PRACTICA DE LABORATORIO #4: EXTRACCIÓN CASERA DE ADN HUMANO

(Células de epitelio bucal)

García Álvarez Rafael; González Manchego Elizabeth; León España Geilys; Sáez
Zabaleta Juan Javier.
Universidad de Córdoba, Facultad de Ciencias Básicas, Departamento de
Biología, Programa de Biología, Asignatura Biología molecular, II periodo
académico 2017.

OBJETIVOS
 Extraer ADN de las células de la mucosa bucal.
 Observar la estructura fibrilar característica del ADN.

 Establecer la relación entre el proceso de extracción y las propiedades

físicoquímicas del ADN.
RESUMEN
En la presente practica se empleó una técnica sencilla de extracción de ADN
humano. Para ello, fue necesario agregar algunos componentes que son de uso
frecuente en nuestro diario vivir. Aunque sencillos, estos materiales permitieron
llevar a cabo un proceso que se resume de la siguiente forma: ruptura de
membranas celulares, liberación de ADN, purificación del ADN y aislamiento del
ADN.
Palabras Claves: ADN, Detergente, Aislamiento, Epitelio bucal, Extracción.
ABSTRACT
In the present practice used a simple technique for the extraction of human DNA.
For it, it was necessary to add some components that are of frequent use in our
newspaper to live. Although simple, these materials have enabled to carry out a
process that is summed up in the following way: rupture of cell membranes, release
of DNA, purification of DNA and DNA isolation.
Key Words: DNA, Detergent, Isolation, Buccal epithelium, Extraction.

INTRODUCCIÓN
El ADN es una molécula que está celular. Aunque estemos
presente en todas las células del acostumbrados a visualizarlo en forma
cuerpo y que porta la información de cromosoma, la mayor parte del
genética para el funcionamiento tiempo de vida de una célula se
encuentra en forma de una hebra
denominada cromatina. En la
siguiente practica se llevará a cabo un
procedimiento para visualizar y aislar
ADN de células de epitelio bucal.

MATERIALES
 Micropipetas Se añaden dos cucharadas de la
disolución del vaso A en el vaso C Se
 Tubo Eppendorf añade una cucharada de la disolución
 1 tubo de ensayo con tapa contenida en el vaso B (detergente) en
el vaso C Se disuelve el contenido del
 NaCl vaso C, evitando la formación de
espuma.
 Etanol al 70%
 Agua destilada
 Solución de rehidratación
 Detergente lava vajillas
 Cucharas desechables
 Vasos desechables
 Hielo Se deposita el contenido del vaso C
en un tubo de ensayo.

METODOLOGÍA
Se rotula cada uno de los vasos de
plástico con las letras A, B y C. En el
vaso A disolver 20 ml de agua
destilada + 1gr de NaCl En el vaso B,
disolver 14 ml de agua destilada + 0,6
gr de detergente lava vajillas. En el
vaso C, depositamos 20 ml de agua
destilada, esta cantidad de agua se
usará para un enjuague bucal
enérgico (3 min), antes de hacerlo seguidamente se agrega en el mismo
conviene haber tragado saliva para tubo etanol al 70% (frio / temperatura
eliminar la acción de enzimas ambiente).
salivales.

Esperar unos minutos (de dos a tres)
sin mover el tubo de ensayo. Luego de
que aparezcan filamentos
blanquecinos en el tubo de ensayo, se
recogen con ayuda de una
micropipeta y se pasan a un tubo
Eppendorf.
Finalmente, con la ayuda de una
micriopipeta se saca el alcohol del
tubo Eppendorf, se agregan 50 μL de
solución rehidratante y se conserva.
RESULTADOS
En el tubo de ensayo se observa la
aparición de dos fases. Una fase turbia
en el fondo con la saliva y una fase
transparente en la superficie con el
alcohol, donde aparecen unos
filamentos de color blanquecino, es
decir el ADN de las células del epitelio
bucal.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
La saliva arrastra las células del
epitelio que recubre las paredes
internas de la boca y que se están
desprendiendo constantemente.
Durante el enjuague el agua ha
recogido las células que se
desprenden de las encías, las paredes
de la boca, la lengua, etc. Para poder
acceder al ADN primero tenemos que
acceder al núcleo de la célula y para
eso es necesario romper la membrana
plasmática. Después debe romperse
la membrana nuclear, para dejar libre
el ADN. Por último, debemos separar
el ADN de otros componentes que no
son de interés y para aislarlo hay que
hacer que se precipite en alcohol. La
sal en disolución actúa disminuyendo
la solubilidad de las proteínas, lo que
hace que precipiten y se separen más
fácilmente del ADN. El detergente
utilizado en el experimento tiene como
función destruir las membranas
celulares. El detergente disuelve las
grasas, que es el componente
principal de la membrana plasmática y
nuclear de las células. Al romperse las
membranas celulares se permite la
salida del ADN al exterior. Finalmente,
para aislar el ADN hay que hacer que
precipite en alcohol. cuando el ADN se
encuentra en alcohol precipita en la
interfase entre el alcohol y el agua.
Además de permitirnos ver el ADN, el
alcohol separa el ADN de otros
componentes celulares, los cuales son
dejados en la solución acuosa.
CONCLUSIÓN
Con el desarrollo de esta práctica de
laboratorio, se logró extraer ADN de
las células del epitelio bucal, se
pudieron observar fibras de color
blanco que corresponden a la
estructura del ADN humano, también
se aprendió el fundamento de una
técnica de extracción en la cual se
usan materiales que son fáciles de
conseguir y poco costosos, finalmente
se pudo establecer la función de los
principales materiales usados en la
práctica.
BIBLIOGRAFÍA
 Angulo, G. B., & Sánchez, E. A. H.
Utilidad de las muestras de saliva en
el diagnóstico por el laboratorio.
 Prácticas de laboratorio anatomía
aplicada. obtención de ADN de tejido
epitelial humano. Disponible en:
http://www.iesmanilva.es/attachm
ents/article/609/OBTENCIÓN%20
ADN%20%20MUCOSA%20BUC
AL.pdf
 http://www.medicinajoven.com/20
10/05/como-extraer-adn-deforma-
casera.html