FACULTAD DE CIENCIAS AMBIENTALES

ESCUELA DE INGENIERA AMBIENTAL

CUANTIFICACIN DE PROTENAS TOTALES EN

PLANTAS SOMETIDAS AL ESTRS ABITICO

Castro, Ninoska; Churano, Daniel; Jaime, Emerson; Susanivar, Max;

Vallejos, Cristian

LIMA, PER
2017
 INTRODUCCION

Las protenas son molculas complejas, orgnicas y antipticas, formados

producto de la unin de aminocidos por el enlace conocido como enlace
peptdico, en el que el grupo -carboxilo se une al carbono del grupo -amino
de la otra molcula. Los aminocidos son molculas simples asimetras,
asociadas a un grupo carbonilo, otro amino, un hidrogeno y un grupo diferente el
cual vara de acuerdo al tipo de aminocido. Esta asimetra le permite tener
isomera ptica. Para ser considerado una protena, se debe cumplir con un
mnimo de cien unidades de aminocidos, ya que una cantidad menor se les
denomina pptidos. Dentro de las estructuras podemos encontrar a las
primarias, conformado una cadena lineal de aminocidos; las secundarias,
enrollndose como hlices o se pliegan (cadena en zig-zag); las terciarias
conformadas por un grupo numeroso de estructuras primarias y secundarias
juntas en conformaciones tridimensionales. En algunos casos las protenas
pueden encontrarse con dos o ms subunidades, y pocas veces logran ser
estructuras cuaternarias.

Como se sabe, las plantas se encuentran conformadas lpidos, carbohidratos y

protenas, que con el paso del tiempo desarrollaron diversas respuestas a las
adaptaciones, logrando sobrevivir a condiciones de constante dficit hdrico
(Daz, F.; Salas, R. 2007), relacionado con mayor capacidad de tomar agua y su
uso ms eficiente. Se observan respuestas ms detalladas a nivel celular y
molecular (Shinozaki y YamaguchiShinozaki, 2007). Donde las principales
actan de manera directa sobre la modificacin en su expresin gnica,
relacionada con la produccin de enzimas clave, por ejemplo la sntesis de
osmolitos, protena con funcin protectora, tambin se expresan las enzimas
antioxidantes, los factores de transcripcin y otras protenas involucradas en las
respuestas al estrs hdrico (Bray, 1997; Zhu et al., 2002). Durante el estrs
hdrico tambin se induce la expresin de varios factores de transcripcin que
median la respuesta de genes a estrs hdrico algunos de los cuales se unen a
secuencias especficas en la regin promotora de los genes (Guiltinan et al.,
1990; Busk et al., 1997).

El estrs hdrico, se da a causa principal por el efecto de excesiva salinidad en

el suelo, bloqueando a la planta para que absorba la cantidad de agua requerida
e induciendo a que esta salga de la clula. Los osmolitos son compuestos
orgnicos de bajo peso molecular, permiten el ajuste osmtico y facilitan la toma
de agua por la planta (Chaman, M.; 2014), conocidas tambin como protenas
reguladoras. El incremento de esas enzimas activan el gen de la produccin de
protenas estructurales, tubulinas (protenas estructurales), las cuales se
encargan del transporte de las molculas de glucosa en el medio citosolico, hacia
la parte interna de la vacuola de la clula vegetal (Daz, F.; Salas, R. 2007). El
aumento de concentracin de glucosa en el medio citosolico, se debe a la funcin
de los osmolitos, es romper las cadenas de carbohidratos que se encuentran
almacenados en los amiloplastos, para luego liberar a las glucosas180 (valos,
A.; Prez-Urria, E. ;2009)

La regulacin final que debe afrontar la planta por la presin osmtica

(resistencia celular), la tensin de la membrana y la presin hidrosttica es
crucial para el funcionamiento celular, ya que el agua se dirige desde las zonas
donde el potencial hdrico es mayor hacia las zonas donde este es menor
(Lehninger, 2006) (Lpez-Mesas, M, 2000). Es decir, la resistencia es el ajuste
osmtico, que consiste en una disminucin del potencial hdrico en los tejidos
vegetales, lo cual tiene como consecuencia la entrada de agua y, por tanto, no
se presenta una disminucin en la productividad fotosinttica.

Uno de los problemas ms graves que el mundo se encuentra enfrentando en la

actualidad, son los problemas de salinidad el cual cerca del 7 % del rea del
suelo a nivel global est afectado por la salinidad (Almodares, 2008), lo que
corresponde a un 20% de la tierra agrcola irrigada. Del mismo modo, en pases
como el Per es algo bastante serio, de modo que las tierras cultivables que
representaban el 3.3% de todo el territorio nacional, han disminuido a 2.8% en
el 2012. A pesar de en los 70s, el ONERN ya haba establecido que el 40% de
los valles costeros sufra de este fenmeno (Lee y Elgregen, 2007). En un
estudio realizado en el Valle de Chancay Per , (Gilboa, 1971) ha encontrado
prdidas de 1.25% por km de tierras cultivables , mientras Salzgitter (1963) llego
a valores de 3 a 4% por km en algunos sectores del canal Taymi, afectando a la
economa del lugar en un 20%. Con los aos y el impacto global que la salinidad
ocasiono a diferentes pases, se determin que es importante estudiar los
efectos del estrs salino sobre los cultivos a fin de poder hacer frente a la
sintomatologa presente en las plantas afectadas y comprender los procesos de
tolerancia o resistencia que se generen con el fin de, en un futuro, poder
utilizarlos para adaptar a los ambientes salinos a una mayor proporcin de
cultivos de inters econmico para el hombre, sin afectar el equilibrio ecolgico.

Las investigaciones sobre el efecto del estrs salino las plantas, han determinado
que existen un grupo de especies de plantas capaces de responder a
condiciones de dficit hdrico por causa de la salinidad, donde se analizan
fenmenos producidos por el sobre el contenido de minerales, azcares,
protenas y/o lpidos de las protenas. De esta marera es que el objetivo de la
investigacin es evaluar el efecto del estrs salino en el contenido de protenas
estructurales y de reserva del cultivo de tomate Naomi en la UCSUR.
MATERIALES Y METODOS

MATERIALES

Espectrofotmetro (Thermo SCIENTIFIC)

Reactivo de Biuret
Estndar de protenas totales
Centrifuga (HETTICH)
4 12 Pipetas 1Ml
4 Gradillas
40 Tubos de ensayo 10mL
Papel filtro
Mortero
Soporte universal
4 Pizetas
Embudo
Plantas de tomate
Cloruro de sodio (ClNa)
Arena fina
Leja

MTODOS

Para la preparacin de muestras se obtuvo de las plantas de tomate, se lav

arena fina repetidas veces, hasta no observar burbujas, desinfectndola con leja
al 10%. Luego se coloc la arena limpia sobre una almaciguera y se agreg 20
semillas de tomate por cada grupo, cuidando que el sustrato siempre se
mantenga hmedo y se cubri las bandejas con un plstico negro hasta que al
menos el 30% de las plntulas hayan emergido, de estas plntulas se separ el
50% de las muestras, se reg un grupo de plntulas con solucin hidropnica
(Muestra Control) y el otro grupo con solucin hidropnica salina 125mM
(Muestras Tratamiento). Se mantuvo estos cultivos como dos meses y medio
previos a la experiencia

Para el procesamiento una vez pasado el tiempo indicado se retir por separado
las plantas de tomate ambos cultivos (Control y Tratamiento) tomando de cada
cultivo una muestra de hojas de 1 g, se lav cuidadosamente cada hoja y se la
coloc en un mortero, para homogenizar en 10mL de solucin salina hasta
conseguir una muestra completamente liquida, las colocamos en tubos de
centrifugas a 5000 rpm por 10 minutos para almacenar el sobrenadante.

Por ltimo para la cuantificacin de azcares reductores se utiliz dos tubos de

ensayo de control y muestra , le agregamos 0,5 mL de homogenizado en los
tubos de ensayo respectivamente , 1mL de reactivo Biuret a cada uno dejndolo
reposar por 10 minutos y realizamos los grupos controle el primer de la Muestra
donde aadimos 0,5 mL de agua destilada con 1 mL de reactivo de Biuret y el
segundo grupo control de Biuret , donde colocamos 0,5 mL del homogenizado
del grupo control con 0,5 mL del homogenizado de la muestra problema y 1mL
de agua en cada tubo , finalmente realizamos la absorbancia a 595 nm
plasmando los resultados obtenidos en una curva de calibracin para as hallar
la concentracin de protenas en g de protenas /g de peso hmedo para
preparar tubos con estndares entre 1000 y 3000 g de protenas totales.

RESULTADOS

Segn los datos recopilados, y la curva de calibracin, nos permiti comprobar

que la relacin entre el peso hmedo de la raz y de las ramas del control eran
directamente proporcionales (R2 >0.696). En cuanto al peso en seco de la raz
con las ramas del control, observamos en la figura 1 una relacin directa, al igual
que la relacin del peso hmedo (R2 >0.993). Donde indica que tiene una
relacin directa ms exacta en las ramas y raz del peso seco, que las del peso
hmedo del control. Del mismo modo, al analizar la relacin entre el peso
hmedo del tratamiento, como se muestra en la figura 2, nos vimos con los
resultados que este tambin se encontraba con una relacin directa entre las
races y el tallo del tomate (R2 >0.825), teniendo una dependencia ms alta que
la del control.

Fig 1. Grafico de Relacion entre el Peso Humedo de las Raz-Ramas del control del
Tomate Naomi

Fig 2. Grafico del Peso Humedo de la Raiz y el Tallo de las plantas de tomate naomi con
efecto de salinidad (Tratamiento).

Segn los datos de las muestras estndar, nos permiti realizar una curva de
calibracin de la figura 3 la cual nos ayud a determinar la concentracin de
protenas totales en las plantas control y las del tratamiento, en dos zonas, en
las hojas nuevas, y las hojas viejas. Mostrando que la media en la concentracin
de protenas totales en las hojas viejas del tratamiento es 1049,4 g/ml mientras
en el control es de 609,3 g/ml, mostrando ser un 40% que la concentracin del
control. El promedio del tratamiento es mayor a causa de que una de sus
absorbancias es bastante alta lo que incremento la media ms no hubo diferencia
notoria. En cuanto a la concentracin de las hojas nuevas, el promedio del control
es 45% mayor que el tratamiento, ocurriendo lo contrario que en las hojas viejas,
porque en el control se obtuvo una concentracin de protenas promedio de
1349.8 g/ml, mientras que el tratamiento la media fue de 764 g/ml.

Fig 3. Curva de calibracin para hallar la concentraciones de protenas totales

en el control y tratamiento de las hojas nuevas y viejas.

La diferencia entre las hojas nuevas de las plantas control y las de tratamiento
del tomate Naomi, no tienen una varianza significativa (p>0.433) en cuanto a la
cantidad de protenas, de modo podemos deducir que no hubo un impacto o
cambio en cuanto a la respuesta al estrs salino segn las pruebas estadsticas
aplicadas a un 95% de confianza. En cuanto a la cantidad de protenas entre las
hojas viejas del tratamiento y el control de la planta, al igual que en las hojas
nuevas no muestra una diferencia significativa (p>0.422).

La diferencia de protenas presentes en las hojas nuevas como las viejas de la

planta control no muestran una diferencia significativa (p>0.343), mostrando que
no existe contraste importante. Por el otro lado, las protenas calculadas en las
hojas nuevas y viejas del tratamiento no muestran una diferencia significativa
(p>0.579) al igual que el control, lo que muestra que la cantidad de ambas son
muy similares, donde no existi un efecto a causa del estrs salino.

Los resultados del largo de la raiz control comparados con los del tratamiento,
determinaron que no existe una diferencia significativa (p>0.4), puesto que el
tamao de estas no se presento una variacion notoria segn los estadisticos
aplicados al 95% de confianza. En cuanto a la diferencia entre el ancho de la raz
control con la del tratamiento mostraron que si exista una diferencia significativa
(p<0.03), de modo que se puede deducir, que el efecto de estrs salino afecto
la raz en cuanto al crecimiento a lo horizontal, determinando as que
estadsticamente si existe un varianza en cuanto a esta medicin.

El rea Foliar de la raz del tratamiento muestra una diferencia significativa (p<
0.037) en comparacin con el rea foliar de la raz del control, puesto que la del
tratamiento tiende a ser mayor, indicando que existe una amplia distancia entre
los resultados.

En cuanto a la comparacin entre el peso total hmedo de la planta de tomate

Naomi del control y las del tratamiento a la cual se le sometio a un estrs salino,
no se logro encontrar una diferencia significativa (p>0.599), puesto que
variaciones del peso total en las mediciones no son suficientemente notorias
segn los estaisticos aplicados al 95% de confiabilidad.

En cuanto a la variacin del peso hmedo del tallo y la raz de la planta con el
tratamiento con estrs de NaCl mostro una diferencia significativa (p<0.034), lo
que indica que si existe una varianza que indica que el peso hmedo de la ramas
es notoriamente mayor, lo cual se puede deber a un incremento de retencin de
lquidos o de produccin de protenas, tanto estructurales como remediadoras
como respuesta a la concentracin salina sometida. Donde tambin se puede
decir, que las races pueden haber sufrido un efecto de deshidratacin perdiendo
lquido y disminuyendo su capacidad hdrica, para equilibrarse con el medido,
donde tambin se le sume el proceso de desequilibrio en cuanto a produccin
de protenas, debido a su contacto directo con el medio estresado, dando as
como resultado una diferencia de pesos alto entre las ramas y la raz.
Al analizar la variacion en porcentajes entre el peso total humedo y el peso total
seco, se determino que el porcentaje de variacion promedio del tratamiento es
de 27.41 %, mientras que el control tenia un promedio de 20.72%, lo que indica
que la planta tratamiento retuvo mayor cantidad de liquido, aproximadamente
6.9% mas que la planta control.

En cuanto a la necrosis hallada, los resultados nos salen para ambas plantas
nulo, no existe porcentaje de necrosis, ya que como es tan baja es considerada
como si no estuviese presente, con 0% de necrosis. Lo que significa que el efecto
del estrs salino no provoc la muerte de las races tornndolas marrones.

La correlacin entre las protenas totales de las hojas nuevas y las hojas viejas
en la planta control muestran una relacin directamente proporcional, donde a
medida que aumenta una, la otra tambin aumentar. En cuanto a la
correlaciones de ambas concentraciones de protenas en las hojas nuevas y
viejas se identificaron valores de correlacin similar, mostrando que el peso seco
al igual que el hmedo mostraba una relacin inversa, a media que uno aumenta
el otro disminuye, el largo, ancho y rea foliar nos arrojaron la misma relacin
inversa que la de los pesos con respecto a la concentracin de protenas, segn
los estadsticos aplicados con un 0.05 de nivel de significancia.

En el caso de la correlacin de las protenas totales de las hojas nuevas y de las

viejas, se hall que mantenan una relacin directa, al aumentar una aumenta la
otra de igual manera. La relacin de cada aspecto de la planta con respecto a
las diferentes concentraciones de las hojas viejas y nuevas si existe diferencias,
no es igual que con el control que mantenan resultados similares. Por ende en
cuanto a las hojas nuevas, la relacin del peso seco y hmedo mantienen una
relacin directa casi perfecta, al igual que con las hojas viejas. Sin embargo, en
cuanto al ancho en la concentracin de protenas de las hojas viejas casi no tiene
ninguna relacin, que esta aumente o vare no afecta al ancho, caso contrario en
las protenas de las hojas nuevas, muestran relacin inversa con el ancho y el
rea foliar.

DISCUSIONES
Los resultados obtenidos en el experimento nos indican que al aplicarle al suelo
la solucin salina a las plantas de tomate Naomi, se obtuvo no existe varianza
significativa en cuanto a la cantidad de protenas en el tratamiento que en las del
control(p>0.37), de igual manera el peso total hmedo no presenta diferencias
significativas (p> 0.599) entre ambos sin embargo el resultado no concuerda con
lo que menciona Chvez, L (2009) lo cual nos dice que efecto de estrs por
salinidad en plantas con alta resistencia a concentraciones de sales elevadas,
para mantener un equilibrio en la presin hdrica y osmtica que evite la
deshidratacin de la clula lo que evita la que se produzca una plasmlisis. Como
efecto protector las clulas vegetales de este tipo de plantas aumentan la
concentracin de molculas de glucosa para que esta influya en el crecimiento
de la vacuola, de esta manera permitir el equilibrio de la presin osmtica dentro
de la clula con respecto al medio en el que se encuentra (Chaman, M. 2007).
Los osmoprotectores de las clulas vegetales gracias a sus grupos hidroxilo que
permiten generar una esfera de hidratacin alrededor de las macromolculas,
previniendo la inactivacin metablica en condiciones de bajo potencial osmtico
(Daz, F.y Salas, R; 2007).

Los mecanismos de defensa para la tolerancia a las sales incluyen la

osmoregulacin, exclusin de sales, estabilizacin de membrana, antioxidantes
y liberacin de hormonas (Chvez, L.; Gonzlez, L.M. 2009). El estudio de la
respuesta al estrs salino en plantas con un nivel organizacional complejo como
en general las plantas de tomate, nos permite analizar la variacin de en la
sntesis de protenas, lpidos y azucares (Daz, F.; Salas, R.; 2007). De acuerdo
con los datos recolectados de la muestra control con respecto al tratamiento, se
obtuvo que no existi una diferencia significativa (p=0.329) en cuanto a la
variacin de protenas presentes en la planta de tomate Naomi, lo que indica que
no existi un efecto ambiental de estrs salino sobre el tratamiento. Sin embargo
lo que nos indican los autores Chaman, M. Veneros, R.; E. Araujo, Ramrez,
A.,Hidalgo, J. Alaya, B.S.L. y Ramos, C. (2014), afirman que en un suelo
afectado por salinidad, la respuesta inmunitaria de los Lycopersicon en general,
tiene un efecto de bioregulacion el cual se activa por medio de las protenas
mensajeras, para activar el gen de produccin de al osmotina, aumentando as
su concentracin en protenas reguladoras. Por otro lado, segn Chvez (2009).
Rubio (2010) en las plantas con adaptaciones a resistencias de estrs salino se
debe obtener un aumento en las concentraciones de cloro, fructosa, glucosa y
mioinositol en hojas de plantas.

Los resultados de la relacin del peso hmedo de la raz con el peso hmedo de
la rama en el tratamiento muestran un R2 de, con lo cual indica que el efecto de
las sales afecto de a con respecto a la concentracin de glucosa nos indican que
mientras menor sea el pH del suelo se podr encontrar mayor cantidad de
molculas de glucosa en la plantacin de tomates Naomi. Por el otro lado, en
otras investigaciones, se obtuvo como resultado que el pH de las cosechas
normales tienden a descender con el tiempo, sin embargo, el suelo con estrs
salino presenta un aumento de pH (Salas A. 2015), a pesar de ello, la variacin
del pH en el suelo tambin depender de la solucin nutritiva que se aade a al
cultivo, en donde el efecto de esta actuara de acuerdo a los componentes que
tenga. Segn Casierra, (2000), la concentracin solucin de riego o solucin
nutritiva, la cual se evala a travs de su CE, que tambin vara de acuerdo a los
ingredientes y los elementos que tenga la CE de la solucin nutritiva como de
concentracin si afecta en la CE del suelo

Con respecto a la CE en el suelo que se vio incrementada en el tratamiento de

las plantas de tomate Naomi por efecto de la solucin salina aadida, ya que
como lo menciona Azcon-Bieto, J.; Talon, M. (1996), los iones que contiene la
solucin aumentar la capacidad de intercambio electrnico, lo que hace que el
suelo se vuelva ms CE, que segn Bray, E.A. (1993) es un problema, porque
interfiere con la capacidad de las plantas para absorber nutrientes.

La densidad del suelo se ve incrementada en los suelos salinos, por la presencia

de los solutos que tienden a aumentar la densidad por el peso que se le suma a
las partculas del suelo (Salas Asencios R, 2015), lo que quiere decir que el suelo
control, que presentase una densidad aparente menor a la del tratamiento
concuerda con los experimentos y mediciones realizadas por los investigadores
Chaman, M. (2014), Chvez, L. y Gonzlez, L.M. (2009)

Existen variadas clasificaciones de los factores de estrs. En general, estos

pueden ser clasificados en fsicos, qumicos y biticos, siendo los dos primeros
agrupados bajo el trmino de estreses abiticos. Entre los factores fsicos se
pueden mencionar el estrs por dficit o exceso de agua, altas-bajas
temperaturas y radiacin UV. Entre los factores qumicos: la contaminacin
atmosfrica metales pesados, toxinas, salinidad etc. (Tambussi, A; 2004)

La respuesta de las plantas a diferentes tipos de estrs generalmente incluye la

alteracin en la expresin de protenas. Estos cambios generalmente estn
relacionados con el aumento o la disminucin de la expresin de genes
especficos, y dependen de la naturaleza, duracin y severidad del estrs. Aqu
se revisarn aquellas que se aumentan durante la condicin de estrs, ya que
aunque la disminucin de protenas particulares puede tener un significado
fisiolgico importante, la mayora de investigaciones se enfocan en las que se
aumentan durante el estrs porque se cree que puedan tener una funcin
adaptativa o de proteccin a dicha condicin. Entre las ms importantes por su
efecto protector potencial estn las protenas LEA (Late Embriogenesis
Abundant Proteins), las involucradas en las vas de sntesis de los osmolitos y
las que funcionan como antioxidantes (Bray, 1997; Zhu, 2002; Bartles y Kotchoni,
2003).

El efecto de las sales en las races de las plantas de tomate siempre resulta en
un menor crecimiento de esta estructura, hecho que puede afectar el
crecimiento, en general, de la planta al reducirse el volumen de suelo sin
salinidad que pueden explorar sus races (Almasoum, 2000).

Las plantas tolerantes al estrs salino recurren a diferentes estrategias: ajuste

osmtico, exclusin de iones txicos de la parte area, traslocacin de
fotoasimilados a rganos subterrneos, para incrementar el crecimiento del
sistema radicular y asegurar una mayor disponibilidad de agua y nutrientes, etc
(Meloni et al., 2004).

La altura de las plantas de tomate disminuye con el incremento de la salinidad.

A nivel de hojas la salinidad genera una reduccin en su nmero y en el rea
foliar. Tambin se observa clorosis, necrosis, disminucin de la densidad
estomtica en la cara adaxial y simultneamente un aumento en la cara abacial,
aumento de clorofila e incremento de actividad de la peroxidasa (Romero-Aranda
et al., 2001). Tambin afecta la floracin y la produccin de frutos entre otros
(Del Rosario, et al., 1990; Prez-Alfocea et al., 1996; Cucci et al., 2000). En
cuanto a su vinculacin con enfermedades, favorece la incidencia de pudricin
terminal en frutos de tomates.

La disminucin en el nmero de hojas como consecuencia del incremento de la

salinidad es una respuesta variable que depende de la especie o cultivar de que
se trate como tambin de los niveles de sales a que son expuestas las plantas.
Experimentos realizados en los tomates cultivados cv Daniela y Moneymarker
(Romero-Aranda et al., 2001) que fueron sometidos a estrs salino con 35 y 70
mM NaC1, el nivel inferior fue suficiente para reducir significativamente el
nmero de hojas en el cv Daniela, no as en el cv Moneymarker, que requiri 70
mM NaCl para presentar una similar respuesta. Considerando este parmetro,
se podra pensar que el cv Moneymarker es ms tolerante a salinidad que el cv
Daniela y que al interior de L. esculentum existe variabilidad gentica para
tolerancia salinidad.

El rea foliar tambin es influenciada negativamente por la salinidad.

Investigaciones sobre esta variable en los cultivares Daniela y Moneymarker
sealan que el rea foliar se reduce en trminos significativos en ambos
cultivares al exponerlos a 35 mM NaC1. La disminucin alcanz un 12,3% en el
cv Daniela y un 18,5% en Moneymarker. A 70 mM NaC1 la reduccin del rea
foliar en ambos cultivares tambin fue significativamente mayor, alcanzando un
16% en el cv Daniela y un 33% en el cv Moneymarker. Por las diferencias
detectadas en este ltimo cv sugeriran su mayor sensibilidad a salinidad
(Romero-Aranda et al., 2001).

RECOMENDACIONES

CUESTIONARIO

1. Cmo se clasifican los aminocidos por el grupo R?

Se clasifican en:

AMINOCIDOS CON GRUPOS R- DE HIDROCARBUROS

Los aminocidos son compuestos orgnicos que contienen tanto un grupo amino
como un grupo carboxilo. Se distinguen por el grupo funcional R adjunto.

De los veinte aminocidos Grupo R

que componen las protenas,
seis de ellos tienen grupos R Hidrocarburos
de hidrocarburo. El ms
simple de los aminocidos, la Neutral
glicina, tiene un tomo de
hidrgeno en la posicin del cido o Base
grupo R.
Fuente: Urdiale J. http://www.biorom.uma.es/contenido/av_biomo/Mat2.html

AMINOCIDOS CON GRUPOS R- NEUTRAL

De los 20 aminocidos Grupo R

que componen las
protenas, siete de ellos Hidrocarburo
tienen grupo R neutral:
Neutral

cido o Base
Fuente: Urdiale J. http://www.biorom.uma.es/contenido/av_biomo/Mat2.html

AMINOCIDOS CON GRUPOS R- CIDO O BASE

De los veinte Grupo R

aminocidos que
Hidrocarburo
componen las
protenas, seis de Neutral
ellos tienen grupos R cido o
cido o base. Base
Comparar con el
ms simple de los
aminocidos, la
glicina, que tiene
slo como grupo R
un H.
Fuente: Olmo R. http://hyperphysics.phy-
astr.gsu.edu/hbasees/Organic/aminostruct.html

Los aminocidos que son esenciales no los puede hacer el cuerpo humano y,
por lo tanto, deben obtenerse de la dieta. (Olmo, 2008)

2. Cmo podran los aminocidos darnos evidencia de la historia de

nuestro planeta?

El caldo primitivo, los aminocidos y una primera forma de seleccin natural. En

1952, segn la hiptesis heterotrfica demostrada por los experimentos de Urey y
Miller, existieron condiciones especiales en la Tierra primitiva que transformaron
sustancias simples en otras muy complejas como son los aminocidos. Algunos de
los fragmentos de cometas y meteoritos presenten evidencias de la llegada
de aminocidos prebiticos al planeta, formados cuando se origin nuestro
Sistema Solar, sustentan la teora de que el mundo primitivo en realidad se vali de
protenas y no de ARN para dar lugar al origen de la vida.Descubrir que los
aminocidos son las primeras molculas que componen la vida en la tierra y cada
ser humano. Concebir una gota de agua como todo un universo lleno de vida, el
agua estuvo presente en caldo primigenio del origen del Universo como en el lquido
amnitico de nuestro origen. (Suarez.O, 2013)
Y as los cuerpos de agua ms pequeos, pudieron encontrarse varios aminocidos
y formar cadenas, polipticos o protenas y de la misma manera formar otros
compuestos orgnicos. A su vez estas molculas grandes se agruparon al azar en
conglomerados o enjambres moleculares constituyendo formas diversas llamadas
pre celulares. Entre estas formas variadas existieron algunas de caractersticas ms
ventajosas que aumentaron su tamao y complejidad a expensas de las menos
eficientes. (Bernardo.A, 2013)

3. Cul es la importancia fundamental de las protenas en el medio

ambiente?
Frente a determinadas agresiones ambientales, los organismos reaccionan con
un mecanismo de defensa celular que involucra la sobreexpresin de estas
protenas y la induccin de otras, de la misma familia, que no son constitutivas.
Su funcin es minimizar los daos producidos por el estrs. Las clulas en cultivo
responden de manera similar a cambios en su medio ambiente habitual o
situaciones de estrs, inicindose una respuesta que implica la sntesis de un
conjunto de protenas, conocidas bajo la comn denominacin de Hsp (Heat
shock proteins) o protenas antiestrs. Otros factores perjudiciales, como
exposicin a txicos, a metales pesados, a anlogos de aminocidos, hipoxia,
etc., desencadenan un proceso similar.(Bielsa.M,2105)

4. Todas las protenas tienen estructura cuaternaria? Explique.

Cuando una protena consta de ms de una cadena polipeptdica, es decir,

cuando se trata de una protena oligomrica, decimos que tiene estructura
cuaternaria. La estructura cuaternaria debe considerar el nmero y la naturaleza
de las distintas subunidades o monmeros que integran el oligmero y la forma
en que se asocian en el espacio para dar lugar al oligmero.

Adems, la estructura cuaternaria deriva de la conjuncin de varias cadenas

peptdicas que, asociadas, conforman un multmero, que posee propiedades
distintas a la de sus monmeros componentes la estructura cuaternaria resulta
de la asociacin de varias hebras para formar una fibra o soga, y modula la
actividad biolgica de la protena y la separacin de las subunidades a menudo
conduce a la prdida de funcionalidad. (Contreras, 2014)
En sntesis, solo algunas protenas estMacan compuestas de varias
subunidades polipeptdicas, como la hemoglobina. La estructura cuaternaria, por
ejemplo, es la que forman las protenas de tubulina o flagelina, para formar el
citoesqueleto de la clula. Estas protenas que se ensamblan en cadenas de
monmeros sirven como rales por los que otras protenas podrn viajar. Otro
ejemplo de la importancia de la estructura cuaternaria la tenemos en las cadenas
de colgeno, el cual no es funcional hasta que se han asociado 3 cadenas de
polipptidos, 3 protenas, de la misma familia. (Luque, 2004)

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFIA

Almodares, A. Hadi, M.R. Dosti, B. (2008). The effects of salt stress on

growth parameters and carbohydrates content in sweet sorghum.
Research Journal of Environmental Sciences. 2(4): 298 304.

H. Horton, A. Moran, K. Scrimgeour, Perry y J. Rawn (2008). Principios de

Bioqumica. Enzimas del ciclo del cido ctrico. 4 Edicin. Pearson educacin,
Mxico. p - 401

David A. Bender, y Peter A. Mayes (2012) Harper Bioqumica ilustrada.

Bioenergtica y el metabolismo de carbohidratos y lpidos. 29 Edicin. Editorial
Mexicana: Mxico D, F. (5-180)
Robert K. Murray, M. P., 2002. Harper: Bioquimica. 29th ed. S.l : Languer. Pp.
165-175

Lehninger, A. (2006) Principios de la Bioqumica. The Jons Hopkings

University, Barcelona. (p.111-121)

Casierra, F.; Eberf, G.; Ldders, P. (2000) Efecto de la salinidad por Cloruro
de Sodio sobre el balance de nutrientes en plantas de Lulo (Solanum
quitoense L.). Agronoma Colombiana. 17: 85 90

Nilsen, E.T. y D.M. Orcutt. (1996) Physiology of plants under stress.Abiotic

factors. John Wiley and Sons, New York, NY.
Salas Asencios R, (2015). Efecto del estrs salino en el contenido de
minerales de cultivos semihidropnicos de tomate Lycopersicon
esculentum MILL (1768) c.v. Rio Grande. San Marcos; Lima. 5-24

Chvez, L.; Gonzlez, L.M. (2009) Mecanismos moleculares involucrados en

la tolerancia de las plantas a la salinidad. Separata ITEA. 105(4): 231 256.

ALMASOUM, A.A. 2000. Effect of planting depth on growth and productivity

of tomatoes using drip irrigation with semi saline water. Acta Hort 537: 773-
778.

Lee, D.R.; Elgregen, J. (2007) Conservacin de Recursos Naturales: Suelos,

Recursos Forestales y Biodiversidad. Taller de Diseminacin del Anlisis
Ambiental del Per. CEA

Lpez-Mesas, M.; Crespi, M. (2000) Revisin de los mtodos de extraccin

y purificacin de pesticidas de muestras con alto contenido de materia
grasa. Grasas y Aceites. 51(3): 183 - 189.

valos, A.; Prez-Urria, E. (2009) Metabolismo secundario de plantas.

Reduca (Biologa). Serie Fisiologa Vegetal. 2(3): 119 - 145.

Azcon-Bieto, J.; Talon, M. (1996). Fisiologa y Bioqumica Vegetal. Ed.

Interamericana, Madrid.

Chaman, M.; Veneros, R.; E. Araujo; Ramrez, A.; Hidalgo, J.; Alaya, B.S.L.;
Ramos, C. (2014) Contenido de prolina en Solanum lycopersicum
pretratado con glicina betaina y sometido a estrs salino. REBIOL. 34(1):
19 - 25.

Daz, F.; Salas, R. (2007) Contenido de materia seca, azcares, protenas y

prolina en Lycopersicon pimpinellifolium y Lycopersicon esculentum en
respuesta a condiciones de salinidad. Revista Cientfica. 4(4): 24 34.

Bray, E.A. (1993) Moleculas responsables del deficit de agua. Plant Physiol.
103, 1035-1040

Zhu, J.K, K.S. Scumaker y L. Xiong. (2002) Cell signalling during cold,
drought, and salt stress. Plant Cell 14, 165-183.
Shinozaki, K. y K. Yamaguchi-Shinozaki. (2007). Gene networks involved in
drought stress response and tolerance. J. Exp. Bot. 58(2), 221-227

Luque, V. (2009). Estructura y propiedades de las protenas. Universidad de

Valencia

Nilsen, E. y Orcutt, D. (1996) Physiology of plants under stress. En: Abiotic

factors, ed. John Wiley & Sons, Inc., New York

Taiz, L. y Zeiger, E. (2006) Plant physiology. The Benjamin/Cummings

Publishing Company, Inc. Redwood City, California, USA.

Eyidogan, F. (2012) Signal transduction of phytohormones under abiotic

stresses. En: Phytohormones and abiotic stress tolerance in plants, eds. N.A.
Khan, R. Nazar, N. Iqbal , N.A. Anjum, Springer, Berlin, pp. 1-48.

ROMERO-ARANDA, R.; SORIA, T.; CUARTERO, J. 2001. Tomato plant-water

uptake and plant-water relationships under saline growth conditions. Plant
Science. 160: 265-272.

Lamz, A. y Gonzlez, C (2013) La salinidad como problema en la agricultura:

la mejora vegetal una solucin inmediata. Cultivos Tropicales versin impresa
ISSN 0258-5936 cultrop vol.34 no.4 La Habana oct.-dic.

Salzgitter G.m.b.H. (1963) Geologa e Hidrologa de la zona de Irrigacin de

Chiclayo, Lambayeque-Valle Nuevo. Tom A: Memoria Descriptiva Proyecto
Tinajones. Min. de Fomento y Obras Pblicas de Per.

DEL ROSARIO, D. A.; SUMAGUE, A. C.; ROXAS, V. P.; BAUTISTA, T. S. 1990.

Response of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) to salt stress. The
Philippine agriculturist. 73 (2): 193-198.

Olmo R. (2008) Aminocidos con grupos R- de Hidrocarburos. [Internet].

Disponible desde: <http://hyperphysics.phy-
astr.gsu.edu/hbasees/Organic/aminostruct.html > [Acceso 2008]

Suarez. O (2013) Nuevas evidencias del origen de la vida. [Internet].

Disponible desde: <www.omicrono.com/2013/.../nuevas-evidencias-
inquietantes-sobre-el-origen-de-la-vi> [Acceso 06 de mayo 2013]
Bernardo. A (2013) Acercndonos al entendimiento de la vida. [Internet].
Disponible desde: <https://hipertextual.com/2013/04/origen-de-la-vida> [Acceso
09 de abril 2013]

Bielsa M. (2015) Efecto del estrs abitico sobre las protenas.

Bray, E.A. 1991. Regulation of gene expression by endogenous ABA during

drought stress. pp. 81-96. En: Davies, W.J. y H.G. Jones (eds.). Abcisic acid,
physiology and biochemistry. Bios Scientific Publisher, Lancaster, UK

Contreras C. (2004) Estructura cuaternaria Estructura cuaternaria de protenas

| La gua de Biologa.

Mark B; Stryer L.; Tymoczko J. & Macarulla J. (2004). Estructura y propiedades

de las protenas.

Olmo R. (2008). Aminocidos con grupos R- de Hidrocarburos.

Bartles, D. y S.O. Kotchoni. 2003. Water stress induces the up-regulation of

a specific set of gens in plants: aldehyde dehydrogenases as an example.
Bulg. J. Plant Physiol, Special Issue, 37-51.

ANEXOS

Tabla 1. Concentracin y absorbancia del Estndar

Concentration St. (g/ml) Absorbancia St

Estndar 1 5000 1.225

Estndar 2 7500 1.931

Estndar 3 10000 2.438

Tabla 2. Concentracin de protenas totales en hojas nuevas y viejas del

control y el tratamiento (longitud de onda 600nm)

PROTEINAS TOTALES

Absorbancia Concentracin (mg/ml)

Control Tratamiento Control Tratamiento
Hojas Hojas Hojas Hojas Hojas Hojas Hojas viejas Hojas
viejas nuevas viejas nuevas viejas nuevas nuevas
 1 0.149 0.286 0.157 0.249
427.9 992.6 460.8 840.1
2 0.145 0.175 0.241 0.187
411.4 535 807.1 584.5
3 0.285 0.657 0.497 0.256
988.5 2521.8 1862.3 868.9

Tabla 3. Tamaos de la planta, Largo-Ancho (cm), y necrosis radicular

% NECROSIS RADICULAR LARGO (cm) ANCHO (cm)

Control Tratamiento Control Tratamiento Control Tratamiento

0% 0% 22.7 10.1 21.9 12.2
0% 0% 5.5 11.2 33 9.5
0% 0% 6 16 15 7
0% 0% 12.5 6 19 15
0% 0% 2.8 12 14 9
0% 0% 8.5 10.4 14 11

Tabla 4. rea foliar de la muestra y el tratamiento de la Solarum Lycopersicum

Tamao (rea foliar-cm2 )

Control Tratamiento
181.5 112
26.4 540
37.5 550
39.2 476

Tabla 5. Peso hmedo y seco de la raz y ramas de la especie de tomate Solarum Lycopersicum

Peso Hmedo Raz (g) Peso Hmedo Ramas (g) Peso Seco Raz (g) Peso Seco Ramas (g)
Control Trat. Control Trat. Control Trat. Control Trat.
0.714 0.2 3.065 1.7 0.290 0.1262 0.575 0.4618
0.763 0.2 3.382 1.9 0.307 0.0502 0.609 0.4458
0.289 0.5 0.862 3.1 0.081 0.2405 0.15 0.7773
0.637 0.1 1.598 0.9 0.150 0.1248 0.248 0.2167

Tabla 6. Peso total (seco y hmedo) del control y tratamiento. Variacin en porcentaje

Peso Total Hmedo (g) Peso Total Seco (g) Variacin (%)
Control Tratamiento Control Tratamiento Control Tratamiento
3.779 2.1 0.865 0.588 22.89 28
4.145 2.4 0.916 0.496 22.1 20.7
1.151 3.8 0.231 1.018 20.1 26.8
2.235 1 0.398 0.3415 17.8 34.15
Tabla 7. Promedios en la concentracion de porteinas totales en las hojas viejas del control (1)
y del tratameinto (2)

Tabla 8. Diferencia no significativa de concentracion de proteinas totales en las hojas viejas del
control y del tratamiento

Tabla 9. Promedio de concentracion de proteinas totales en las hojas nuevas del control(1) y
tratameinto (2)

Tabla 10. Comparacion de diferencias significativas enntre las hojas nuevas del control y del
tratamiento en cuanto a concentracion de proteinas totales
Tabla 11. Significancia entre las protenas de las hojas nuevas y viejas del
control

Tabla 12. Significancia de las protenas de las hojas nuevas y viejas del
tratamiento

Tabla 13. Significancia entre el largo de la raiz control y la del tratamiento

Tabla 14. Significancia entre el ancho de la raiz control y el tratamiento

Tabla 15. Diferencia entre el area foliar del tratamiento con el control de la planta
Tabla 16. Comparacion de peso total humedo de la planta control con la planta tratamiento

Tabla 17. Relacin entre el peso humedo de la raiz y el tallo de la planta con tratamiento

Tabla .18 Correlacin del Control en cuanto a la concetracion de proteinas totales y las demas

variables medidas.
Tabla 19. Correlacin entre las proteinas totales de las hojas nuevas y viejas del tratameinto
con respecto a las variambles medidas.