CENTRO UNIVERSITRIO LUSADA

Estgio Supervisionado Curso de Biomedicina

Laboratrio de Anlises Clnicas
Relatrio de Atividades Microbiologia e Micologia

NOME: Murillo da Silva Santos N ALUNO: 401103115

1. NOME DO TESTE/ EQUIPAMENTO

Identificao de Haemophilus spp.

2. OBJETIVO:
Identificar a presena de diferentes espcies de Haemophilus spp.

3. APLICAO CLNICA
Descartar ou identificar infeces que podem ser causadas por diferentes espcies de
Haemophilus spp.

4. PRINCPIO
Diferentes espcies pertencentes ao gnero Haemophilus podem ser encontradas como flora
normal da nasofaringe e orofaringe, geralmente cepas no capsuladas. Para considerar o
isolamento de Haemophilus fundamental associar o papel patognico ao da clnica. Vrias
so as infeces causadas por H. influenzae, como Meningite, Epiglotite, Pericardite,
Pneumonia, Artrite sptica, Osteomielite, Celulite facial. Assim, torna-se importante sua
identificao, bem como de outras espcies, principalmente atravs da cultura em gar
chocolate, que amplamente utilizado para o cultivo de microrganismos exigentes.

5. METODOLOGIA
Semeadura em meio de cultura.

6. AMOSTRA
A. Preparo do paciente
No aplicvel.
B. Tipos de amostra
Colnias isoladas ou inoculadas em meio de cultura a partir de amostras biolgicas como
sangue, secrees do trato respiratrio, de leses genitais, LCR, etc.
C. Armazenamento e estabilidade da amostra
Manter a amostra selada refrigerada de 2C a 8C.
D. Volume mnimo
No aplicvel.
E. Volume ideal
No aplicvel.
F. Critrios para rejeio da amostra
Devero ser rejeitadas amostras contaminadas, com bactrias no isoladas.

7. PADRES, CONTROLE, REAGENTES E INSUMOS.

- Meio gar Chocolate.

8. EQUIPAMENTOS E MATERIAIS NECESSRIOS

- Capela de fluxo laminar
- Ala bacteriolgica
- Estufa.

9. PROCEDIMENTO TCNICO
- Com a ala bacteriolgica, pegar uma colnia isolada da bactria;
- Semear no meio gar Chocolate.
- Colocar na estufa entre 24 e 48h a 36C.

10. CLCULOS
No aplicvel.

11. RESULTADO
Colnias pequenas e delicadas.

12. CONTROLE DA QUALIDADE

No aplicvel.

13. VALORES DE REFERNCIA

No aplicvel.

14. INTERPRETAO (SIGNIFICADO CLNICO)

Aps incubao, examinam-se as placas para detectar a presena de colnias de
Haemophilus spp. Para a identificao da espcie, existem alguns testes, como: dependncia
dos fatores X e V, hemlise, fermentao da glicose, sacarose, lactose, xilose e manose,
presena de catalase e B-galactosidase.
1. Dependncia dos fatores X e V
Consiste na adio de discos comerciais impregnados com os fatores X (hemina/hematina) e
V (NAD/coenzima I). A semeadura da bactria feita com a mesma metodologia do
antibiograma, seguida da adio dos discos com uma pina a uma distncia de 1,5 cm um do
outro. Flambar a pina antes e aps a retirada de cada disco. Aps 24 horas de incubao
em jarra com vela e umidade a 35C, verificar o crescimento prximo aos discos:

Figura 1: Identificao de espcies de Haemophilus

Referncia: ANVISA (2004)

1.1. Satelitismo

Semear com swab uma suspenso de Haemophilus spp em salina, cerca de 1 a 2 da escala
Mac Farland, no centro de uma placa de gar sangue. Em seguida, semear em uma nica
estria um repique de S. aureus hemoltico e incubar 18-24h em jarra com vela e umidade ou
CO2.Verificar o crescimento de colnias pequenas prximas a zona de hemlise do
estafilococo e confirmar com sorotipagem.

2. Principais provas de diferenciao de algumas espcies de Haemophilus.

Referncia: ANVISA (2004)

3. VALORES CRTICOS
No aplicvel.

4. LINEARIDADE E LIMITE DE DETECO

No aplicvel.

5. LIMITES DO MTODO
No aplicvel.

6. REFERNCIA BIBLIOGRFICA
ANVISA. Deteco e Identificao de Bactrias de Importncia Mdica. 2004. Disponvel
em: <http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/microbiologia/mod_5_2004.pdf>. Acesso em:
20 ago. 2017.

NEVES, Felipe Piedade G. Haemophilus, Bordetella e Pseudomonas. Universidade

Federal Fluminense. Disponvel em:
<http://www.uff.br/labac/Haemophilus_Bordetella_Pseudomonas_FARM_ODO.pdf>. Acesso
em: 20 ago 2017.