ASCORBATE PEROXIDASE (APX)

Enzim ascorbat peroksidase adalah enzim yang mengkatalisis substrat askorbat

dan peroksida menjadi monodehidroaskorbat.

Aktivitas askorbat peroksidase ditentukan dengan metode yang dikembangkan

oleh Candan (2003). Sebanyak 1 ml 25mM PBS (pH=7) ditambahakan 1ml
0,1mM EDTA, 1 ml 1mM H2O2, 1 ml 0,25mM asam askorbat, dan 1 ml esktrak
sampel 25oC, kemudian dicampur dan diukur absorbansinya(A0). Campuran yang
sudah dibiarkan selama 5 menit, setelah itu diukur absorbansinya(A1). Aktivitas
dinyatakan sebagai unit enzim, yakni perubahan absorbansi substrat dalam satuan
waktu.

Senyawa peroksida diperlukan pada saat tahap awal konversi asam arakhidonat
menjadi prostaglandin. Pada tahap tersebut, terjadi abstraksi satu atom hydrogen
pada atom karbon 13 asam lemak. Reaksi ini, akan membentuk radikal
arakhidonil. Apabila tersedia dua molekul oksigen, radikal arakidonil akan diubah
menjadi radikal prostaglandin.

Kehadiran enzim askorbat peroksidase akan mengkatalisis perubahan senyawa

peroksida menjadi air. Jika peroksida terkatalisis menjadi air, pembentukan
radikal arakhodonil akan terhambat. Di samping itu, pengikatan oksigen oleh
askorbat oksidase juga akan menghambat pembentukan radikal arakhidonil . lebih
jauh lagi, penghambatan pembentukan arakidonil menyebabkan tidak
terbentuknya prostaglandin.