BIOTECNOLOGIA

Cultivo y Crecimiento

ERNESTO A. ROSERO D.
UNIVERSIDAD TECNICA DE MANABI
• Cultivo y crecimiento

“Proceso de propagar los microorganismos,

proporcionándoles las condiciones
ambientales adecuadas”
• Cultivo y crecimiento

Los microorganismos en fase de

crecimiento realizan replicas de
si mismos

Crecimiento Celular
• Cultivo y crecimiento
Composición Elemental de una Célula Bacteriana

Los microorganismos requieren de los

elementos que se encuentran en su
composición química.
• Cultivo y crecimiento
Interface gas-líquido
Se le deben brindar los elementos nutritivos Fase
Gaseosa
en una forma accesible desde el punto de Fase
Líquida (medio de
vista metabólico. Po2 cultivo)
O
2
Po2*

Co2*
Además los microorganismos requieren Co2

energía metabólica con el objetivo de 1. Etapa de transferencia de masa por

sintetizar macromoléculas y conservar los
gradientes químicos esenciales a través de
sus membranas
difusión a través de la película gaseosa al
lado de la interface gas-líquido.
2. Etapa de transferencia de masa por
difusión a través de la película líquida al otro
Película Película
líquida
lado de la interface gas-líquido.
3. Etapa de transferencia de masa por
gaseosa
difusión a través de la película líquida que
rodea a la célula.
4. Etapa de transformación química
mediante la estequiometria de la reacción.
• Cultivo y crecimiento
Durante el crecimiento se deben regular los
factores nutricionales (carbono, nitrógeno,
azufre, fosforo, elementos trazas y
vitaminas) y los factores nutricionales (pH,
temperatura, oxigeno, humedad, presión
hidrostática, presión osmótica y radiación)

CHmOl  aNH3  bO2  ycCHpOnNq  zCHrOsNt  dCO2  cH2O

(sustrato) (fuente de N) (biomasa) (productos)
 • Cultivo y crecimiento…….. Requerimientos

El peso seco de los m/o consiste en materia Se requieren además iones inorgánicos como
orgánica que contiene carbono, hidrogeno, potasio, sodio, hierro, magnesio, calcio y
nitrógeno, oxigeno, fosforo y azufre. cloruro para facilitar la catálisis enzimática y
conservar los gradientes químicos a través
de la membrana celular.

CHmOl  aNH3  bO2  ycCHpOnNq  zCHrOsNt  dCO2  cH2O

(sustrato) (fuente de N) (biomasa) (productos)
 • Cultivo y crecimiento…….. Requerimientos

Durante el crecimiento, un microorganismo

requiere todos los elementos de su materia
orgánica y el complemento total de iones
necesarios para la energía y catálisis

Los m/o varían ampliamente en cuanto a sus

demandas nutricionales y sus fuentes de
energía metabólica
• Cultivo y crecimiento…….. Fuente de Carbono

La mayoría de las bacterias utilizan

ORGANISMOS
compuestos de carbono como fuente de
energía y otras, para la síntesis de elementos
celulares.
AUTOTROFOS HETEROTROFOS

Los organismos fotosintéticos reducen el

dióxido de carbono, a glucosa y otras
moléculas orgánicas. INORGANICOS ORGANICOS
• Cultivo y crecimiento…….. Fuente de Nitrógeno

Necesario para sintetizar enzimas, proteínas

y ácidos nucleicos.

ORGANISMOS

F. METABOLISMO
INORGANICAS DE SUSTANCIAS
CON N2
• Cultivo y crecimiento…….. Fuente de Nitrógeno

El producto final de todas las vías de

asimilación del nitrógeno es la forma mas
reducida del elemento, el ion de amonio
(NH4+ ).

Nitrato (NH3- )
NH3-
Nitrato (NH2- )
• Cultivo y crecimiento…….. Fuente de Nitrógeno

La capacidad de asimilar N2 de manera

reductiva por medio del NH3 se nombra fijación
del nitrógeno , y es una propiedad única de los
procariotas, siendo pocas las bacterias que
poseen esta capacidad metabólica.

m/o pueden recurrir al NH4+ como única fuente

de N, y otros poseen capacidad para producir
este ion a partir de aminas ( R – NH2 )
• Cultivo y crecimiento…….. Azufre y Fósforo

Son componentes celulares importantes, los

obtienen a partir de sales inorgánicas de sulfato
y de aminoácidos azufrados.

El fosforo es adquirido principalmente mediante

iones fosfato inorgánico ( PO43+ ) y lo emplean
para sintetizar ATP, fosfolípidos y ácidos
nucleicos.
• Cultivo y crecimiento…….. Trazas

Requieren elementos trazas en forma de iones.

• Cierta cantidad de sodio y cloro, (los halófilos en grandes cantidades)

• Potasio, zinc y manganeso para activar enzimas
• Cobalto para m/o que sintetizan vitamina B12
• Hierro para la síntesis de compuestos que contienen el núcleo heme y para ciertas
enzimas
• Calcio para las paredes celulares y organismos formadores de esporas (paredes de
las esporas)
• Cultivo y crecimiento…….. Vitaminas

Los vitaminas necesarias para algunos microorganismos incluyen inositol, acido fólico,
vitamina B12 y vitamina K.

Los m/o patógenos humanos requieren a menudo una variedad de vitaminas y por
esta razón son capaces de crecer solamente cuando pueden obtener esas sustancias a
partir del organismo hospedero.

El desarrollo de tales organismos en el laboratorio necesita un medio complejo el cual

contenga todos nutrientes que normalmente obtiene de sus hospederos
• Cultivo y crecimiento…….. Vitaminas

Los vitaminas necesarias para algunos microorganismos incluyen inositol, acido fólico,
vitamina B12 y vitamina K.

Los m/o patógenos humanos requieren a menudo una variedad de vitaminas y por
esta razón son capaces de crecer solamente cuando pueden obtener esas sustancias a
partir del organismo hospedero.

El desarrollo de tales organismos en el laboratorio necesita un medio complejo el cual

contenga todos nutrientes que normalmente obtiene de sus hospederos
• Cultivo y crecimiento…….. Vitaminas

Los vitaminas necesarias para algunos microorganismos incluyen inositol, acido fólico,
vitamina B12 y vitamina K.

Los m/o patógenos humanos requieren a menudo una variedad de vitaminas y por
esta razón son capaces de crecer solamente cuando pueden obtener esas sustancias a
partir del organismo hospedero.

El desarrollo de tales organismos en el laboratorio necesita un medio complejo el cual

contenga todos nutrientes que normalmente obtiene de sus hospederos
• Macromoléculas

Todos los organismos están

compuestos por agua y moléculas de
diversos tipos, inorgánicas y
orgánicas.
• Macromoléculas

Entre ellas esta un grupo de

macromoléculas, las proteínas, que
participan en numerosas
actividades, cumpliendo un papel
fundamental para los seres vivos.
• Macromoléculas

A las macromoléculas pertenecen las

enzimas, que cumplen una función
catalítica y los anticuerpos que
participan en la defensa del
organismo
• 1. Proteínas
Estructura

Macromoléculas formadas por

20 aminoácidos diferentes

Se caracterizan por tener

unido un grupo amino (básico),
un grupo carboxilo (acido) y
un radical variable
• 1. Proteínas
Estructura

Macromoléculas formadas por

20 aminoácidos diferentes

Se caracterizan por tener

unido un grupo amino (básico),
un grupo carboxilo (acido) y
un radical variable
• 1. Proteínas
• 1. Proteínas
• 1. Proteínas……………….. Algunas Técnicas de Laboratorio

La cromatografía

* Exclusión por talla

* Intercambio Iónico
* Afinidad
• 1. Proteínas……………….. Algunas Técnicas de Laboratorio

La cromatografía
• 1. Proteínas……………….. Algunas Técnicas de Laboratorio
La electroforesis

Las moléculas ionizadas

colocadas en un campo eléctrico
migran de acuerdo a con sus
cargas

* SDS
* Nativa
• 1. Proteínas……………….. Algunas Técnicas de Laboratorio
Espectrometría de masas

Mide la masa molecular a partir

de la relación masa carga de
moléculas ionizadas
• 1. Proteínas……………….. Ejemplos
• 2. Enzimas
Catálisis Enzimática

Actúan disminuyendo la energía

de activación necesaria de una
reacción química, siendo
capaces de promoverla y
acelerarla, si ser alteradas o
destruidas durante la misma
• 2. Enzimas
Catálisis Enzimática

Una enzima como la lactasa, no

actúa sobre la sacarosa, dos
enzimas como la α-amilasas y la
β-amilasas, pueden hidrolizar de
manera diferente por que
rompen enlaces distintos
• 2. Enzimas
Catálisis Enzimática

Depende del pH, la temperatura,

presencia de cofactores inorgánicos
(zinc, hierro, cobre) y orgánicos
(coenzimas)

Metales pesados alteran la estructura

molecular irreversiblemente (impiden
su acción)
• 2. Enzimas…… Importancia económica
Catálisis Enzimática

Especificidad
Operan en condiciones controlables
Biodegradables
• 2. Enzimas…… Importancia económica
Catálisis Enzimática

25000  2800clasificadas  400comercializan

Proteasas (59%),
Carbohidasas (28%),
Lipasas (3%)
Analíticas y Farmacéuticas (10%)
• 2. Enzimas………….. Ejemplos
• 3. Anticuerpos
Elementos que reconocen a un
antígeno

Inmunoglobulina G (IgG) esta formada

por dos cadenas polipeptidicas livianas
y dos pesadas formando una “Y”
responsables del reconocimiento y
unión al antígeno.
• 3. Anticuerpos
• 3. Anticuerpos
Producción laboratorio

Un individuo de prueba es inoculado

con un antígeno, al poco tiempo se
produce una respuesta inmune contra
este antígeno, y es posible aislarlos del
suero sanguíneo del animal
• 3. Anticuerpos
Elementos que reconocen a un
antígeno

Inmunoglobulina G (IgG) esta formada

por dos cadenas polipeptidicas livianas
y dos pesadas formando una “Y”
responsables del reconocimiento y
unión al antígeno.