Professional Documents
Culture Documents
1
2
1.3.1 Analisadores de setor magntico e
setor magntico- eltrico ( dupla focalizao)
3
Em se utilizando somente um analisador magntico, os ons
sero separados de acordo com sua massa nominal (ou seja,
massa determinada por nmeros inteiros), e por isso os
espectrmetros de massas compostos apenas de um setor de
anlise m agnt ico so chamados de espectrmetros de
massas de baixa resoluo. J os espectrmetros de massas
que so constitudos por um setor de anlise form ado por um
campo magntico acoplado a um setor eltrico pode separar
os ons de acordo com suas massas exatas, e por isso so
chamados de espectrmetros de massas de alta resoluo.
4
Quando os ons atravessam o setor magntico, atravessam
um campo magntico perpendicular ao seu movimento.
Como o campo magnt ico provoca a acelerao dos ons,
e a direo da acelerao perpendicular ao seu movimento,
a velocidade dos ons permanecer constante, mas estes
apresentaro uma trajetria circular. Consequentemente, a
geometria do setor magntico semi- circular, para que os
ons possam atravess- lo com uma velocidade constante.
Como os ons viajam velocidade constante, ser possvel
separ- los de acordo com sua razo m/z.
V r Detector
5
Quando os ons so capturados no campo magntico
do analisador, eles iro realizar uma trajetria circular.
Para que os ons atinjam a placa coletora de ons no
detector, os ons devem realizar uma trajetria de raio
r que resulta do equilbrio entre a fora centrfuga do on
2
m B.r 2
z = 2.V
Por esta equao fica claro:
1. Porque o espectrmetro de massas no distingue
sinais de ons m + e 2m 2+
2. Que os parmetros B, r e V que determinam o
trajeto dos ons no analisador.
6
De maneira a aumentar sua resoluo, passaram a ser
construdos aparelhos de espectrometria de massas de
dupla focalizao. Nestes, o setor de anlise apresent a
um analisador de campo elt rico ps o analisador de
campo magntico. O analisador eltrico atua como um
filt ro de energia cintica, permitindo que apenas ons
com uma energia cint ica especfica possam
atravess- lo, a despeit o de suas razes m/z. A
separao de ons no analisador eletrosttico explicada
pela combinao de duas equaes: de fora centrfuga ( 1)
e de energia potencial=cintica (2).
( 1)
Fcf = m.v2 = z.E ( 2) z.V = 1 m.v2
r 2
r = 2V
E = intensidade do campo E
eletrosttico
7
Vantagens
- Espectros de massas tradicionais, ou seja pode operar em baixa
(1.000) ou alta resoluo (at 60.000).
- Excelente reprodutibilidade
- Melhor desempenho quantitativo entre todos os aparelhos
- Alta resoluo
- Alta sensibilidade
- Alta preciso nas medidas de massas (5 ppm em alta resoluo).
Desvantagens
- Inadequadas para tcnicas de ionizao pulsada
- Aparelhos muito maiores e mais custosos
- ons precisam ser acelerados com alta energia cintica para compensar
disperso de energia na fonte (8 kV).
- Varreduras relativamente lentas (efeito de esteresse de campo).
Aplicaes
- Para todos os compostos orgnicos
- Para determinao de massa exata
- Medidas de distribuio isotpica
BE ou EB
8
1.3.2 Analisadores de quadrupolo
Um analisador de quadrupolo consiste em quatro barras
paralelas, arranjadas em dois pares opostos. Um dos
pares apresenta um potencial eltrico aplicado de
( U+ Vcos( wt)) e o outro par apresenta um potencial
eltrico aplicado de - ( U+ Vcos( wt)), aonde U uma
voltagem de corrente contnua e o termo Vcos( wt) uma
voltagem de corrente alternada (ou de radiofrequncia. A
aplicao destas duas voltagens afeta a trajetria centralizada
dos ons. Em se fazendo variar estas voltagens, somente ons
com uma razo m/z determinada iro atravessar no
centro do quadrupolo, enquanto que os outros ons
sero desviados da trajetria central. O espectro de
massas obtido em se fazendo variar as voltagens do
quadrupolo, de maneira a se realizar uma varredura em
t oda a faixa de m / z desej ada. Pode- se ut ilizar 2 m todos:
variando- se w e mantendo- se U e V constantes, ou
variando- se U e V (U/V) e mantendo- se w constante.
Quadrupolos Lineares : Q / q
Paul & Steinwedel 1953
Wolfgang Paul
Prmio Nobel 1989
y
z
-
x +
+
-
9
Vantagens
- Espectros de massa tradicionais
- Boa reprodutibilidade
- Aparelhos relativamente pequenos (20 cm), robustos, simples e baratos.
- Podem ser utilizados para gerar espectros do tipo dissociaes induzidas
por colises de baixa energia (Low-energy collision-induced dissociation,
CID MS/MS) em sistemas com quadrupolos triplos e espectrmetros de
massa hbridos, nos quais se analisa as fragmentaes dos fragmentos.
-Varreduras rpidas
- ons acelerados com baixas energias cinticas (15 eV).
Desvantagens
- Resoluo limitada
- Altura dos picos varivel em funo da massa, mas no funo da
abundncia dos ons.
- Inadequada para tcnicas de ionizao pulsadas (MALDI e ESI).
- Baixa sensibilidade
Aplicaes
- Na maioria dos equipamentos de LC/MS e GC/MS
- Sistemas de quadrupolo triplo MS/MS
- Em sistemas hbridos magntico/quadrupolo MS/MS.
10
Extrel Pentaquadrupole QqQqQ Mass Spectrometer (MS3)
M1 M2
Fonte Q1 q2 Q3 q4 Q5 Det.
11
1.3.3 Analisadores de captura de ons (ion trap)
tridimensionais
Existem dois tipos de espectrmetros de massas de captura
de ons: captura de ons por quadrupolos tridimensionais
( t am bm chamada de captura dinmica), e de ressonncia
em cclotron (captura esttica). Ambas funcionam acumu-
lando ons no seu interior, em se manipulando correntes
alternada e de radiofrequncia simultaneamente. A captura
permite a liberao controlada de ons, o que permite
analisar sua separao controlada e com uma resoluo
muito grande. Alm disso, utilizada para experimentos
m lti- acoplados (MSn ), que permitem estudar mecanismo de
fragm ent ao de molculas relativamente complexas, alm
de fornecerem espectros com alta sensibilidade. A possibili-
dade de capturar ons por perodos que variam de
milissegundos a dias permite a anlise de reaes de
fragm ent ao extremamente incomuns, dando origem a
espectros de massas que no podem ser obtidos atravs
de nenhuma outra tcnica.
12
"Bath gas": adiciona-se hlio a uma presso tpica de 10-3 Torr para
aumentar sensibilidade e resoluo. A repulso entre ons de mesma carga
confinados no centro do trap tende a desestabilizar suas trajetrias por
disperso (efeito "space-charge"). Colises com o "bath gas" resfriam os ons
(energia cintica), mantendo-os aprisionados com refocalizao para o centro
do trap.
13
14
QIT - Quadrupolos "Ion Traps Lineares
Vantagens
- Alta sensibilidade: ons so pr-concentrados e sucessivamente analisados.
- Permite a realizao de EM em multi-etapas
- Baixo custo, simples, robusto e pequeno: ~ 5 x 5 x 5cm.
- Permite experimentos MSn seqenciais no tempo (ex: MS13).
Desantagens
- Ineficiente para se medir abundncia relativa dos ons
- Baixa dinmica
- Sujeito interferncia por espcies carregadas e reaes inter-moleculares
- Energia de coliso entre partculas mal definida
- Deve-se otimizar vrios parmetros simultaneamente para a obteno de
dados de boa qualidade
- Baixa resoluo: resoluo "unitria". Pode trabalhar em alta resoluo em
varreduras lentas.
- Devido a possibilidade de ocorrer reaes on-molcula durante
aprisionamento, espectros de EI podem ser "contaminados" por CI.
Applicaes
- Sistemas GC/MS, LC/MS e MS/MS
- Anlise de ons especficos
- Estudo da qumica de ons
15
1.3.4 Analisadores de tempo- de- vo (time- of- flight)
16
Aumento da Resoluo em TOF
TOF's lineares apresentam baixa resoluo devido a durao do pulso de
ionizao e disperso de energia cintica dos ons na fonte. Soluo paliativa:
Aumento de L ou tcnicas de acelerao "ps-ionizao".
Reflectors (Espelhos Eletrostticos): Uma srie de grades ou eletrodos onde
se aplica um potencial repulsivo crescente. Os ons penetram angularmente no
reflector, so desacelerados por repulso eletrosttica, fazem uma curva, e
assim retornam para o tubo de vo. Considere dois ons de mesma m/z mas
com diferentes velocidades, dispersos no tempo. O on de maior energia
cintica, a frente em tempo de vo, penetra mais profundamente no reflector
e ali permanece por mais tempo. O outro penetra menos profundamente,
e ali permanece por um tempo menor. A disperso corrigida, e os ons
so refocalizados em tempo de vo, com conseqente aumento da resoluo
(largura do pico) ou poder de separao.
Acelerao ortogonal. o-TOF: ons so produzidos de forma contnua na
fonte de ionizao, e acelerados. O feixe de ons focalizado com o auxlio
de lentes e quadrupolos/octapolos "rf-only". Uma acelerao pulsada e
ortogonal ao movimento do feixe de ons aplicada. ons ento adquirem
velocidades "ortogonais" que no so influenciadas pelas suas velocidades
divergentes adquiridas pela acelerao na fonte.
17
Vantagens
- o espectrmetro de massas mais rpido
- Desenhado para tcnicas de ionizao pulsada (MALDI)
- Alta transmisso de ons
- Informao sobre MS/MS aps fragmentao
- Permite a deteco de ons com a maior faixa (de pequena a altssima).
- Alta sensibilidade
- Baixo custo, fcil manuteno.
- Varreduras extremamente rpidas.
- Ampla faixa de varredura > 106 u. nico analisador acoplvel a MALDI de
macromolculas.
- Hoje, uma das melhores relaes custo/benefcio.
Desantagens
- Requer tcnica de ionizao pulsada
- Requer deteco muito rpida, e digitalizao dos sinais.
- Baixa seletividade na gerao de precursores inicos em MS/MS
- TOF's lineares: baixa resoluo. TOF's com reflector: mdia resoluo.
o-TOF's com reflector: alta resoluo e alta preciso ( 5 ppm).
Applicaes
- Todos os sistemas MALDI
- Sistemas de GC/MS muito rpidos
18
1.3.5 Espectrometria de Massas com Ressonncia
Ciclotrnica de ons (ICR) e Transformada de Fourier
( FT- MS)
wc = zeB/m
Para evitar que ons escapem da cela, uma baixa voltagem dc aplicada aos
eletrodos de aprisionamento gerando um campo eltrico E perpendicular ao
campo magntico B.
19
FTMS
c= c = zB m= B
2 2 m z 2 c
FTMS
Detector
plate
Trapping
plate Detection on
frequency spectrum
Excitation
plate
Magnetic
field, B
20
I llustration of how the image current is
obtained. As the ion(s) in a circular orbit
approach the top plate, electrons are
attracted to this plate from ground. Then
as the ion(s) circulate towards the bottom
plate, the electrons travel back dow n to
the bottom plate. This motion of electrons
moving back and forth between the two
plates produces a detectable current.
21
1.3.6 Espectrometria de massas em sequncia (MS/MS,
ou Tandem Mass Spectrometry)
22
MS/MS em determinao estrutural
23
1.4.1 Multiplicadora de eltrons
Uma multiplicadora de eltrons um dos meios mais simples
para se detectar ons, apresentando grande sensibilidade
fazendo uso do princpio do copo de Paraday. Na multiplicadora
se utiliza uma srie de placas coletoras de ons em srie,
mantidos em potencial crescente. Os ons atingem a sperfcie
da primeira placa, resultando na transmisso de eltrons.
Estes elt rons so atrados pela segunda placa aonde so
gerados novos eltrons, resultando em uma cascata de
eltrons. O ganho tpico da amplificao da corrente gerada
pela cascata de eltrons da ordem de 1.000.000 de vezes.
24
1.4.1 Placa de converso fotomultiplicadora
25
This document was created with Win2PDF available at http://www.daneprairie.com.
The unregistered version of Win2PDF is for evaluation or non-commercial use only.