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Presentacin
Susana Rodriguez
Periodista.
Experta en temas de Educacin
Texto
Diego Martnez Caro
Profesor Emrito de Cardiologa.
Universidad de Navarra
1
Autor: Diego Martnez Caro
Editor: Diego Martnez Caro
Depsito Legal: PM 2815-2008
ISBN: 978-84-612-8083-4
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PRESENTACIN
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investigaciones. Los pensadores basan sus afirmaciones en la
experimentacin y, ya entonces, los avances tecnolgicos facilitan
su labor.
El tiempo pasa inexorable, pero va dejando una estela de
brillantes cientficos, personas curiosas que dedicaron su vida a
dar respuesta a las preguntas que todos nos hacemos.
En la actualidad, ciencia y tecnologa estn indisolublemente
unidas. No hay ciencia sin tecnologa, ni tecnologa sin ciencia.
Dos brazos de un mismo cuerpo. De hecho, la ciencia aparece en
la propia definicin de tecnologa: Conjunto de teoras y de
tcnicas que permiten el aprovechamiento prctico del
conocimiento cientfico. La tecnologa sirve para satisfacer
necesidades elementales y para hacer avanzar a la humanidad. Se
mire donde se mire, nada funciona sin tecnologa.
En los ltimos tiempos, los avances cientficos, especialmente los
que se refieren a la medicina, son tan rpidos e impresionantes
que apenas tenemos tiempo de asimilar uno cuando ya hay otro
descubrimiento en las portadas de todos los medios de
comunicacin. Porque la ciencia, adems, est ahora al alcance de
todo el mundo. Los cientficos han abandonado las aulas de las
universidades para explicar a pie de calle en qu consiste su
trabajo y para qu sirve eso a lo que llevan varios aos dedicados.
Los cientficos han conseguido desarrollar la tcnica para
recomponer miembros amputados, han logrado que cncer no
siempre sea sinnimo de muerte, han presentado impresionantes
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avances en prevencin y enfermedades que hasta hace pocos aos
tenan una mortalidad elevada, se han convertido ahora en
enfermedades crnicas que permiten a los pacientes hacer una
vida prcticamente normal.
Sin embargo, uno de los avances ms impresionantes de los
ltimos aos es, sin duda, el relacionado con la investigacin de
clulas madre. Estas clulas parecen guardar el secreto de la
salud, ser capaces de resolver situaciones tan graves como las
dolencias cardiacas, el Parkinson, el Alzheimer, el sndrome de
Down, la esclerosis lateral amiotrfica, y un largo etctera. Sin
duda, no son la panacea, pero suponen un paso de gigante en la
consecucin de terapias que, definitivamente, otorguen una mejor
calidad de vida a una poblacin que est consiguiendo vivir cada
vez ms aos.
En contra de lo que pueda parecer, la investigacin con clulas
madre se remonta a mediados del siglo XIX, cuando un grupo de
cientficos descubrieron que algunas clulas de la mdula sea
podan generar otro tipo de clulas de estirpe diferente a la suya.
Pero no fue hasta los primeros aos del siglo XX cuando se
descubrieron las primeras clulas madre reales, al descubrir que
algunas clulas podan generar clulas sanguneas.
Los estudios avanzaban tmidamente, porque los cientficos
todava no tenan muy claro cules podan ser las aplicaciones de
esas clulas. En 1963 los doctores Ernest A. McCulloch y James
E. Till describen por primera vez, de manera documentada, la
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actividad autoregenerativa de las clulas seas de un ratn
trasplantado. Ser entonces cuando comience la bsqueda de
clulas madre en animales y en seres humanos.
Los aos entre 1980 y 1990 fueron cruciales por la introduccin
de tcnicas que permitieron analizar y alterar el material gentico.
El descubrimiento de mtodos para reproducir clulas humanas en
el laboratorio abre las puertas a la bsqueda de clulas madre
humanas.
Desde entonces, cada ao se publican aproximadamente 2.000
artculos cientficos sobre clulas madre embrionarias y adultas.
Las primeras estn todava sometidas a ensayos experimentales,
pero las adultas ya se utilizan en tratamientos para un centenar de
enfermedades, como la leucemia, el sndrome de Hunter o
problemas cardiacos.
La historia no se detiene. Ahora, el objetivo es conseguir
desarrollar en el laboratorio, a partir de clulas madre, tejidos y
rganos que puedan reparar o sustituir a los daados o enfermos.
La leucemia fue la primera enfermedad que se intent curar con
clulas madre. En 1956, el doctor Edward Donnall Thomas
trasplant clulas madre adultas a un paciente con leucemia, que
se cur por completo. La leucemia se considera un cncer de la
sangre que se desarrolla en la mdula sea, donde se producen las
tres clulas principales de la sangre: Los glbulos blancos, que
luchan contra la infeccin, los glbulos rojos, que transportan el
oxgeno, y las plaquetas, que intervienen en la coagulacin de la
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sangre. Cuando un nio tiene leucemia, la mdula sea, por
razones que an se desconocen, comienza a fabricar glbulos
blancos que no maduran correctamente, pero que continan
reproducindose. Las clulas normales sanas nicamente se
reproducen cuando hay suficiente espacio para ellas. El cuerpo
puede regular la produccin de clulas al enviar seales para parar
dicha produccin. Cuando se sufre de leucemia, dichas clulas no
responden a las seales de cesar la reproduccin, aunque ya no
haya espacio para ellas.
Estas clulas anormales se reproducen muy rpidamente y no
funcionan como glbulos blancos sanos, cuya tarea es combatir
las infecciones. Cuando los glbulos blancos inmaduros, llamados
blastos, comienzan a desplazar a las clulas sanas de la mdula
sea, el nio experimenta los sntomas de la leucemia
(infecciones, anemia, sangrado). El doctor Donnall Thomas vea
cmo la enfermedad acababa con la vida de sus pacientes y, junto
con su equipo, comenz a investigar con la posibilidad de utilizar
las clulas madre para acabar con la leucemia. El objetivo del
tratamiento es lograr la remisin completa de la enfermedad,
erradicarla de la mdula sea mediante quimioterapia y, despus,
introducir nuevas clulas madre que restablezcan la funcin
normal de la mdula sea.
Sin embargo, el camino hasta el xito no fue corto ni sencillo.
Unos aos antes, a principios del siglo XX, varios mdicos
intentaron administrar va oral materia sea a pacientes con
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anemia o leucemia. La terapia no funcionaba. Comenzaron
entonces, en el laboratorio, los primeros ensayos con ratones a los
que se les administraba en sangre clulas de la mdula sea de
otros ratones. La tcnica no se experiment en seres humanos
hasta que un mdico francs hizo un importante descubrimiento
sobre el sistema inmunitario: En 1958, Jean Dausset, que aos
ms tarde consigui el Premio Nobel de Medicina, identific el
primero de muchos antgenos histocompatibles humanos. Esas
protenas, halladas en la superficie de ms clulas en el cuerpo, se
denominaron antgenos leucocitarios o antgenos HLA. Su
funcin es dar al sistema inmune la capacidad de determinar qu
protenas pertenecen a un organismo y cules no. Si el cuerpo no
reconoce las series de antgenos de las lneas de clulas, crea
anticuerpos para destruirlas.
La mdula sea trasplantada entre gemelos idnticos garantiza la
compatibilidad completa de HLA entre donante y receptor.
Precisamente estos trasplantes entre gemelos fueron los primeros
xitos en humanos.
En 1960 se hall por fin la forma de realizar trasplantes entre
gemelos no idnticos, y en 1973 se realiz el primer trasplante de
mdula sea entre personas no emparentadas. Fueron necesarios
siete trasplantes hasta conseguir el xito, pero hoy en da, si se
consigue un donante compatible, los trasplantes de mdula sea
prcticamente garantiza la curacin en enfermedades hasta ahora
mortales.
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En 1990, E. Donnall Thomas y Joseph E. Murray consiguieron el
Premio Nobel de Medicina por su contribucin al descubrimiento
de los mecanismos de compatibilidad en los trasplantes de
rganos.
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Las potenciales aplicaciones de terapias con clulas madre para
paliar determinadas enfermedades son muchas y muy
interesantes. Hay aplicaciones realmente esperanzadoras y
efectivas, como las destinadas a curar la leucemia o a reparar
rganos daados. En otras ocasiones, sin embargo, las terapias
con clulas madre no han conseguido los efectos esperados, e
incluso se han convertido en tumores. Sin embargo, preferimos
centrarnos ahora en algunas de las terapias ms interesantes, bien
porque se trata de enfermedades que afectan a un nmero
importante de personas, como la diabetes o el sndrome de Down,
o bien porque los ensayos se encuentran ya muy avanzados y los
resultados son extraordinarios.
En el caso de la diabetes infantil, por ejemplo, se estn realizando
ensayos que permitirn cultivar en el laboratorio clulas madre
que reparen las clulas pancreticas daadas que producen esta
enfermedad. La diabetes infantil es una enfermedad causada en la
mayor parte de los casos por un proceso autoinmune, es decir, las
clulas del sistema inmunitario atacan las mismas clulas que
deberan proteger; es decir, las clulas del propio cuerpo.
En cuanto a la regeneracin de tejidos, los avances en este campo
son muy importantes. Hasta el momento se ha conseguido
construir vlvulas cardiacas mediante su cultivo en el laboratorio,
en un armazn biodegradable. Ya se han implantado en animales
con xito, y parece prximo el momento de comenzar los ensayos
con humanos.
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La esclerosis lateral amiotrfica (ELA, en sus siglas en ingls) es
una grave enfermedad degenerativa de tipo neuromuscular por la
cual las neuronas motoras disminuyen gradualmente su
funcionamiento y mueren, provocando una parlisis muscular
progresiva de pronstico mortal, pues en sus etapas avanzadas los
pacientes sufren parlisis total. En la ELA, las funciones
cerebrales no relacionadas con la actividad motora, esto es, la
sensibilidad y la inteligencia, se mantienen inalteradas. La ELA se
conoce tambin con el nombre de Enfermedad de Lou Gehrig o
de Stephen Hawking. Ludwig Heinrich Gehrig fue un jugador de
bisbol estadounidense nacido el 19 de junio de 1903 en New
York y fallecido el 2 de junio de 1941 en esta misma ciudad. Es
conocido principalmente por el rcord de 2.130 juegos
consecutivos jugados, que se mantuvo durante 56 aos, y por su
trgico final debido a la ELA, enfermedad degenerativa que desde
entonces lleva su nombre. Desde que le fue diagnosticada la
enfermedad, en junio de 1938, hasta su fallecimiento en junio de
1941, se dedic a trabajar con chicos con problemas en New
York. Por su parte, Stephen William Hawking (Oxford, 8 de
enero de 1942) es un fsico, cosmlogo y divulgador cientfico del
Reino Unido. Es el actual titular de la Ctedra Lucasiana de
Matemticas (Lucasian Chair of Mathematics) de la Universidad
de Cambridge y es miembro de la Real Sociedad de Londres, de
la Academia Pontificia de las Ciencias y de la Academia Nacional
de Ciencias de Estados Unidos. Entre las numerosas distinciones
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que le han sido concedidas, Hawking ha sido honrado con doce
doctorados honoris causa y ha sido galardonado con la Orden del
Imperio Britnico (grado BCE) en 1982, con el Premio Prncipe
de Asturias de la Concordia en 1989 y con la Medalla Copley en
2006. Y todo ello a pesar de padecer ELA desde los 21 aos.
Entonces, los mdicos le pronosticaron que apenas vivira 2 3
aos. Sin embargo, ha conseguido sobrevivir hasta ahora, y
desarrollar una impresionante carrera cientfica. Pues bien, en esta
enfermedad, tan incapacitante se est intentando la reposicin de
las neuronas motoras afectadas por otras sanas, obtenidas a partir
de clulas madre pluripotentes.
La Enfermedad de Parkinson est siendo objeto de un gran
nmero de ensayos. Las clulas reprogramadas son la esperanza
para esta enfermedad. Ya se ha comprobado que esta tcnica
reduce los sntomas del Parkinson en ratas. En este caso, la terapia
se aplica con clulas obtenidas de tejido fetal y de la piel.
Por otra parte, en el caso de la reparacin de vas nerviosas, se
estn realizando investigaciones que intentan restaurar la mdula
espinal daada en lesiones traumticas mediante implantes de
oligodendrocitos fabricados a partir de clulas madre. Los
experimentos con ratas son muy esperanzadores. Ratas con la
columna vertebral seccionada, tratadas con clulas madre, han
conseguido, primero, mover sus patas traseras y, despus,
recuperar el movimiento, aunque con cierta cojera. Ahora son
muchas las personas y asociaciones, como la Christopher Reeves
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Foundation, que esperan impacientes las pruebas con seres
humanos. Sin embargo, es importante resaltar que, en los ensayos
con ratas, se ha comprobado que los animales slo vuelven a
caminar cuando se inicia el tratamiento menos de una semana
despus de producirse la herida, ya que las clulas madre no
tienen capacidad para reparar cicatrices. Cuando se esperan diez
meses para iniciar el tratamiento, las ratas no recuperan la
movilidad.
No podemos terminar sin citar el Sndrome de Down. Hace ya
ms de 70 aos que comenzaron los ensayos clnicos para tratar
enfermedades genticas como el Sndrome de Down, el retraso
mental, la parlisis cerebral, etc., mediante el trasplante de clulas
madre. El doctor F. Schmid ha tratado genticamente mediante el
trasplante de clulas madre a 3.000 nios y nias con Sndrome
de Down. Los trasplantes se realizaron en todos los casos a
edades muy tempranas, inmediatamente despus del diagnstico,
y en el propio tero. Adems, a edades tempranas no es necesario
implantar clulas madre directamente en el cerebro, ya que se ha
comprobado que, tras una aplicacin sistmica (intravenosa), el
cerebro atrae las clulas madre que le pertenecen. Los resultados
son alentadores: El 25% de los nios tratados consiguieron
superar sus estudios en colegios normalizados. El porcentaje de
nios con Down, de entre 3 y 5 aos, con un desarrollo mental de
unos 50 puntos, se increment un 17% antes del primer
tratamiento, el 58% despus del primer tratamiento y un 71% tras
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el segundo tratamiento. Por otra parte, el Cociente Intelectual de
nios de 4 a 9 aos, que tenan un CI situado entre 25 y 49
puntos, se situ de 50 a 69 puntos. Con los tratamientos con
clulas madre disminuye la hiperactividad, aumenta la
concentracin y mejora la pronunciacin.
El texto que sigue es un ensayo sobre las clulas madre, que tiene
como objetivo que personas sin conocimientos cientficos previos
descubran el mundo de las clulas madre, qu son, cmo se crean
y qu son capaces de hacer. Es un mundo asombroso, lleno de
puertas todava por abrir, que ha llevado a miles de cientficos de
todo el mundo a dedicar su vida a la investigacin. Y todo, con
una sola meta: mejorar el presente y el futuro del ser humano. Son
muchas las personas que tienen puestas sus esperanzas en las
investigaciones con clulas madre, enfermos que esperan mejorar
con tratamientos que hoy todava parecen de ciencia ficcin pero
que, gracias al tesn de mdicos y cientficos, son ya una realidad.
Este libro quiere tambin que los estudiantes de Secundaria y
Bachillerato se acerquen sin temor a la ciencia. Al explicar con
trminos accesibles los entresijos de la investigacin, pretende
abrir las puertas de los laboratorios a cientficos que todava no
han descubierto su vocacin y que, quien sabe, quizs la
encuentre en estas pginas.
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LAS CLULAS MADRE
Hay en Biologa un principio que dice que todas las cosas vivas
son celulares o, como escribe Harold J. Morowitz1, la nica
vida que conocemos es celular. Lynn Margulis2 lo expresa de
otro modo afirmando que las unidades de vida son las clulas.
Al ser toda vida celular, como slo lo vivo transmite vida, toda
clula debe proceder siempre de otra clula viva. Desde el origen
de las primeras clulas vivas, todo ser vivo celular procede, pues,
de otro ser vivo por lo que la vida desde su origen es un continuo
que no se ha interrumpido y, hasta ahora, ha sido inmortal.
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que es la nica realidad unicelular totipotente, es decir, capaz de
originar cualquiera de los tipos de clulas presentes en el
organismo. Por ello se dice de ella que es una clula
completamente indiferenciada. El cigoto se divide
progresivamente, primero en dos clulas (que ya son desiguales
entre s y desiguales tambin respecto al cigoto del que proceden)
cada una de stas en otras dos y as sucesivamente.
De las clulas madre de cada una de las tres capas derivan los
tejidos que van a formar los diversos rganos. As, del
mesodermo derivan, entre otros, tejidos como el conjuntivo
(incluyendo hueso y cartlago), los msculos, el tejido cardaco y
vascular, el sistema urogenital, el tejido linftico, la mdula sea
y la sangre; del endodermo deriva el tiroides y las paratiroides, el
timo, la laringe, la trquea y los pulmones con su revestimiento
interno, el revestimiento intestinal, el hgado, el pncreas, la
vejiga, la vagina y la uretra; del ectodermo deriva la piel, el tejido
nervioso, la mdula suprarrenal, la hipfisis, los ojos y los odos.
Podemos afirmar, por tanto, que las clulas madre representan el
origen o la fuente normal de todo lo que constituye el ser vivo.
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capacidad de reproducirse en otras, iguales a s mismas (son
autorenovables), un grado mayor o menor de indiferenciacin
que les permite originar varios tipos de clulas especializadas de
un tejido concreto (heptico, sanguneo, etc.), ya diferenciado.
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El cultivo de algunas de estas clulas, obtenidas generalmente tras
la destruccin de embriones creados mediante fecundacin in
vitro, permite su desarrollo y multiplicacin en el laboratorio para
obtener de ellas casi cualquier tipo de clula del organismo, como
veremos ms adelante.
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progresivamente se pliega, se torsiona y crece dando lugar a una
estructura formada por las tres capas germinales, con una cabeza
reconocible y una cavidad central, que formar el intestino. La
capa ms interna es el endodermo del que derivar el
recubrimiento del intestino y los rganos asociados, como el
pncreas y el hgado. Las clulas de la capa media, el mesodermo,
formarn casi todos los rganos (msculos, huesos, corazn,
riones) y todo el tejido conjuntivo que los sustenta y los rodea.
Las clulas de la capa ms externa, el ectodermo, formarn la piel
y el cerebro.
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De estas clulas madre no embrionarias, las ms conocidas son
las hematopoyticas, que se encuentran en la mdula sea y
fabrican de manera fisiolgica las clulas de la sangre (clulas
rojas o hemates y clulas de la serie blanca o leucocitos), las
clulas madre epidermales, que renuevan o reparan la capa
externa de la piel, las clulas madre epiteliales que renuevan
continuamente el recubrimiento intestinal y aquellas que permiten
el crecimiento de los msculos esquelticos. Las clulas madre
neurales son capaces de originar nuevas neuronas y clulas de
sostn del tejido nervioso. Recientemente se han descubierto en
los pulmones de adultos normales, clulas madre
broncoalveolares que renuevan el recubrimiento de algunas
partes del pulmn.
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clulas circundantes que les envan mensajes o los reciben de
ellas. En este ecosistema influyen factores diversos, como pueden
ser la temperatura ambiente, el hecho de que estn adheridas a
algo o floten libremente, etc. Todo ello ayuda a las clulas madre
a mantener sus propiedades de autorenovacin, mediante
divisiones controladas, las dirige hacia donde es necesario que
estn presentes o las gua en su diferenciacin en clulas
especializadas tanto en el embrin en desarrollo como en el
individuo adulto. Las lesiones de diversos tipos que se pueden
producir localmente en los tejidos, influyen en las condiciones del
ecosistema y son uno de los principales estmulos que ponen en
marcha la diferenciacin de las clulas madre presentes en los
tejidos para convertirse en otras ms especializadas. Hasta llegar a
la plena diferenciacin, las clulas madre necesitan recorrer un
camino en el que se producen varias divisiones intermedias. En
algn punto de este recorrido estos grupos de clulas pierden la
capacidad de seguir manteniendo junto a ellas a un cierto nmero
de clulas indiferenciadas de reserva y se convierten entonces
en las llamadas clulas progenitoras.
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Cules son las aplicaciones cientficas de las Clulas madre?
La Medicina Regenerativa.
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Mucho ms reciente es el inters que ha despertado en el campo
mdico la posibilidad de utilizar el potencial de las clulas madre
para conseguir la reparacin de la estructura y/o funcin de
tejidos u rganos del cuerpo humano, afectados por lesiones o por
enfermedades. Las aplicaciones mdicas de este potencial
reparador constituye el ncleo fundamental de la Medicina
Regenerativa10. El fundamento de la Medicina Regenerativa
radica, por una parte, en el reconocimiento de que muchos tejidos
del organismo van perdiendo, con el transcurso del tiempo, parte
de su masa celular necesaria para el desarrollo de su funcin,
siguiendo generalmente un proceso conocido como apoptosis o
muerte programada. En otros casos, determinadas agresiones
externas producen a travs de mltiples mecanismos, la
destruccin celular mediante necrosis. En ambas situaciones, el
organismo intenta reponer, total o parcialmente, las clulas
perdidas.
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tejidos del organismo se van circunscribiendo progresivamente
dentro de lmites cada vez ms estrechos hasta llegar a definir el
tipo de clula especfica de cada tejido del organismo.
Histricamente slo se reconoca la presencia en el ser humano
adulto de unos pocos tipos de clulas madre o troncales, con un
repertorio de diferenciacin muy limitado, cuya misin se reduca
prcticamente a la reposicin de clulas de sus tejidos de origen.
Este sera el caso de las clulas madre hematopoyticas,
productoras de las clulas sanguneas, el de las clulas madre
gastrointestinales que mantienen la regeneracin de la mucosa
intestinal, el de las responsables de la regeneracin de la capa
drmica de la piel o el de las precursoras de las clulas germinales
(espermatogonias y ovogonias).
De lo dicho hasta aqu resulta obvio que antes de que ciertos tipos
de clulas madre se puedan usar para el tratamiento de pacientes,
se deber conseguir de ellas que:
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Ensayos de Medicina Regenerativa en el ser humano
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Las clulas mesenquimales (llamadas tambin estromales) se
encuentran tambin en la mdula sea, procedentes del
mesodermo embrionario. Aadiendo a los cultivos determinadas
hormonas y otros ingredientes, las clulas mesenquimales se han
podido diferenciar como clulas neurales, drmicas, musculares,
seas, cartilaginosas o adiposas. Algunos de estos tipos celulares
se estn ensayando en estudios clnicos de pacientes con
enfermedades hepticas o cardacas, intestinales como la
enfermedad de Crohn, entre otras. A partir de las clulas
mesenquimales procedentes de la mdula sea se pueden obtener
tambin, con condiciones apropiadas de cultivo, clulas
musculares con las propiedades y funciones de los msculos
esquelticos.
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Otra fuente para la obtencin de clulas madre no embrionarias es
el cordn umbilical. La mayora de las clulas que se pueden
obtener del cordn umbilical tras el parto son del tipo de las
clulas hematopoyticas, anlogas a las de la mdula sea, y se
usan para tratamiento de leucemias. Como proceden de recin
nacidos que tienen un sistema inmunitario inmaduro, son menos
propensas al rechazo por parte del receptor. Junto a esta ventaja
presentan el inconveniente de que no son muy numerosas,
problema que podr ser resuelto si se consigue su multiplicacin
en cultivos previos a su empleo.
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Regeneracin cardaca
La regeneracin cardiaca es uno de las reas de la Medicina en la
que se han realizado mayor nmero de ensayos. La experiencia
acumulada, adems de constatar su seguridad, ha demostrado que
aumenta el riego miocrdico y el rendimiento contrctil en
pacientes con infarto agudo de miocardio, enfermedad coronaria
avanzada y fallo cardaco crnico. Esta eficacia justifica su
empleo, la multiplicacin de los esfuerzos para mejorar estos
resultados y la realizacin de estudios ms controlados y amplios.
Las clulas sobre las que existe mayor experiencia son las clulas
satlites o mioblastos esquelticos y las clulas madre derivadas
de la mdula sea.
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racimos, semejantes a los islotes pancreticos, por lo que se
sugiri la posibilidad de regenerar de esta forma el pncreas
endocrino, afectado en la diabetes21. Sin embargo, trabajos
posteriores han mostrado que estas clulas embrionarias, ms que
producir insulina lo que hacan era tomar y concentrar la insulina
presente en el medio de cultivo y cederla posteriormente al animal
en el que haban sido trasplantadas. Adems, el modelo animal de
diabetes que se haba utilizado tampoco era el ms adecuado para
extrapolar los resultados a la diabetes humana22.
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Cmo se obtienen las clulas para su utilizacin en la
Medicina Regenerativa?
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1 - Obtencin de clulas embrionarias a partir del cultivo de
clulas de la masa celular interna extrada tras la destruccin de
embriones, en fase de blastocistos, obtenidos por procedimientos
de fecundacin in vitro.
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problemas que, naturalmente, exigen su resolucin antes de que se
pueda realizar su aplicacin en el ser humano.
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logrado aislar retienen la expresin gentica correspondiente a
varias lneas celulares, a pesar de haberse empleado factores de
crecimiento especficos.
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la terapia previa con frmacos inmunosupresores que no est
exenta de complicaciones. Para obviar o, al menos, disminuir la
inmunosupresin, existe la posibilidad de atenuar la
inmunogenicidad de las propias clulas madre.
41
indica que cultivando en determinadas condiciones clulas madre
embrionarias de ratn se pueden conseguir unas clulas similares
a vulos. Estos vulos podran recibir, tras ser enucleados, la
transferencia de ncleos de clulas procedentes de un potencial
receptor30. Esto permitira, adems de reducir la necesidad de
donaciones de vulos, generar clulas madre especficas del
mismo paciente que no seran rechazadas por su sistema
inmunolgico.
43
Mtodos alternativos para la obtencin de clulas humanas
pluripotentes
44
1. Potenciacin de clulas madre autctonas
Clulas hematopoyticas de la mdula sea
Clulas progenitoras cardiacas
Clulas progenitoras endoteliales, miocrdicas o de msculo
liso
Clulas epicrdicas adultas
Clulas madre hepticas, clulas ovales hepticas
45
1. Potenciacin de clulas madre autctonas
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Clulas progenitoras tejido-especficas movilizadas hacia el torrente
circulatorio
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Segn estos datos, parece que en el corazn adulto se mantiene un
reservorio de clulas no diferenciadas que cuando, por diversas
causas, se produce una sobrecarga del miocardio o ste se daa,
permiten una cierta renovacin del miocardio y la sustitucin de
porciones daadas por tejido funcionalmente competente. La
demostracin experimental de este hecho, abre oportunidades
para la posible utilizacin teraputica de estas clulas para
regenerar el miocardio daado.
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A partir de clulas madre autctonas se pueden originar clulas
miocrdiacas y vasculares
50
vasos tras la produccin de lesiones cardacas41. Segn se ha
demostrado recientemente, el epicardio postnatal contiene una
poblacin de clulas madre que retienen la capacidad de generar
precursores miocrdicos y vasculares 42.
51
diferencias en el tamao del infarto, los volmenes ventriculares y
la fraccin de eyeccin 43.
53
Estas clulas madre pueden multiplicarse en su estado
indiferenciado para, posteriormente, ser dirigidas a la formacin
de una amplia variedad de tejidos representativos de las tres capas
germinales (clulas nerviosas, precursoras de hgado y pncreas,
de msculo esqueltico, adiposas, seas o vasculares). Su
aplicacin en el propio sujeto del que proviene el cordn,
representa un autotrasplante, exento de cualquier problema de
incompatibilidad inmunolgica. Con las medidas pertinentes,
anlogas a las utilizadas en los trasplantes de rganos, pueden ser
utilizadas tambin en otros sujetos distintos del donante. Las
caractersticas favorables de este tipo de clulas ha propiciado el
establecimiento en muchos pases de bancos de sangre de cordn
umbilical.
Cultivo de espermatogonias
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clulas pluripotentes identificables mediante los marcadores de
las clulas madre. Estas clulas, denominadas clulas madre
germinales multipotentes o clulas mGS, son similares a las
clulas madre embrionarias tanto en su morfologa como en la
capacidad de proliferacin. La principal dificultad tcnica que
presenta su manejo es la baja eficiencia de su obtencin, ya que
para conseguir una nica lnea celular los autores de un estudio
necesitaron utilizar testculos de 30 animales. Las experiencias
iniciales han sido complementadas ms recientemente por Guam
y cols., quienes han sido capaces de obtener clulas madre
pluripotentes similares a las embrionarias a partir de testculos de
ratones adultos. Manipulando el medio de cultivo han conseguido
inducir el desarrollo de espermatozoides45,46. Es evidente que el
potencial empleo de estas clulas para terapia regenerativa slo
sera posible en pacientes del sexo masculino. No obstante,
tambin se han identificado clulas madre en ovarios de ratonas y
de mujeres.
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MAPC es precisamente su capacidad diferenciadora. Al sustituir
en los cultivos el medio de expansin por medio de diferenciacin
se puede inducir en estas clulas su diferenciacin hacia tejidos de
las tres capas embrionarias. Cuando se inyectan las clulas MAPC
en un blastocisto temprano, se pueden diferenciar en tipos
celulares especficos en respuesta a seales proporcionadas por
diferentes rganos.
57
de fertilizacin in vitro para lo que se conoce como diagnstico
gentico preimplantatorio, se podran realizar cultivos de clulas
embrionarias pluripotentes.
58
La partenognesis es el procedimiento mediante el cual un vulo
puede dar lugar a un embrin en ausencia de un espermatozoide
54
.
59
embriones producidos nunca sern viables y no existran
inconvenientes para su destruccin con el fin de obtener las
clulas55. De hecho, David Wininger, de la empresa
biotecnolgica Stemron de Maryland, ha llegado a producir
embriones humanos partenogenticos hasta el estadio de
blastocisto, de los que obtuvo clulas embrionarias que llegaron a
sobrevivir unos pocos das.
60
As, pues, primero se altera el genoma nuclear y despus se
transfiere este ncleo a un vulo enucleado, creando un autntico
artefacto no embrionario, cuyo citoplasma reprograma el vulo a
un estado pluripontente. (De ah la denominacin ANT-OAR:
altered nuclear transfer-oocyte associated reprograming). La idea
en este caso no es la de crear un artefacto biolgico del que
obtener clulas embrionarias, sino la de producir directamente, sin
intermediarios y desde el inicio, clulas embrionarias
(pluripotentes). Los blastocistos producidos mediante esta
transferencia nuclear anormal, presentan una modificacin
epigentica que afecta al patrn de expresin gentica desde su
inicio, carecen de la unidad y del potencial de desarrollo de un
embrin, carecen de trofoblasto y, por ello, son incapaces de
implantarse en el tero mientras que s son capaces de generar
clulas pluripotentes.
61
5. Creacin de clulas pluripotentes mediante reprogramacin
62
pluripotentes: se diferenciaron en los cultivos como cuerpos
embrioides, formaron teratomas en ratones con inmunidad
comprometida e incluso llegaron a formar manchas de cabello en
animales normalmente calvos.
63
Dos maneras de obtener clulas madre. A la izquierda, mediante
transferencia nuclear alterada por reprogramacin del ncleo donante. A
la derecha, mediante reprogramacin directa de clulas somticas.
66
Segn Yamanaka, el papel de los cuatro factores de transcripcin
en la induccin de las clulas iPS se puede esquematizar
tentativamente de la siguiente manera: la expresin del gen c-Myc
induce en las clulas un cambio en la estructura de la cromatina
que tiene un doble efecto: la tendencia a la inmortalidad y la
posibilidad de conversin de las clulas en tumorales.
67
Antes de los trabajos de Yamanaka, tres de los factores, Oct4,
Sox2 y c-Myc, ya eran conocidos como importantes para la
pluripotencia. En la actualidad estn apareciendo nuevos factores
de pluripotencia y su lista se sigue ampliando. Sin embargo, para
Thompson, resulta sorprendente que un nmero relativamente
pequeo de factores puedan producir un cambio tan dramtico.
68
embriones, resulta especialmente fcil obtener fibroblastos Seis
meses despus de obtenerse las primeras clulas embrionarias
humanas exista tan solo una docena de laboratorios trabajando
con ellas, mientras que medio ao despus de obtenerse las
clulas iPS, hay miles de laboratorios que las trabajan y obtienen
cada uno multiples lneas celulares. As como existen tan solo
algunos cientos de lneas de clulas embrionarias, se han
obtenido ya grandes cantidades de lneas celulares iPS Estas
clulas pueden llegar a cambiar la Medicina humana porque
cambian la va de acceso al cuerpo humano ahora se pueden
estudiar por primera vez, algunos tipos de clulas y tejidos que
antes eran difciles de obtener y ahora se consiguen en
cantidades ilimitadas
Ian Wilmut, creador de la oveja Dolly con James Thomson uno de los
padres de la reprogramacin
70
Un grupo investigador ingls (Cambridge) ha conseguido
demostrar que los requerimientos para la deprogramacin y
reprogramacin son menores en clulas somticas manipuladas
mediante sustancias inhibidoras, presentes en sangre leucmica69,
con lo que mejoran notablemente la eficiencia.
71
72
GLOSARIO
73
Biopsia. Procedimiento diagnstico que consiste en la extraccin
de una muestra de tejido para examinarla al microscopio o por
mtodos bioqumicos.
74
Clulas diferenciadas. Clulas que poseen las caractersticas
especficas de forma y funcin correspondientes al tejido u rgano
del que forman parte.
75
Clulas madre autctonas. Clulas progenitoras especficas de un
tejido.
76
Clulas mesenquimales. Clulas procedentes del mesodermo
embrionario que se encuentran en la mdula sea y en otros
tejidos. Se llaman tambin clulas estromales.
77
Cigoto. Primera clula resultante de la fusin de un vulo y un
espermatozoide durante la fertilizacin.
78
Desdiferenciacin celular. Proceso por el que se hace retroceder
a las clulas diferenciadas hasta la fase de pluripotencia (ver
clulas pluripotentes).
79
da color a las pupilas, y otra no pigmentada. Ambas contribuyen
de diversa manera a la formacin del humor vtreo y del humor
acuoso de los globos oculares.
80
Fibroblastos. Clulas que forman el tejido conjuntivo.
81
Lnea celular. Una lnea celular de clulas madre es una familia,
procedente de un nico grupo de clulas, que se mantiene
indefinidamente en cultivos en los que se multiplica
constantemente.
82
Neurona. Clula del tejido nervioso.
83
que es lo que constituye su programa epigentico, responsable de
su desarrollo como un organismo vivo que comienza, se
desarrolla y vive, y habr de terminar muriendo. Ese programa es
lo que asegura que dicho organismo pertenece a una especie y es
miembro de una poblacin.
84
Teratoma. Tumor formado por tejidos de las tres capas
germinales de los embriones. Se encuentra habitualmente en los
ovarios y testculos. Se puede producir experimentalmente
inyectando a animales clulas pluripotentes.
85
86
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