Benemérita Universidad Autónoma

de Puebla

Facultad de Ciencias Químicas

Biología Molecular de la Célula.
Laboratorio
Tipos de microscopios

Docente: Sandra Cuellar Herrera

INTEGRANTES:
 Karina Pineda Pérez
 Luis Enrique Cordero García
 Adriana Ruiz Chamorro
Contenido
INTRODUCCION............................................................................................................................................. 3
1) Microscopio óptico: ......................................................................................................................... 3
Microscopio óptico compuesto:....................................................................................................... 3
Microscopio de campo oscuro: ........................................................................................................ 4
Microscopio de contraste de fase: .................................................................................................. 5
Microscopio de fluorescencia: .......................................................................................................... 6
2) Microscopio electrónico ................................................................................................................. 7
Microscopio electrónico de transmisión: ...................................................................................... 7
Microscopio electrónico de barrido: ............................................................................................... 8
Microscopio electrónico digital: ....................................................................................................... 9
Microscopio electrónico de cuántico: ............................................................................................ 9
INTRODUCCION
El microscopio (del griego
μικρός micrós, ‘pequeño’, y
σκοπέω scopéo, ‘mirar’) es
un instrumento que permite
observar objetos que son
demasiado pequeños para
ser observados a simple
vista.
Su llegada, sin lugar a
dudas, beneficio a la
investigación científica que
encontró en él un gran
aliado y soporte a la hora de
avanzar en ciertas
investigaciones que
justamente implicaban el
conocimiento de elementos
y organismos muy pequeños.

Ilustración 1. Clasificación de los tipos de microscopios

1) Microscopio óptico:

Es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como microscopio de luz,

(que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele
asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Aumenta el tamaño de los objetos que
son realmente muy pequeños y que no se pueden ver a simple vista, a su vez puede ser
monocular, binocular entre otros.

Microscopio óptico
compuesto:

Posee una serie de lentes y

utiliza luz visible como fuente de
iluminación.

 FUNCION:

Sirve para observar diversas

muestras teñidas y contar
microbios, pero no podemos
visualizar elementos muy
pequeños como los virus

Ilustración 2 Partes del microscopio óptico Compuesto.

  COMO FUNCIONA:

Un conjunto de lentes finamente detalladas forma una imagen focal

definida cuyo tamaño es muchas veces mayor que el de la muestra en
sí. Este aumento se logra, cuando los rayos luminosos procedentes de la
fuente de luz pasan a través de un condensador, que tiene lentes que
dirigen los rayos de luz a través de la muestra. Desde ahí los rayos
pasan al interior de la lente del objetivo, la lente más próxima a la
muestra. La imagen vuelve a ser ampliada por el ocular.

Microscopio de campo oscuro:

Se utiliza para examinar microorganismos vivos que no son visibles con
el microscopio óptico común, que no pueden teñirse con los métodos
estándares o que resultan distorsionados por la tinción y que sus Ilustración 3. Microscopio
características no pueden identificarse. óptico compuesto.

 FUNCION:

Para examinar microorganismos vivos que son invisibles en el microscopio óptico, no se tiñen
con facilidad o se distorsionan con la tinción, se utilizan con frecuencia para detectar
Treponema pallidum (esta es el diagnostico de
sífilis)
.

Ilustración 5. Examen en fresco con microscopía de

campo oscuro de Treponema pallidum.
Ilustración 4. Microscopio de campo oscuro

 COMO FUNCIONA

En lugar del condensador normal el microscopio de campo oscuro tiene un condensador

especial que incluye un disco opaco. El disco bloquea la luz que llegaría directamente al
objetivo, en el que solo ingresa la luz reflejada (desviada hacia afuera) por la muestra. Como no
hay una luz de fondo directa, la muestra aparece iluminada contra un fondo negro, es decir el
campo oscuro. Esta técnica se utiliza con frecuencia para examinar microorganismos no teñidos
suspendidos en un líquido.

Microscopio de contraste de fase:

Los microorganismos también
pueden observarse con un
microscopio de contraste de fase, que
es especialmente útil porque permite
la observación detallada de
estructuras internas en los
microorganismos vivos. Además, no
es necesario fijar ni teñir la muestra
ya que serían procedimientos que
podrían distorsionar o destruir los
microorganismos.

 FUNCION:

Su función principal es la observación

Ilustración 6. Microscopio de contraste de fase de las estructuras internas de
muestras viables.

 COMO FUNCIONA

El principio de la microscopia de contraste

de fase se basa en la naturaleza ondulatoria
de los rayos de luz y en el hecho de que esos
rayos pueden estar en fase(sus picos y sus
valles coinciden).Si el pico de la onda de los
rayos de luz de una fuente coincide con el
pico de la onda de los rayos de luz de otra
fuente, los rayos interactúan para producir un
reforzamiento (brillantez relativa).En cambio,
si el pico de la onda de una fuente de luz
coincide con la depresión de la onda de otra Ilustración 7. Estructura interna del microscopio de contraste de
fuente de luz los rayos interactúan para fase.
producir interferencia. En un microscopio de
contraste de fase un conjunto de rayos luminosos proviene directamente de la fuente de luz.
Microscopio de fluorescencia:

El microscopio de fluorescencia aprovecha las ventajas de

la fluorescencia, es decir la capacidad de ciertas sustancias
de absorber luz de longitudes de onda corta (ultravioleta) y
emitir una luz de una longitud de onda mayor (visible).
Algunos organismos fluorescentes de origen natural, bajo la
luz ultravioleta si la muestra se debe examinar no fluoresce
de modo natural se la tiñen con alguno de los colorantes
fluorescentes denominados fluorocromos.

 FUNCION:

En técnicas de anticuerpos fluorescentes

(inmunofluorescencia) para detectar con
Ilustración 8. Microscopio de Fluorescencia rapidez e identificar microbios en
muestras de tejidos o clínicas.

 COMO FUNCIONA:

Utiliza una fuente de luz ultravioleta o cercana a la ultravioleta que determina

que los microbios emiten luz en una muestra aparezcan como fluorescentes. Ilustración 9. Funcionamiento del
microscopio
2) Microscopio electrónico

Es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o

luz visible para formar imágenes de objetos diminutos.
Los microscopios electrónicos permiten alcanzar
ampliaciones hasta 5000 veces más potentes que los
mejores microscopios ópticos, debido a que la
longitud de onda de los electrones es mucho menor
que la de los fotones "visibles".

 FUNCION

El poder de resolución del microscopio electrónico es

mucho mayor que el de la luz visible. Por ende, los
microscopios electrónicos se utilizan para examinar
estructuras demasiado pequeñas para ser
discriminadas con la resolución del microscopio

óptico. Ilustración 10. Microscopio electrónico.

 COMO FUNCIONA

Disponen de un cañón de electrones que emite los electrones que chocan contra el
espécimen, creando una imagen aumentada. Se utilizan lentes magnéticas para crear
campos que dirigen y enfocan el haz de electrones, ya que las lentes convencionales
utilizadas en los microscopios ópticos no funcionan con los electrones. El sistema de vacío
es una parte relevante del microscopio electrónico. Los electrones pueden ser desviados
por las moléculas del aire, de forma que tiene que hacerse un vacío casi total en el interior
de un microscopio de estas características.

Microscopio electrónico de transmisión:

Es un microscopio que utiliza un haz
de electrones para visualizar un objeto, debido a
que la potencia amplificadora de un microscopio
óptico está limitada por la longitud de onda de
la luz visible. Lo característico de
este microscopio es el uso de una muestra ultra fina
y que la imagen se obtenga de los electrones que
atraviesan la muestra.

 FUNCION
Ilustración 11. Microscopio electrónico de
La microscopia electrónica de transmisión sirve transmisión
para estudiar todo tipo de materiales siempre y
cuando cuenten con la preparación adecuada y tengan dimensiones dentro del rango
nanometrico o incluso sub-micrométrico. Por sus características, es una
 herramienta importante para la caracterización estructural de material
nano estructurado, de los cuales se puede obtener no solo información
morfológica, sino también cristalográfica y de composición química con
la ayuda de la espectroscopia de dispersión de energía de rayos-X

 COMO FUNCIONA

Un haz de electrones precisamente enfocado proveniente de un cañón

de electrones atraviesa un corte ultradelgado especialmente preparado
de la muestra. El haz se enfoca sobre un área pequeña de la muestra
mediante un condensador electromagnético que cumple más o menos
la misma función que el condensador del microscopio óptico, es decir
dirige el haz de electrones en una línea recta para iluminar la muestra y
este microscopio en lugar de colocar la muestra en portaobjetos suele
utilizarse una rejilla de cobre. El haz de electrones atraviesa primero la
muestra y después las lentes electromagnéticas del objetivo, con la cual
aumenta el tamaño de la imagen.

Ilustración 12. Partes de

microscopio electrónico de
transmisión. Microscopio electrónico de barrido:
Es una técnica de microscopía electrónica capaz de producir
imágenes de alta resolución de la superficie de una muestra utilizando las
interacciones electrón-materia. Utiliza un haz de electrones en lugar de un haz
de luz para formar una imagen.

 FUNCION

Su función es solucionar el problema de los cortes asociados con la

Ilustración 13. Microscopio
microscopia electrónica de transmisión y proporciona imágenes electrónico de barrido.
tridimensionales sorprendentes, es especialmente útil para estudiar
las estructuras superficiales de las células intactas y de
los virus, en la práctica puede discriminar objeto
separados por una distancia de apenas 20 nm y suele
producir un aumento de 1000 a 10000x.

 COMO FUNCIONA

Un cañón de electrones produce un haz de electrones

enfocado con precisión, denominado haz primario. Estos
electrones atraviesan lentes electromagnéticas y son
dirigidas sobre la superficie de la muestra, estos son
emitidos en forma secundaria, son transmitidas hasta un
colector, luego amplificados y utilizados para formar una
imagen sobre una pantalla o sobre una placa
Ilustración 14. Estructura interna del microscopio fotográfica. La
imagen se denomina microfotografía electrónico de barrido. electrónica de
barrido.

Microscopio electrónico digital:

Un microscopio, es un aparato de captura de video y una
pantalla de video formando una sola unidad sin oculares es la
definición apropiada para un microscopio digital.

 FUNCION

Es como un microscopio óptico tradicional, solo que con la

diferencia, de que trae incorporado un dispositivo de
acoplamiento y carga en la cámara que se utiliza para
visualizar muestras y especímenes de una forma más amplia y
cómoda a través de un monitor o pantalla de computadora.

 COMO FUNCIONA

Tanto su uso y función es muy simple ya que la muestra se coloca debajo del lente, además de
que generalmente se utiliza una fuente de luz (leds) para que la muestra obtenga la suficiente
iluminación y sea mucho más fácil de ver.
El lente de objetivo magnifica la muestra, y se pone en foco dentro del tubo del microscopio
digital. En un microscopio estéreo, el ocular, también llamada la lente ocular, posteriormente
aumenta la imagen de nuevo, por lo que hace más visible para quien observa. Un microscopio
digital no puede incluir un lente ocular, pero en su contiene una cámara digital para enfocar la
imagen en su lugar.

Ilustración 15. Tipos de microscopios digitales

Microscopio electrónico de cuántico:

El microscopio cuántico es un microscopio que forma parte de los instrumentos
llamados nanoscopios porque posibilitan ver objetos del tamaño en nanómetros y aún menores,
se conoce como "microscopio de barrido de efecto tunel" o STM siglas del inglés del Scanning
tunneling microscope y fue presentado en 1982 por Binning y Rhrer. Ambos recibieron por esto
el Premio Nobel de Física en 1986.

FUNCION
Los componentes de un STM incluyen la punta de exploración, un piezoeléctrico de altura
controlada, escáner x-y, control muestra-a-punta, sistema de aislamiento de vibraciones, y
computadora.
La resolución de una imagen está limitada por el radio de curvatura de la punta del STM.
Además, si la punta tiene dos puntas en vez de una, pueden observarse irregularidades en la
imagen obtenida; esto lleva a "imágenes de doble punta", una situación en la que ambas puntas
contribuyen al efecto túnel y en la que se percibe una imagen duplicada. Por tanto ha sido
esencial desarrollar procesos para obtener consistentemente puntas afiladas y útiles.
Recientemente se han utilizado nanotubos de carbono con este propósito.

La punta puede estar fabricada de tungsteno o platino-iridio, aunque también se utiliza

el oro para ello. Las puntas de tungsteno están fabricadas habitualmente por grabado
electroquímico, y las puntas de platino-iridio están fabricadas por corte mecánico.
Debido a la extrema sensibilidad de, la corriente túnel a la altura, es imperativo un apropiado
aislamiento de vibraciones o un cuerpo extremadamente rígido del STM para obtener
resultados útiles. En el primer STM de Binnig y Rohrer, se usó levitación magnética para
mantener el STM libre de vibraciones; ahora se usan a menudo sistemas de resortes o resortes
de gas. Adicionalmente, son implementados a veces mecanismos para reducir las corrientes
parásitas.
Manteniendo la posición de la punta con respecto a la muestra, el escaneo de la muestra y la
adquisición de los datos son controlados por computadora. La computadora puede ser usada
también para mejorar la imagen con la ayuda de procesamiento digital de imágenes así como
también para realizar medidas cuantitativas.

COMO FUNCIONA
El STM está basado en el concepto de efecto túnel. Cuando una punta conductora es colocada
muy cerca de la superficie a ser examinada, una corriente de polarización (diferencia de voltaje)
aplicada entre las dos puede permitir a los electrones pasar al otro lado mediante efecto túnel a
través del vacío entre ellas. La resultante corriente de tunelización es una función de la posición
de la punta, el voltaje aplicado y la densidad local de estados (LDOS por sus siglas en inglés)
de la muestra. La información es adquirida monitoreando la corriente conforme la posición de la
punta escanea a través de la superficie, y es usualmente desplegada en forma de imagen
El efecto túnel es un concepto que surge de la mecánica cuántica. Clásicamente, un objeto que
choca con una barrera impenetrable no pasará a través de ella. Sin embargo, los objetos con
una muy pequeña masa, tales como el electrón, tienen características de onda que permiten el
evento conocido como efecto túnel.
Los electrones se comportan como haces de energía, y en la presencia de un potencial U(z),
asumiendo un caso unidimensional, los niveles de energía ψn(z) de los electrones están dados
por las soluciones a la ecuación de Schrödinger,

Donde ħ es la constante de Planck reducida, z es la posición, y m es la masa de un electrón. Si

a un electrón de energía E se le hace incidir hacia una barrera de energía de altura U(z),
la función de onda del electrón es una solución de onda.

BIBLIOGRAFIAS
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microbiología. Argentina: Medica panamericana.
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2. http://morfoudec.blogspot.mx/2008/07/microscopa-de-contraste-de-
fase.html
3. https://www.ecured.cu/Microscopio_electr%C3%B3nico
4. http://www.cciqs.uaemex.mx/index.php?option=com_content&view=article&i
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5. https://www.google.com.mx/search?q=microscopio+electronico+de+barrido&
espv=2&biw=1366&bih=662&source=lnms&tbm=isch&sa=X&sqi=2&ved=0ahU
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6.