UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE BIOCINCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR E GENTICA

Problema de Tcnicas Moleculares para Anlise de Expresso Gnica e Terapia

Gnica

F) Anlise de expresso Gnica Global

O conhecimento apenas das sequencias nucleotdicas e suas variaes no so suficientes

para a compreenso do funcionamento celular, na identificao de novos alvos para
frmacos e novas terapias. Compreender como a clula reage a um determinado estmulo,
fundamental para compreender o todo. Assim, tcnicas de anlise de expresso gnica
global foram desenvolvidas tanto para RNA quanto para protena. Sabendo disto, vocs
foram encarregados de analisar o efeito de um novo componente encontrado na frao
orgnica do material particulado, oriundo da queima de biomassa, em clulas epiteliais
derivadas do pulmo humano. Descreva aqui o desenho experimental do seu experimento,
explicando os passos importantes para analisar: a) transcriptoma e b) proteoma.

Para responder a esta questo, devero ler o captulo referente a Tcnicas de DNA
recombinante.
Objetivos:
Ao trmino do estudo os alunos devero ser capazes de:

- compreender as etapas da expresso gnica

- saber que tipo de vetor usado para anlise de expresso gnica
- citar diferentes tcnicas de anlise de RNA (individual e global)
- explicar northern-blot e compreender a diferena em relao ao Southern-blot
- explicar e diferenciar RT-PCR (reversa transcriptase PCR) e real time PCR
- diferenciar estes ensaios do microarray (compreender as etapas necessrias para tal)
- exolicar western-blot e diferencia-lo do Southern e northern-blot
- explicar o funcionamento do gel SDS-PAGE
- explicar o gel 2D em relao a protenas.
G) Terapia Gnica (Livro do Strachan o recomendado)

1. Micarstica possue uma doena pulmonar de carter dominante, caracterizada por

uma expresso exagerada de um gene, devido a uma mutao em seu promotor.
Que estratgias de terapia gnica poderiam ser oferecidas a esta pessoa. Explique.
2. Anabela possue uma doena pulmonar de carter recessivo, caracterizada pela
ausncia de uma dada proteina. Que tipo de estratgia pode ser utilizada para a
realizao de uma terapia gnica para Anabela? Descreva a abordagem.

Para responder a esta questo, devero ler a parte do captulo referente a Terapia Gnica
do Strachan (cap 21)

Objetivos:
Ao trmino do estudo os alunos devero ser capazes de:

- Definir terapia gnica;

- Identificar as potenciais doenas passveis de terapia gnica;
- Identificar as diferentes estratgias de terapia gnica;
- Como as clulas somticas podem ser modificadas? Descreva as estratgias.
- Identificar o que deve conter o vetor usado em terapia gnica
- Compreender como produzir um retrovrus recombinante
- Identificar como os genes so transferidos para a clula do paciente;
- Identificar os diferentes tipos de vetores usados em terapia gnica, inclusive suas
vantagens e desvantagens;
- Compreender as diferentes formas de inibio da expresso gnica