AISLAMIENTO DEL ALCALOIDE LUPANINA DEL CHOCHO O TARWI
Gustavo Balarezo Inuma, Carlos Morales Bravo, Jhon Orrego Jesus, Nancy Parvina Moreno
Asignatura: Química Orgánica II
Escuela Profesional de Ingeniería Química
Facultad de Ingeniería Química y Textil
Universidad Nacional de Ingeniería
RESUMEN:
En el presente estudio se realizó la extracción
de los alcaloides del chocho o tarwi con el
principal objetivo de aislar la lupanina. Para
evidenciar la presencia de alcaloides en la
solución concentrada se usó el reactivo de
dragendorff y la espectrometría UV. El
aislamiento de la lupanina fue realizado
mediante la técnica de Cromatografía de capa
fina. El resultado obtenido indica la presencia
de alcaloides en el agua de desamargado del
chocho, evidenciado mediante el reactivo de
Dragendorff, al formarse precipitado naranja,
asimismo la prueba de espectrometría UV
mostró espectros que evidencia la presencia
de alcaloides.
INTRODUCCIÓN
Esta pre-investigación nació como inquietud de
conocer y aplicar las técnicas ya conocidas en
el laboratorio en la caracterización de una
sustancia y ¿Por qué el tarwi? Debido a que
queríamos comprender los motivos de los
agricultores en utilizar el agua de
desamargado del tarwi en sus cosechas.
La presente investigación se refiere al
aislamiento del alcaloide Lupanina proveniente
del Chocho, La lupanina tiene una actividad
antibacteriana y puede utilizarse como
insecticida además inhibe la síntesis de
proteínas. Lupinus mutabilis Sweet planta
conocida comúnmente como ullush, talwish,
tauri, tarwi, chocho, lupino o ccquella
(Jacobsen y Mujica, 2006), pertenece a la
división Magnolio- phyta, clase Magnoliopsida,
orden Fabales, familia Fabaceae, subfamilia
Papilionoideae (Ceroni, 2003; Varshney et al.,
2005; Sbabou, 2010) siendo su género
Lupinus el más abundante de la familia
(Sbabou, 2010).
El lupinus mutabilis sweet (CHOCHO), es una
leguminosa oriunda de los Andes
Sudamericanos, las semillas desamargadas y
en cocimiento son utilizadas por el poblador
andino de nuestro país como alimento y
medicina. Los alcaloides son sustancias
orgánicas de origen vegetal que se encuentran
presentes mayormente en el reino vegetal,
especial en las leguminosas. Las plantas
utilizan estos metabolitos secundarios como
mecanismos de defensa ante la presencia de
depredadores
Algunas técnicas para la identificación de los
alcaloides presentes en el tarwi que usaremos
en este proyecto son la identificación mediante
la reacción (formación de precipitado
anaranjado) con el reactivo de dragendorff, la
prueba con uv-visible; así como también el
aislamiento de la lupanina mediante la técnica
de cromatografía con capa fina. Y por último la
verificación del espectro de la lupanina.
PRESENTACIÓN DEL PROBLEMA
En los últimos años la contaminación de los
mares por petróleo o metales pesados se ha
incrementado por la irresponsabilidad de las
grandes empresas extractoras. Es por ello la
necesidad de la búsqueda de compuestos que
pueden formar complejos y luego precipitar.
Entonces mediante el tarwi que es una
leguminosa de origen andino el cual contiene
alcaloides con propiedades de formar
complejos con los metales pesados buscamos
reducir esta contaminación.
Para la mayoría de pueblos la agricultura
significa el sustento de sus hogares, sin
embargo se reportan casos de enfermedades
en algunos de estos pueblos debido a sus
propias cosechas que son consumidas,
contaminadas por las plagas que abundan en
los lugares .Con la utilización de los alcaloides
del tarwi se disminuirían o eliminarían estas
enfermedades de los pobladores debido a su
capacidad de defensas en las plantas.
Como en esta investigación se espera dar un
valor agregado al cultivo del chocho, mediante
el desarrollo de fitofármacos y la posibilidad AGUA AGUA
de incorporar a un mayor número de
agricultores a los procesos de producción y
+𝑯𝑪𝒍
agroindustria, además de impulsar la CHOCHO EX1
seguridad alimentaria en las zonas andinas. CHOCHO EXHCl2
CHOCHO EX3
OBJETIVOS CHOCHO EX4
OBJETIVO GENERAL Tabla 1. Componentes usados en cada
extracción sólido-líquidos
Aislar el alcaloide que se encuentra en mayor
concentración en el chocho o Tarwi (nombre EX: fase acuosa
científico: lupinus mutabilis sweet) llamado
LUPANINA.

OBJETIVO ESPECÍFICO

Extraer los alcaloides presentes en el chocho o

tarwi usando técnicas de extracción sólido-
líquido y lìquido-lìquido.

DESCRIPCIÓN DE LA SOLUCIÓN

EXTRACCIÓN SÓLIDO-LIQUIDO (AGUA DE

DESAMARGADO)

 Se pesó 500g de chocho seco, y se dejó

remojar en suficiente agua (por encima del
nivel del chocho y teniendo en cuenta que
este absorbe el agua en su totalidad)
durante 12 horas aproximadamente,
siendo esta la primera muestra de agua de
desamargado. Esta primera fase acuosa
presenta un color amarillo intenso
 Se dejó remojar nuevamente el chocho
pero esta vez en agua y ácido clorhídrico
diluido durante 12 horas
aproximadamente, siendo esta la segunda
muestra de agua de desamargado. Esta
vez la fase acuosa presento un color
amarillo menos intenso.
 Nuevamente se realizó el mismo
procedimiento dos veces más pero ahora
solo en agua durante 12 horas, estas
serían la tercera y cuarta muestra de
extracto de chocho. Estas fases acuosas
presentaron el mismo color pero menos
intenso.
 Cada una de estas fases se guardaron en
la refrigeradora en recipientes previamente
rotulados.
Fig 1.Extracción sólido-líquido usando diclorometano
A la fase segunda acuosa (EXHCl2) se le añadió
𝑁𝑎𝑂𝐻 poco a poco hasta la ligera neutralización
EXTRACCIÓN LIQUIDO-LIQUIDO (CLORURO
DE METILENO)
 Se Tomó 200 𝑚𝐿 de agua de desamargado de
chocho de EX1 y se añadió a la pera de
decantación, luego se agregó 15 𝑚𝐿 de
cloruro de metileno y se Agitó lentamente. Se
obtuvo dos fases inmiscibles.
 Se Recibió la fase diclorometánica, fase
incolora que es la que contiene los alcaloides,
en un erlenmeyer perfectamente limpio
provisto de un embudo con algodón en la
base del cono, se repitió las extracciones 3
veces con 15 𝑚𝐿 de cloruro de metileno en
cada extracción. Esta fase diclorometánica se
guardó en Erlenmeyer con tapa de vidrio
rotulado (FD1).La fase acuosa se almacenó
en un recipiente.
  El mismo procedimiento se realizó con
EXHCl2, EX3 y EX4. + DESTILACIÓN
FD1 AC1
+ DICLOROMETANO FD2 AC2
EX1 FD1 FD3 AC3
EXHCl2 FD2 FD4 AC4
Tabla 3. Concentrado obtenido en la destilación
EX3 FD3
EX4 FD4

Tabla 2. Fases diclorometánicas obtenidas de cada

muestra de agua de desamargado

FD1: Fase diclorometánica

Fig 3. Equipo de destilación simple usado

IDENTIFICACIÓN DE ALCALOIDES

 A todos estos estos concentrados de alcaloide

(AC1) se le realizó la prueba de
DRAGENDORFF.
 Luego todos estos concentrados se les hace
pasar por la prueba de UV-VISIBLE
 Una vez que se terminó la prueba UV-VISIBLE
se mezcló todos los concentrados en un
mismo recipiente, luego se concentró esta
Fig 2.Extracción líquido-líquido usando diclorometano solución mediante una destilación simple.
 Se preparó las placas para las cromatografía
en capa fina, luego se activó las placas a una
CONCENTRACCION DE CADA FASE temperatura aproximada de 105°C.Se colocó
DICLOROMETÁNICA POR DESTILACIÓN gotas consecutivas a 1𝑐𝑚 de la parte inferior
de la placa y se deja en el tanque
desarrollador que contiende el diclorometano a
 Se armó el equipo de destilación simple y se 0.5𝑐𝑚 de su base hasta observar que el
colocó 100𝑚𝐿 de FD1 en el balón y se diclorometano fluyó a través de la placa
concentró a menos de la mitad y así con las llegando a la parte superior.
proporciones correctas hasta terminar con todo
FD1. Se dejó enfriar el residuo del balón, el
cual sería la fase diclorometánica concentrado.
El diclorometano obtenido en la destilación se
guardó en un recipiente cerrado. El mismo
procedimiento se realiza para FD2, FD2 y FD3.

Fig 4. Proceso de cromatografía para separar

alcaloides
 Fig 5. Placas usadas en la cromatografía
Fig 7.Prueba con UV-VISIBLE

 Después del aislamiento de los alcaloides por

cromatografía en capa fina se sometió a la
prueba de UV-VISIBLE cada una de las
placas.

 Se llevó una pequeña muestra de solución

concentrada (AC) de alcaloides al
espectrofotómetro UV-VISIBLE.

RESULTADOS

+ REACTIVO DE DRAGENDORFF
AC1 precipitado anaranjado intenso
AC2 precipitado anaranjado intenso Fig 8.Prueba de UV-VISIBLE
AC3 precipitado anaranjado intenso
AC4 precipitado anaranjado intenso
Tabla 4. Placas usadas en la cromatografía

Fig9. Espectro UV-VISIBLE obtenido

Fig 6. Precipitado formado en la identificación de
alcaloides con el reactivo de dragendorf
 CONCLUSIONES http://editorial.uan.edu.mx/BIOCIENCIAS/article/vi
ew/139.
 En el espectro obtenido de la lupanina se
mostró algunas irregularidades en los 200 - Luis Camacho Saavedra y Luis Uribe Uribe ;
a 225 𝑛𝑚 debido a los contaminantes de la 1995;Intoxicación por agua de Lupinus
misma pre-investigación. El espectro Mutabilis(“Chocho”); “Boletín Sociedad Peruana de
muestra 2 saltos resaltantes de 𝜆max de
235 𝑛𝑚 y en 272𝑛𝑚 aproxmiadamemte.La Medicina Interna”;
teoria nos dice que este deberia mostrar 3 http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/spmi/v08n
saltos sin embargo no se aprecian ya que 3-4/pdf/a09.pdf.
el ültimo salto que estaria en 315 aprox
tiene un ԑ muy bajo comparado con los - Sven-E. Jacobsen1 y Angel Mujica;2006; El tarwi
otros 2. (Lupinus mutabilis Sweet.) y sus parientes
 Mediante técnicas de extracción L/L y S/L silvestres; Universidad Mayor de San Andrés, La
fue posible extraer la lupanina y otros
alcaloides del agua de desamargado del Paz;
chocho. http://www.beisa.dk/Publications/BEISA%20Book
 El disolvente usado en la extracción fue el %20pdfer/Capitulo%2028.pdf
diclorometano, ya que este es no polar y
es un buen disolvente para los alcaloides
que el agua.
ANEXOS
Preparación de reactivo de Dragendorff
BIBLIOGRAFÍA Mezclar 4g de nitrato de bismuto
pentahidratado en 10 mL de ácido nítrico al
- Elena Villacrés, Eduardo Peralta, Lourdes 30% con una solución de 13.6g de yoduro de
Cuadrado;(2009); Propiedades y Aplicaciones potasio en 25mL de agua. Dejar en reposo por
24horas, se decanta y se afora a 50mL.
de los alcaloides del Chocho;INIAP-ESPOCH
SENACYT;http://www.iniap.gob.ec/nsite/image
s/documentos/ALCALOIDES%20DEL%20CHOCH Preparación de la papilla para la
cromatografía en capa fina
O.pdf
- Lourdes Guadalupe Torres Constante; En un vaso precipitado mezclar una cucharita
(2006);”Utilización del CHOCHO (Lupinus de gel con aproximadamente 4𝑚𝐿 de agua,
Mutabilis sweet) como antiparasitario agitar intensamente la mezcla con una bagueta
hasta que se forme una masa viscosa. La
gastrointestinal y hepáticos en Ovinos viscosidad se puede evaluar levantando la
Mestizos”;Facultad de Ciencias bagueta y observando que la papilla gotee
Pecuarias;http://dspace.espoch.edu.ec/bitstre lentamente, y si no llegara a ocurrir eso se le
am/123456789/1784/1/17T0755.pdf. añade agua hasta obtener la viscosidad
ó
- Andrés Rafael Farinango Matute, Juan Diego
p
Quizhpi Mogrovejo;(2015);” PREPARACIÓN DE UN t
SUPLEMENTO PROTEICO ELABORADO A PARTIR DE i
Lupinus mutabilis “CHOCHO” Y SU VALORACIÓN m
a
BROMATOLÓGICA”; UNIVERSIDAD DE CUENCA
.
;FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA DE
BIOQUÍMICA Y FARMACIA; Espectrometría UV-VISIBLE
- Chirirnos Arias , M.c ; 11 de mayo del 2016;”Tarwi
(Lupinus mutabilis Sweet) una planta con ;potencial
nutritivo y medicinal”;Universidad Autonoma de
Nayarit
Tabla 5. Espectro UV-VISIBLE de la Quinolina
 Diagrama de Gestión de Residuos

RESIDO LÍQUIDO OBTENIDO DE LA

CONCENTRACIÓN DE LA FASE
DICLOROMETANICA
MEZCLA DE LÍQUIDOS:
DICLOROMETANO

AGUA
Mediante una destilación
simple de nuestra muestra

SUBPRODUCTO

AGUA

PRODUCTO

DICLOROMETANO
PURIFICADO