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Fisiología Humana
Manual de Laboratorio
Pedro P. Núñez
Profesor de Fisiología Humana,
Universidad Nacional Mayor de
San Marcos,
Universidad Nacional Federico Gabriel Núñez
Villarreal, Profesor de Fisiología Humana,
Universidad Privada San Juan Universidad Nacional Federico
Bautista, Villarreal,
Universidad San Martín de Porres, Universidad Privada San Juan
Universidad Científica del Sur, Bautista,
Universidad Alas Peruanas Universidad Ricardo Palma,
Universidad Nacional San Luis
Gonzaga
LIMA 2011
1
Práctica N° 1: Intercambio de
líquidos, electrolitos y otros
solutos a través de
membranas
Introducción
Existe un intercambio continuo de sustancias entre el medio ambiente y el
organismo, a través de los epitelios: dérmicos, digestivo y respiratorio. Dentro
del mismo organismo existe un intercambio entre los espacios intracelular y
extracelular.
Algunas sustancias pueden atravesar la membrana celular por difusión pasiva.
Otras requieren consumir energía para moverse a través de las membranas
contra sus gradientes de concentración. Estos fenómenos de difusión pasiva y
transporte activo permiten la creación de una composición orgánica
diferenciada.
La piel del sapo no solamente separa al espacio extracelular del medio ambiente, sino que permite el pasaje de
muchas sustancias, incluyendo el agua, el sodio, el cloro y la glucosa. La dirección del intercambio depende
del tipo de transporte involucrado y de la gradiente de concentración de los solutos. Cuando cambia la
composición del líquido extracelular, los riñones excretan las sustancias presentes en exceso o reabsorben las
necesarias para lograr preservar la homeostasis.
Material
17 sapos
Beakers.
Agua destilada
Solución de NaCl al 0.68% *
Solución de NaCl al 1.36% *
Solución de dextrosa al 3.87%
Solución de dextrosa al 7.74% * (preparar otra al 15 % )*
Balanza
Urinómetro
Solución de cromato de potasio al 20%
Solución de nitrato de plata al 2.9%
Tubos de ensayo
Pipetas de Pasteur
Goteros
Pinzas mosquito
Hilo
Método
Experimento N° 1: preparación del animal
Durante la noche previa al experimento se debe mantener a los sapos en un
ambiente húmedo para que estén adecuadamente hidratados. Antes de la
pruebas se vacía la vejiga de todos animales y se liga la cloaca para analizar la
orina formada en condiciones basales. Si se coloca a un sapo en una solución de
dextrosa y luego se encuentra dextrosa en la orina, puede deducirse que fue
absorbida a través de la piel hasta alcanzar una concentración suficiente en el
líquido extracelular que obligase a los riñones a excretar el exceso en la orina.
Los sapos son colocados en diferentes soluciones y se les inyecta distintas
soluciones para producir cambios en la composición de los líquidos corporales.
Los animales son pesados antes de realizar la prueba y después de haber
vaciado sus vejigas. Los cambios de agua corporal se determinan pesando a los
sapos antes y después de la exposición a distintas condiciones experimentales.
Para cerrar la papila cloacal se la toma con las pinzas mosquito y se la liga con
firmeza, sin llegar a cortar la piel, pero lo suficientemente fuerte para prevenir el
escape de orina. Después de esto se pesa al sapo y se registra su peso.
Experimento N° 2
Se inyecta a los sapos 4 ml de una solución en el saco linfático dorsal. Esta
solución puede ser hipotónica, hipertónicas o isotónicas; de cloruro de sodio,
dextrosa o agua destilada. Se vuelve a pesar para confirmar que todo el líquido
inyectado se encuentra en el animal.
Se coloca 200 ml de líquido en un beaker de 500 ml y se pone al sapo dentro de
él. El líquido debe cubrir la mitad inferior del animal pero el punto de inyección
debe permanecer por encima del nivel. Se tapa el beaker. Se pesa al sapo a
intervalos de 15 minutos hasta por 2 horas. Se registra los datos obtenidos.
Control
Final
1 Agua Agua
2 NaCl Agua
0.68%
3 NaCl Agua
1.36%
4 Agua NaCl
0.68%
5 NaCl NaCl
0.68% 0.68%
6 NaCl NaCl
1.36% 0.68%
7 Agua NaCl
1.36%
8 NaCl NaCl
0.68% 1.36%
9 NaCl NaCl
1.36% 1.36%
10 Dextro Agua
sa
3.87%
11 Dextro Agua
sa
7.74%
12 Agua Dextro
sa
3.87%
13 Dextro Dextro
sa sa
3.87% 3.87%
14 Dextro Dextro
sa sa
7.74% 3.87%
15 Agua Dextro
sa
7.74%
16 Dextro Dextro
sa sa
3.87% 7.74%
17 Dextro Dextro
sa sa
7.74% 7.74%
Experimento N° 3
Después de 2 horas, se saca al sapo del beaker y se retira la ligadura de la
cloaca. Se vacía la vejiga comprimiendo el abdomen y se recolecta la orina.
Se pesa nuevamente al sapo. La diferencia entre este peso y el obtenido
inmediatamente antes de quitar la ligadura es igual al peso de la orina
recolectada. La diferencia entre el peso después de recolectar la orina del
animal y el peso inicial antes de sumergirlo equivale al peso ganado o perdido
durante el experimento. Se debe tomar en cuenta el peso después de inyectar
los 4 mL de solución en los sacos dorsales. Se calcula el porcentaje de variación
de peso con respecto a la medida inicial y se registra la cantidad de orina
formada durante el experimento.
1.- Introducción
Todas las células están protegidas del líquido espacio extracelular por el citocalix (1) y la
bicapa lipídica de la membrana plasmática que excluye iones y proteínas. A fin de
comunicarse con el exterior, las células han desarrollado mecanismos de traducción de
señales. En las células excitables como la neurona y los miocitos, los canales iónicos
constituyen una clase de esas proteínas de membrana críticas para la traducción de las
señales eléctricas.
Las funciones de la membrana son la definir los límites del compartimento celular, regular
transporte molecular y organizar las consecuencias complejas de sus reacciones.
Con respecto a las propiedades específicas de las membranas tenemos: Insolubles:,
resistentes y soportar presiones; flexibles: deformables acompaña el crecimiento y
movimiento; autoemzamblantes: autoreparación dinámica de la fusión/fisión y
selectivamente permeables: transporte de metabolitos, generación de energía y señales.
Método
Experimento N° 1
Obtener una muestra de sangre venosa y colocarla en un frasco con oxalato.
Preparar los tubos de prueba con solución de cloruro de sodio al 0.75% y agua
destilada de la siguiente manera:
Agregar a cada uno de los tubos 2 gotas de sangre oxalatada y aireada, mezclar
adecuadamente y llevar a la centrífuga a 2000 rpm por 15 minutos. La centrífuga
deberá detenerse por inercia, no deberá ser frenada. Observar la hemólisis y la
crenación. Observar que la hemólisis es leve en la solución al 0.42%, intensa en
la solución al 0.36% y total en la solución al 0.30%. Comparar los resultados
obtenidos en cada mesa.
Experimento N° 2
Obtener una muestra de sangre venosa y colocarla en un frasco con oxalato.
Preparar los tubos de prueba de la siguiente manera:
Tubo Solución
1 5 cc de solución de pH 5.4
2 5 cc de solución de pH 6.4
3 5 cc de solución de pH 7.4
4 5 cc de solución de pH 8.4
5 5 cc de solución de pH 9.4
Agregar a cada uno de los tubos 2 gotas de sangre oxalatada y aireada, mezclar
adecuadamente y llevar a la centrífuga a 2000 rpm por 15 minutos. La centrífuga
deberá detenerse por inercia, no deberá ser frenada. Observar la hemólisis
Experimento N° 3
Obtener una muestra de sangre venosa y colocarla en un frasco con oxalato.
Colocar 2 gotas de sangre oxalatada y aireada en un tubo con 5 cc de suero
fisiológico y granallas de vidrio y llevar al vibrador por 3 minutos. Observar la
hemólisis
Experimento N° 4
Cortar un pedazo de membrana de diálisis o de celofán preparado, sumergir esta
membrana en agua destilada por unos minutos, cubrir con ella el extremo de
diámetro mayor del tubo en forma de cardo con cuello recto y confirmar que no
haya goteo. Llenar el bulbo del tubo en forma de cardo con una solución de
dextrosa al 30%, previamente teñida con unas gotas de tinta azul. Fijar el tubo
en forma de cardo al soporte con clamp y sumergir el bulbo en un beaker con
agua destilada. El nivel inicial de fluido en el tubo y el beaker debe ser el mismo.
Observar el desplazamiento del fluido en el tubo durante la siguiente hora.
Experimento N° 5
Utilizar el aparato descrito en el experimento anterior y reemplazar en el beaker
el agua destilada por una solución de dextrosa al 60%. Observar el
desplazamiento del fluido en el tubo durante la siguiente hora.
Experimento N° 6
Cortar un pedazo de membrana de diálisis o de celofán preparado, sumergir esta
membrana en agua destilada por unos minutos, cubrir con ella el extremo de
diámetro mayor del tubo en forma de cardo con cuello doblado en ángulo recto y
confirmar que no haya goteo. Llenar el bulbo del tubo en forma de cardo hasta
sus 2/3 partes con agua destilada y unir la pipeta mediante un tubo de jebe. Fijar
el tubo en forma de cardo al soporte con clamp, de manera que la pipeta quede
en posición horizontal, y sumergir el bulbo en un beaker con solución de sulfato
de magnesio al 7.5%. El nivel inicial de fluido en el tubo y el beaker debe ser el
mismo. Permitir que el sistema se equilibre durante 5 minutos y luego añadir una
gota de alcohol en el extremo abierto de la pipeta. Observar la velocidad a la que
la gota de alcohol es aspirada hacia el interior de la pipeta.
Experimento N° 7
Utilizar el aparato descrito en el experimento anterior y reemplazar en el beaker
la solución de sulfato de magnesio al 7.5% por una solución al 15%.
Experimento N° 8
Utilizar el aparato descrito en el experimento anterior y reemplazar en el beaker
la solución de sulfato de magnesio al 15% por una solución al 30%.
Discusión:
Referencias:
1.-
Sickle Cell Disease
Sickle cell anemia occurs in individuals who are homozygous for a GAG → GTG
substitution in the
b -globin subunit of hemoglobin, resulting in the production of hemoglobin S.
Approximately 30 million
people worldwide have SCD, making it one of the most common autosomal
recessive disorders.
When hemoglobin S is deoxygenated, the hemoglobin S polymerizes, causing
decreased fl exibility of the erythrocyte and obstruction of the microvasculature. 8
Damage to the erythrocyte cell membrane occurs as it passes through the
microcirculation, shortening its life span and causing a chronic hemolytic anemia.
These two pathologic processes are responsible for the majority of the clinical
manifestations of SCD.
Práctica N° 4: Estimulación
muscular
Organice sus conceptos sobre la contracción muscular
1.-Fibra muscular: lisa (vascular y visceral), esquelética y cardiaca.
2.-Potencial Transmembrana de Reposo (PTR) y Potencial de Acción (PA)
3.-Proteínas contráctiles
4.-Acoplamiento excitación-contracción
Introducción
Los tejidos musculares tienen la propiedad de responden a estímulos físico ó
químicos ( excitabilidad) con la contracción(interacción de las proteínas
contráctiles), previa participación de las proteínas regulatorias y el Ca ++
acortándose y generando fuerza, En el caso del músculo esquelético, nos dan el
movimiento por el concurso de los músculos agonistas y antagonistas. La
contracción muscular puede ser estudiada experimentalmente bajo dos
condiciones especiales. (1) isométrico:(“misma medida” ó longitud) en el cual la
longitud del músculo permanece constante y la fuerza es desarrollada, y (2)
isotónica: (misma tensión”) en el cual los músculos se acortan contra una fuerza
constante.
En los fenómenos estímulo-respuesta, la respuesta depende de las
características del estímulo y de las condiciones del tejido estudiado. La
descripción correcta de la relación entre estímulo y respuesta requiere el
control de la duración, intensidad y frecuencia del estímulo.
En esta práctica vamos la contracción muscular
Material
Sapos grandes
Miógrafo
Estimulador eléctrico
Equipo de disección
Tabla de fijación para batracios
Alambre de cobre y zinc soldados
Quimógrafo
Balanza “Ohaus”
Un soporte de metal
Solución Ringer rana:
ClNa.......... 6.000g
ClK------------0.075 “
Cl2Ca--------0.260 “
NaHCO3----0.100 “
H2O destilada c.s.p. l litro.
-------------------------------------
Método
Experimento N° 1
Se anestesia al sapo por destrucción del cerebro y la médula espinal.
Con unas tijeras se hace un ojal en la piel de la región anterior homóloga al
tronco. Se continúa la incisión de la piel en cinturón. Una vez completado el
cinturón, se desprende la piel de un tirón hacia abajo. En la región dorsal se debe
tener cuidado por la adherencia de la piel al urostilo.
Se levanta el urostilo con la pinza disección y se secciona los elementos
paravertebralmente y en dirección cefálica, fracturando el proceso del ilíaco
paralelo al urostilo que se articula con el proceso transverso de la novena
vértebra. Inmediatamente se observa dos formaciones blancas que se
introducen por tres raíces más arriba en la columna vertebral. Estas estructuras
son los nervios ciáticos. Por debajo se observa la aorta dorsal con sus
bifurcaciones.
Con las tijeras se secciona transversalmente el urostilo, evitando traccionar o
lesionar los dos nervios ciáticos.
Se pasa un hilo por debajo de cada uno de los nervios ciáticos y se realiza una
ligadura lo más proximal posible a la columna vertebral. En este momento se
observa una reacción muscular.
Se secciona el nervio proximalmente a la médula, entre columna vertebral y la
ligadura. Con la ayuda del hilo se puede efectuar la disección del nervio ciático,
no siendo necesario manipularlo con ningún instrumento.
Para poder liberar el nervio, es necesario cortar el músculo piriforme, después
se lo aisla por disección roma entre el semimembranoso por dentro y el bíceps
por fuera. A todo lo largo del nervio se irá seccionado sus colaterales y se lo
aislará hasta la rodilla, comprobando que exista conexión funcional entre el
nervio y el músculo gastrocnemio. Una vez que el nervio ha sido aislado, se debe
evitar que se seque humedeciéndolo constantemente en solución Ringer rana.
Experimento N° 3
Se toma la pata del animal y se pasa un hilo por debajo de la aponeurosis
plantar, amarándola fuertemente. La ligadura queda ubicada proximalmente y se
realiza la disección de la aponeurosis, que en el sapo se continúa hacia la pierna
por el tendón de Aquiles que tiene un sesamoideo.
Se libera el tendón de Aquiles por disección roma y se separa el gastronemio
hasta llegar a su inserción superior. Con un golpe de tijera se secciona la tibia
por debajo de la rodilla y el fémur un poco por encima de ésta. Se libera el
fragmento de fémur del exceso de tejido muscular y se le hace una fuerte
ligadura. Con este mismo hilo se fija al miógrafo. El hilo amarrado a la
aponeurosis plantar se fija a la otra barra del miógrafo.
Con cuidado se coloca el nervio sobre el electrodo y se procede a estimular la
preparación neuromuscular.
Con el estimulador eléctrico se realiza el estímulo de menor intensidad y se
incrementa gradualmente.
Humedecer constantemente la preparación con un gotero.
Discusión
Introducción
La placa mioneural media la transmisión de la señal de la fibra nerviosa motora
a la célula muscular. Salvo en el caso de las fibras musculares intrafusales,
existe una sola placa terminal por cada fibra muscular. A medida que el axón del
nervio se acerca a su fin emite varias ramas, cada una de las cuales inerva una
fibra muscular. Estas ramas terminales son de poco diámetro y carecen de
mielina, por lo que la velocidad de conducción en ellas es baja. La placa
mioneural es una discontinuidad entre la célula nerviosa y la muscular donde la
transmisión del impulso de despolarización queda a cargo de un mediador
químico, la acetilcolina.
La terminal presináptica posee vesículas sinápticas, las cuales han sido
sintetizadas en el soma neuronal, y presenta canales de membrana de sodio y
calcio dependientes del voltaje.
La generación del potencial de acción da lugar a la apertura de los canales de
calcio y se incrementa la concentración citosólica de calcio. Este incremento
promueve la fusión de las vesículas sinápticas con la membrana citoplasmática
del rafe sináptico, liberando acetilcolina. La acetilcolina actúa sobre receptores
nicotínicos presentes en el miocito y produce despolarización de la membrana
celular muscular. Este fenómeno es denominado potencial de la placa terminal.
Este potencial de acción excita a las miofibrillas para que se contraigan.
Para el control de la actividad muscular existe además una vía inhibitoria
recurrente, es decir, un mecanismo de retroalimentación negativa que mejora la
resolución espacial de la acción neuronal. Esta vía inhibitoria provee un
mecanismo para evitar la contracción muscular persistente.
El axón de la motoneurona A sale de la sustancia gris a nivel de la médula
espinal, pero emite antes una rama colateral, la rama recurrente. Esta rama se
desprende a partir del primer nódulo de Ranvier, permanece dentro de la materia
gris ventral y pasa medialmente y dorsalmente. Esta rama forma sinapsis con
interneuronas que se encuentran en la región ventromedial del asta anterior y
son denominadas células de Renshaw. Sus axones se proyectan hacia las
motoneuronas , tanto hacia aquella en la cual se originó la primera sinapsis
desde el asta dorsal, representada como la motoneurona A, y a sus vecinas,
representadas como motoneuronas B, terminan en sinapsis inhibitorias. La
transmisión en este sistema inhibitorio está a cargo de la glicina.
Material
Sapos grandes
Miógrafo
Estimulador eléctrico
Equipo de disección
Tabla de fijación para batracios
Succinilcolina
Estricnina
Vecuronio
Neostigmina
Atropina
Método
Experimento N° 1
Se procede a anestesiar a un sapo por destrucción del encéfalo. Se diseca y se
expone el nervio ciático en la cara posterior de ambos muslos, evitando lesionar
la arteria femoral que corre paralela al nervio.
En una de las extremidades, se separa el nervio de la arteria y se procede a ligar
alrededor del músculo y de la arteria, dejando libre al nervio.
Se aplica estímulos de baja intensidad a los nervios ciáticos y se va
incrementando su intensidad hasta obtener la contracción muscular.
Luego se estimula directamente al músculo gastrocnemio a través de una
incisión hecha en la piel.
Experimento N° 2
Se administra 1 mL de succinilcolina en el saco linfático dorsal del sapo. Luego
de unos minutos se procede a estimular con el carrete de inducción ambos
ciáticos.
Experimento N° 3
Se administra 1 mL de vecuronio en el saco linfático dorsal del sapo. Luego de
unos minutos se procede a estimular con el carrete de inducción ambos ciáticos.
Experimento N° 4
Se administra 1 ml de solución de atropina y neostigmina en el saco linfático
dorsal del sapo. Luego de unos minutos se procede a estimular con el carrete de
inducción ambos ciáticos.
Discusión
La succinilcolina es un bloqueador muscular despolarizante. Inicialmente simula
el efecto de la acetilcolina, produciendo apertura de los canales iónicos y
despolarización persistente. Inicialmente puede producir excitación, la que se
manifiesta por fasciculaciones transitorias. Esta fase es seguida por el bloqueo
de la transmisión neuromuscular y parálisis flácida.
La estricnina actúa a nivel de la médula espinal, bloqueando la sinapsis
inhibitoria de las células de Renshaw sobre las motoneuronas α, en las que
ejerce el rol de antagonista competitivo selectivo que bloquea los efectos
inhibitorios de la glicina.
La estricnina produce aumento de los impulsos nerviosos sucesivos, creando
contracciones similares a las tetánicas. Origina una contracción muscular
sostenida de extensores y flexores y espasmo muscular persistente.
Práctica N° 6: Efectos
simpáticos y parasimpáticos
Organice sus conocimientos sobre:
Origen, distribución y vías de los nervios vegetativos: simpático y
parasimpático.
Sinapsis, características y neurotransmisores
Receptores y vías de señalización intracelular
Introducción
El sistema nervioso autónomo comprende dos ramas antagónicas: sistemas
simpático y parasimpático, relacionados a respuesta de stress y antistress.
Se emplea al sapo para observar los efectos simpáticos y parasimpáticos en la
actividad cardíaca.
Material
Sapos grandes
Conejos
Adrenalina
Acetilcolina
Atropina
Atenolol ó propranolol
Pilocarpina
Equipo de disección
Algodón
Jeringas descartables
Suero fisiológico
Electrocardiógrafo con juego de aguja no descartables
Tabla de fijación para batracios
Solución de Ringer para batracios.
Método
Experimento N° 1
Anestesiar al sapo por destrucción del cerebro y la médula espinal. Colocar al
animal en la tabla de fijación. Abrir el peto esternal y exponer el corazón.
Humedecer periódicamente con la solución de Ringer para batracios. Conectar el
electrocardiógrafo por medio de las agujas no descartables y obtener un trazado
electrocardiográfico basal. Instilar una gota de solución de acetilcolina al 1/5000
y obtener un nuevo trazado electrocardiográfico. Lavar la preparación con la
solución de Ringer y dejarla reposar por al menos 2 minutos.
Experimento N° 2
Emplear la preparación descrita en el experimento anterior. Instilar dos gotas de
solución de adrenalina al 1/2000 y obtener un trazado electrocardiográfico.
Lavar la preparación con la solución de Ringer y dejarla reposar por al menos 2
minutos.
Experimento N° 3
Emplear la preparación descrita en el experimento anterior. Instilar una gota de
solución de atenolol ó propranolol y obtener un trazado electrocardiográfico.
Lavar la preparación con la solución de Ringer y dejarla reposar por al menos 2
minutos. A continuación instilar dos gotas de solución de adrenalina al 1/2000 y
obtener un nuevo trazado electrocardiográfico. Lavar la preparación con la
solución de Ringer y dejarla reposar por al menos 2 minutos.
Experimento N° 4
Emplear la preparación descrita en el experimento anterior. Instilar una gota de
solución de atropina al 0.1% y obtener un trazado electrocardiográfico. Lavar la
preparación con la solución de Ringer y dejarla reposar por al menos 2 minutos.
A continuación instilar dos gotas de solución de acetilcolina 1/5000 y obtener un
nuevo trazado electrocardiográfico. Lavar la preparación con la solución de
Ringer y dejarla reposar por al menos 2 minutos.
Experimento N° 5
Instilar 1 gota de pilocarpina en el ojo derecho de un conejo y 1 gota de solución
de adrenalina en el ojo izquierdo. Observar las variaciones en el tamaño de las
pupilas.
Discusión
Práctica N° 7: Shock espinal
Método
Experimento N° 1: preparación del sapo espinal
Se fija al animal con la mono izquierda y se determina una línea transversal a
nivel del límite posterior de la membrana timpánica. Se toma una tijera y se
introduce uno de sus extremos en la boca del animal y se lo decapita con un solo
golpe, procurando que en este momento el sapo se encuentre con el dorso hacia
abajo. Realizar hemostasia por compresión.
Inmediatamente se observa el tono y la actitud postural del animal y se efectúa
el pinzamiento de uno de sus dedos. Se objetivará la depresión motora que
constituye uno de los componentes del shock espinal.
Se espera unos minutos y se observa nuevamente el tono y la actitud postural
del animal y se efectúa el pinzamiento de uno de sus dedos. Se objetivará las
respuestas motoras.
Experimento N° 6
Se repite las experiencias anteriores empleando el carrete de Runckford y
administrando estímulos eléctricos de intensidad creciente.
Experimento N° 7
Se empapa un papel de filtro en ácido acético puro y se lo coloca en el dorso del
animal
Se observa y se registra las características de la respuesta.
Experimento N° 8
Se hace una incisión en el abdomen y se expone con mucho cuidado una parte
del intestino. Se estimula cuidadosamente con el carrete de inducción.
Se observa y se registra las características de la respuesta. Al principio se
observará una ligera contracción de la musculatura abdominal que aumentará al
incrementar la intensidad del estímulo hasta llegar a desarrollar una respuesta
flexora amplia.
Experimento N° 9
Se introduce un estilete dentro del canal vertebral y se destruye la médula.
Después se repite las mismas estimulaciones hechas previamente-
Discusión
Práctica N° 8: Sensación
Somatica y sensibilidad
cutanea
Organice sus conocimientos sobre :
Introducción:
Dentro de la fisiología se diferencia lo que está en el medio ambiente y lo que
sucede dentro de los organismos vivos. A lo primero se le denomina estímulos y
a lo segundo respuestas. La vía fisiológica a través de la cual se responde a los
diferentes tipos de energía se le denomina sentido. El sentimiento que se
produce por ser estimulados se denomina sensación y al proceso que organiza e
interpreta esos sentimientos se le denomina percepción.
Receptor sensorial es una proteína que se une con gran afinidad y especificidad
a un neurotransmisor. El receptor puede ser una neurona que genera potencial
de acción.
La transducción es el proceso por el cual un estímulo físico es convertido en una
señal neural para ser enviado al Sistema Nervioso Central (SNC).
La zona de disparo: Es donde el estímulo actúa en el receptor sensorial, en el
cual el potencial de acción es generado. Donde algunos de los receptores son
más sensibles que otros. Además una unidad sensorial particular es más
sensible y solo en una modalidad. Por lo que se refiere cuatro clases.
Clásicamente el estudiante fue formado con la idea de cinco sentidos, pero en
realidad hay once modalidades concientes y un alto número de inconcientes que
interviene en la homeotasis; de estos varios mal definidos ó desconocidos.
Llama la atención que la vista es el órgano que contribuye en el mayor
porcentaje.
Los órganos sensoriales para la estimulación mecánica, (tacto – presión) frío
calor dolor; cuyos cuerpos celulares de estas neuronas están en los ganglios de
la raíz dorsal ordenadas en láminas de I (superficial) á VII (profunda), usando
tres tipos de fibras: 1. grandes mielinizadas Aα y Aβ, 2. pequeñas mielinizadas y 3. no
mielinizadas.
Las que media el tacto fino asciende en la columna dorsal hasta los núcleos grácil y cuneiforme, la
segunda neurona cruza y sube por el lemnisco medio para terminar en el núcleo ventral posterior
del tálamo. Este es el sistema lemniscal. Hay otro sistema que trasmite el tacto, temperatura, dolor
que hace sinapsis con las neuronas del asta dorsal, la segunda neurona cruza y asciende en el
cuadrante anterolateral de la medula espinal y otra por la porción dorsal y constituyen los haces
espinotalámico ventral y espinotalámico lateral, ascienden hasta el tálamo y de esta a la corteza
cerebral previa estimulación del sistema reticular activador. En esta práctica vamos evaluar las
siguientes sensaciones.
-Sensación táctil
-Propioceptiva( a la posición y movimiento corporal )
-Termosensación
-Dolor
En la experiencia vamos a demostrar la capacidad de discriminar los procesos y
modalidad de la percepción sensorial, su distribución de los receptores cutáneos
y la influencia de las bajas temperaturas en la sensibilidad.
Material:
Experiencia a realizarse en: los alumnos
Sello especial
Pelo de cerda
Compás de doble punta
Regla
Experimento Nº 2:
-Un alumno cierra los ojos, mientras su compañero aplica las puntas del compás
en forma simultánea en cara, nuca, antebrazo, mano y yema de los dedos,
tratando de determinar en que momento la percepción es de dos puntos. En ese
momento medir la distancia de los puntos del compás
Procedimiento:
Introducir el termómetro en el hervidor y observar el incremento de la
temperatura.
A partir de 20ºC cargar el gotero y dejar caer dos gotas en el dorso de la mano y
describir la sensación térmica.
Repetir la observación en la palma de la mano.
Procedimiento:
-Colocar el manguito del tensiómetro en el brazo desinflado.
-Insuflar hasta 160 mm de Hg.
-Pedir a que el alumno de la experiencia abra y cierre la mano rítmicamente.
-Registrar la sensacion de dolor que observa el alumno hasta que se vuelva
insoportable. Y al mismo tiempo observe los cambios de color de la mano.
-Mantener el manquito inflado por 30 minutos, lo cual produce anoxía temporal y
bloquea ls conducción en las fibras Aα y Aβ de diámetro grande y las fibras C
siguen siendo capaces de conducir el PA y responder a la estimulación nociva,
por que las primeras tienen demanda metabólica superior a la fibra C. así no
pueden discriminar los estímulos alfiler y hielo. (vía dorso lemnisco interno
queda bloqueado.
-Desinsuflar el manguito y registrar el tiempo que demora en desaparecer el
dolor.
Discusión:
Práctica N° 9: Reflejos
Osteotendinosos
Organice sus conceptos sobre la actividad refleja.
1.-Defina los componentes del arco reflejo
2.-A que de denomina reflejo miotático ó de estiramiento
3.-Como actúa el huso muscular.
4.-Cual es el reflejo miotático inverso
5.- Defina el reflejo de retiro
Introducción
Los mecanismos reflejos están constituidos por un órgano receptor, un órgano
efector y una red de comunicaciones entre ambos. La acción refleja se inicia por
un estímulo de entrada y tiene como resultado una respuesta de salida. La
acción refleja abarca desde el reflejo axónico sencillo hasta los reflejos
complejos en los que existe intervención cerebral.
Reflejos medulares de tipo osteotendinosas, estiramiento, miotático o patelar
Es un reflejo de estiramiento muscular donde el estímulo al actuar sobre el
tendón rotuliano va a estirar el receptor huso muscular (mecanoreceptor)que es
trasmitido por las fibras Ia y II de el estiramiento pasivo, experimental o
voluntario al órgano central medular provocando una respuesta del músculo
agonista (monosináptico- glutamato) y antagonista (neurotrasmisor glutamato y
glicina ). Las vías descendentes producen co-activación alfa-gama.
El reflejo miotático regula la longitud del músculo y es la base del tono muscular.
3. El órgano neurotendinoso de Golgi:
- situación; mecanorreceptor sensible al cambio de tensión muscular.
- estímulo (contracción o estiramiento (esto es raro)) y respuesta
(inhibición autogénica; r. miotático inverso).
- elementos: receptores; fibras Ib; polisináptico (al menos 2 sinapsis)
(Figura 4).
- significado funcional: funciona junto con el r. miotático para medir la
longitud y fuerza muscular (Figura 5).
-
Material
Sujeto de prueba
Martillo de reflejos
Método
Experimento N° 1: reflejo rotuliano
Se sienta al sujeto en una posición cómoda y cruza las piernas. La pierna
superior debe estar relajada. Por palpación, se localiza el tendón rotuliano y se
da un golpe seco con el martillo de reflejos. La respuesta adecuada es la
contracción del cuadríceps, lo que produce extensión de la pierna. ( L2-L4 )
Introducción
VISION GENERAL DEL SISTEMA CARDIOVASCULAR.
• El Sistema está formado por dos bombas instaladas es serie que trabaja en forma
“casi” sincrónica y cuenta con:
-Un sistema de distribución (arterias-arteriolas)
-Un sistema de recolección (venas)
-Un sistema de intercambio (capilares)
-Un mecanismo de regulación a nivel central y periférico
º-Visión general del Sistema cardiovascular:
variaciones en presiones.
variaciones en la resistencia y
variaciones en el volumen
Recuerdo anatómico del corazón
Propiedades del músculo cardiaco:
• Músculo miocárdico especializado:
-Automatismo: Capacidad de generar el potencial de acción (PA). Difiere el
comportamiento del corazón en adultos y niños del nodo sinoatrial (SAN), miocitos atriales
y fibroblastos
-Dromotropismo: Capacidad de conducir del PA.
• Músculo miocárdico no especializado:
-Batmotropismo : Capacidad de responder a los estímulos
-Inotropismo: Capacidad de la contracción miocárdica
-Lusitropismo: Capacidad de la relajación ó complacencia.
-Hormonal: es un órgano de secreción interna por que produce:
ANP, BNP, Renina, aldosterona tisulares.
Material
Sapos grandes
Quimógrafo
Electrocardiógrafo con aditamentos para sapos
Miógrafo para cardiografía por suspensión
Carrete de inducción o estimulador eléctrico
Equipo de disección
Tabla de fijación para batracios
Hilo
3 tubos de ensayo de 10 cm
Agua caliente (a 40° C)
Agua helada (a 0° C)
Solución de Ringer para batracios
Adrenalina al 1/2000
Acetilcolina al 1/5000
Propranolol al 1/1000 ó Atenolol
Solución de cloruro de potasio al 1%
Solución de cloruro de calcio al 1%
Método
Experimento N° 1
Anestesiar al sapo por destrucción del cerebro y la médula espinal. Colocar al
animal en la tabla de fijación en decúbito dorsal. Hacer una incisión desde el
piso de la boca hasta la porción media del abdomen, retirar la piel del peto
esternal. Tomar con una pinza el esternón y cortar el lado izquierdo. Introducir
uno de los extremos de la tijera en la cavidad celómica y cortar el esternón.
Exponer el corazón, identificar el pericardio. Humedecer periódicamente con
solución de Ringer. Ampliar el campo operatorio cortando desde los tercios
externos de las clavículas derecha e izquierda. Reconocer las fases del ciclo
cardíaco y las cavidades cardíacas. Realizar las conexiones necesarias para
obtener un ECG y obtener un trazado basal.
Experimento N° 6
Extraer el corazón y los vasos sanguíneos y colocarlos en un beaker con
solución de Ringer para batracios. Observar la actividad cardiaca.
Discusión
Infradesnivel gradual del segmento ST: Infradesnivel > 0,5 mm en DII o de V1 a V3.
• Disminución de la amplitud da onda T (onda T plana).
• Eventual inversión de onda T.
• Onda U prominente.
• Prolongación del intervalo QTc.
• Potenciación de la acción digitálica.
EFECTOS DE LAS ALTERACIONES DEL CALCIO:
HIPERCALCEMIA >Ca2+
A) ENDÓCRINAS
Hiperparatiroidismo primario: 80% adenoma único, 15% hiperplasia difusa.
Hipertiroidismo: por aumento de reabsorción ósea de calcio por las hormonas T3 y T4.
Feocromocitoma: por mayor reabsorción ósea de calcio por catecolaminas.
Insuficiencia suprarrenal durante las crisis agudas.
Hipercalcemia hipocalciúrica familiar autosómica dominante.
Neoplasias: hematológicas (ejemplos: leucemia) y linfoma por células T de adulto
inducida por retrovirus, tumores sólidos con o sin metástasis óseas.
Acortamiento del intervalo QTc, acortamiento del intervalo Q-oTc: intervalo de inicio de la onda Q
hasta el inicio de la onda T corregido según la FC. Acorta la meseta y el periodo refractario absoluto
Disminución del intervalo Q-aT: intervalo entre el inicio de QRS hasta el ápice de la onda T.
Valores menores a 270 ms son diagnósticos.
Altas concentraciones de Ca2 hacen las fibras menos excitables por caída del umbral.
HIPOCALCEMIA
La regulación del calcio sérico y óseo es asegurada por la paratormona (PTH), vitamina D y
calcitonina, a través de un complejo mecanismo de bucle y retroalimentación, que actúa sobre
los huesos, riñones e intestino. El calcio también es afectado por el nivel de fósforo y magnesio
sérico. Bajas concentraciones de Ca2 aumenta el potencial umbral por lo que hay respuesta a
estímulos débiles por caída del umbral. El PTMR es de -70 mV.
CAUSAS DE HIPOCALCEMIA
Hipoalbuminemia.
Hipoparatiroidismo
Déficit de la vitamina D
Sindrome nefrótico
EFECTOS DE LA HIPOCALCEMIA (-7mg/dl)
Suelen aparecer manifestaciones en el ECG cuando los niveles de calcio iónico alcanzan valores
inferiores a < 7 mg/dl.
1) Manifestación ECG mayor: prolongación del intervalo QT a expensas del aumento en la
duración del segmento ST, sin modificaciones en la onda T. El fenómeno se observa en la
hipocalcemia y en la hipotermia.
2) El grado de prolongación del segmento ST es proporcional a la severidad y la velocidad de
instalación de la hipocalcemia.
3) Prolongación del intervalo Q-oTc: intervalo que se extiende desde el inicio de la onda Q, hasta
el comienzo de la onda T, corregido según la frecuencia cardíaca.
4) Onda T: puede ser apiculada y con inversión tardía. Estos hechos son más visibles en las
derivaciones precordiales derechas.
5) La hipocalcemia no afecta a la onda P, el intervalo PR y la onda U, pudiendo acortar la duración
del complejo QRS; sin embargo, difícilmente este acortamiento sea reconocido. Hay referencias de
desaparición de la onda U.
6) Ocasiona disminución de la sensibilidad a la digital.
7) Produce disminución de la contractilidad miocárdica (inotrópica negativa), pudiendo conducir a
ICC, hipotensión y angina.
8) En forma característica la hipocalcemia no se asocia con arritmias; sin embargo pueden
registrarse arritmias ventriculares como las TdP, FV en forma inducida,
9) Puede confundirse con insuficiencia coronaria crónica, donde ocasionalmente se observa
rectificación del segmento ST y prolongación del intervalo QT.
10) Debe distinguirse de la hipopotasemia, que prolonga el intervalo QT, afectando a la onda T y
ocasiona onda U prominente.
Frasco Solución
A Solución de Ringer
B Solución de Ringer con exceso de
CaCl2
C Solución de Ringer con exceso de KCl
D Solución de Ringer con exceso de
MgCl2
Se llena un lado del sistema con solución de Ringer, permitiendo que fluya a
través de la cánula, para evitar que quede aire. Luego se inserta la cánula en la
cava y se inicia la perfusión hasta que el corazón se contraiga normalmente.
Se conecta el corazón a un quimógrafo para registrar la actividad cardíaca. Se
registra la actividad cardíaca y la amplitud de las contracciones.
Experimento N° 2
Se inicia la perfusión con solución de Ringer con exceso de CaCl 2. Se registra la
actividad cardíaca y la amplitud de las contracciones.
Luego de obtener resultados positivos, se perfunde nuevamente el corazón con
solución de Ringer normal.
Experimento N° 3
Se inicia la perfusión con solución de Ringer con exceso de MgCl 2. Se registra la
actividad cardíaca y la amplitud de las contracciones.
Luego de obtener resultados positivos, se perfunde nuevamente el corazón con
solución de Ringer normal
Experimento N° 4
Se inicia la perfusión con solución de Ringer con exceso de KCl. Se registra la
actividad cardíaca y la amplitud de las contracciones.
Luego de obtener resultados positivos, se perfunde nuevamente el corazón con
solución de Ringer normal.
Discusión
Práctica N° 8:
Electrocardiografía en reposo
Organice sus conocimientos sobre:
Despolarización y repolarización del músculo miocárdico
Despolarización de las células marcapaso
Conducción del potencial de acción
Correlación con el electrograma del haz de His
Secuencia de la despolarización ventricular
Reconocer las ondas del ECG del batracio y del hombre
Memorizar: ritmo y frecuencia cardiaca normales
Fijar la duración normal de los intervalos: PR, complejo QRS y QT
Memorizar los ejes espaciales de la onda P, del complejo QRS y la onda T
Analice los gráficos
Introducción
El corazón tiene la capacidad de generar su propio potencial de acción, el que
es transmitido a través del sistema de conducción a las aurículas y los
ventrículos. Es transmitido a través del volumen conductor a la superficie del
cuerpo, donde es captado por los electrodos del electrocardiógrafo.
La electrocardiografía puede realizarse en reposo (electrocardiografía clínica de
reposo) o en actividad (prueba de esfuerzo).
En la presente práctica se realizará la electrocardiografía de reposo.
Material
Sujetos de prueba varones y mujeres, leptosómicos y pícnicos
Electrocardiografo
Método
Experimento N°1
Colocar al sujeto en decúbito dorsal y aplicar los electrodos de acuerdo a la
convención internacional. Estandarizar el aparato aplicando 1 mV, debiendo
defleccionar la aguja inscriptora 10 mm; la velocidad de registro del aparato
deberá ser 25 mm/seg. Realizar 6 trazados de derivaciones de miembros y 6
trazados de derivaciones precordiales.
Informar de acuerdo al siguiente protocolo:
Nombre:
Edad: Fecha:
Peso: Talla:
Tipo constitucional:
Informe electrocardiográfico
Ritmo: Frecuencia cardíaca:
Intervalo PR: Complejo QRS:
Intervalo Q-T Q-Tc:
SAP: SAQRS: SAT:
Morfología de P:
Morfología de QRS:
Morfología de T:
Conclusiones:
Comentario:
Discusión
bomba.
Introducción
Existen dos grupos de factores que regulan el gasto cardíaco: extrínsecos e
intrínsecos. El grupo de factores extrínsecos están representados por el sistema
neurohumoral y el grupo de factores intrínsecos por el retorno venoso, la
resistencia periférica y el estado contráctil del miocardio. El gasto cardíaco se
ajusta a la demanda creciente fundamentalmente a través de la hipertrofia del
sistema simpático. Cuando éste mecanismo se vuelve insuficiente se recurre a
modificaciones de los mecanismos intrínsecos por medio del sistema renina-
angiotensina. En la práctica vamos a demostrar los mecanismos de
compensación que luego será visto en los pacientes con insuficiencia cardiaca.
Material
Sapos grandes
Quimógrafo
Electrocardiógrafo
Equipo de disección
Tabla de fijación para batracios
Aparato perfusor
Frasco de Mariotte conectado por medio de un tubo a un manómetro de agua y
una cánula fina (el sistema cuenta con dos llaves de Hoffmann para regular el
flujo)
Tacos de madera
Reglas de 50 cm o cinta métrica
Beaker de 50 ml
Probeta graduada de 25 ml
Solución de Ringer para batracios
Cateter endovenoso de 1 y 2 mm de diámetro x 50 cm
Solución de adrenalina al 1/2000
Solución de cloruro de calcio al 1%
Solución de cloruro de calcio al 1%
Solución de propranolol al 1%
Método
Experimento N° 1
Anestesiar al sapo por destrucción del cerebro y la médula espina. Colocar al
animal en la tabla de fijación. Hacer una incisión desde el piso de la boca hasta
la porción media del abdomen. Identificar la vena cava anterior izquierda;
proceder a ligar con un hilo humedecido. Identificar la vena cava anterior
derecha y el tronco aórtico derecho; proceder a ligar con un solo nudo. Preparar
dos ligaduras en el tronco aórtico izquierdo. Ligar el extremo distal lo más lejos
posible; anudar el extremo proximal y hacer un piquete. A través del piquete
introducir un catéter en la arteria. Fijar la ligadura proximal. Preparar dos
ligaduras en la vena cava posterior. Ligar el extremo distal; anudar el extremo
proximal y hacer un piquete en la vena; a través del piquete introducir la cánula
del aparato de perfusión y fijar con la ligadura proximal. Abrir la llave de
Hoffmann y observar la perfusión del corazón. Hacer las conexiones para
obtener trazado de ECG.
Determinar el volumen minuto basal manteniendo el retorno venoso de 10 cm de
agua y fijando la resistencia periférica a nivel del corazón. Obtener un trazado
de ECG.
Experimento N° 2
Aumentar el retorno venoso gradualmente, manteniendo constante la resistencia
periférica hasta producir insuficiencia cardíaca. Obtener un nuevo trazado de
ECG y comparar con el trazado basal.
Experimento N° 3
Fijar el retorno venoso en 10 cm de agua y aumentar la resistencia periférica
elevando la altura del catéter insertado en la arteria, hasta producir
insuficiencia cardíaca. Obtener un trazado de ECG. Cuando el débito cardíaco
sea cero, instilar unas gotas de adrenalina sobre el corazón y observar los
cambios. Obtener un trazado de ECG.
Post
adrenalina
Experimento N° 4
Colocar el retorno venoso en 10 cm de agua y la resistencia periférica en cero.
Observar el tamaño del corazón y obtener un trazado de ECG.
Experimento N° 5
Repetir la experiencia anterior instilando cloruro de calcio, cloruro de potasio y
propranolol.
Discusión
20
15
10 Gasto cardíaco
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
Relación entre resistencia periférica y gasto cardíaco
20
15
10 Gasto cardíaco
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
indirecta
Organice sus conocimientos sobre:
Métodos de la determinación de la presión sanguínea no cruentos y los
principios en que se basan:
Regulación de la presión sanguínea: gasto y resistencia periférica.
Alteraciones genéticas y factores hipertesinogénicos que pueden alterar la
presión sanguínea.
Valores de la presión arterial normal y su comportamiento con la edad.
Defina la presión arterial sistólica, la diastólica, la media y la presión de pulso o
diferencial
Enumere los ruidos de Korotkoff y sus mecanismos de producción de los ruidos.
Introducción
Presión Arterial Sistémica (Sanguínea)
METODO DE MEDICIÓN:
Cruento: En los laboratorios de investigación
No Cruenta: - Palpatorio
- Auscultatorio: Ruidos de Korotkof. Sfigmomanometrico:
Manguito: 1.5 pulgadas para infantes, 3 para niños 3-5 años, 5 para adulto normal, 8
para obesos. El manguito debe abarcar el 40% de la circunferencia del brazo.
Valor normal de la Presión Arterial (PA)
- Para menores de 18 años: Task Force (TF) (mediante tablas)
-Para mayores de 18 años: JNC VII. Ideal 115 / 75 mm Hg.
Presión Normal hasta: 115 /75 mm Hg
Prehipertensión: 121-139/81-89
Hipertensión 140/90 mm Hg.
JNC: Seventh report of the Joint National Committee on prevention, detection,
evaluation and treatment of high Bood Pressure
Riuidos de Korotkoff
Fase I: Toque claro, indica la presión sistólica PAS
Fase II: soplo suave
Fase III: soplo ruidoso
Fase IV: el soplo se apaga (cambio) Acá se toma la PAD en niños.
Fase V: desaparición de los ruidos. Se encuentra 10 mm de la fase IV.
Acá se toma la presión diastólica.
La PA en menores de 18 años normal encuentra en tablas para ♀ y ♂
En la tercera edad se encuentra con frecuencia una forma de HTA con la PAS por
encima de 140 y la PAD por debajo de 90 mm Hg. a esta forma se llama hipertensión
arterial sistólica aislada
CONTROL FISIOLOGICO DE LA PRESIÓN SANGUÍNEA
La regulación aguda de la resistencia vascular periférica (RVP),de minutos a horas es
llevado por el sistema de control autonómico y los barorreflejos, los cuales proporcionan
una rápida respuesta de la circulación de minuto a minuto de variación y la regulación
del tono arterial por ambos factores metabólicos locales tales como el NO y adenosina y por
la variación de las señales adrenérgicas ó colinérgicas.
La regulación de la presión sanguínea (PS) a largo plazo en días ó semanas depende
más de regulación neurohumoral del volumen sanguíneo y factores renales incluyendo el
RAAS.
Control anatómico y barorreflejos:
El centro vasomotor del tallo encefálico coordinas el control anatómico de la circulación,
recibiendo señales que viene de los barorreceptores y luego transmitido los impulsos
efectores a través de las fibras vasoconstrictoras ó vasodilatadoras a las arteriolas . El
núcleo solitario es el punto de llegada de los barorreceptores en respuesta del incremento ó
disminución de la presión arterial. La señal de los barorreceptores llegan a través del nervio
vago de los cuerpos aórticos y a través del glosofaríngeo del bulbo carotidelo(seno
carotideo) que monitoriza la alta presión arterial.
Material
Sujetos de prueba hombres y mujeres
Tensiómetro aneroide, de mercurio o digital
Estetoscopios
Beakers
Agua fría
Método
Experimento N° 1: determinación de la presión arterial
Se coloca al sujeto de prueba en posición sentado, con cualquiera de los brazos
descubierto y a la altura del corazón. Este sujeto no debe haber fumado o
tomado café en la media hora previa. Se lo deja en reposo por 5 minutos. Se
escoge el tamaño adecuado del manguito para el tamaño del brazo (el manguito
debe cubrir al menos el 80% de la circunferencia del brazo). Se coloca el
manguito a 3 cm por encima de la flexura del codo, ni muy suelto ni muy
apretado. Se registra la presión arterial sistólica en el primer ruido de Korotkoff
y presión arterial diastólica en el quinto ruido de Korotkoff. (En los niños se
emplea manguito más pequeño y se registra la presión arterial diastólica en el
cuarto ruido de Korotkoff). Se hace dos o más lecturas a intervalos de 2 minutos
y se las compara. Si el primer registro difiere del segundo más de 5 mm de Hg,
se obtiene varios registros y se los compara. Se convierte a kilopascales, de
acuerdo a la siguiente equivalencia:
1 mm de Hg = 0.133 Kpa
Experimento N° 4
Se determina la presión arterial sistólica y diastólica y la frecuencia cardíaca
con el sujeto de prueba sentado. Se sumerge la mano libre en agua fría (a 5°C)
hasta cubrir la muñeca. Después de 30 segundos se determina la presión arterial
y la frecuencia cardíaca.
Se retira rápidamente la mano del agua fría y se determina nuevamente la
presión arterial y la frecuencia cardíaca en el brazo opuesto.
Se repite las determinaciones a intervalos de un minuto hasta que la presión
arterial y la frecuencia cardíaca retornen a sus valores basales.
Discusión
Medidas recomendadas para el ancho del manguito del
esfigmomanómetro : niños y adultos
Edad Medida en cm (OMS, l985)
Menor de 1 año 2a5
1 a 3 años 5a6
4 a 8 años 9 a 10
Adulto medio 12.5
Adulto obeso 14
en medio gaseoso
Introducción
El aire atmosférico, el aire espirado y el aire alveolar son mezclas de gases:
cantidades constantes de nitrógeno y cantidades variables de oxígeno y CO 2.
Estas mezclas gaseosas se encuentran a determinada presión total, resultante
de las presiones parciales de los gases que las constituyen. Las presiones
parciales son modificadas por la altitud, la temperatura y la saturación con
vapor de agua.
En la presente práctica se demuestra la diferencia en las composiciones de
estas mezclas gaseosas empleando el aparato de Fry. Este consta de una copa
de vidrio, un tubo capilar graduado y una ampolla o bulbo terminal. El bulbo
terminal tiene un extremo inferior y un brazo lateral que se continúan con tubos
de goma ocluidos. El bulbo está lleno de mercurio. El extremo inferior del
aparato se encuentra dentro de una prensa, lo que permite hacer subir o bajar la
columna de mercurio dentro del tubo capilar. La muestra de gas a analizar se
introduce a través del tubo de goma del brazo lateral.
Materiales
Sujeto de prueba
Aparato de Fry
Solución de ácido sulfúrico al 0.5%
Absorbente de CO2 (KOH 0.5 N)
Absorbente de O2 (mezcla de hidrosulfito de sodio y antraquinona sulfonato de
sodio: 10 a 1 disuelto en solución de KOH 0.5 N)
Jeringas de 5 mL con agujas 26G
Frascos goteros
Bombilla mediana
Frasco para desechos
Beaker de 500 mL
Bolsa de Douglas con pinzas de Hoffmann
Tubo de látex de 30 cm
Pedazos de goma
Método
Experimento N°1: toma de muestras
Tomar una jeringa de 5 mL con aguja de 26G, aspirar un poco de ácido sulfúrico
para humedecer y acidificar y sellar la jeringa (el ácido cubre el espacio muerto
de la aguja y la jeringa). Eliminar la solución.
a) Aire atrmosférico
Aspirar un poco de aire atmosférico y sellar la aguja insertándola en un pedazo
de goma.
b) Aire espirado
Colocar una pinza nasal en el sujeto de prueba y hacerlo respirar dentro de la
bolsa de Douglas. Pinchar con una jeringa de 5 mL con aguja de 26G la
tubuladura lateral de bolsa de Douglas y jalar y empujar el émbolo varias veces
para obtener una muestra homogénea de 3 mL. Sellar la aguja insertándola en un
pedazo de goma.
c) Aire alveolar
Colocar una pinza nasal en el sujeto de prueba y hacerlo realizar una espiración
forzada. Obtener una muestra de aire de la fase final de la espiración. Sellar la
aguja insertándola en un pedazo de goma.
Discusión
Oxígeno CO2 N2
Muestra % PO2 % PCO2 % PN2
gaseosa
Aire
atmosféri
co
Aire
espirado
Aire
alveolar
Práctica N° 30: Espirometría.
Volúmenes y capacidades
pulmonares
Introducción
La medición de los volúmenes pulmonares se realiza por medio de la
espirometría. Este procedimiento permite determinar todos los volúmenes
pulmonares, excepto el volumen residual y las capacidades que comprende este
volumen residual, cuya medición se realiza por métodos indirectos.
El registro espirográfico se realiza a velocidad constante, de manera que puede
determinarse la distancia de trazado recorrida en un minuto.
Materiales
Sujeto de prueba
Espirómetro
Pinza nasal
Pieza bucal
Regla milimétrica
Método
Experimento N° 1: obtención del espirograma
Llenar la campana de espirómetro con aire, de manera que la aguja inscriptora
marque la parte inferior del papel.
Sentar al sujeto de prueba, colocarle la pinza nasal y la pieza bucal unida por dos
tubos al espirómeto. Constatar que no haya fugas de aire.
Permitir que el sujeto de prueba respire un momento con la pieza bucal, para que
se acostumbre a ella. Una vez que la frecuencia respiratoria se ha vuelto
constante y la profundidad de la respiración uniforme, conectar al espirómetro
para obtener un trazado durante 5 a 7 minutos, con el quimógrafo a una
velocidad de 32 mm/minuto. Registrar la presión barométrica y la temperatura
del aparato. Obtener una línea basal regular (usualmente se consigue en unos
minutos). A continuación solicitar al sujeto que realice las siguientes maniobras:
a) Al final de una inspiración normal (FIN) realizar una espiración máxima y
luego respirar normalmente. Esperar hasta que el trazado se regularice.
b) Al final de una espiración normal (FEN) realizar una inspiración máxima y
luego respirar normalmente. Esperar hasta que el trazado se regularice.
c) Al final de una inspiración normal (FIN) realizar una espiración máxima
seguida de una inspiración máxima, luego respirar normalmente. Esperar hasta
que el trazado se regularice.
d) Registrar la presión barométrica y la temperatura del aparato. Anotar el
factor del aparato.
Volumen o capacidad = fa x mm
Donde:
fa = factor del aparato
mm = altura en milímetros del espacio medido
Donde:
Vol BTPS = volumen en condiciones BTPS
Vol ATPS = volumen en condiciones ATPS
P = presión barométrica
PH2O/Ts = presión de vapor de agua a la temperatura del aparato
Ts = temperatura del aparato
P – 47 = presión barométrica menos la presión de vapor de agua a la saturación
de 37 °C
273 = temperatura absoluta
37 = temperatura corporal
Donde:
Vol STPD = volumen en condiciones STPD
Vol ATPS = volumen en condiciones ATPS
P = presión barométrica
PH2O/Ts = presión de vapor de agua a la temperatura del aparato
Ts = temperatura del aparato
273 = temperatura absoluta
760 = presión barométrica standard
TEM = mm / 32 = seg
MVV = mm x fa x fBTPS x 5
Velocidad del flujo medio respiratorio máximo (MMEFR) o velocidad del flujo
espiratorio forzado (FEF 25-75%)
Es la relación del medio de la CVF y el TEM. Es el test más sensible para el
diagnóstico de la enfermedad obstructiva.
Discusión
En un trazado espirográfico se midió:
VT 11mm
Frecuencia respiratoria 13 por minuto
Temperatura del aparato 24°C
Presión barométrica 752mmHg
Factor del aparato 43.75 cc por mm
o
Consumo de O2 (VO2) 6mm
Factor de conversión a BTPS 1.080
Factor de conversión a STPD 0.0879
Determinar:
1. volumen tidal en BTPS
o
Solución
VT = 11 x 43.75 x 1.080
= 519.75 cc en BTPS
o
VE = VT x fr
= 519.75 x 13
= 6756.75 cc
o
Problemas:
En el trazado de práctica medir los volúmenes y las capacidades pulmonares.
El factor del aparato, temperatura y la presión barométrica será dado en la
práctica.
El factor de conversión será calculado por el alumno.
Determinar:
4. VT en ATPS luego en BTPS
5. VRE en ATPS luego en BTPS
6. VRI en ATPS y luego en BTPS
7. CV en ATPS luego en BTPS
8. CI en ATPS luego en BTPS
o
9. VE en BTPS
o
Resultados
Tabla N° 1
Tabla N° 2
Introducción
La ventilación pulmonar es la cantidad de aire movilizada por la respiración
dentro de una unidad de tiempo. Esta ventilación puede ser calculada en un
trazado espirográfico (VT x fr = suma de los volumenes tidales en un minuto,
corregido a BTPS) o por la medición del volumen de aire espirado recolectado en
la bolsa de Douglas en cinco minutos. También puede determinarse directamente
por la recolección en el gasómetro de Tissot. Siempre se debe contar la
frecuencia respiratoria y corregir el volumen a condiciones BTPS.
No todo el aire del volumen tidal interviene en el intercambio gaseoso, ya que
parte de él permanece en las vías aéreas, en el espacio muerto, de modo que
VT = VD + VA
Donde
VT = volumen tidal
VD = volumen de espacio muerto
VA = volumen alveolar
Estos volúmenes están presentes en una respiración, de modo que si se
multiplica por la frecuencia respiratoria se obtiene la ventilación expresada en
condiciones BTPS:
o o o
VE = VD + VA
Donde
o
VE = ventilación pulmonar
o
VA = ventilación alveolar
Material
Sujeto de prueba
Respirómetro con cal sodada
Pinza nasal
Boquilla
Aparato de Fry
Reactivos
Jeringas de 5 mL con agujas de 26 G
Bolsa de Douglas
Válvula
Manguera
Llave de tres vías para bolsa
Método
La ventilación puede medirse por método cerrado o método abierto
Experimento N° 1: método cerrado
Se realiza con el respirómetro, en el cual se hace respirar al sujeto de prueba por
un minuto. Se obtiene una muestra de aire alveolar lo más cerca posible de la
boquilla y una muestra de aire espirado del blader. Se registra la temperatura del
aparato y la presión barométrica.
VT x f = VE
Debido a que la
o o
VI = VE
Donde:
o
VI = ventilación inspiratoria
o
VE = ventilación espiratoria
Se analiza la composición del aire alveolar y del aire espirado.
o o o
VE = VA + VD
y o o o
VA = VE - VD
VI = VE
Entonces
o o
Producción de CO2
Puede calcularse por análisis del aire espirado o del aire alveolar.
o o
VCO2 = VE x FECO2
o
o o
VCO2 = VA x FACO2
Cociente respiratorio (R)
Es la relación entre la producción de CO2 y el consumo de oxígeno
o o
R = VCO2 / VO2
o
R = FECO2 / (FIO2 – FEO2)
o
R = FACO2 / ( FIO2 –FAO2)
VD = VE - VA
Pero
o o
VA = VCO2 / FACO2
Entonces
o o o
VD = VE – (VCO2/ FACO2)
Pero
o o
VE = VCO2 / FECO2
Entonces
o o o
Despejando la ecuación
o o
respiración
Introducción
El patrón respiratorio mantiene fracciones de oxígeno y CO 2 alveolares que
permiten tener presiones arteriales de oxígeno y CO 2 de 100 y 40 mmHg
respectivamente. Los cambios metabólicos producen alteraciones de las
concentraciones de oxígeno y CO2.
El CO2, debido a la producción de H +, actúa como el principal regulador químico
de la respiración, por su acción sobre los quimiorreceptores centrales y
periféricos.
Material
Sujeto de prueba
Respirómetro
Bolsa de Douglas
Aparato de Fry
Pinza nasal
Boquilla
Método
Experimento N°1: efecto de la hipoxia, estudio en
respirómetro
Llenar la campana del respirómetro con aire atmosférico. A continuación
conectar al sujeto de prueba al respirómetro preparado con cal sodada, de
manera que todo el CO2 que produzca sea absorbido y pueda observarse una
disminución del volumen de aire en la campana debido al consumo de oxígeno.
Cada dos minutos evaluar:
a) presencia de cianosis en uñas, labios y mucosas
b) frecuencia cardíaca
c) estado mental: contar el número de vocales en un texto proporcionado.
d) síntomas generales: sensaciones extrañas, mareo, alteraciones del
equilibrio, alteraciones visuales.
e) trazado espirográfico.
El trazado espirográfico debe ser de 12 segundos.
Realizar a intervalos regulares análisis de gases con el aparato de Fry para
determinar el grado de hipoxia al que es sometido el sujeto.
Esta experiencia debe realizar siempre bajo la supervisión del profesor debido
riesgo implícito de la hipoxia. La prueba se realiza con sujeto sentado; sin
embargo, algunos de los síntomas generales son más evidentes si el sujeto se
pone de pie.
Discusión
creatinina.
Método
Experimento N° 1
Pesar y tallar al alumno en estado de ayuno.
Ingerir agua a razón de 20 ml/kg en 15 minutos.
Evacuar la vejiga por micción espontánea y anotar la hora de inicio de la prueba.
Obtener 5 ml de sangre venosa de la flexura del codo en un frasco con
anticoagulante
Después de 40 minutos evacuar la vejiga y calcular el volumen urinario por
minuto.
Analizar las muestras de sangre y orina para determinar las concentraciones de
creatinina.
Determinar la depuración de creatinina de acuerdo a la siguiente fórmula:
Procedimiento:
Desproteinizado deFolin Wu (filtrado al 10%
En un frasco de color caramelo colocar:
- 2 ml de sangre total oxalatada
- Añadir 14 ml de agua destilada
- 2 ml de ácido sulfúrico 2 / 3 N.
- 2 ml de tunstato de sodio al 10%.
Agitar en forma vigorosa, reposar por 10 minutos. Luego filtrar ó centrifugar la
muestra.
Hombre= 1
Mujer = 0.85
Discusión
Práctica N° 37: Pruebas de
concentración y dilución
Organice sus conceptos:
-Regulación del volumen de los fluidos corporales.
-Manejo del agua corporal
-Mecanismo de contracorriente en la generación de la hiperosmolaridad
-Papel de las hormona antidiurética
Introducción
La prueba de concentración y dilución urinarias se emplea para estudiar la
función del asa de Henle, tubo colector y acción de la hormona arginina
vaspresina (AVP).
La depuración osmolar se designa C osm y se calcula de acuerdo a la fórmula
general de depuración (C):
C =U/PxV
De donde
Cosm = Uosm / Posm x V
V = CH2O + Cosm
De donde la depuración de agua libre es:
CH2O = V - Cosm
Dado que la concentración de agua libre en el filtrado glomerular es cero, el
agua libre presente en la orina proviene de otras fuentes:
(a) adición de agua libre en la orina tubular
(b) reabsorción de algunos solutos osmóticamente ativos, de manera que se
libera una cantidad de agua libre.
V’ = Cosm – TCH2O
De donde:
TCH2O = Cosm – V’
Material
Sujeto de prueba
Balanza
Tallímetro
Probeta graduada
Frascos para orina
Beaker de 1 lt
1 ampolla de furosemida
1 ampolla de ADH (Pitressin)
Jeringa
Método
Experimento N° 1: prueba de dilución, test de sobrecarga
hídrica
Colocar al sujeto de prueba en reposo durante la misma.
Evacuar la vejiga por micción espontánea y marcar la muestra.
Ingerir 20 ml de agua por Kg de peso en 15 minutos. Al terminar la ingesta de
agua, marcar la hora e iniciar la recolección de la orina cada 20 minutos por
micción espontánea, en muestra separadas, por tres horas.
Determinar el momento en que se produce la mayor diuresis.
Determinar el volumen de orina evacuado en cada una de las muestras.
Determinar la densidad urinaria de cada una de las muestras.
Experimento N° 3: control
Colocar al sujeto de prueba en reposo durante la misma.
Evacuar la vejiga por micción espontánea y marcar la muestra.
Iniciar la recolección de la orina cada 20 minutos por micción espontánea, en
muestra separadas, por tres horas.
Determinar el momento en que se produce la mayor diuresis.
Determinar el volumen de orina evacuado en cada una de las muestras.
Determinar la densidad urinaria de cada una de las muestras.
Experimento N° 5: cálculos
La medición de la osmolaridad se realiza con un osmómetro a partir de la
determinación de la depresión del punto de congelación. Si no se dispone de un
osmómetro puede asumirse una regla para determinar la posible osmolaridad a
partir de la densidad urinaria.
Si la osmolaridad plasmática es 290 mOsm/L y su densidad 1.010 g/mL, entonces
puede inferirse que:
Si
Uosm = Posm
Entonces
Uosm / Posm = 1
Y
Cosm = V
Discusión
Práctica N° 38: Acidificación y
alcalinización de la orina
Actualiza tus conceptos sobre:
Introducción
Los riñones regulan la eliminación a través de la orina de sustancias ácidas o
alcalinas para regular el pH sanguíneo. En condiciones basales se excretan 1200
ml de orina por día, junto a los productos finales del metabolismo y el exceso de
iones. El riñón es capaz de ajustar el pH de la orina en límites muy amplios, de
4.5 a 8.5, con el fin de conservar el pH sanguíneo en 7.4.
El balance de hidrogeniones se obtiene de la diferencia entre la producción y la
excreción de los mismos. Dentro de la producción se considera tanto la
producción endógena como la liberación de hidrogeniones a partir del
metabolismo de los alimentos, de modo que:
•
•
Material
Sujeto de prueba
Cloruro de amonio 0.5% -500 ml
Bicarbonato de sodio al 10% - 500 ml.
Potenciómetro
Beaker
Probeta graduada
Frascos para orina
Buretas para titulación
Solución de fenolsulfotaleina al 1%
Solución de NaOH 0.1 normal
Formol al 40% con el pH austado a
Método
Experimento N° 1: acidificación urinaria
Colocar al sujeto de prueba en reposo.
Evacuar la vejiga por micción espontánea y marcar la muestra.
Administrar 500 ml de solución de cloruro de amonio al 0.5 % en 15 minutos.
Iniciar la recolección de orina cada 20 minutos por micción espontánea, en
muestras separadas durante tres horas.
Determinar el pH de orina evacuado en cada una de las muestras.
Experimento N° 3: control
Colocar al sujeto de prueba en reposo.
Evacuar la vejiga por micción espontánea y marcar la muestra.
Iniciar la recolección de orina cada 20 minutos por micción espontánea, en
muestras separadas durante tres horas.
Determinar el pH de orina evacuado en cada una de las muestras.
Experimento N° 4: cálculos
Con el pH determinado puede calcularse la concentración de hidrogeniones a
partir de su definición:
pH = - log [H+]
De donde
[H+] = antilog (-pH)
Discusión
Hematocrito. Velocidad de
sedimentación
Introducción
La hemoglobina es la proteína encargada del transporte de oxígeno en la sangre.
En esta práctica se realizará su dosaje.
El hematocrito se define como el porcentaje de volumen globular de una muestra
de sangre.
La sangre es una suspensión de elementos formes en plasma que al ser
colocada en reposo sedimenta. La velocidad a la que ocurre este fenómeno,
denominada velocidad de sedimentación globular, varía según el sexo, la edad y
el estado de salud o enfermedad.
Material
Sujetos de prueba varones y mujeres
Pipeta de Sahli
Lanceta
Solución diluida de Drabkin
Fotocolorímetro ó Espectrofotómetro
Tubos graduados de fotocolorímetro ó cubetas del espectrofotómetro
Algodón
Alcohol yodado
Jeringas descartables de 5 ml
Ligadura
Frasco con anticoagulante de Wintrobe ó EDTA
Tubo de Wintrobe
Centrífuga
Tubo capilar de microhematocrito con anticoagulante
Microcentrífuga
Plastilina
Gradilla
Pipeta de Pasteur con tubo capilar largo
Reloj
Tubo de Westergreen
Tubo de Cutler
Método
Experimento N° 1: dosaje de hemoglobina
Obtener una muestra de sangre venosa y colocarla en el frasco con
anticoagulante ó sangre capilar del pulpejo del dedo anular. Si se trabaja con
sangre con anticoagulante agitar por 5 minutos, cargar la pipeta de Salí-Haden
hasta la marca de 20 microlitros. Transferir luego la muestra de sangre a un
tubo graduado preparado con 5 ml de solución de Drabkin. Reposar 5 minutos y
luego llevar al espectrofotómetro para su lectura con filtro verde ó una banda de
540 mμ.
Discusión
Práctica N° 16:
Petequiometría. Coagulación
de la sangre. Fibrinolisis
Introducción
Hemostasia : significa prevención de la pérdida de sangre y el organismo
pone los siguientes mecanismos de compensación:
-Espasmo vascular por vasoconstricción: por secreción de serotonina, actividad
miogena de la fibra muscular lisa vascular y producción de tromboxane A2.
-Agregación plaquetaria: El colágeno de la matriz vascular y el factor de Von
Willebrand se pone en contacto con la glicoproteína GpIb y se inicia la liberación
plaquetaria de ADP donde las plaquetas se hinchan y emiten pseudópodos y
expresan las GPIIb y GPIIIa para lo cual requieren una molécula de fibrinógeno.
Así se forma el tapón plaquetario o tapón blanco
-Coagulación sanguínea: Formación del coagulo de fibrina (Trombo rojo) a través
de la activación de los factores por dos vías de la cascada de coagulación.
La coagulación se realiza en tres etapas:
a.- Formación del complejo activador de la protrombina.
b.- Conversión de protrombina en trombina
c.- Conversión de fibrinógeno en fibrina.
• -Fibrinolisis: El sistema fibrinolítico tiene por objeto producir una enzima
principal que es la plasmina que resulta de la activación del
plasminógeno
Método
Experimento N° 1: prueba de torniquete, prueba de
permeabilidad capilar
La prueba de torniquete es una prueba clínica de permeabilidad capilar que
estudia su fragilidad.
El tiempo de sangría es una prueba para la contractibilidad capilar, mide el
tiempo requerido para suspensión del sangrado proveniente de una herida
estandarizada.
El tiempo de coagulación es una prueba que mide la velocidad de coagulación de
la sangre en ausencia de los factores extrínsecos o tisulares.
Los mecanismos de coagulación y fibrinolisis se encuentran en estado de
equilibrio en el hombre. Cuando se activan los procesos de coagulación en el
hombre también se activan los procesos fibrinolíticos.
Material
Sujetos de prueba varones y mujeres
Tensiómetro
Estetoscopio
Petequiómetro
Lancetas descartables
Papel de filtro
Láminas de vidrio
Jeringas descartables de 5 mL (picos sin rosca)
Tubo capilar sin anticoagulante
Tubos de ensayo de 11 mm de diámetro interior
Bañomaría
Gradillas de plástico
Alcohol yodado
Algodón
Ligadura
Tubos de ensayo etiquetados A, B, C y D
Heparina
Estreptoquinasa
Método
Experimento N° 1: prueba de torniquete, prueba de
permeabilidad capilar
Determinar la presión arterial sistólica y diastólica y calcular la presión arterial
media.
Colocar el manguito del tensiómetro en uno de los brazos e insuflar hasta
alcanzar el valor de la presión arterial media. Mantener esta presión por 5
minutos. Liberar el brazo y dejar reposar por 15 minutos. A continuación contar el
número de petequias en un área circular de 5 cm de diámetro justo por debajo de
la flexura del codo. Un recuento mayor de 5 es anormal y refleja un incremento
en la fragilidad capilar.
Experimento N° 7: fibrinolisis
Obtener una muestra de sangre venosa por punción de vena en forma rápida y lo
menos traumática posible. Colocar 1 mL de sangre en los 4 tubos de prueba
etiquetados.
En el tubo A añadir 1 gota de heparina inmediatamente luego de obtener la
muestra. Determinar el tiempo de coagulación.
En el tubo B determinar el tiempo de coagulación y luego añadir 1 gota de
heparina. Observar si se presenta algún cambio.
En el tubo C determinar el tiempo de coagulación y luego añadir 1 gota de
estreptoquinasa. Observar si se presenta algún cambio. Determinar nuevamente
el tiempo de coagulación.
En el tubo D determinar el tiempo de coagulación y luego añadir 1 gota de
estreptoquinasa + 1 gota de heparina. Observar si se presenta algún cambio.
Determinar nuevamente el tiempo de coagulación.
Discusión
Práctica N° 17: Recuento eritrocitario y
leucocitario. Cálculo de constantes
corpusculares
Introducción
El recuento eritrocitario informa sobre el número de glóbulos rojos de una
muestra de sangre. Se obtiene mediante la dilución en líquido isotónico y la
lectura en la cámara de Neubauer.
Los estudios cuantitativos de los valores corpusculares requieren mediciones
precisas del hematocrito, el recuento eritrocitario y la hemoglobina, las tres
pruebas básicas para el estudio de los desórdenes de los glóbulos rojos.
Material
Sujetos de prueba varones y mujeres
Microscopio
Cámara de Neubauer con cubreobjeto
Pipeta de dilución de Thoma para glóbulos rojos
Manguera de succión de jebe
Solución de Hayem
Frasco con anticoagulante de Wintrobe
Lancetas
Jeringa descartable de 5 ml
Alcohol yodado
Algodón
Eter
Ligadura
Método
Experimento N° 1: recuento eritrocitario
Obtener una muestra de sangre venosa por punción de vena y colocarla en un
frasco con anticoagulante de Wintrobe. Agitar por 5 minutos y cargar la pipeta de
dilución de Thoma para glóbulos rojos hasta alcanzar la marca 0.5. Aspirar
solución de Hayem hasta alcanzar la marca 101. Colocar la pipeta en posición
horizontal y dejarla reposar por 5 minutos. Agitar nuevamente tapando ambos
extremos de la pipeta, descartar 2 gotas y finalmente colocar 1 gota entre el
cubreobjetos y la oquedad geométrica de la cámara de Neubauer. El líquido se
extiende rápidamente por capilaridad en el reticulado. Dejar reposar por unos
minutos. Iniciar el recuento empleando el objetivo de gran aumento en 5 de los
cuadrados menores del cuadrado central de la cámara de Neubauer. Se
recomienda utilizar los cuadrados de las esquinas y uno central.
Por convención se considera en el recuento a los hematíes que se superponen a
los márgenes superior e izquierdo y no se considera en el recuento a los
hematíes que se superponen a los márgenes inferior y derecho.
Siempre que la dilución haya sido 1/200, es decir, que la sangre alcanzó la marca
0.5, el número de hematíes encontrados en 5 grupos de 16 cuadrados menores
se multiplica por 10,000 para obtener el número de hematíes por milímetro
cúbico de sangre.
Los cuadrados menores de la cámara de Neubauer tienen un área de 0.0025
mm2 y una profundidad de 0.1 mm. Su volumen es de 0.00025 mm3. El volumen
estimado de los 80 cuadrados menores contados es de 0.02 mm3. Para calcular
la cantidad de glóbulos rojos por mm3, el número de glóbulos contados debe
multiplicarse por 50. Dado que la dilución fue 1/200, el factor de multiplicación
es 50 x 200, es decir 10,000.
Discusión
periférica
Introducción
El frotis de sangre periférica es un examen empleado fundamentalmente para
determinar las características de los leucocitos.
Existen diferentes tipos sanguíneos determinados por la presencia de antígenos
en la superficie de los eritrocitos. Estos tipos pueden ser reconocidos mediante
anticuerpo. Se ha identificado varios sistemas de grupo sanguíneo. Los más
importante en la práctica médica son los sistema ABO y Rh.
El sistema m.as importante es el Sistema ABO: descubierto pos Karl Landsteiner,
en 1901, que describe 4 fenotipos principales: (A,B, AB y O)El gen ABO se
encuentra localizado en el brazo largo del cromosoma 9.
ANTÍGEMOS MÁS FRECUENTES(SISTEMA DE GRUPOS SANGUINEOS
SISTEMA ABO (antigenos) Ab anti
B A
A1 B
A2 B (posible A1)
0 A, B
-
AB
Rh C
c
MNSs M
N,S,s
P P1
Lutheran Lu
Kell K
Lewis Le
Duffy Fe
Kidd Jk
SUB-TIPO DE A:
80% de A son del subtipo A1
Los eritrocitos A tienen aprox 1 millón de antigenos/célula
Los eritrocitos A2 tienen sólo 200,000/célula
Los individuos A2 pueten producir anti-A1
Existen otros grupos más débiles
Los aglutinógenos: son los antígenos de membrana(ver composición de hidrato
de carbono) y aglutininas son los anticuerpos presentes (Ig G).
Factor Rh;
Presencia de antígenos (proteína de 34 kD)
N presencia natural de anticuerpos.
Mas de 45 antígenos
El grupo D es el más frecuente (Rh+)
Gen RH localizado en el brazo corto del cromosoma 1
GENETICA DE FACTOR Rh;
86% blancos Rh(D) positivo
El gen d es recesivo:
• Dd, dD, DD, son Rh(D) positivos
• Solo dd son Rh negativos
PROBLEMAS DERIVADOS DEL Rh:
Los anticuerpos los producen los rh (D-) cuando se transfunden con Rh
(D+), o por sensibilización en el embarazo (madre rh, feto Rh)
• embarazo 1 : sensibilización madre
• embarazo2 : los anticuerpos pasan al feto (Rh) hemolisis.
profilaxis : IgG anti D tras el primer embarazo
Material
Sujetos de prueba varones y mujeres
Láminas de vidrio portaobjeto y cubreobjeto
Gotero
Solución tampón
Colorante de Wright
Lancetas
Alcohol al 70%
Algodón
Microscopio
2 varillas de vidrio unidas con tubos de goma
Agua destilada
Suero anti-A
Suero anti-B
Suero anti-D
Láminas excavadas
Método
Experimento N° 1: frotis de sangre periférica
Obtener una muestra de sangre capilar por punción del pulpejo del dedo anular
de la mano izquierda. Descartar la primera gota de sangre. Por compresión,
obtener 3 gotas y colocarlas en 3 láminas de vidrio. Realizar el frotis a lo largo
de la lámina, secar la preparación por aereación y colocar las láminas encima de
las varillas de vidrio. Cubrir con el colorante de Wright por 1 minuto, luego gotear
la solución tampón y dejar reposar por 3 minutos hasta obtener un color verde
metálico. Limpiar con agua corriente el exceso de colorante. La lámina debe
quedar de color amarillento rosado. Secar y llevar al microscopio con lente de
inmersión. Reconocer los elementos de la sangre periférica y realizar su
recuento.
Experimento N° 2
Obtener una muestra de sangre capilar por punción del pulpejo del dedo anular
de la mano izquierda. Descartar la primera gota de sangre. Por compresión,
obtener 3 gotas y colocarlas en 3 excavaciones de la lámina excavada. Agregar a
la excavación No.1 1 gota de suero anti-A. Agregar a la excavación No.2 1 gota de
suero anti-B. Agregar a la excavación No.3 1 gota de suero anti-D. Mezclar y
agitar suavemente por 2 minutos. Observar los resultados producidos.
Discusión
Práctica N° 19: Circulación
capilar
Introducción
Existen factores que regulan la circulación capilar: el tono vascular, la presencia
de proteínas de señal u hormonas.
Material
Sapos grandes
Equipo de disección
Tabla de fijación para batracios
Solución de Ringer para batracios
Solución de adrenalina al 1/10000
Solución de acetilcolina
Método
Experimento N° 1
Se anestesia al sapo por destrucción del cerebro y de la médula espinal. Se
coloca al animal en la tabla de fijación y se hace una incisión en la línea media
del abdomen. Se identifica los intestinos y el mesenterio y se los expone sobre
una lámina de vidrio.
Se lleva la preparación al microscopio y se observa la circulación de las células
de la sangre a través de los capilares
Experimento N° 2
Se instila una gota de solución de acetilcolina y se observa los cambios en el
patrón circulatorio.
Experimento No 3
Se instila una gota de solución de adrenalina y se observa los cambios en el
patrón circulatorio.
Discusión
Práctica N° 20: Aglutinación y
hemólisis biológica
Introducción
En condiciones fisiológicas no se observa aglutinación y hemólisis de eritrocitos,
pero estos fenómenos aparecen en condiciones patológicas e infecciones.
Se debe distinguir la verdadera aglutinación de la seudoaglutinación. La
seudoaglutinación es la formación de pilas de eritrocitos y se observa
frecuentemente en el mieloma múltiple, kala-azar, sarcoide de Boeck y
crioglobulinemia, así como en otras enfermedades que cursan con niveles de
globulinas y de fibrinógeno elevados. Este el proceso fundamental que conduce
al aumento de la velocidad de sedimentación globular. La seudoaglutinación se
produce con mayor rapidez a 37°C, pero también ocurre en frío; disminuye en los
casos de esferocitosis; desaparece en la dilución escasa del plasma y es
inhibida por la presencia de lecitina. Las propiedades seudoaglutinadoras de un
plasma no desaparecen por la absorción repetida de eritrocitos.
Se denomina isoaglutinación a la aglutinación de los eritrocitos de un individuo
por el suero de otro y depende de los diversos grupos sanguíneos. Se denomina
autoaglutinación a la aglutinación de los eritrocitos de un individuo por su
mismo suero y constituye un fenómeno raro, salvo bajo la forma de aglutinación
en frío.
La criohemoalgutinación es el fenómeno en el cual los eritrocitos y el suero de
un mismo individuo presentan aglutinación en frío (0 a 5 °C); este proceso puede
ser revertido elevando la temperatura por encima de 20 a 30°C y puede repetirse
por enfriamiento por debajo de 10 a 20°C. El anticuerpo contenido en tal suero
aglutina a todos los eritrocitos humanos, sin tener en cuenta el grupo sanguíneo
al que pertenezcan. Este anticuerpo también es activo, en grado variable, contra
eritrocitos de otras especies. Se puede observar presencia de
criohemoaglutininas en neumonías atípicas primarias, anemias hemolíticas
adquiridas, tripanosomiasis, espirilosis, cirrosis hepática, etc.
Material
Sangre de conejo heparinizada
Suero de perro
Tubos de prueba de 5 y 10 mL
Pipeta de Pasteur
Microscopio
Láminas
Tubos de centrífuga
Centrífuga
Varillas aplicadoras
Método
Experimento N° 1
Se obtiene una muestra de sangre de conejo por medio de una jeringa
heparinizada. La muestra es colocada lentamente en un tubo de prueba de 10 mL
etiquetado “células de conejo”.
Se obtiene una muestra de sangre de perro por medio de una jeringa no
heparinizada. La muestra es colocada suavemente en un tubo de centrífuga y
dejada reposar a temperatura ambiental. Después que la sangre ha coagulado,
se descarta el coágulo con una varilla aplicadora y lo restante es puesto en el
refrigerador durante toda la noche. Se centrifuga la sangre a 2500 rpm; se retira
el suero con una pipeta de Pasteur y se coloca en un tubo de prueba etiquetado
“suero de perro”.
En un tubo de prueba de 10 mL se coloca 2 mL de suero de perro y se añade dos
gotas de células de conejo. A continuación se examina una gota de la
preparación bajo microscopio. Se deja el tubo de prueba a temperatura
ambiental y se lo examina una hora más tarde.
Discusión
Material
Sujetos de prueba
Jeringas
Tubos de prueba de 5 y 10 mL
Pipeta de Pasteur
Microscopio
Láminas
Tubos de centrífuga
Centrífuga
Varillas aplicadoras
Suero antiglobulina
Método
Experimento N° 1: prueba cruzada mayor, técnica
antiglobulina indirecta
Se prepara una suspensión al 2% en suero salino de los eritrocitos del donante
prospectivo. Se separa el suero del receptor de una muestra de sangre
coagulada obtenida dentro de las 24 horas.
En un tubo de prueba rotulado se coloca dos gotas de suero del receptor. Se
añade al tubo dos gotas de la suspensión al 2% de los eritrocitos del donante. Se
lleva a la centrífuga por un minuto y a continuación se busca la presencia de
aglutinación.
Si no se observa aglutinación, se coloca a bañomaría a 37°C y se incuba por 15
minutos.
Se lava los eritrocitos tres veces con tubos llenos de suero salino, seguidos cada
vez por centrifugación y una remoción tan completa como sea posible del
sobrenadante.
Después de la última lavada, se descarta el sobrenadante y se resuspende a los
eritrocitos en la gota de solución salina restante en el tubo. Se añade dos gotas
de suero antiglobulina, se centrifuga por un minuto y se examina macroscópica y
microscópicamente buscando aglutinación.
La presencia de aglutinación en la primera fase de la prueba indica
incompatibilidad causada por anticuerpos completos. La aglutinación que no se
produce en la primera fase de la prueba sino que aparece después de la prueba
antiglobulina indica incompatibilidad causada por anticuerpos incompletos.
Discusión
Práctica N° 24: Test de Galli
Mainini. Test de Aschheim-
Zondek. Pruebas de embarazo
Introducción
• El control neuroendocrino de la función reproductiva es expresada a través de la secreción
episódica de las hormonas gonadotróficas de la glandula pituitaria anterior en respuesta a la
estimulación pulsátil por la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) producida por un
plexo de neuronas peptidergicas del hipotálamo. La característica de la secreción pulsátil de
GnRHde las neuronas hypotalámicas es dependiente sobre la acción de una interacción
autocrina entre GnRH y sus receptores expresadas en las neuronas productoras de GnRH.
•
•
Gonadotropinas:
• La FSH y la LH son glucoproteínas, heterodímeros, constituida por una subunidad α de 92
aa identicos para la FSH,LH,TSH y una subunidad β de 121 aa para LH, 117 para la FSH y
145 para la gonadotrofina corionica (hCG). LA vida media para la FSH es de 170 min; para
la LH es de 60 min; La frecuencia de pulsos para LH es de 90 min, en la fase folicular
temprana y 60 en la fase folicular tardía, en la fase luteal temprana es 100 y en la tardía es
200 min, Estas variaciones es la responsable para los cambios de los niveles de FSH y LH y
liberación de esteroides ováricos durante esas fases del ciclo menstrual. La prolactina
humana es de 199 aa con tres puentes disulfuro es semejante a la GH y dura 20 min;
• Los receptores para la FSH, LH son en serpentina que trabaja con la proteína G Son
glucoproteínas que tiene ác. Siálico y residuos de H d C. que depuran.
• Acciones:
• El FSH en el varón ayuda a mantener el epitelio espermatogénico vía estimulación de las
células de Sertoli vá AMPc.y en la mujer es la encargada del crecimiento de los folículos
ováricos y las células de la granulosa y estimula la secreción de estrógenos
• La LH tiene efecto trófico en las células de Leydig en el varón y la producción de
andrógenos y en las mujeres es la encargada de la maduración de los folículos ováricos
células de la teca ovárica, ruptura , ovulación y secreción de estrógenos, además induce la
formación del cuerpo amarillo y la secreción de progesterona
•
•
Método
Experimento N° 1: test de Aschheim-Zondek
Cuatro días antes del experimento se separan y pesan dos ratas blancas
impúberes de unos 21 días de edad. A la primera rata se le administra orina de
gestante y a la segunda rata orina de no gestante. Se administra 1 mL de orina
en la mañana y en la tarde durante tres días, de manera que la dosis total sea de
6 mL. Los animales son guardados en jaulas separadas. Se sacrifica a los
animales 96 a 100 horas después de la primera inyección.
Se examina el orificio vaginal de los dos animales, comparando su tamaño y
permeabilidad. Con una jeringa se retira y se mide el volumen de fluido uterino.
Luego se abre las cavidades abdominales y se expone los ovarios, trompas y
útero de cada animal. Se examina los órganos con la lente de aumento y se
busca cuerpos lúteos y cuerpos hemorrágicos en la superficie de los ovarios.
Experimento N° 3
Se coloca una gota de suero en la lámina y se agrega una gota de orina
problema, se mezcla durante treinta segundos. Se añade una gota de látex
sensibilizado con gonadotrofina coriónica y se mezcla durante dos minutos. Si no
se produce aglutinación la prueba se considera positiva.
Discusión
Práctica N° 25: Calorimetría
en humanos
Introducción
El efecto más característico de las hormonas tiroideas es el incremento del
metabolismo basal, del consumo de oxígeno por los tejidos y de la producción de
calor por el organismo.
En humanos, la extirpación de la glándula tiroidea disminuye el consumo de
oxígeno a cifras inferiores, del 30 a 50% de lo normal. En los hipertiroideos
aumenta el consumo de oxígeno.
El aumento o disminución del metabolismo basal a partir de la determinación del
consumo de oxígeno se ha empleado como método diagnóstico del
hipertiroidismo y del hipotiroidismo.
En los sujetos hipertiroideos con sintomatología definida el metabolismo basal
está incrementado en 40 a 60% y puede superar más del 100%. Al aumentar el
metabolismo disminuyen las reservas de carbohidratos y se emplea grasas para
cubrir las necesidades metabólicas. Este produce pérdida de peso y aumento de
la temperatura corporal. Debido a que los mecanismos de disipación de calor
están sobrecargados, los sujetos hipertiroideos toleran muy mal los ambientes
cálidos. Las hormonas tiroideas aumentan la frecuencia cardíaca y la presión
arterial sistólica.
El sujeto hipotiroideo presenta síntomas opuestos: metabolismo bajo,
temperatura inferior a la normal, depósito de grasa y reacciones lentas.
Material
Sujeto de prueba
Espirómetro
Método
Experimento N° 1
El sujeto de prueba debe descansar o tener el mínimo de actividad por lo menos
doce horas antes del procedimiento. Debe ingerir una dieta ligera, no tomar
alcohol, dormir sin emplear medicamentos y no realizar ninguna actividad normal
durante la noche anterior al examen. Se debe levantarse a las seis de la mañana,
vestirse sin realizar movimientos acentuados, caminar lo menos posible y, si
viaja, no manejar. Debe permanecer en ayunas.
El sujeto debe respirar de manera tranquila, no debe realizar ningún esfuerzo. El
objetivo es lograr una gráfica regular y uniforme.
Se instala al sujeto de prueba en una habitación cómoda y abrigada y se los deja
descansar recostado por al menos media hora.
Se prepara el espirómetro con cal sodada, se coloca la pieza bucal y se conecta
al sujeto de prueba. Mientras el paciente respira aire ambiental se chequea el
aparato. Se inicia el registro espirográfico. Se continúa hasta obtener una línea
basal ascendente adecuada. Esto puede tardar de cuatro a quince minutos,
según la salud y el grado de cooperación del sujeto.
Se mide el consumo de oxígeno para tres minutos. Se determina la distancia
recorrida en tres minutos, entre el punto inicial en la línea basal y el punto final
en la línea vertical. Se traza una recta que una estos dos puntos. Desde el primer
punto se prolonga una horizontal y desde el segundo punto se traza una línea
vertical descendente, de manera que sea perpendicular a la horizontal. Se
determina el punto de intersección entre las dos líneas. La altura desde el punto
de intersección al segundo punto representa el consumo de oxígeno.
Este volumen de oxígeno consumido en tres minutos se debe convertir a volumen
por minuto. Está expresado en condiciones ATPS y debe corregirse a condiciones
STPD.
El volumen de oxígeno consumido calculado en condiciones STPD debe
convertirse en volumen por metro cuadrado dividiéndolo entre la superficie
corporal del sujeto de prueba.
A partir del consumo de oxígeno se puede calcular el índice metabólico basal.
Con una dieta promedio se asume que el cociente respiratorio es 0.85, de
manera que la producción de calor en calorías por metro cuadrado de superficie
corporal por hora pueda ser leída directamente del respectivo nomograma. El
equivalente calórico de 1 litro de oxígeno en estas condiciones es 4.825.
Discusión
V1 = V0T1P0 / T0P1
o
Vol STPD = {[Vol ATPS x (Pb – PH2O / Ts)] / 760} x [273 / (273 + Ts)]
Donde:
Vol = L/h
Pb = presión barométrica
PH2O = presión de vapor de agua
Ts = temperatura del aparato
El valor calórico de los litros de oxígeno varía según el cociente respiratorio. Con
una dieta promedio el cociente respiratorio es 0.8 y el equivalente calórico es
4.8 cal/L, por lo que el número de calorías por hora será:
Cal/h = 4.8 cal/L x L/h
Dado que el número de calorías es proporcional al peso y a la superficie
corporal, entonces:
S = K x ³V p²
o
S = K x logW x 2/3
Donde:
S = superficie corporal
K = constante de von Muralt
Equivalentes calóricos a
diferentes cocientes
respiratorios (R)
R no proteico Equivalente calórico en
cal/L
0.70 4.69
0.75 4.74
0.80 4.80
0.85 4.86
0.90 4.92
1.00 5.05
Hombre 12.3
Conejo 11.2
Cobayo 8.5
Ratón 11.4
Discusión:
glucosa
Introducción
Fisiología de páncreas endocrino
• Metabolismo de carbohidratos:
• El estado post absortivo se refiere al periodo entre 6 á 12 horas después de la
comida, el estado postabsortivo (postprandial) es el periodo comprendido entre
sexta hora hasta la 12 hrs y el estado de ayuno ó es más allá de las 12 horas.
• En el estado absortivo ingresa los alimentos como aa, monosacáridos , triglicéridos y
ácidos grasos los serán conducidos, las grasa a los adipositos, los a.a a los tejidos
para formar las proteínas y los carbohidratos a los tejidos donde serán quemados
para dar energía, glucógeno muscular y glucógeno hepático.
• En el estado postabsortivo, la glucosa plasmática, se encuentra estable entre el
ingreso y la remoción en la misma magnitud. En este estado toda la glucosa que
entra en la circulación viene de hígado.
• Los riñones puede contribuir en casos de ayuno prolongado (de varios días).
• En el estado postabsortivo ó ayuno :
• La glucosa hepática deriva de dos fuentes: glycogenolisis del glucógeno hepático ó
la síntesis de nuevas moléculas de glucosa (gluconeogénesis), predominando la
primera en la noche de ayuno y luego a segunda.
• Los principales substratos gluconeogénicos son los llamados precursores de tres
carbonos (lactato, alanina y glicerol).
• El glicerol viene de la lipólisis del tejido adiposo, y los lactatos y alanina vienen de
la glicólisis en el músculo esquelético, tracto gastrointestinal y glóbulos rojos.
• En el estado postabsortivo la glucosa entra y sale de la circulación a la frecuencia de
12μmol por kilogramo de peso corporal por min. (2 gr por min.)- no hay reserva de
glucosa.
• Cerca del 80% de la glucosa captada es independiente de la insulina y ocurre en
cerebro, tejido esplágnico y glóbulos rojos,
• Los músculos y los adipositos son dependientes de la insulina, ellos toman poca
glucosa en el estado postabsortivo por que el nivel de insulina plasmático es baja por
lo que usan ácidos grasos como combustible en el hígado corazón y riñones.
• El control hormonal es dado principalmente por la insulina y el glucagon de las
concentraciones plasmáticas de glucosa. La sensibilidad tisular a la insulina difiere; a
baja concentraciones de insulina circulante limita la lipólisis (evita la degradación de
las grasas) en tejido adiposo y promueve la captación de glucosa por el músculo.
• El efecto simultaneo del glucagon sobre la glycogenolisis hepática y la
gluconeogénesis precisa el balance de los efectos supresivos de la insulina sobre esos
procesos
• Sumario de la glucosa normal en estado postabsortivo
• Glucosa plasmática μmol/Kg/min porcentaje
• Oferta:
• Débito hepático 12 100
• glycogenolisis 9 75
• gluconeogénesis 3 25
• Consumo
• Captación cerebral 6 50
• Esplagnica 2.4 20
• musculo 1.8 15
•
Material
Sujeto de prueba en ayunas
Glucosa 75 gr. Anhidra, disuelta en 300 ml de agua más zumo de tres limones
Glucómetro “Glucotrend” con las cintas reactivas
Balanza
Tallímetro
Tubos de prueba
Pipetas
1 fiola de 100 mL
Matraz de 1000 ml
Reactivos para análisis de glucosa en orina:
Sulfato de cobre (puro cristalizado) 17.3 g
Citrato de sodio o potasio (cristalizado) 173.0 g
Carbonato de sodio (cristalizado) 200.0 g
Agua destilada, c.s.p. 1000.0 ml
Paso previo:
-Colocar el ship del glucómetro
-Encender y ver el número de cinta reactiva que reconoce para su uso
-Colocar la tira reactiva en el glucómetro para su reconocimiento.
Fisiología normal.-
El estado post absortivo se define al periodo comprendido de 6 a 12 horas
después de la comida. El estado postparndial es el comprendido de 0 a 6 hrs y el
estado de ayuno más allá de las 12 hrs. En el estado post absortivo la glucosa
viene del hígado. ( los riñones produce glucosa después da varios días de ayuno.
La glucosa hepática viene del glucógeno (glycogenolisis) y la síntesis de de
nuevas moléculas de glucosa (gluconeogénesis). La producción de la glucosa en
el estado postabsortivo es de 1-2 mg Kg. del peso corporal por minuto.
Método
Experimento N 1
Pesar y tallar al alumno en estado de ayuno de 12 horas.
Hacer una determinación de glicemia en ayunas y después administrar una
solución de 75 gr de glucosa. Obtener muestras de sangre cada 30 minutos por
2 horas y determinar la glicemia. Simultáneamente buscar presencia de glucosa
en orina.
Construir el gráfico correspondiente.
Experimentos N° 2: test de Benedict
El test de Benedict puede detectar concentraciones tan pequeñas como 0.15 a
0.2 por ciento de glucosa. La solución de Benedict no es reducida por el ácido
úrico, la creatinina, cloroformo o aldehídos.
Para prepararla, disolver el citrato de sodio y el carbonato de sodio en 700 ml de
agua destilada con ayuda de calor y filtro. Disolver el sulfato de cobre en 100 ml
de agua destilada y añadir lentamente a la primera solución, agitando
constantemente. Dejar enfriar y completar a un litro.
Tomar 5 ml del reactivo y calentar en un tubo hasta la ebullición, para asegurrarse de que
nada del cobre precipitará por el calor solamente. Añadir 8 a 10 gotas (no más) de orina.
Llevar a la ebullición y mantener esta temperatura por 1 a 2 minutos y después enfriar
lentamente.
Nombre:
Sexo:
Peso (Kg):
Fecha actual:
Muñeca:
Angulo subxifoideo:
Dislipidemia:
Dislipidemia:
Peso (Kg):
Dislipidemia:
Peso (Kg):
Glicemia
Experiencia Nº 3 : DIABETES EXPERIMENTAL
Introducción
Material
Animal de experimento rata de de 200 a 300 gr. de peso, bien hidratado en ayuno.
1 Jaula metabólica
3 Jeringa de insulina 3
3 Jeringa con aguja de 5 ml.
Alloxan en solución 4% (4000 mgr en 100 ml de suero fisiológico).
1 glucómetro con cintas reactivas
Insulina cristalina
Phlorizin en solución al 4% en solución salina.
1 tijera
2 tubos de prueba
reactivos de Benedict
Procedimiento:
Determinar la glicemia basal en las tres ratas previamente pesadas ( la muestra
de sangre se obtiene de la cola a través de un corte en el extremo)
Administrar vía intraperitoneal:
A la rata A ( control) se administra vía intraperitoneal 1.5 ml de suero fisiológico.
A la rata B : se administra vía intraperitoneal Alloxan en solución al 4% a la
dosis de
200 mgr. por kilogramo de peso corporal.
A la rata C : se administra vía intraperitoneal Phorizin en solución al 4% a la
dosis de
200mgr por kilogramo de peso corporal.
En la rata B hacer control cada 5 minutos hasta que se haga diabética, luego
cada 20 minutos.
A la rata diabetica administrar insulina intraperitoneal a la dosis de 1UI por
cada 100 gramos de peso.
Discusión:
Práctica N° 39: Secreción Salival
Introducción
Introducción
La mucosa gástrica produce constantemente jugo gástrico, que está formado
por los siguientes componentes:
• Inervación simpática: dado por la fibra preganglionar de T6 – T8, luego
forma el ganglio celiaco y parasimpático por el vago.
• La irrigación lo dan las arterias: tronco celiaco y la hepática.
• La mucosa del cardias es productora de moco.
• La mucosa del fondo, cuerpo es productora de:
• células mucosa del cuello: moco y ˉHCO3 .
• células principales: pepsinógeno y lipasa
• células parietales: HCl y factor intrínseco
• células enterocromafines : histamina
• células D : somatostatina
• La mucosa antral de la región pilórica produce:
• células endocrinocitos células G: gastrina y moco
• La abertura de las glándulas: criptas gástricas
•
• FUNCIONES DEL ESTÓMAGO:
• 1.- Triturar, mezclar y almacenar el quimo.
• 2.- Iniciar la digestión:
• -de las proteínas en el 15% , por acción de la pepsina ya activada
• -de los lípidos en el 10-30%, por las lipasa lingual y gástrica.
• -de los hidratos de carbono en el 30% por el α-amilasa salival.
• 3.- Producir el moco alcalino.
• 4.- La acidez de la secreción gástrica permite:
• -Activar el pepsinógeno a pepsina ,pH 1.8 a 3.5
• -Bactericida
• -estimula la secreción biliar y pancreática en el duodeno
• -permite absorber el calcio y hierro
• 5.- se absorbe agua y alcohol
El reactivo de Topfer (dimetil-amino-azobenzol) cambia de rojo a amarillo de pH
2.9 a 4.0; su punto final es color rosa salmón a pH 3.5
El indicador de fenolftaleína cambia de incoloro a rojo de pH 8.3 a 10.0.
Material
Sujeto de prueba
Sonda nasogástrica de Levin
Vaselina
Beakers
Toallas
Esparadrapo
Jeringas
Guantes
Histamina al 1%
Tubos de prueba
Gradillas
Gasa
Papel de filtro
Embudos
Reactivo de Topfer
Indicador de fenolftaleína
Bureta con indicador de NaOH 0.1 N.
Cafeína
Método
Experimento N° 1: secreción ácida basal
El sujeto de prueba debe permanecer en ayunas por doce horas.
En el momento de la prueba, se coloca una toalla alrededor del cuello del sujeto
y se le entrega un frasco para que expulse continuamente la saliva. El sujeto
debe permanecer sentado o en decúbito lateral izquierdo.
Se lubrica la sonda nasogástrica con la vaselina y se la introduce por la nariz. La
sonda debe avanzar unos 60 centímetros desde la altura de la arcada dental. Se
aspira el residuo gástrico y se lo coloca en un frasco marcado “R”. Este residuo
debe verificarse; su volumen normal debe ser menor de 100 mL. Volúmenes
mayores indicarían hipersecreción o síndrome pilórico.
Se obtiene muestras cada quince minutos durante una hora para establecer la
secreción ácida basal. Se registra el volumen y el pH de las muestras.
Se obtiene muestras cada quince minutos durante una hora para establecer la
secreción ácida basal. Se registra el volumen y el pH de las muestras.
Experimento N° 3: análisis
En las muestras basales y estimuladas se determina:
a) Volumen
b) Acidez libre, determinada mediante el reactivo de Topfer o rojo de fenol al
1% en alcohol
c) Acidez total, determinada mediante la fenolftaleína
Modelo de cálculo: Ejemplo: se gasto 2,4 ml de Na(OH) al 0,1N para titularla una
muestra de 5 ml.
Cada 1ml de Na(OH) 0,1 N que se gasta representa 0,1 mEq de H+
2,4 ml de Na(OH) 0,1N gastado será X mEq H
Si esa muestra obtenida era de 40 ml en 15 minutos y hemos trabajado solo en 5
ml , habrá que realizar una regla tres simple para los 4º ml. Se repite para las
otras tres muestras y luego se suman las 4 muestra y se tiene el Débito Acido
Basal (DAB). VN: 2 – 5 mEq de H+ /hora.
Se administra por vía subcutánea histamina previo
antihistamínico(clorotrimeton) i.m.. y se grafica el Débito Acido Máximo o
Estimulado (DAMx o DAE)
Tubo Muestra Muestra Muestra Muestra
15’ 30’ 45’ 60’
Volumen
pH
Jugo gástrico 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml
Agua destilada 5 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml
ml
Indicador R.F. II gts IIgts IIgts II gtas
Na(OH) 0,1 N
gastado
Resultado
Repetir las operaciones y así se tiene el DAMx. VN: 15- 25 mEq de H+/hora.
Nota: HCl 84ml/1000ml_N; 8.4/100: 0.1N : 1.1/50,1.6/50, 0.8/50, 1.0/50
3.0/50,3.75/50, 3.5/50 3.3/50
Discusión
Práctica N° 41: Motilidad
Gastrointestinal
Introducción
El esófago, el estómago y los intestinos tienen inervación parasimpática
predominante. La acetilcolina es el neurotransmisor de este sistema y actúa
como un agonista de la motilidad intestinal.
Células Intersticiales de Cajal (CIC): se encuentra en el intestino delgado y
colon, son cell mesenquimales localizado en el plexo myenterico la propria
muscularis y submucosa. Reconocido como cell marcapaso del intestino que
regulan la motilidad intestinal. La CIC tiene la forma alargada y expresa un
receptor tyrosine kinasa c-kit. Cell intersticiales de Cajal (ICC), cell similares al
marcapaso en el nodo sinusal del corazón localizado en la fibra muscular lisa
intestinal delgado (fmli), del plexo mienterico y submucoso, en conexiones
cerradas entre las varicosidades axonales entéricas por un lado del gap junction
y la fml al otro. Es un mecanorreceptor?, tiene participación en la regulación de
las tres funciones primarias de la motilidad intestinal, de actividad
electrofisiológica de la fml y enterica neuronal en el acoplamiento excitación-
contracción.
Material
Sapo
Quimógrafo
Equipo de disección
Solución de Ringer para batracio
Acetilcolina
Pilocarpina
Adrenalina
Atropina
Histamina
Método
Experimento N° 1
Se anestesia al animal por el método de destrucción del tallo del encéfalo y se
realiza una laparotomía para resecar el estómago desde la porción media de
esófago previa tracción en dirección caudal, y luego se reconoce la primera
porción del duodeno y se reseca a este nivel y después se corta los nervios y loa
vasos en la curvatura menor. Se amarra el segmento esofágico en el extremo
delgado de una pipeta Pasteur y con un falso nudo de fija en la depresión de la
pipeta. Se carga a través de la pipeta Ringer de batracio en el estómago y
observar donde se acomoda la solución Ringer y los movimientos del órgano.
Determinar el pH del Ringer.
Experimento N° 2
Instilar varias gotas de adrenalina en la superficie del estómago y observar la
motilidad del estómago, flujo duodenal y pH-
Experimento N° 3
Lavar con Ringer e instilar unas gotas de acetilcolina y observar: el nivel del
Ringer en la pipeta de Pasteur, la motilidad de amasamiento, tono y movimientos
peristálticos del órgano.
Hacer control del pH del líquido que sale por el duodeno.
Experimento N° 4
Lavar el órgano con Ringer y luego instilar pilocarpina y observar la motilidad
gástrica.
Experimento N° 5
Instilar acetilcolina y luego atropina y observar el cambio del tono y motilidad
gástrica y instilar una doble dosis de acetilcolina y ver resultados. Hacer
conclusiones
.
Discusión
Práctica N° 40: Secreción gástrica
Introducción
• Inervación simpática: dado por la fibra preganglionar de T6 – T8, luego forma el
ganglio celiaco y parasimpático por el vago.
• La irrigación lo dan las arterias: tronco celiaco y la hepática.
• La mucosa del cardias es productora de moco.
• La mucosa del fondo, cuerpo es productora de:
• células mucosa del cuello: moco y ˉHCO3 .
• células principales: pepsinógeno y lipasa
• células parietales: HCl y factor intrínseco
• células enterocromafines : histamina
• células D : somatostatina
• La mucosa antral de la región pilórica produce:
• células endocrinocitos células G: gastrina y moco
• La abertura de las glándulas: criptas gástricas
•
Material
Sujeto de prueba
Sonda nasogástrica de Levin
Vaselina
Beakers
Toallas
Esparadrapo
Jeringas
Guantes
Histamina al 1%
Tubos de prueba
Gradillas
Gasa
Papel de filtro
Embudos
Reactivo de Topfer
Indicador de fenolftaleína
Bureta con indicador de NaOH 0.1 N.
Cafeína
Método
Experimento N° 1: secreción ácida basal
El sujeto de prueba debe permanecer en ayunas por doce horas.
En el momento de la prueba, se coloca una toalla alrededor del cuello del sujeto
y se le entrega un frasco para que expulse continuamente la saliva. El sujeto
debe permanecer sentado o en decúbito lateral izquierdo.
Se lubrica la sonda nasogástrica con la vaselina y se la introduce por la nariz. La
sonda debe avanzar unos 60 centímetros desde la altura de la arcada dental. Se
aspira el residuo gástrico y se lo coloca en un frasco marcado “R”. Este residuo
debe verificarse; su volumen normal debe ser menor de 100 mL. Volúmenes
mayores indicarían hipersecreción o síndrome pilórico.
Se obtiene muestras cada quince minutos durante una hora para establecer la
secreción ácida basal. Se registra el volumen y el pH de las muestras.
Se obtiene muestras cada quince minutos durante una hora para establecer la
secreción ácida basal. Se registra el volumen y el pH de las muestras.
Experimento N° 3: análisis
En las muestras basales y estimuladas se determina:
d) Volumen
e) Acidez libre, determinada mediante el reactivo de Topfer
f) Acidez total, determinada mediante la fenolftaleína
intestinal
Introducción
El esófago, el estómago y los intestinos tienen inervación parasimpática
predominante. La acetilcolina es el neurotransmisor de este sistema y actúa
como un agonista de la motilidad intestinal.
Material
Conejo
Quimógrafo
Equipo de disección
Solución de Ringer para mamíferos
Suero fisiológico
Bañomaría a 40°C
Balón de oxígeno
Algodón embebido en aceite
Acetilcolina
Pilocarpina
Adrenalina
Atropina
Tesmostato
Método
Experimento N° 1
Se sacrifica al animal y se realiza una laparotomía para resecar una segmento
de intestino delgado de unos 20 centímetros. Se marca el extremo proximal. Se
lava la pieza operatoria con suero fisiológico, se la sumerge en un baño de
solución de Ringer a 40°C y se fija a la palanca inscriptora del quimógrafo. Se
mantiene oxigenado el medio por burbujeo constante.
Se realiza el registro de la actividad intestinal basal.
Experimento N° 2
Se añade unas gotas de acetilcolina en el bañomaría y se obtiene un nuevo
registro en el quimógrafo.
Experimento N° 3
Se añade unas gotas de pilocarpina en el bañomaría y se obtiene un nuevo
registro en el quimógrafo.
Experimento N° 4
Se añade unas gotas de adrenalina en el bañomaría y se obtiene un nuevo
registro en el quimógrafo.
Experimento N° 5
Se añade unas gotas de pilocarpina en el bañomaría y se obtiene un nuevo
registro en el quimógrafo.
Experimento N° 6
Se añade unas gotas de atropina en el bañomaría y se obtiene un nuevo registro
en el quimógrafo.
Experimento N° 7
Se suspende la oxigenación y se obtiene un nuevo registro en el quimógrafo.
Experimento N° 8
Se introduce un pedazo de algodón embebido en aceite en el extremo proximal
intestinal y se observa su progresión.
Discusión
Práctica N° 42: Absorción
intestinal
Introducción
La principal fuente de glucosa son los polisacáridos como el almidón. La
digestión de los carbohidratos involucra el desdoblamiento del almidón ingerido
hasta glucosa, ya que el almidón no puede ser absorbido. La glucosa atraviesa la
mucosa intestinal y alcanza la corriente sanguínea para luego distribuirse a los
tejidos.
La digestión del almidón se inicia en la boca con la masticación y la acción de la
amilasa salival, la ptialina. Sin embargo, la acción de la ptialina es muy limitada.
La digestión de los carbohidratos es realizada principalmente por la amilasa
pancreática, que degrada el almidón a maltosa, y los disacaridasas intestinales,
que desdoblan la maltosa en glucosa. La absorción intestinal de glucosa es un
fenómeno activo y existen aun cuando la concentración intestinal sea inferior a
la sanguínea.
Material
Ratas
Equipo de disección
Caja de Petri
Aparato de órganos aislados
Tubos de centrífuga
Jeringa
Pipetas
Goteros
Tubos de prueba
Hilo
Balón de oxígeno
Papel de filtro sin almidón
Solución de Ringer para mamíferos
Glucosa al 0.5 % en solución de Krebs-Ringer bicarbonatada
Almidón soluble al 1 % en solución de Krebs-Ringer bicarbonatada
Cinta reactiva para glucosa
Solución acuosa de yodo al 0.5 %
Agua destilada
Método
Experimento N° 1: preparación del segmento intestinal
En un tubo de centrífuga de plástico de 15 mL se coloca un tapón de caucho. A
través de un agujero en el centro del tapón se hace pasar el extremo inferior de
un tubo de vidrio de 10 mm de diámetro externo en su parte superior y 5 mm de
diámetro en su parte inferior. También se hace pasar a través del tapón una
aguja número 21 cuya punta se une a un tubo de polietileno de ocho centímetros
de largo. En lado opuesto del tapón se inserta una aguja número 15.
Se mata a una rata grande, se abre la cavidad abdominal y se busca el yeyuno.
Se corta un segmento intestinal cercano a la unión duodenoyeyunal y se lo lava
allí mismo con solución de Krebs-Ringer bicarbonatada. Luego se corta la unión
yeyunoileal, se saca el intestino y se lo pone inmediatamente en una caja de
Petri llena de solución salina amortiguada con bicarbonato.
Empleando una varilla de vidrio se procede a invertir el segmento intestinal
extirpado y a continuación se cortan pedazos de cuatro centímetros. Se toma
uno de estos pedazos y se liga uno de los extremos, de modo que se consiga un
cierre a prueba de fugas. Se desliza el otro extremo sobre la cánula de vidrio
colocada en centro del tapón de caucho y se ata.
Con una pipeta se coloca 10 mL de solución salina amortiguada en uno de los
tubos de centrífuga y se lo tapa con el tapón de caucho con cánula e intestino.
La cánula se ajusta de tal manera que todo el segmento intestinal quede dentro
de la solución. Se introduce solución salina amortiguada en la parte ancha de la
cánula hasta que el segmento intestinal quede lleno y la cánula contenga una
columna de solución que sobresalga uno o dos centímetros por encima del nivel
de líquido en el tubo de centrífuga.
El dispositivo se coloca en el aparato de órganos aislados a 37°C. Se une la aguja
21 a un tubo de goma conectado a la válvula del balón de oxígeno y se comienza
a hacer burbujear oxígeno al 95% y CO2 al 5% en el sistema.
Discusión