Anlisis de la Respuesta Inmunitaria

a las vacunas

Jos Ignacio Santos

Profesor de Medicina Experimental
Jefe de la Subdivisin de Investigacin Clnica
Facultad de Medicina
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Lunes 26 de Noviembre, 2012
Conflicto de Inters

En lo referente a esta presentacin, no tengo

conflictos de inters que declarar.
La primera descripcin del estado de resistencia a la
infeccin (Estado inmune), se debe a Tucidides que en
la Historia de la guerra del Peloponeso, relata como
durante la epidemia de peste, el cuidado de los
enfermos se encomend a ciudadanos que se haban
recuperado de la enfermedad ya que no volvan a
padecerla.
BASES INMUNOLOGICAS DE LAS VACUNAS
Los principales mecanismos efectores del sistema inmunitario son tres:
produccin de anticuerpos, inflamacin y citotoxicidad.
El antgeno pasa al interior de una clula presentadora de antgenos; sta expone,
en su superficie, fragmentos del mismo asociados con el complejo principal de
Histocompatibilidad (MHC) de clase II. Entonces, clulas T inactivas reconocen el
complejo constituido por antgeno y MHC y se multiplican en consecuencia.
Las clulas T activadas median los tres mecanismos efectores a travs de la
produccin de citocinas especficas (anticuerpos, inflamacin y citotoxicidad).
Las clulas T ayudan a las clulas B a producir anticuerpos. La unin del antgeno
a inmunoglobulinas de superficie sirve de seal de las clulas B al mismo tiempo,
el antgeno pasa al interior de las clulas presentadoras de antgeno, que lo
degradan en pptidos y estos se asocian con las molculas del complejo principal
de histocompatibilidad de clase II y activan a las clulas T coadyuvantes inactivas.
El antgeno ligado y las seales de las clulas B comiencen a multiplicarse y a
diferenciarse en clulas plasmticas secretoras de anticuerpos
 Respuesta inmune ideal a una vacuna
Receptor de Ag Antgenos La vacuna es procesada por
clulas presentadoras de
antgeno
Variedad de clulas B

Proliferacin activando clulas T y B para

celular formar clulas de memoria

genera clulas Th y Tc a
varios eptopes

antgeno persiste y contnua

Clona de clulas Clona de clulas de el reclutamiento de clulas B
plasmticas memoria
de memoria produciendo
Secrecin de Acs
a la circulacin aanticuerpos de alta afinidad
Analisis de la respuesta inmunitaria de las vacunas
La inmunidad generada por las vacunas, es similar a
la originada por las enfermedades: la vacunacin
desencadena una respuesta humoral y celular del
organismo, mediante la formacin de anticuerpos
que van actuar neutralizando o facilitando la
fagocitosis de los agentes infecciosos especficos.

Podemos evaluar la respuesta humoral en forma

cuantitativa mediante estudios serolgicos antes y
despus de su aplicacin.
 Como medimos la proteccin?

La respuesta del organismo a una vacunacin o

exposicin de campo con el agente se puede realizar
mediante pruebas serolgicas de laboratorio utilizando
suero del paciente
La respuesta inmune primaria y secundaria o , pueden
evaluar en el laboratorio mediante la deteccin de
anticuerpos especficos en el suero, utilizando
antgenos conocidos antes y semanas despus de la
aplicacin de la vacuna.
 Como medimos la proteccin?
La respuesta inmunolgica contra la mayora de las
vacunas induce la produccin especifica de anticuerpos
y linfocitos T efectores.
Este reconocimiento entre el antgeno anticuerpo o
linfocito sienta las bases del diagnostico inmunolgico.
El anlisis cualitativo y cuantitativo se realiza mediante
el empleo de tcnicas inmunolgicas basadas en la
deteccin de y evaluacin de la respuesta humoral
(anticuerpos y complemento) o celular (linfocitos T y
fagocitos).
 Cmo interpretamos la respuesta?

Seroconversin: Aumento del ttulo de

anticuerpos x 4 o paso de negativo a positivo
Ttulo: Mxima dilucin a la cual un suero
contina siendo positivo en una prueba
serolgica determinada
 Como medimos la proteccin?

La medicin de las interacciones antgeno- anticuerpo

con fines diagnsticos.
Se realizan en 2 vas:
Utilizacin de anticuerpos especficos para detectar el
antgeno(diagnostico directo)
Utilizacin de antgenos especficos para detectar
anticuerpos (diagnostico indirecto)
 Evaluacin de la respuesta humoral
Deteccin serolgica de la titulacin de anticuerpos pre y post
vacunacin, o mediante la deteccin de anticuerpos IgM .
Otras tcnicas diagnsticas:
Fijacin de complemento (CFT); Radioinmunoensayo (RIA); ELISA;
Pruebas de inmunoflourescencia (EIA); Aglutinacin de partculas de
ltex; Pruebas de neutralizacin; Western Blot; Hemolisis radial ;
Inmunoblot recombinate (RIBA) etc.
El anlisis de la especificidad permite evaluar la capacidad de los
anticuerpos de distinguir y reaccionar con una estructura qumica
entre muchas.
Tambin se puede analizar la reactividad cruzada: es decir el
anticuerpo reacciona con otro antgeno, cuando este y el antgeno
que estimulo la produccin del anticuerpo especifico comparten un
eptope idntico o muy similar.
 Pruebas de Laboratorio
Inmunofluorescencia.
Radioinmunoanalisis.
Pruebas inmunoenzimaticas. ELISA.
Aglutinacin.
Precipitacin,
Inmunodifusion
Inmunoelectroforesis
Hemoaglutinacion-Inhibicion de hemoaglutinacion.
 Respuesta Inmune humoral
La respuesta inmune primaria se
desarrolla entre una y dos
Log nivel de Acs

semanas despues de la exposicin

al antgeno e inicia con
anticuerpos IgM seguida por
anticuerpos IgG.

semanas

La memoria especfica caracteriza

a la inmunidad adaptativa

Nuevo desafo
Respuesta de Acs

La respuesta inmune secundaria es

With kind permission from Nick Holmes

1er Respuesta a
desafo otro antgeno mas robusta con predominio de
Acs IgG.
Tiempo en das
Nick Holmes
Cual es la utilidad de ensayos serolgicos ?
Inmunogenicidad clnica y Efectividad (eficacia inferencial)
Ej.- Demostracin de la no inferioridad de una respuesta inmune
relevante
Comparacin con los estandares atencin
Comparacin con sueros de estudios de eficacia con correlacin clnica
comprobada.
La no interferencia con otras vacunas aplicadas
Determinar si la correlacin de proteccin es aceptable
CMC Inmunogenicidad
Evaluar cambios en procedimientos de manufacturaa
Nuevas instalaciones de manufactura
Consistencia de lotes

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Anlisis de la calidad de respuesta humoral

Con la finalidad de analizar la calidad de la respuesta

humoral de una vacuna, se puede evaluar la afinidad y
la avidez de los anticuerpos.
Afinidad de un anticuerpo es la fuerza o intensidad
de la unin, entre un sitio de unin del anticuerpo
y el determinante antignico de la vacuna.
Avidez es la fuerza con la que el anticuerpo se une
al antgeno.
 Anlisis de la respuesta inmune celular
Aunque no es rutinario, para fines de evaluar una vacuna en fase uno
se cuenta con varias pruebas clnicas y de laboratorio.
La intradermorreaccin (prueba cutnea de sensibilidad tarda)
permite evaluar la memoria celular al antgeno y por ende a la vacuna.
Nuevos mtodos de Inmunologa Celular
La cuantificacin de clulas B (productoras de Acs especficos) y
subpoblaciones de linfocito T se pueden realizar mediante citometra
de flujo.
Para la localizacin y enumeracin de clulas formadoras de
anticuerpo se utiliza marcaje inmuno-fluorescente y placa hemoltica
El cultivo celular permite el anlisis de interacciones entre las clulas
inmunes.
Respuesta linfoproliferativa

Consiste en cultivar linfocitos del paciente con el

antgeno (vacuna) que se quiere evaluar o estudiar y
con varios mitgenos que se utilizan como control de
la inmunoproliferacin (estimulacin no especfica).

La transformacin blstica especfica se mide por la

capacidad que tiene la vacuna de inducir la
proliferacin linfocitaria.
Caracteristicas deseables en las pruebas de
anlisis inmunodiagnostico

Utilizar pequeas cantidades de sangre y de reactivos

Sensibles y especificas.
Estandarizada y validada.
Reproducible.(nter laboratorios)
Antgenos inactivados.
Sencilla.
Equipo y reactivos accesibles, econmicos.
Evaluacin clnica de una vacuna : Eficacia
Se conoce como eficacia de una vacuna a los
resultados o beneficios de salud proporcionados a los
individuos cuando esa vacuna es aplicada en
condiciones ideales. La evaluacin de la eficacia
protectora deben realizarse mediante ensayos clnicos
aleatorizados.
La eficacia de una vacuna est en funcin de su
inmunogenicidad: capacidad de generar el tipo
apropiado de respuesta inmunitaria (humoral, celular
o ambas), del perodo de duracin de la proteccin
conferida, en el lugar adecuado (torrente sanguneo,
mucosas) y frente al antgeno adecuado (antgenos
inmunizantes).
Evaluacin clnica de una vacuna : Efectividad

Se considera efectividad de una vacuna a los

resultados o beneficios de salud proporcionados
por un programa de vacunaciones en la poblacin
objeto, cuando las vacunas son administradas en
las condiciones reales o habituales de la prctica
diaria asistencial o de desarrollo de los programas
Una buena eficacia no siempre implica una buena
efectividad.
La efectividad depende de factores como la
aceptacin y accesibilidad de la poblacin a la
vacuna, la pauta correcta de administracin (dosis,
va, lugar, tcnica), la conservacin y manipulacin
adecuadas, etc.
 Anlisis costo - beneficio
Los costos (del programa de vacunacin: costo de la
vacunacin + costo de los efectos secundarios de la
vacunacin) y los beneficios(costos directos e
indirectos de la enfermedad ) sin el programa de
vacunacin.
Los costos directos e indirectos de la enfermedad con
el programa de vacunacin se valoran en trminos
monetarios.
 Anlisis costo - beneficio
Este tipo de anlisis permite la evaluacin econmica
intrnseca del programa al comparar los beneficios
econmicos del programa con los costos, as como la
comparacin entre programas alternativos con objetivos
similares.
Tambin permite plantear si existe otros programas que
puedan proporcionar a la comunidad mayores beneficios e
de vacunacin o introduccin de un nuevo biolgico.
 Evaluacin clnica de una vacuna

Solamente cuando se ha demostrado la eficacia, tiene sentido la

evaluacin de la efectividad de una vacuna mediante un ensayo
comunitario aleatorizado (o no aleatorizado, como alternativa).

La realidad es que por motivos ticos y prcticos, la evaluacin

experimental de la efectividad de la vacunacin en la poblacin rara vez
se realiza. Una vez registrada, autorizada y comercializada, se evala la
efectividad de la vacuna mediante estudios observacionales
(cohortes, casos-controles), estudio de las tasas de ataque en brotes
Epidmicos y comparaciones de tasas de ataque secundario al mbito
familiar.