CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

ACUÑA ANGULO JOSE MIGUEL

ESCOBAR MARTINEZ LUIS MIGUEL
GOMEZ SALAZAR MARIA CAMILA
JAIMES PADILLA IVAN ALONSO
TIRADO RAMOS ALVARO MIGUEL

Msc.
EDINELDO LANS CEBALLOS

UNIVERSIDAD DE CORDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA DE QUIMICA
MONTERIA – CÓRDOBA
2015
 INTRODUCCIÓN

Una columna de cromatografía es un tubo de vidrio relleno con una sustancia sólida
de propiedades adsorbentes constituida por pequeñas partículas: gel de sílice y
alúmina son las más usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografía
como la fase estacionaria, a través de la columna se hará pasar una corriente de un
disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyente y/o fase móvil.
La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequeña cantidad de
disolvente y se coloca sobre el adsorbente, en la parte superior de la columna,
quedando adsorbida por el mismo. Se pasa un flujo de eluyente a través de la
columna. Los compuestos constituyentes de la mezcla son arrastrados por el
eluyente a su paso, haciéndoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo, no
todos los compuestos avanzan a la misma velocidad y esta es precisamente la clave
de la cromatografía. Algunos compuestos se ven más fuertemente retenidos por el
adsorbente (fase estacionaria) y por lo tanto avanzarán más despacio. Por el
contrario, otros apenas son retenidos y avanzarán a mayor velocidad. En general
se dice que la separación en la cromatografía se basa en la afinidad diferencial de
los distintos compuestos por la fase móvil o la fase estacionaria
La cromatografía en columna se emplea para la separación de mezclas o
purificación de sustancias a escala preparativa, mediante esta técnica se llevará a
cabo la separación de una mezcla de permanganato de potasio y dicromato de
potasio.
 OBJETIVOS
 Emplear la técnica de cromatografía en columna para la separación de una
mezcla de permanganato de potasio y dicromato de potasio.
 Analizar la influencia del solvente en la separación cromatografía.
 Comprender la técnica de cromatografía en columna, sus características y
los factores que intervienen en ella.
 MARCO TEORICO

La cromatografía es la técnica que valga la redundancia agrupa una serie de

técnicas que permiten analizar, purificar o separar una mezcla de solutos
basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se
establece al ser arrastrados por una fase móvil (liquida o gaseosa) a través
de un lecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede
ser sólida o líquida, por lo que es uno de los métodos más eficientes y más
utilizados actualmente en los laboratorios de química. Ningún otro método de
separación es tan potente y de aplicación tan general como la cromatografía.
Es difícil definir rigurosamente el término de cromatografía, ya que se ha
aplicado ese nombre a varios sistemas y técnicas. Sin embargo, todos esos
métodos tienen en común el uso de una fase estacionaria y una fase móvil.
Sin embargo, este nombre proviene de la primera experiencia cromatográfica
realizada, la cual se utilizó para separar pigmentos coloreados de plantas. La
cromatografía fue descubierta por el botánico ruso de origen italiano Mijail
Tswett en 1903. Tswett separo los pigmentos de las plantas (clorofila)
vertiendo extracto de hojas verde en éter de petróleo sobre una columna de
carbonato de calcio en polvo en el interior de una probeta. No obstante, no
existen datos sobre la utilización de esta técnica hasta 1930 cuando khun y
Lederer separaron también pigmentos de las plantas usando como
adsorbentes alúmina y carbonato de calcio. Fue a partir de ahí cuando se
inició el verdadero desarrollo de la cromatografía. Para explicar el fenómeno
cromatográfico es necesario establecer dos tipos de fundamento, uno remoto
y otro próximo:

Fundamento remoto:

Este fundamento se encuentra en alguna o algunas propiedades físicas o

fisicoquímicas de los analitos: solubilidad, adsorción (tendencia a ser
retenidos en sólidos finamente divididos), volatilidad, tamaño, carga,
reactividad química o bioquímica, etc. La mezcla de sustancias a separar se
coloca en una situación experimental dinámica donde exhiben dos de estas
propiedades, o bien una de ellas, pero por duplicado tal como la solubilidad
en dos líquidos diferentes como ocurre en cromatografía liquido - liquido.
Deben cumplirse las condiciones siguientes:
Los componentes de los sistemas empleados deben estar en intimo contacto
entre sí y el equilibrio establecido entre esos componentes debe ser lo más
completo posible.
 Fundamento próximo

Se encuentra en el hecho de que es muy improbable que dos

especies presenten cuantitativamente el mismo par de propiedades físicas o
físico - químicas frente a un sistema cromatográfico dado. Por tanto, en estas
diferencias, que pueden ser muy pequeñas, se basa la separación
cromatográfica.

MATERIALES Y REACTIVOS

 1 bureta.
 1 Espátula.
 2 Beacker de 100 mL
 1 Varilla de vidrio.
 Pipetas de 1,5 y 10 mL
 1 Pera.
 12 Tubos de ensayo
 sílica
 Ácido sulfúrico 0.5 M
 Ácido nítrico 0.5 M
 Mezcla de dicromato de potasio y permanganato de potasio.
 Agua destilada
 PROCEDIMIENTO

Se preparan las soluciones de ácido nítrico y sulfúrico al 0.5 N y se pone

algodón en el interior de la bureta con el fin de evitar que se pierda la sílica
que se agregara.

C) Añadir la fase móvil con cuidado

A) Se sujeta la columna a un
soporte y se rellena con la fase
estacionaria en forma de papilla
o en seco según se nos indique.
por la pared de la columna.
D) los componentes de la mezcla
deben ser eluirce manteniendo un flujo
constante de disolvente.

E) Finalmente las fracciones eluidas

se recogen en tubos de ensayos.
B) Se deposita la muestra en
Disolución.
 CALCULOS Y RESULTADOS

Después de finalizado el proceso de elución se observó que el ion

permanganato fue eluido en primera instancia al utilizar ácido sulfúrico 0.5 N
mientras que el ión dicromato fue eluido al utilizar ácido nítrico 0.5 N como
fase móvil. Los datos obtenidos se presentan en las siguientes tablas.

Datos para el permanganato de potasio.

Tabla n° 1
Permanganato de potasio

Concentración Absorbancia

0,001 0,02

0,002 0,028

0,004 0,04

0,006 0,052

0,008 0,067

ABSORBANCIA VS CONCENTRACIÓN
0.08
0.07
0.06
ABSORBANCIA

0.05
0.04
y = 6,5427x + 0,0139
0.03 R² = 0,9978
0.02
0.01
0
0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.007 0.008 0.009
CONCENTRACIÓN

Grafica n° 1 ( Permanganato de potasio)

 Datos para el dicromato de potasio
Tabla n° 2
Dicromato de potasio

Concentración Absorbancia

0,001 0,007

0,002 0,011

0,004 0,0152

0,006 0,0197

0,008 0,024

ABSORBANCIA VS CONCENTRACION
0.03

0.025
ABSORBANCIA

0.02

0.015
y = 2,3482x + 0,0055
0.01
R² = 0,9915

0.005

0
0 0.001 0.002 0.003 0.004 0.005 0.006 0.007 0.008 0.009
CONCENTRACION

Grafica n° 2 (Dicromato de potasio)

Mediante las ecuaciones de las gráficas n° 1 y n° 2, se hallaron las
concentraciones de las fracciones separadas.
Fracciones de permanganato
de potasio.
Fracciones de dicromato de potasio
Tabla n° 3
Tabla n°4
permanganato de potasio Dicromato de potasio
Concentración de X Absorbancia Concentración de X Absorbancia
0,14 0,02 0,022 0,007
0,192 0,028 0,0315 0,011
0,28 0,04 0,0041 0,0152
0,344 0,052 0,052 0,0197
0,065 0,23 0,062 0,024

ANALISIS DE RESULTADO

La cromatografía de columna se basa en las velocidades de los compuestos a

separar, conforme estos descienden al añadir la muestra y la fase móvil a la
columna, por efecto de la gravedad se produce el movimiento de la muestra,
estableciendo un equilibrio entre el soluto absorbido en la fase estacionaria(sílica) y
la fase móvil (ácido sulfúrico) que fluye por la columna. Debido a que cada uno de
los componentes de la mezcla establecerá interacciones diferentes con la fase
estacionaria y la fase móvil, estos serán transportados a diferentes velocidades,
promoviendo una mejor separación.
En la separación del permanganato y el dicromato se procedió a recolectar las
fracciones en tubos de ensayos.
De manera previa, se colocó dentro de la columna utilizada, un pequeño trozo de
algodón con la finalidad de retener la sílica utilizada en este caso como fase
estacionaria, posteriormente se realizaron procesos de lavado para compactar más
la sílica. Tras compactar la fase estacionaria se dejaron dos centímetros sobre la
misma, para permitir el flujo de la muestra y la otra fase móvil que se utilizó
posteriormente (ácido nítrico).
Luego de la primera separación, la cual fue de dicromato, se procedió a añadir la
segunda fase móvil para producir la elución del dicromato, observando el progreso
de la misma, debido a su coloración de las especies separadas, tras la recolección
de las fracciones se le midió la absorbancia para posteriormente determinar la
concentración de cada una de ellas.
 CONCLUCIÓNES
 Se determinó la concentración de las fracciones separadas del ión dicromato
e ión cromato mediante el método del patrón externo.
 Las fracciones que demoraron menos tiempo en ser eluidas fueron las de
menor concentración y las eluidas en un tiempo mayor concurrieron con las
de mayor concentración
 BIBLIOGRAFIA

 SKOOG, WEST, HOLLER, Fundamentos de química analítica, octava

edición, editorial THOMSON, 2005. Pág. 1014.

 Daniel. Harris, Análisis Químico Cuantitativo 3 Edi. Editorial Reverte.

 CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA TOMADO DE: https://es.scribd.com/doc/14172697/6-

Cromatografia-en-Columna
 INTRODUCCIÓN ALA CROMATOGRAFÍA. TOMADO DE:
file:///C:/Users/Luis%20Miguel%20Escobar/Downloads/564113864.introducion%20croma
tografia.pdf