Determinación de celulosa por el método de Kurschner y Hoffer

Se tomó un gramo de materia anhidra libre de extractos, se colocó en un matraz, se le añadió 20

mL de etanol y 5 mL de ácido nítrico concentrado. Se hirvió en baño María a reflujo durante 30

minutos. La solución se pasó por un filtro Gooch de porosidad media y peso conocido.

El líquido se desechó y el sólido se sometió a una segunda digestión de 30 minutos con 25 mL de

etanol-ácido nítrico.

Se realizó una decantación como en la etapa anterior y se efectuó una tercera digestión con 100

mL de agua destilada por una hora. La muestra se filtró en el Gooch, se lavó con agua destilada

caliente y posteriormente con 100 mL de solución saturada de acetato de sodio y por último con

500 mL de agua destilada caliente. El residuo se seco en un horno eléctrico a una temperatura de

105 ± 3 o

C para luego enfriarlo en un desecador de cristal sobre sílica gel y pesarlo (15).

El porcentaje de celulosa se calculó con la siguiente relación:

Celulosa (%) = * 100

Donde:

Por = Peso seco del residuo (g)

Po = Peso anhidro de la muestra (g)

3.1. Curva de calibrado de glucosa utilizando el método del DNS

A partir de una solución stock de glucosa 40 mM y por dilución con agua

destilada, preparar una gama de soluciones del azúcar de distinta

concentración, tal y como se indica en la Tabla 1. Hacer las diluciones en

tubos de ensayo. Una vez hechas las mezclas, agitar bien para homogeneizar

la solución.
De cada tubo se toman 0,1 ml y se transfieren a un tubo de vidrio con tapón

de rosca. Añadir 1 ml del reactivo DNS, incubándose posteriormente la mezcla

en el bloque seco a 100 ºC durante 10 minutos; enfriar y determinar la

absorbancia a 570 nm, utilizando como blanco la mezcla del tubo 0. En el caso

de que la absorbancia de alguna muestra resultase excesiva, diluir

convenientemente con agua destilada, mientras que si fuera demasiado

pequeña, repetir el ensayo pero con una mayor cantidad de solución de

glucosa (p. ej. 0