2017

DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES DE UN ALIMENTO POR

ESPECTROFOTOMETRA (MTODO DNS)

INGENIERIA
AGROINDISTRIAL
 DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES DE UN ALIMENTO

UNIVERSIDAD NACIONAL
DEL SANTA

TEMA:
DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES
DE UN ALIMENTO POR ESPECTROFOTOMETRA
(MTODO DNS)
ASIGNATURA:
ANALISIS INSTRUMENTAL DE PRODUCTOS
AGROINDUSTRIALES

ESTUDIANTES:
ESPINOZA TORRES Cinthia lucero

CICLO:
VI

NUEVO CHIMBOTE PER

2017

ANALISIS INSTRUMENTAL DE PROD. AGROINDUSTRIALES

 DETERMINACION DE AZUCARES REDUCTORES DE UN ALIMENTO

DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES DE UN

ALIMENTO POR ESPECTROFOTOMETRA (MTODO DNS)

I. INTRODUCCION:
II. OBJETIVOS:
El alumno utilizara un mtodo espectrofotomtrico para azucares
Preparar una curva patrn de glucosa con el 3,5-dinitrosalclico (3,5 - DNS)
III. FUNDAMENTO TEORICO:

La determinacin cuantitativa de los monosacridos se realiza,

frecuentemente basndose en su oxidacin en solucin alcalina
mediante Cu2+, Ag+, o ferrocianuro, originndose una mezcla de
azucares cidos. En otras palabras los monosacridos pueden reducir
a los compuestos mencionados por lo que reciben el nombre de
azucares reductores.

Se basa en que los azucares reductores reaccionan con el 3,5 acido

dinitrosalcilico en solucin alcalina, formando compuestos
nitroaminados coloridos. La prueba positiva de un color rojo marrn.
La coloracin se mide con un espectrofotmetro para mediciones
cuantitativas a 540 nm. Esta prueba funciona para la glucosa y otros
azucares reductores, en este caso nos concentramos en la glucosa.

Esta tcnica tiene la ventaja de ser un mtodo preciso y rpido en

comparacin con los que utilizan derivados fenlicos. Presenta
desventajas por la presencia de polifenoles que ocasiona la reduccin
del reactivo.

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IV. MATERIALES Y METODOS:

Reactivos
A) Reactivo DNS
Tartrato de Sodio y Potasio

Hidrxido de Sodio

Metabisulfito de Sodio

Reactivo DNS

V. PROCEDIMIENTO:

Preparacin del Reactivo DNS:

Se mezcla y disuelve en 250 ml. de agua destilada 8 gr. De NAOH y 15 gr. de
tartrato de Sodio y Potasio.
Posteriormente se agregan 5 gr. de Acido 3,5 dinotrasalicilico bajo
calentamiento. Se aforan a 500 ml con agua destilada y se almacenan a
temperatura ambiente protegindolo de la luz.
B) Utilizar un estndar de 1.0 mg/ml. de glucosa, realizar las diluciones para
obtener concentraciones de 0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 y 1.0, Realizar una curva
patrn de glucosa.

C) Anlisis de Muestra

Diluir 1 ml. de cada muestra en 100ml. de agua destilada en una probeta,

luego extraer 1 ml de esta solucin en un tubo de ensayo adicionando un
1ml. de la solucin DNS, agitar y llevar luego a ebullicin por 10 min.
Enfriar rpidamente y agregar 10 ml. (o 5 ml.) de agua destilada con previa
agitacin.
Llevar la muestra al espectrofotmetro a 540 nm y leer su absorbancia.
Con este dato encontrado insertamos en la curva de calibracin
previamente construida y el resultado se lee como gramo de glucosa.

Clculos
1. Graficar los datos de la curva patrn colocando en el eje de las abscisas
la cantidad de azucares reductores en mg./ml. y en las ordenadas la
absorbancia a 540 nm. Calcular la pendiente ajustando la ordenada a
cero.
2. Con el valor de la pendiente calcular la cantidad de azucares reductores
para cada tiempo en la muestras:

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Y = mx + bX = (y - b)/m
Azucares reductores mg./ml. = (Abs de la muestra/pendiente) x dil.
Tomar en cuenta la dilucin para cada muestra.
VI. RESULTADOS:

VII. DISCUSION:

VIII. CONCLUSION:

IX. BIBLIOGRAFIA:

- Borsfort R. y Scholz, M. 1964. Spektroskopische Methoden in der

organischen. Chemie. Berlin.
- Snchez. D. 1995. Instrumentacin en Bioqumica. Concejo Nacional de
Ciencia y Tecnologa (CONCYTEC). Lima.
- Walton y Reyes. 1978. Anlisis Qumico e Instrumental Moderno. Editorial
Revert S.A. Espaa.
- Jacobs M. 1962. The Chemical Analysis of Foods and Food Products Third
Ediition. D. van Nonstrand Company. INC.

X. CUESTIONARIO:

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1. Cules son los mtodos que determinan cualitativamente los azucares

reductores? Descrbelos.
2. Explique por que la sacarosa y el almidn no son reductores.
3. Qu funcin cumple el blanco en la medicin de absorbancia?

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