIO
1. Qu otros mtodos existen para cuantif icar protenas sricas?
- Mtodos de absorcin
- Mtodos Derivados color imtricos
Biur et
Lowr y
Bradf ord
BCA
- Mtodos der ivados Fluor imtricos
O-f talaldehido
2. Cules son las vent ajas y las desventajas de usar el mtodo de Lowr y?
- Ventajas: Tiene bastante sensibilidad.
- Desventajas: No todas las protenas reaccionan igual muestra muchas interferencias
como detergentes no inicos, sulfato amnico etc.
3. Por qu se deben realizar las lecturas en el espectrof otmetro a 520
nm?
- Porque la absorcin se mide en 500 y 520nm y es visible par a el ojo
humano.
Ejercicios de integracin
O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr y R.J. Randall. J. Biol. Chem. (1951)
Stoscheck CM. Quantitation of Protein. 1990. Methods in Enzymology.
Peterson GL. 1977. A simplification of the protein assay method of Lowry et al. which
is more generally applicable. Analytical Biochemistry.