Menurut prinsip hibridisasi molekuler, 32 esterifikasi

Senyawa alami merupakan pendekatan yang efektif untuk mencapainya

Turunan yang menjanjikan, dimana dua bagian aktif dapat dengan mudah dilakukan
Dihibridisasi untuk meningkatkan aktivitas. Misalnya, rangkaian aktif
Turunan dari caudatin15 dan hemslecin A17 diperoleh oleh
Esterifikasi dalam penelitian kami sebelumnya, yang menunjukkan aktivitas yang jelas meningkat dibandingkan
dengan senyawa induknya.
Untuk meningkatkan aktivitas anti-HBV dan menurunkan sitotoksisitas, turunannya
Dehydroandrographolide dan andrographolide diperoleh oleh
Esterifikasi Steglich untuk menggabungkan kelompok cinnamoyl dan
Cincin heterosiklik dengan atom nitrogen, oksigen dan sulfur, yang
Menawarkan penghambatan yang cukup besar untuk replikasi DNA HBV.6,7,33 Senyawa 1a diesterifikasi dengan
asam dengan adanya 4-dimetilaminopiridin (DMAP) dan N0, dikoloheksilkarbodiimida (DCC)
Dalam diklorometana anhidrat (Skema 1). Umumnya turunan turunan 19-O-subsituted adalah produk utama; 3,
19-O-disubsituted
Turunan diperoleh dengan rendemen rendah pada saat bersamaan. Posisi substituen dapat ditentukan dengan
perubahan
Pergeseran kimia H-3 dan H-19 dalam spektrum 1H NMR. Untuk
Contoh, pergeseran kimia H-3 dan H-19a dari substitusi 19-O
Turunan 2e muncul pada dH 3,33 dan 4,37 berbeda dengan dH 4,88
Dan 4,40 dari 3, derivatif 19-O-disubstituted 3a. Saat majemuk
1b diolah pada kondisi esterifikasi Steglich, turunan 4a-6f diperoleh dengan kehilangan gugus hidroksil pada C-14
dan
Membentuk ikatan rangkap karbon-karbon antara C-14 dan C-15
(Skema 2) .28 Produk asilasi lainnya 2j, 3d-3g, 4g, 5g, 6c, 6e
Dan 6f dicapai dengan anhidrida dan jumlah katalitik
DMAP dalam piridin anhidrat. Senyawa 1a dan 1b diobati
Di bawah kondisi oksidasi Pfitzner-Moffatt dengan DCC, dimetil
Sulfoksida (DMSO), asam trifluoroasetat (TFA) dalam piridin anhidrat
Dan diklorometana untuk mengungkapkan efek transformasi hidroksil
Kelompok pada C-3 dan C-19 menjadi gugus karbonil (Skema 3). Di
Cincin C, senyawa 9a dan 9b diperoleh di hadapan
Formaldehid atau aseton di bawah natrium karbonat (Skema 4). Untuk
Menyelidiki pengaruh cincin lakton pada aktivitas anti-HBV, senyawa 1b ditangani dengan natrium hidroksida
dalam air untuk mendapatkan
Produk 10 dengan cincin lakton dibuka. Pada cincin B, karbon-karbon
Ikatan rangkap antara C-8 dan C-17 di epoksidasi oleh asam m-kloroperoksibenzoat (m-CPBA) dalam
diklorometana pada suhu kamar untuk menghasilkan senyawa 11,34 Kemurnian (lebih tinggi dari
90%) dari semua turunan ditentukan oleh HPLC (normalisasi
Metode tanpa puncak pengotor yang tidak jelas) atau TLC dengan tiga berbeda
Sistem pelarut (hanya satu titik di bawah deteksi UV dan disemprotkan
Dengan 10% H2SO4).
Derivat dehidroandrografolida (1a) dan andrografolid (1b) dievaluasi untuk aktivitas anti-HBV mereka, yaitu
menghambat sekresi HBsAg dan HBeAg, dan replikasi DNA HBV.
Pada HepG 2.2.15 sel secara in vitro dengan tenofovir sebagai kontrol positif.13 Aktivitas anti-HBV dan
sitotoksisitas dirangkum
Pada Tabel 1.
Analog 19-O-Cinnamoyl 2a menunjukkan aktivitas tinggi melawan HBV
Replikasi DNA dengan nilai IC50 14,6 lM dan sitotoksisitas 50%
Konsentrasi (CC50) sebesar 183 lM. Setelah pengenalan
Kelompok methoxyl menjadi kelompok cinnamoyl pada posisi C-19,
Sitotoksisitas analog 2b dan 2c menurun dengan jelas (CC50
> 1970 dan 1706 lM) dibandingkan dengan senyawa 2a, menunjukkan bahwa
Kelompok methoxyl memainkan peran penting dalam mengurangi sitotoksisitas. Itu
Kesimpulan di atas didukung oleh analog nikotinil 19-O- (20-methoxy) 2f dengan sitotoksisitas lebih rendah dari
pada 19-O-nicotinyl
Analog 2e Senyawa 2c dengan kelompok 3,4,5-trimetoksikinamik
Pada C-19 memiliki penghambatan yang nyata pada replikasi DNA HBV
Dengan nilai IC50 10,3 lM dan sitotoksisitas lebih rendah yang menghasilkan
Nilai SI lebih tinggi dari 165,1, menunjukkan bahwa keduanya m-methoxyl
Dan kelompok p-methoxyl dapat meningkatkan aktivitas melawan DNA HBV
Replikasi Namun, analog cinnamoyl 19-O- (30-chloro) 2d
Menunjukkan sitotoksisitas yang lebih tinggi dan aktivitas yang lebih lemah karena pengenalan halogen ke
substituen. Cincin heteroatomik di
Posisi C-19 memainkan peran penting dalam menekan replikasi DNA HBV dan sekresi HBsAg dan HBeAg yang
sesuai dengan
Aktivitas tinggi senyawa 2e, 2g dan 2h dengan nilai IC50
22.1, 9.3 dan 22.1 lM. Berbeda dengan analog pengganti 19-O,
Senyawa 3, 19-O-disubstituted 3a-3g menunjukkan penurunan aktivitas anti-HBV yang dramatis akibat
disubstituen pada C-3,
Dan C-19.
Untuk penyelidikan lebih lanjut, turunan andrografolid adalah 23
Diperoleh. 19-O-Cinnamoyl dan 19-O- (30,40,50-trimetoksi) turunan cinnamoyl 4a dan 4b menunjukkan
peningkatan aktivitas dengan
Nilai IC50 46,58 dan 22,25 lM terhadap replikasi DNA HBV.
19-O-Nicotinoyl (4c), 19-O-20-furoyl (4d) dan 19-O-20-thenoyl
(4e) menunjukkan penghambatan yang signifikan pada replikasi DNA HBV dengan nilai SI yang lebih tinggi dari
126,0, 100,5, dan 104,9, dan lebih rendah
Sitotoksisitas dari pada turunan 2e, 2g dan 2h dengan substituen yang sama, yang menyimpulkan bahwa
sitotoksisitas turunan ini erat
Terkait dengan ikatan rangkap terkonjugasi antara C-12 dan C-15 atau
C-11 dan C-14. Menurut prinsip penggantian bioisosterik, analog 19-O-benzoyl 4f disiapkan dan menunjukkan
aktivitas serupa melawan replikasi DNA HBV dengan nilai IC50
20,6 lM dan nilai SI yang lebih rendah dibandingkan dengan senyawa 4c, 4d
Dan 4e, menunjukkan bahwa cincin heteroatomik yang mengandung N, O dan S
Menguntungkan untuk mengurangi sitotoksisitas. Berbeda dengan analog 19-O-valeryl 4h, aktivitas peningkatan
19-O-asetil yang jelas meningkat
Analog 4g menyarankan agar panjang rantai alkil dapat mempengaruhi aktivitas anti-HBV. Senyawa 2a-2j dan 4a-
4g menunjukkan
Sitotoksisitas yang berbeda, menunjukkan bahwa ikatan rangkap terkonjugasi
Terkait erat dengan sitotoksisitasnya namun bervariasi dengan substituen pada C-19. Sitotoksisitas tinggi yang
tersubstitusi 3-O (5a-
5h) menunjukkan bahwa substituen pada C-19 dan gugus hidroksil bebas
Pada C-3 diperlukan untuk mempertahankan sitotoksisitas rendah. Di antara 3, 19-
Turunan disubstitusi, 3, 19-O-disuccinyl (6e) dan 3, 19-O-di
(20-karboksil) benzoil (6f) menunjukkan peningkatan
Dari aktivitas, yang menunjukkan pentingnya kelompok karboksil bebas
Untuk aktivitas anti-HBV.
Dibandingkan dengan produk oksidatif 7a, 8a dan 8b, IC50
Nilai senyawa 7b ditingkatkan menjadi 13,4 lM karena adanya gugus hidroksil bebas pada C-3. Penurunan aktivitas
Turunan 9a dan 9b mendukung pentingnya metilena di
C-15. Derivatif 10 dengan cincin lakton dibuka menunjukkan
Aktivitas serupa dan sitotoksisitas pada senyawa induk 1b, menunjukkan bahwa cincin lakton tidak banyak
berperan dalam aktivitas anti-HBV.
Gugus ganda antara C-8 sampai C-17 pada cincin B sangat diperlukan
Karena berkurangnya inhibisi replikasi DNA HBV pada epoksida
11.
Meskipun dehidroandrografolid 1a dan andrografolid 1b
Tidak aktif terhadap sekresi HBsAg dan HBeAg, 14
Turunan dengan aktivitas penghambatan sekresi HBsAg dan 19
Derivatif menghambat sekresi HBeAg diperoleh. Senyawa
2a, 4e dan 9a menghambat sekresi HBsAg dengan nilai SI pada
Kisaran 10.2-20.3, dan senyawa 2h dan 4e ditekan HBsAg