FORMULATION, OPTIMIZATION AND EVALUATION OF DENDRICREAM FOR

WOUND HEALING ACTIVITY OF ARTEMISIA INDICA.

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk menguji potensi penyembuhan luka komparatif ekstrak
herbal dan dendricream herbal dengan formulasi standar Povidone-iodine yang dipasarkan
dengan menggunakan model luka eksisi pada tikus normal. Ekstrak kasar diberikan secara
topikal pada dosis yang berbeda untuk mengevaluasi potensi penyembuhan luka pada model luka
eksisi selama empat belas hari. WHC [Formulasi No. 6 (F-6)] menunjukkan aktivitas
penyembuhan luka yang jauh lebih baik daripada krim standar. F-6 juga menunjukkan epitel
lengkap dan deposisi kolagen yang baik dibandingkan dengan krim standar. Data percobaan
daerah ukuran luka yang, dinyatakan penyembuhan pada kelompok perlakuan krim hewan
signifikan dibandingkan dengan kelompok control hewan. Telah diamati bahwa dendricreams
yang diformulasikan menunjukkan aktivitas penyembuhan luka yang lebih baik.

PENDAHULUAN

Luka adalah kerusakan dalam kontinuitas jaringan, dari kekerasan dan trauma. Hal ini
dapat dihasilkan oleh kerusakan fisik, termal, kimiawi atau imunologi pada jaringan. Mereka
tidak hanya mempengaruhi kesehatan fisik dan mental pasien tetapi juga mengenakan biaya yang
signifikan pada mereka. Luka umumnya disebut sebagai luka fisik yang menyebabkan
pembukaan dan pecahnya kulit. Luka terdiri dari kerusakan fisik (ulkus tekanan), kerusakan
termal (luka bakar), kerusakan mekanis (luka potong, abrasi, laserasi), dll. Penyembuhan luka
adalah proses kontraksi sel, gerakan, adhesi ulang setelah cedera. Penyembuhan luka melibatkan
agregasi trombosit, penggumpalan darah, pembentukan fibrin, respons provokatif terhadap
kerusakan, angiogenesis dan epitelisasi ulang. Proses penyembuhan luka normal melibatkan
empat fase yaitu Homeostasis, Peradangan, Maturasi dan Remodeling. Di industri obat farmasi,
aksesibilitas obat-obatan yang mampu merangsang proses perbaikan luka masih terbatas. Hanya
1-3% obat yang terdaftar di pharmacopoei Barat yang dimaksudkan untuk digunakan pada luka;
Di sisi lain, setidaknya sepertiga obat alami dihubungkan sebagai agen penyembuhan luka.
Proses penyembuhan luka terutama dipromosikan dengan menggunakan obat herbal yang
didasarkan pada sumber tanaman.
 Tanaman obat merupakan sumber penting zat kimia baru yang memiliki efek terapeutik
yang menguntungkan. Dendrimers memiliki potensi besar dalam pengiriman obat karena sifat
kimia, fisik dan biologi berskala nano diturunkan. Polimer dendritik, termasuk dendrigrafts,
dendrimers dan dendrons memberikan arahan baru dalam pengiriman obat berbasis Nanomaterial
karena struktur nano, monodispersitas, kemampuan beradaptasi, ukuran molekuler yang pasti,
kelompok permukaan buatan dan stabilitas kimia. Produk berbasis dendrimers berkontribusi
secara signifikan dan efisien. Asetilasi adalah satu pendekatan lagi untuk membatasi kelompok
amina bebas dari dendrimers. Dendrimers dapat berfungsi sebagai pembawa obat baik dengan
mengenkapsulasi obat dalam struktur dendritik atau dengan bekerja dengan obat pada kelompok
fungsional terminal mereka dengan ikatan elektrostatik atau kovalen (prodrug).

BAHAN DAN METODE

Bahan Kimia dan Reagen

Bahan kimia yang digunakan selama percobaan adalah kelas metodis. Asam stearat (Lab
Qualikems, Vadodara, Gujarat, India), Potassium Hydroxide, jeli minyak bumi, natrium paraben
metil, sodium propil paraben (bahan kimia yang bagus, Kerala, india), parafin cair, gliserin
(laboratorium Avarice, Ghaziabad, Uttar Pradesh, India ), Cetosteryl alcohol, Methanol, Methyl
acrylate (Loba Chem, India), Ethylenediamine (Merck Specialties, Karnataka), IP-PIMIDone-
iodine 5% w / w, (Win-Medicare, Delhi, India) digunakan.

Instrumen

Viscometer (spektrometer Brookfield DV-E, AS), Digital pH meter (Hanna Instruments,

Italy), spektrometer FTIR (Bruker Optics, Germany), spektrometer UV (Shimadzu Corporation,
Jepang), Magnetic Stirrer (REMI Laboratory Instruments, Mumbai, India ), Hot Air Oven (Gupta
Scientific Industries, Ambala, India) digunakan.

Sintesis PAMAM Dendrimers

Methylacrylate (MA), metanol, Ethylenediamine (EDA) digunakan untuk sintesis

dendrimer PAMAM (Polyamidoamine). 2G PAMAM dendrimers disintesis dengan metode
pertumbuhan yang berbeda dimana dendrimer tumbuh dari dalam (yaitu inti molekul) ke luar.
Diagram alir skematik dari 2G PAMAM dendrimers diberikan pada Gbr.1.
 2g dendrim 1,5 G dan 42,7 ml EDA (Ethylenediamine) dilarutkan dalam jumlah yang
sesuai dengan metanol dalam labu dasar bulat berwarna kuning kuning yang disumbat erat dan
kemudian disimpan selama 144 jam. Akhirnya residu pelarut diuapkan pada bak air. Dendrimer
disiapkan dianalisis dengan spektroskopi ultraviolet (UV-1800, Shimadzu Corporation, Jepang)
dan Fourier Transform Infrared Spectroscopy.

Evaluasi dendrimer PAMAM 2G

Uji Warna

PAMAM dendrimers diobati dengan larutan tembaga sulfat (1% b / v). [16]

Spektroskopi ultraviolet

Konsentrasi 0,01% b / v dari PAMAM dendrimers dipindai dalam kisaran 200 nm sampai
400 nm terhadap air suling. Perubahan dalam nilai λmax dicatat. [17,18,19]

Spektroskopi FT-IR

The 2G PAMAM dendrimer dikenai analisis spektroskopi FT-IR (Bruker Optics,

Germany). [20]

Persiapan ekstrak herbal

Daun segar tanaman, A. indica dikumpulkan dari perbukitan Sarkaghat, Himachal

Pradesh, India. Ekstraksi ekstrak dari A. indica dilakukan dengan proses sederhana Macerasi.
Bahan tanaman dikumpulkan dalam jumlah besar, dicuci, ditanami kering dan dilumatkan dalam
penggiling mekanis untuk mendapatkan ekstrak berair. Itu disimpan dalam wadah tertutup.
[21,22]
 Evaluasi ekstrak herbal

Evaluasi tanaman dilakukan dengan menentukan sifat organoleptiknya, spektroskopi UV

dan spektroskopi FTIR. Larutan standar A. indica dalam Metanol (10μg / ml) dipindai (200-400)
nm dengan menggunakan spektrofotometer UV. Spektrum FTIR A. indica dilakukan dengan
menggunakan rentang bilangan gelombang.

Persiapan krim dasar

Pertama, asam stearat, cetosteril alkohol, parafin cair, petroleum jelly dilelehkan pada
pemandian uap pada suhu 75 ° C. Setelah itu, sisa bahan dilarutkan dalam air dan direbus pada
suhu 75 ° C. Larutan berair kemudian ditambahkan ke fase berminyak di atas dengan agitasi.
Gliserin akhirnya ditambah dan dicampur. Krim yang diformulasikan diisi dalam wadah plastik
yang sesuai.

Persiapan krim dasar

Asam stearat, kalium hidroksida, Cetosteril alkohol, jeli minyak bumi, parafin cair,
natrium paraben metil, sodium propil paraben, gliserin. Tujuh varian WHCs yang berbeda (F1 to
F6) disiapkan dengan menggunakan konsentrasi ekstrak herbal yang berbeda.

Persiapan dendricream

Ekstrak 1%, 2%, 3%, 4% dan 5% dicampur dengan dasar krim yang disiapkan di atas
secara terpisah dengan pengadukan seragam dengan menggunakan pengaduk mekanis. Setelah
itu ditambahkan dendrimer 1% di dalamnya. Gliserin ditambahkan dan dicampur. Akhirnya,
agen pewarna pinch (Tartrazine) ditambahkan dalam formulasi yang memberi warna kuning.
Krim yang diformulasikan diisi dalam wadah plastik yang sesuai.

Perumusan desain untuk dendricream

Evaluasi farmasi krim [24]

 Formulasi dievaluasi untuk parameter farmasi yang berbeda:

a. Penampilan Fisik

Krim yang diformulasikan diamati untuk penampilan visual, transparansi, warna,

konsistensi.

b. pH

pH krim yang diformulasikan ditentukan dengan menggunakan meteran pH

digital ((Hanna Instruments, Italy) dengan melarutkan krim 1 gm dalam 100 ml air.

c. Konsistensi

Konsistensi krim formula ditentukan dengan tangan. Ambil sejumput krim dan
gosok dengan jari.

d. Spreadability

Penyebaran krim yang diformulasikan ditentukan dengan menempatkan sejumput

krim di atas kaca dan kemudian letakkannya di atasnya lalu diamati.

e. Viskositas

Viskositas krim yang diformulasikan ditentukan oleh viskometer Brookfield

dengan bantuan spindle no. 6 yang diputar pada 10 rpm. Sampel krim diizinkan untuk
menetap lebih dari 30 menit sebelum pengukuran dilakukan.

In Vitro Release krim herbal

Sel difusi Franz digunakan untuk studi pelepasan obat. Dendricream (1gm)
diaplikasikan ke permukaan membran Telur secara merata. Membran Telur dijepit di
antara kontributor dan ruang reseptor sel difusi. Ruang reseptor diisi dengan larutan
Acetate Buffer Saline (pH 5.5) yang baru disiapkan untuk melarutkan obat. Ruang
reseptor diaduk dengan pengaduk magnet. Sampel (1,0 ml) dikumpulkan pada interval
waktu yang sesuai 15 menit. Sampel dianalisis untuk kandungan obat dengan
spektrofotometer UV terlihat pada 211 nm setelah pengenceran yang tepat. Koreksi
 kumulatif dibuat untuk mendapatkan jumlah total obat yang bebas pada setiap periode
waktu. Jumlah kumulatif obat yang dilepaskan di membran Telur ditentukan sebagai
fungsi waktu.

Evaluasi in vivo krim herbal

Uji radang kulit

Krim dievaluasi untuk tes peradangan kulit primer pada hewan percobaan (tidak
memiliki rambut di belakang tikus) untuk mengevaluasi keamanan krim. [30, 31, 32]

Evaluasi aktivitas penyembuhan luka

Tikus albino Wistar yang sehat dari kedua jenis kelamin, dengan berat 150-200
gm ditempatkan di bawah kondisi lingkungan normal suhu, kelembaban (25 ± 0.50˚C)
dan 12 jam cahaya / siklus gelap. Hewan diberi pakan dengan diet pelet standar dan air ad
libitum. Percobaan dilakukan sesuai dengan protokol yang disetujui oleh Institution
Animal Ethical Committee (IAEC-CTIPS), CT Institute of Pharmaceutical Sciences,
Shahpur, P.O. Udhopur, Jalan Partappura, Jalandhar-144020 (Punjab) / (nomor 1704 / PO
/ a / 13 / CPCSEA). Tikus dibagi menjadi empat kelompok yaitu kontrol (kelompok
perlakuan krim dasar / tanpa ekstrak), standar (kelompok perlakuan Povidone-Iodine),
test1 (ekstrak herbal yang diobati) dan kelompok uji 2 (herbal formulated dendricream).
Tikus diberi anestesi dengan pemberian ketamin (80 mg / kg i.p.). Tikus diberi label
dengan ketamine hydrochloride (0,5 ml / kg b.w., i.p.). Hewan diberi anaesthetized
dengan menggunakan Ketamine hydrochloride dengan dosis 80mg / kg yang sesuai. Bulu
sisi belakang binatang dilepas dengan menggunakan pisau cukur listrik. Ketebalan penuh
luka eksisi dengan luas melingkar 176 mm2 (lebar 1,5 cm) dibuat pada punggung tikus
yang dicukur. Luka diobati dengan krim topikal sekali sehari. Luka dan luas luka diukur
pada hari ke 3, 6, 9, 12 dan 14 setelah hari luka.

Studi stabilitas

Formulasi krim yang berbeda disimpan dalam botol kaca tertutup rapat. Sampel
disimpan dalam gelap (dalam botol warna kuning) dan cahaya (dalam botol tidak
berwarna) pada suhu 0 ° C. Suhu kamar (25 ° -30 ° C) dan 45 ° C untuk periode tujuh
minggu. Sampel dianalisis setelah setiap minggu sampai tujuh minggu untuk presipitasi,
perubahan warna dan konsistensi. Data yang diperoleh digunakan untuk analisis
degradasi fisik atau kimia.