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Puede aplicarse también a análisis cuantitativos si se define previamente un valor límite que
defina si un resultado es no satisfactorio (si supera ese valor) o satisfactorio (si se encuentra por
debajo de ese valor). En ambos casos hay dos resultados posibles: positivo o insatisfactorio y
negativo o satisfactorio. Un plan de dos clases se encuentra definido por los siguientes dos
valores:
_Ejemplo: un plan de muestreo para Salmonella con n = 5, c =0 implica que se toman y analizan 5
unidades de muestreo; si no se detecta la presencia de Salmonella en ninguna unidad, el lote es
aceptado; si se detecta la presencia de Salmonella en al menos una unidad, el lote es rechazado.
B_Planes de muestreo de atributos de tres clases:Se aplican a análisis cuantitativos, en los que se
definen tres calidades del producto: satisfactoria, marginalmente aceptable e inaceptable. Un plan
de tres clases se encuentra definido por los siguientes valores:
M = recuentos superiores a este valor son inaceptables y si al menos en una unidad se obtiene un
resultado superior a M el lote es rechazado.
_Ejemplo: un plan de muestreo para coliformes con n = 5, c =2, m= 10 ufc/g, M= 100 ufc/g implica
que se toman y analizan 5 unidades de muestreo; el lote será aceptado si todos los recuentos se
encuentran por debajo de 10 ufc/g, o si como máximo en 2 unidades los recuentos se encuentran
entre 10 y 100 ufc/g; el lote será rechazado si al menos en una unidad se obtiene un recuento
superior a 100 ufc/g, o si en más de 2 unidades se obtiene un recuento superior a 10 ufc/g.
La ICMSF ha sugerido una clasificación de planes de muestreo que comprende 15 casos, definidos
por el tipo y severidad del peligro de los microorganismos y por otra parte considerando la
manipulación que tendrá el producto luego del muestreo y cómo será consumido. La clasificación
es la siguiente: (Cuadro 1) Nivel de peligro para la salud_Condiciones en las cuales el producto será
manipulado y consumido luego del muestreo.
_Peligro severo: patógenos que presentan un peligro alto; ejemplo: Clostridium botulinum, Vibrio
cholerae O1, Listeria monocytogenes para grupos de riesgo.
_Peligro moderado con diseminación potencial: patógenos que presentan un menor peligro y la
posibilidad de producir infecciones secundarias a partir de personas infectadas; generalmente
poseen dosis infectivas bajas y pueden producir una enfermedad grave en personas susceptibles;
ejemplo: Escherichia coli patógena, otras serovariedades de Salmonella no consideradas en el
punto anterior, Listeria monocytogenes.
_Peligro moderado con diseminación limitada: patógenos que producen enfermedades sin
provocar en general infecciones secundarias;
_Sin peligro para la salud: microorganismos o grupos de microorganismos que pueden dar una
idea de las condiciones de higiene durante el proceso, o bien de la vida útil de un producto, y que
no están relacionados con un peligro para la salud; ejemplo: recuento de aerobios, lactobacilos.
Con respecto a la manipulación del producto luego del muestreo se pueden considerar las
siguientes posibilidades:
_Reducción del peligro: el producto estará expuesto a una condición que reducirá el peligro;
ejemplo: Salmonella o Brucella en leche cruda que será pasteurizada.
Elección de M y m
El valor m se encuentra definido por buenas prácticas; en los planes de dos clases para patógenos,
m es cero o un valor pequeño.
Elementos de mu estreo
_Utensilios de muestreo: se pueden utilizar cucharas, cuchillos, bisturíes, pipetas, marcos, tijeras
de un material resistente que no provoque cambio alguno que pueda afectar los resultados de los
análisis. Sus superficies deben ser lisas, libres de asperezas y con esquinas redondeadas. Si el
utensilio presenta soldaduras, éstas deben soportar la temperatura de esterilización. También se
pueden realizar muestreos mediante hisopos o esponjas.
En todos los casos los elementos de muestreo deben estar limpios, secos y estériles.
_Recipientes para la muestra: deben ser de un material no tóxico, impermeable, con cierre
hermético, tales como frascos de vidrios o plástico de boca ancha, o bolsas de plástico
descartables. Los recipientes deben estar limpios, secos y estériles. La capacidad debe ser la
adecuada para tomar la unidad de muestra deseada. En el caso de recipientes reutilizables, la
calidad de los mismos debe ser la adecuada como para tolerar esterilizaciones repetidas.
_Esterilización de los elementos de muestreo: los métodos de esterilización recomendados son los
siguientes:
A_En autoclave a 121°C durante 15 minutos, especialmente para los materiales que no soporten el
calor seco.
Alternativamente se pueden utilizar los siguientes métodos, teniendo en cuenta que no eliminan
todas las esporas:
A_Inmersión del utensilio en alcohol etílico 95% y posterior flameado; este procedimiento se
repite dos veces más asegurándose que se haya apagado la llama antes de sumergirlo nuevamente
en alcohol.
B_Inmersión en una solución de hipoclorito de sodio de 50 ppm de cloro libre durante al menos 30
segundos (este método no es esterilizante).
Obtención de la mu estra
El objetivo del muestreo es obtener una muestra representativa del alimento y que el traslado de
la muestra se efectúe de manera tal que al llegar al laboratorio tenga las mismas condiciones que
tenía en el momento de haber sido tomada la muestra.
Es importante que el operador que efectúa la toma de muestras sea una persona idónea.
Para que la muestra obtenida pueda representar de la mejor manera al lote de la que fue tomada
se deberá evitar subjetividades. Una forma de asegurar esto es a través de un muestreo mediante
números aleatorios. Esto permite que todas las unidades del lote tengan igual posibilidad de
formar parte de la muestra.
Este tipo de muestreo tiene la desventaja que no asegura que las muestras obtenidas sean iguales
al lote del cual proviene, pero asegura que hayan sido tomadas objetivamente.
Un programa estratificado de muestreo aleatorio se utiliza cuando se sabe o se supone que el lote
no es uniforme. Esta estratificación permite controlar las variables conocidas de un proceso. Los
resultados de los distintos estratos se valoran separadamente y luego se unifican si resultan
homogéneos.
Si es de tipo oficial (ordenado por organismos de control), las muestras se tomarán por triplicado y
en acuerdo a lo establecido por el Código Alimentario Argentino a fin de permitir, mediante el
análisis de las contramuestras, la verificación de los resultados analíticos, en caso de ser necesario.
Siempre que sea posible es conveniente tomar envases cerrados tal como se venden al público.
En caso de un alimento a granel, se extraen porciones de diferentes puntos del contenedor (si no
se puede homogeneizar previamente), a menos que se conozca por experiencia previa la
homogeneidad del alimento o que se haya determinado un punto específico que resulte
representativo.
Si se toma una muestra de un conducto de salida, se debe evitar tomar de las primeras fracciones
con el fin de limpiar la salida del flujo.
En caso que el operador no pueda tomar una muestra en forma estéril por la naturaleza de la
misma, deberá informarlo al laboratorio y extremar los cuidados durante el transporte a fin de
evitar al máximo la proliferación microbiana.
Es recomendable registrar la temperatura del alimento del que se obtiene la muestra, así como la
temperatura ambiente donde se almacena.
La unidad de muestreo debe tener un tamaño mínimo de alrededor de 200 gramos que permita la
búsqueda de distintos microorganismos a través de diferentes procesos (por ejemplo Salmonella
spp. y coliformes) y que sea suficiente para repetir el análisis en caso de ser necesario. En ese caso
debe procurarse que la reserva se mantenga en condiciones como para que su carga microbiana
no se vea alterada.
Se debe evitar durante el transporte al laboratorio cualquier alteración de las muestras de modo
de asegurar que éstas al ser examinadas por el laboratorio sean las mismas recogidas y
documentadas por la persona que efectuó el muestreo.
El tipo de acondicionamiento dependerá del estado físico del producto (líquido, sólido o
semisólido). Deberá tomarse en cuenta la naturaleza del producto, y su presentación.
Las muestras deben ser enviadas con la mayor brevedad posible al laboratorio. Los productos
líquidos deben ser analizados dentro de las 24 horas desde el momento de muestreo, los
productos refrigerados, dentro de las 36 horas de su recolección.
Es necesario elaborar un informe detallado del muestreo, firmado por la persona responsable de
la obtención de las muestras y refrendado por los representantes de las partes interesadas, si
están presentes. <<
Corina E. Meier y Cel ia L. Melame d se desempe ñan en la Subc omisión de Acreditac ión de Lab
oratorios de Microbiología de Alime ntos - División de al ime ntos, me dicame ntos y cosm éticos -
Asociac ión Argentina de Microbiología.