Practica 12: Determinacin de Plomo y Cromo por AA a la Llama

I. OBJETIVOS
II. Objetivos Generales
Analizar distintas matrices de agua en los parmetros de Plomo y Cromo
por AA para determinar segn su procedencia si cumple o est dentro de
los Instrumentos de Gestin de Calidad utilizados en el territorio Nacional y
evaluar estadsticamente los resultados.
III. Objetivos Especficos
Determinar de Plomo y Cromo por AA a la Llama en las Matrices de Agua
recolectadas por cada grupo.
Aprender a utilizar el Espectrfometro de Absorcin Atmica Marca Agilet
Modelo 200 Series AA.
Utilizar tcnicas de Digestin adecuadas de acuerdo al Tipo de
Procedencia de la Muestra.
Utilizar los ECA, LMP o VMA segn la procedencia de la muestra y
comparar con los resultados obtenidos en el Laboratorio.
IV. DEFINICIONES
IV.1. Seal de salida: La seal del detector aumenta al mximo algunos segundos
despus de la ignicin y cae rpidamente a cero cuando los productos de
atomizacin salen fuera.
IV.2. Atomizacin en vapor fro: La tcnica de vapor fro solamente aplicable a la
determinacin de mercurio ya que es el nico elemento metlico que tiene una
presin vapor apreciable a temperatura ambiente.
IV.3. Fuentes de radiacin: Los mtodos analticos basados en la absorcin
atmica son potencialmente muy especficos, ya que las lneas de absorcin
atmica son considerablemente estrechas (de 0,002 a 0,0005 nm), y las
energas de transicin electrnica son especficas de cada elemento.
IV.4. Lmpara de ctodo hueco: Una lmpara de ctodo hueco consiste en un
nodo de tungsteno y un ctodo cilndrico cerradas hermticamente en un tubo
de vidrio lleno con nen / argn a una presin de 1 a 5 torr. El ctodo est
constituido con el metal cuyo espectro se desea obtener, o bien, sirve de
soporte para una capa de dicho metal. Una parte de estos tomos se excitan
con la corriente que pasa a travs de ellos y, de este modo, al volver al estado
fundamental emiten su radiacin caracterstica, los tomos metlicos se
vuelven a depositar difundiendo de nuevo hacia la superficie del ctodo o hacia
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las paredes del vidrio. La configuracin cilndrica del ctodo tiende a concentrar
la radiacin en una regin limitada del tubo metlico, este diseo aumenta la
probabilidad de que la redepositacin sea en el ctodo y no sobre la pared del
vidrio.
IV.5. Instrumentos de haz sencillo: Consiste en una fuente de ctodo hueco, un
contador o una fuente de alimentacin de impulsos, un atomizador, un
espectrofotmetro sencillo de red de difraccin y un detector. El haz de luz
proveniente de la fuente pasa directamente a travs de todos los componentes
del instrumento hasta llegar al detector.
IV.6. Instrumentos de doble haz: Bsicamente consta de las mismas partes que el
sistema de haz sencillo, slo que el haz que proviene de la fuente de ctodo
hueco se divide mediante un contador reflejante y un divisor de haz, una mitad
pasa a travs de la llama y la otra es enviada por un paso ptico interno. Los
dos haces se encuentran nuevamente en el mismo camino ptico mediante un
espejo semiplateado o recombinador antes de entrar al monocromador.
IV.7. Monocromadores: Existen diversas combinaciones y distribuciones de los
componentes pticos dentro de un monocromador que buscan optimizar la
calidad del espectro generado. Las ms comunes son las denominadas, prisma
de Nicoll o el de Litrow y Zcerny-Turner para sistemas convencionales con
redes de difraccin hologrficas. Tambin se estn comenzando a utilizar
monocromadores con redes Echelle.
IV.8. Detectores: El detector es el dispositivo encargado de captar la seal ptica
proveniente del monocromador y transformarlo en una seal electrnica capaz
de ser convertida en un valor legible. El ms comn es el fotomultiplicador,
tubo de vaco provisto de placas fotosensibles que recibe los fotones, los
convierte en impulsos electrnicos y multiplica hasta obtener la suficiente
intensidad elctrica. En aos reciente se estn utilizando tambin los
detectores de estado slido CCD, de alta sensibilidad asociados a los
monocromadores Echelle.
IV.9. PRINCIPIO
En la Espectrometra de Absorcin Atmica de Llama, una muestra se aspira
en una llama y atomizada. Un haz de luz se dirige a travs de la llama, en un
monocromador, y sobre un detector que las medidas la cantidad de luz
absorbida por el elemento atomizado en la llama. Para algunos Metales,
absorcin atmica exhibe superiores sensibilidad sobre emisin de llama.
Debido a que cada metal tiene su propia longitud de onda de absorcin
caracterstica, una lmpara de fuente compuesta de ese elemento se utiliza;
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esto hace que el mtodo relativamente libre de interferencias espectrales o

radiacin. La cantidad de energa en la longitud de onda caracterstica
absorbida en la llama es proporcional a la concentracin del elemento en la
muestra durante un intervalo de concentracin limitado. La mayora de los
instrumentos de absorcin atmica tambin estn equipados para funcionar en
un modo de emisin, lo que puede proporcionar una mejor linealidad para
algunos elementos.
IV.10. Equipos
Espectrmetro de Absorcin Atmica ESPECTROFOTOMETRO
AGILENT TECHNOLOGIES 200 SERIES AA Marca Agilet.
Quemador de Aire y Acetileno.
Sistema de gases, abastecimiento de gas Acetileno, grado ultra puro
(99.99%).
Compresor, abastecimiento de oxigeno libre de agua. e. Sistema de
Extraccin.
Lmpara de Ctodo Hueco del Elemento de cromo y plomo.
Plancha de Digestin, Temperatura ajustable capaz de mantener
Temperatura de Operacin de 95C.
Micropipetas: De 0.1mL, 1.0mL, 5.0ml y sus respectivos tipos
descartables.
IV.11. Materiales
Matraces volumtricos, embudos, (vidrio y/o plstico libre de metal).
Pipetas Calibradas (Varios Volmenes). c. Vasos de digestin, de 250
ml.
Frascos de boca angosta para almacenaje, de FEP (fluorinated
ethylene propylene), de 125ml a 1L de capacidad.
Pizeta plstica para lavado de FEP.
IV.12. Reactivos
cido Ntrico Concentrado (sp.gr. 1.41) - HNO3.
Solucin de cido Ntrico al 0.15%: Agregar 1.5ml de HNO3 cc. a una
fiola de 1L y aforar con Agua Ultrapura.
Agua Ultrapura: Agua libre de Metales.
Perxido de Hidrogeno al 10%.
Soluciones Estndar de Calibracin: Solucin Estndar de Cromo de
1000ppm Marca Merck con certificado.
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Solucin Intermedia de Calibracin de 250ppm: Agregar 25ml de Sol.

Estndar de Cromo de 1000ppm, a una fiola de 100ml y aforar con Sol.
de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Cromo1: Agregar 250ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Cromo de 250ppm a una fiola de 100ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Cromo2: Agregar 500ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Cromo de 250ppm a una fiola de 100ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Cromo3: Agregar 1000ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Cromo de 250ppm a una fiola de 100ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin Estndar de Verificacin: Solucin de Cromo de 1000ppm
preparada a partir de una sal de Dicromato de Potasio al 99% de
Pureza en 5ml de cido Ntrico concentrado.
Solucin Intermedia de Verificacin de 250ppm: Agregar 25ml de Sol.
Estndar de Verificacin de Cromo de 1000ppm, a una fiola de 100ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Verificacin: Agregar 250ul de la Sol. Intermedia
de Verificacin de Cromo de 250ppm a una fiola de 100ml y aforar con
Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Soluciones Estndar de Calibracin: Solucin Estndar de Plomo de
1000ppm Marca Merck con certificado.
Solucin Intermedia de Calibracin de 500ppm: Agregar 25ml de Sol.
Estndar de Plomo de 1000ppm, a una fiola de 50ml y aforar con Sol.
de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Plomo 1: Agregar 200ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Plomo de 500ppm a una fiola de 100ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Plomo 2: Agregar 200ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Plomo de 500ppm a una fiola de 50ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Calibracin Plomo 3: Agregar 200ul de la Sol.
Intermedia de Calibracin de Plomo de 500ppm a una fiola de 25ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
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Solucin Estndar de Verificacin: Solucin de Plomo de 1000ppm

preparada a partir de una sal Carbonato de Plomo al 99% de Pureza en
5ml de cido Ntrico concentrado.
Solucin Intermedia de Verificacin de 500ppm: Agregar 25ml de Sol.
Estndar de Verificacin de Plomo de 1000ppm, a una fiola de 50ml y
aforar con Sol. de cido Ntrico al 0.15%.
Solucin de Curva de Verificacin: Agregar 200ul de la Sol. Intermedia
de Verificacin de Plomo de 500ppm a una fiola de 50ml y aforar con
Sol. de cido Ntrico al 0.15%.

V. PROCEDIMIENTOS
V.1. Preparacin de la muestra: preparacin de muestras acuosas- aguas con
turbiedad > 1NTU
Para la determinacin de los Analitos recuperables totales en muestras
acuosas (otras diferentes al agua potable, con turbiedad >1 NTU),
transfiera una alcuota de 100mL (1 mL) de una muestra bien mezclada,
preservada con cido a un beaker de 250mL., Beaker Griffin. (Cuando sea
necesario se pueden usar alcuotas ms pequeas y cidos
proporcionales).
Aadir 5ml de HNO3. Si se utiliza un vaso de precipitacin, cubrir con luna
reloj para minimizar la contaminacin. Esquirlas, cuentas de vidrio, o
grnulos Hengar se pueden aadir para ayudar a ebullicin y reducir al
mnimo las salpicaduras cuando alto niveles de concentracin (> 10 mg / L)
se estn determinando, llevar a una ebullicin lenta y se evapora en un
plato caliente con un volumen posible (aproximadamente 10 a 20 ml) antes
de que ocurra la precipitacin. Continuar calentamiento y la adicin de
HNO3 como sea necesario hasta que la digestin este completa como se
muestra por una solucin de color claro. No dejar que la muestra se seque
durante la digestin.
Lavar el vaso o las paredes y la cubierta de cristal (si utiliza) con agua ultra
pura libre de metal y luego filtrar si es necesario. Transferencia de filtrado a
un matraz aforado de 100ml con dos porciones de 5ml de agua, aadiendo
estos enjuagues al matraz volumtrico. Enfriar, diluir para marcar, y
mezclar bien. Llevar porciones de esta solucin para las determinaciones
de metal requeridos.
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.1. Operacin del instrumento: Segn las condiciones de Operacin para

el Elemento Cobre establecidas en el Procedimiento de Operacin,
Mantenimiento y Uso del Software del Equipo de Absorcin Atmica
ESPECTROFOTOMETRO AGILENT TECHNOLOGIES 200 SERIES
AA Marca Agilet.
.2. Procesamiento de la muestra: Una vez que se tiene el Equipo listo y
el Software con las condiciones establecidas para el Elemento Cobre,
segn el Mtodo de Absorcin Atmica a Llama Aire Acetileno, se
procede a correr las muestras con sus respectivos controles de calidad.
Una vez terminado el proceso de Anlisis se proceder hacer el vaciado
de la informacin.
V.2. Preparacin de la solucin intermedia:

V.3. Preparacin de los estndares de curva de calibracin:

V.4. Determinar curva de calibracin de cromo

Concentracin Promedio
Item Absorbancias
(mg/L) Abs.

1 0.5 0,0384 0,0384

2 1 0,0715 0,0715

3 2 0,1269 0,1269

V.5. Determinar curva de calibracin de cadmio

Concentracin Promedio
Item Absorbancias
(mg/L) Abs.
1 0,1 0,0239 0,0239
2 0,2 0,0447 0,0447
3 0,4 0,1036 0,1036
4 0,8 0,2025 0,2025
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V.6. Determinar curva de calibracin de plomo

Concentracin Promedio
Item Absorbancias
(mg/L) Abs.

1 0.5 0,0184 0,0184

2 1 0,0338 0,0338

3 2 0,0682 0,0682

V.7. Determinacin de cromo por AA

Los resultados obtenidos se reportan con la siguiente frmula:

m = Pendiente
b = Intercepto
R= Coeficiente de Correlacin
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0.14

0.12

0.1

0.08

0.06

0.04
y = 0,0585x + 0,0107

0.02

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5

Concentraci
Promedio
Item Muestras Absorbancias n (mg/L) = Fd Resultado=C(mg/L)
Abs. (A)
[(A- *Fd
b)/m]
1 Agua 0,012 0,012 0,0223 0,4 0,0892
de
Mar
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V.8. Determinacin de cadmio por AA

0.25

0.2

0.15

0.1
y = 0,2583x - 0,0032
0.05

0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1

Concentraci
Promedio
Item Muestras Absorbancias n (mg/L) = Fd Resultado=C(mg/L)
Abs. (A)
[(A- *Fd
b)/m]
1 Agua 0,004 0,004 0,0031 0,4 0,00124
de
Mar
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V.9. Determinacin de plomo por AA

0.08

0.07

0.06

0.05

0.04

0.03
y = 0,0334x + 0,0012
0.02

0.01

0
0 0.5 1 1.5 2 2.5

Concentraci
Promedio
Item Muestras Absorbancias n (mg/L) = Fd Resultado=C(mg/L)
Abs. (A)
[(A- *Fd
b)/m]
1 Agua -0,001 -0,001 -0,1557 0,4 -0,0623
de
Mar
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VI. DISCUSIONES:
La presencia de bajas concentraciones de cromo parece tener importancia
para el metabolismo humano, y que tendra un papel en los factores de
tolerancia a la glucosa. La presencia de altas concentraciones de cromo en
el ambiente, es daina para la salud, ya que causan problemas de cncer
local. La importancia del cromo, desde el punto de vista de sus efectos
sobre la salud, es mayor a la del ambiente, ya que cuando no hay
contaminacin por fuentes antropognicas, las concentraciones
ambientales naturales son muy bajas. En las aguas de las playas de
Salaverry se obtuvo 0.0892 mg/l de cromo. Explica sobre el cadmio en el
mar (Contaminacin del agua con cromo., 2015), que: Su toxicidad
depende del estado de oxidacin y concentracin en que se encuentre,
siendo de especial importancia la eliminacin de cromo hexavalente
presente en los sistemas acuosos, por su reconocido carcter cancergeno.
(1). Este resultado comparado con el DECRETO SUPREMO N004-2017-
MINAM que establece un valor de: 0.05 mg/l sobrepasa los ECA
establecidos por el decreto. Lo que significa un impacto negativo para las
especies marinas y la calidad del agua de mar que se ve afectado
directamente por este metal.
Cadmio es un metal pesado que reacciona con grupos biolgicos activos.
En las aguas de mar de Salaverry se obtuvo 0,00124mg/l de Cadmio.
Explica sobre el cadmio en el mar Larsson et al. (1981) sealan que el
cadmio causa variados efectos subletales en peces telesteos, como
fracturas y deformidad vertebral, daos testiculares, desarrollo defectuoso
de vulos, reduccin del consumo de oxgeno por los tejidos branquiales,
cambios patolgicos en los tejidos renal e intestinal, efectos hematolgicos
y disturbios en el metabolismo de carbohidratos. Muchos de los efectos
txicos en humanos (lesiones en huesos y lesiones renales, anemia e
hiperglicemia). Este resultado comparado con el DECRETO SUPREMO
N004-2017-MINAM que establece un valor de: 0.088 mg/l, este valor no
sobrepasa los ECA establecidos por el Decreto.
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VII. CONCLUSIONES
Se analiz distintas matrices de agua en los parmetros de Plomo y Cromo
y Cadmio por AA para determinar segn su procedencia si cumple o est
dentro de los Instrumentos de Gestin de Calidad utilizados en el territorio
Nacional y evaluar estadsticamente los resultados.
Se aprendi a utilizar el Espectrfometro de Absorcin Atmica Marca
Agilet Modelo 200 Series AA.
Se aprendi a utilizar tcnicas de Digestin adecuadas de acuerdo al Tipo
de Procedencia de la Muestra.
Se utilizaron los ECA, LMP o VMA segn la procedencia de la muestra y
comparar con los resultados obtenidos en el Laboratorio.

VIII. RECOMENDACIONES
Se recomienda investigar ms proyectos de investigacin referentes a la
contaminacin de mar por metales pesados.
Se recomienda realizar ms tomas de datos para una mejor comparacin
al momento de realizar los resultados.
IX. REFERENCIAS
[1] Contaminacin del agua con cromo. (2015). [Blog] El Agua de Madrid. Available
at: http://www.madrimasd.org/blogs/remtavares/2015/12/09/132418 [Accessed 30
Nov. 2017].
PRUEBAS ECOTOXICOLGICAS CON CADMIO Y CROMO USANDO
POSTLARVAS DEL PEJERREY Odontesthes (Austromenidia) regia regia
HILDEBRAND. (2001). [Blog] SAN MARCOS. Available at:
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/biologia/v08_n2/puebas_ecoto.htm
[Accessed 30 Nov. 2017].
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X. ANEXOS

Anexo 1.Categora 4: Conservacin del ambiente acutico.