CINÉTICA

ENZIMÁTICA DE LA
INVERTASA
PROFESOR: FERNANDO HERNANDEZ CLEMENTE
GRUPO 1453 LABORATORIO BCT
EQUIPO 2:
BEJARANO RANGEL IVONNE STEPHANY
GARCIA PATIÑO JESUS
MARTINEZ MORENO BEATRIZ ADRIANA
ROJAS HERNANDEZ VIANEY TAMAR
Objetivos
 Analizar algunos factores que modifican la velocidad de la
reaccion que es catalizada por la invertasa.
 Demostrar la relacion lineal ente la velocidad de la
reaccion y la concentracion de la enzima presente.
 Determinar como influye el pH del medio sobre la
velocidad de una reaccion enzimatica y su efecto sobre el
carácter ionico de la enzima y el sustrato.
 Demostrar que la temperatura afecta a las reacciones
enzimaticas.
 Observar el efecto de la concentracion del sustrato sobre
la velocidad de la reaccion enzimatica y determinar el km,
Vmax, por los metodos conocidos.

Resultados

Curva estandar
TUBO ABSORBANCIA Mmol pH
Blanco 0 0 4.7
1 0.001 0.25 4.7
2 0.078 0.5 4.7
3 0.255 1 4.7
4 0.543 2 4.7
5 0.845 3 4.7
6 1.061 3.75 4.7
Tabla 1.0
Efecto de pH en la cinetica enzimatica

TUBO ABSORBANCIA Mmol VELOCIDAD pH

Mmol/min
Blanco 0 0 0 5.0
1 -0.005 0.200 0.0400 2.5
2 -0.003 0.207 0.0414 3.5
3 0.002 0.223 0.0447 4.5
4 0.122 0.620 0.1240 5.0
5 0.333 1.317 0.2635 5.5
6 0.188 0.838 0.1676 6.5
7 0.038 1.472 0.0685 7.5
Tabla 1.2 efecto del pH

Efecto de la concentracion del sustrato

TUBO ABSORBANCIA Mmol VELOCIDAD pH
Mmol/min
Blanco 0 0 0 4.7
1 0.078 0.474 0.0949 4.7
2 0.213 0.920 0.1841 4.7
3 0.490 1.836 0.3672 4.7
4 0.559 2.064 0.4129 4.7
5 0.570 2.100 0.4201 4.7
6 0.665 2.414 0.4829 4.7
7 0.603 2.209 0.4419 4.7
8 0.636 2.319 0.4638 4.7
Tabla 1.3
Efecto de la concentracion de enzima en la cinetica
enzimatica

TUBO ABSORBANCIA Mmol VELOCIDAD pH

Mmol/min
Blanco 0 0 0 4.7
1 0.335 1.324 0.2648 4.7
2 0.419 1.601 0.3203 4.7
3 0.448 1.697 0.3395 4.7
4 0.684 2.477 0.4955 4.7
5 0.973 3.432 0.6865 4.7
Tabla 1.4

Efecto de la temperatura en la cinetica enzimatica

TUBO ABSORBANCIA Temperatura Mmol VELOCIDAD pH
°C Mmol/min
Blanco 0 0 0 0 4.7
1 0.017 0 0.003 0.0006 4.7
2 0.212 19 0.042 0.0084 4.7
3 0.544 37 0.108 0.217 4.7
4 0.943 50 0.188 0.0377 4.7
5 0.045 75 0.009 0.0018 4.7
6 -0.035 92 -0.007 -0.0014 4.7
Tabla 1.5
Figura 2.0

Figura 2.1
Figura 2.2

Figura 2.3
Figura 2.4

Figura 3.0
 CURVA DE VELOCIDAD DE REACCIÓN DEL EFECTO DEL
pH
0.3

0.25

0.2
V Rx.
(μMOL/MIN) 0.15

0.1

0.05

0
0 2 4 6 8
pH

Figura 3.1

Figura 3.2
Figura 3.3

Figura 3.2
Analisis
Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH;
imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Según el pH del medio, estos
grupos pueden tener carga eléctrica positiva, negativa o neutra. Como la conformación de
las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la
conformación será la más adecuada para la actividad catalítica. Este es el llamado pH
óptimo. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de
pocas décimas por encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su
actividad. ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína, los
seres vivos han desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH
intracelular: En la figura 3.1 al observar la velocidad de reaccion se puede asumir que el pH
optimo es de 5.5 y se puede reafirmar en la tabla 1.2 debido a que el este pH aumenta la
actividad enzimatica pero al aunmentar el pH a 6.5 la actividad enzimatica disminuye
drasticamente debido a ls desnaturalizacion de proteinas e en la misma tabla se observa
como la concentracion decrece al sobrepasar el pH optimo.
En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC
de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas
siguen esta ley general. Se puede observar en la figura 2.4 que la temperatura a la cual la
actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima y por encima de esta
temperatura, el aumento de velocidad de la reacción decrece, debido a la temperatura
que es contrarrestada por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización
térmica, y l a actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.
En la Figura 3.0 al aumentar la temperatura de la reacción catalizada por la enzima invertasa
se observa un incremento de la velocidad de reacción hasta llegar a los 50°C donde se
observa su máxima actividad sin embargo al sobre pasar esta temperatura, la actividad
decae abruptamente debido a que las enzimas son proteínas y estas al sobrepasar la
temperatura optima se desnaturalizan, en caso de las enzimas pierden su función.
La velocidad de una reacción enzimática depende de la concentración de sustrato.
Principalmente, la velocidad de la reacción o catálisis varía de acuerdo a la concentración
del sustrato. Al aumentar la concentración de sustrato, la actividad enzimática aumenta,
hasta alcanzar la velocidad máxima, punto donde la enzima se satura, debido a que las
enzimas tienen todos sus sitios activos ocupados en la figura 3.3 se observa como la
velocidad de reaccion aumenta conforme a la concentracion de enzima, pero esto tambien
va de la mano con la tabla 1.3 donde por ejemplo al llegar a la concentracion de 2.100
Mmol de sustrato la velocidad ya no aumenta tanto como las anteriores concentraciones
debido a que la enzima se encuentra saturada y todos sus sitios activos se encuentran
ocupados esto se puede corroborar en la figura 3.3.

Conclusion

Bibliografia