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RESUMEN
Introducción: La espectrofotocolorimetría es un método que permite relacionar la
absorbancia de luz de un compuesto y su concentración. Es importante a la hora de
estandarizar métodos para el análisis de sustancias nuevas o que químicamente no se han
estudiado en el laboratorio. Se rige bajo el principio de que cada sustancia tiene la
capacidad de absorber determinadas longitudes de onda. Objetivo: Estudiar la leyes
aplicadas en la espectrofotometría con base en una serie de soluciones que contienen
patrón de hierro II para ser aplicadas en un análisis de muestra de agua residual del río
Fucha. Metodología: Se prepararon una serie de soluciones con ácido clorhídrico 1N
hidroxilamina, acetato de sodio, o-fenantrolina y patrón de hierro II en distintas
concentraciones. Se llevaron al espectrofotómetro para ser analizadas e identificar la
longitud de onda con la que se presentaba la mayor absorbancia. A continuación, las
muestras fueron irradiadas individualmente y se registraron los datos de absorbancia y
porcentaje de transmitancia. Con base en los resultados obtenidos, se evaluó la
concentración para la muestra de estudio. El agua residual. Resultados: Se obtuvo la
concentración de hierro en la muestra de agua residual, la cual fue 0,746 ppm, también se
encontró el mayor valor de la absorbancia del sistema, en este caso 0,227 a una longitud de
onda de 511 nm. El error relativo obtenido en la práctica fue de 0,78%. Conclusión: Con
base en las leyes de aplicación al análisis cuantitativo de la espectrofotometría, se encontró
un modelo que permitió calcular la concentración del hierro en el agua residual del río
Fucha, además se comprendió la relación entre absorbancia y transmitancia y el uso y
funcionamiento del espectrofotómetro. De acuerdo con la concentración de hierro en la
muestra problema se determinó que cumple con la resolución 0631 de 2015.
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Universidad de la Salle. Facultad de ingeniería Ambiental y Sanitaria.Fisicoquímica.Grupo 09
INTRODUCCIÓN:
La espectrofotocolorímetro es un método de análisis óptico que permite caracterizar una
muestra basándose en la relación que existe entre la absorción de luz de un compuesto y
su concentración.
De acuerdo con la Universidad de Murcia (s.f.), este método de análisis parte del hecho de
que cada compuesto tiene la capacidad de absorber determinadas longitudes de onda, que
son características de la radiación electromagnética. Por lo cual, cuando una sustancia o
analito de interés es irradiado con este tipo de energía, parte de esa radiación puede ser
transportada hacia el interior de las moléculas (absorbida) o ser reflejada, por lo que es
posible cuantificar esta variación en la intensidad de la radiación. Para este procedimiento
se hace uso del espectrofotómetro.
Para entender las leyes de la espetrofotocolorimetría, es necesario primero comprender tres
conceptos relacionados a estos:
● La intensidad o potencia por unidad de área: Definida en términos físicos como la
energía transportada por unidad de tiempo (potencia) y por unidad de área, la cual,
es perpendicular a la dirección del viaje de la onda. (Serway & Jewett, 2008)
● Transmitancia: Se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo.
● Absorbancia: Definida como la cantidad de energía o luz absorbida por la muestra.
Leyes de la espectrofotocolorimetría:
● Ley de beer: Establece la relación entre la absorción de la luz y la concentración de
la solución mediante la afirmación de que a mayor concentración del la sustancia de
interés hay mayor absorbancia de luz y menor el valor de transmitancia.
● Ley de Lambert: Establece la relación entre la absorción de luz con la profundidad o
espesor de un líquido coloreado.
● Ley de Lambert-Beer: Es una consolidación de los dos principios anteriormente
mencionados, que explica por lo tanto, que la cantidad de luz absorbida depende de
el tipo de sustancia, la distancia que recorre (espesor), la concentración de sustancia
y la longitud de onda de la luz monocromática.
Curva espectral:
De acuerdo con la Universidad de buenos aires (s.f) la curva espectral es un gráfico que
permite relacionar la absorbancia de un compuesto a diferentes longitudes de onda. Su uso
es de gran importancia para el análisis de sustancias nuevas o que nunca han sido
evaluadas en el laboratorio.
Curva de Ringbon:
Es un tipo de gráfica que permite relacionar el porcentaje de transmitancia del compuesto o
analíto de interes para las concentraciones presentes en la solución de dicha sustancia.
Con la presente práctica, se busca estudiar la leyes aplicadas en la espectrofotometría con
base en una serie de soluciones que contienen patrón de hierro II para ser aplicadas en un
análisis de muestra de agua residual del río Fucha.
METODOLOGÍA
1. Soluciones preparadas con patrón de hierro II:
1.1. Determinación de la longitud de onda con mayor absorbancia para una
solución Patrón de Hierro II:
Se prepararon ocho soluciones a estudiar en matraces aforados de 50 ml. Para esto,
se utilizó una pipeta de 10 ml y un pipeteador con los que se adiciono a cada uno de
los matraces un volumen de 0 (blanco), 1, 2, 3, 4, 5, 6 y 7 ml de Patrón de hierro II
(Fe+2) correspondientemente al matraz previamente marcado. A continuación, se
agregaron a cada uno de estos 1 ml de ácido clorhídrico (HCl) con concentración
1N, 1 ml de hidroxilamina, 5 ml de solución de acetato de sodio y 5 ml de solución de
o-fenantrolina, realizando lavado de la pipeta durante el cambio del compuesto a
utilizar. A continuación, se completo la solución utilizando agua destilada hasta el
aforo de 50 ml, se homogeneizó mediante agitación y se dejó reposando a lo largo
de 15 minutos. Finalmente, las muestras preparadas se adicionaron cada una de las
soluciones a las celdas del espectrofotómetro, purgando la celda tres veces con su
correspondiente solución, se secaron y limpiaron en el exterior utilizando papel de
arroz y se llevaron al instrumento para su medición.
Con respecto al manejo del espectrofotómetro, en primer lugar se realizó un barrido
y se generó la gráfica de curva espectral para la soluciones de absorbancia vs
concentración, a partir de la cual se identificó la longitud de onda a la cual se
presentó mayor absorbancia de las soluciones preparadas.
RESULTADOS
400 0,079
406 0,093
409 0,101
415 0,114
421 0,126
427 0,137
433 0,147
439 0,156
445 0,162
466 0,193
472 0,202
493 0,214
502 0,222
508 0,227
511 0,227
520 0,213
526 0,189
535 0,140
Con base los resultados presentados en la tabla 1, se elaboró la gráfica de calibración del
sistema que se muestra a continuación:
Blanco 0 100 0
5 1,38 79 0,103
● Curva patrón:
A partir de los resultados de absorbancia para cada una de las concentraciones de
las soluciones preparadas, se elaboró la gráfica de curva de patrón que se muestra
a continuación:
● Curva de Ringbon:
A partir de los resultados de transmitancia (%) para cada una de las concentraciones
de las soluciones preparadas, se elaboró la gráfica de Ringbom que se muestra a
continuación:
Muestra %T A
Blanco 100 0
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Inicialmente el proceso descrito para los patrones se basa en el principio del método para la
determinación de hierro, este consiste en la reacción de la fenantrolina con el ión Fe++ para
formar un complejo de color anaranjado rojizo que presenta su absorbancia máxima de luz
a una longitud de onda de 510 nm. La absorbancia de la solución colorida es proporcional a
la concentración de hierro y la intensidad del color es independiente del pH en el rango de 3
a 9. Un pH entre 2.9 y 3.5 asegura un rápido desarrollo de color en presencia de un exceso
de fenantrolina.Como el reactivo de fenantrolina es específico para medir Fe2+ se tiene que
reducir todo el hierro Fe3+ a Fe2+ lo que se logra utilizando hidroxilamina como agente
reductor. Es necesario adicionar una solución amortiguadora de acetato para asegurar el pH
especificado. El ácido clorhídrico (HCl) se agrega con el fin de asegurar que todo el hierro
se disuelve. (Sánchez, 2011).
De acuerdo con las reacciones mencionadas anteriormente, en la práctica se observó la
formación de color anaranjado rojizo, a medida que se aumentó la concentración de hierro
el color se tornaba más intenso como se puede observar en la Figura 1 (Anexo 2).
Como se observa en la gráfica 2, la absorbancia es directamente proporcional a la
concentración de la sustancia, lo que comprueba el principio de la Ley de Beer. Si se
observa la gráfica 3, la relación lineal de %T es inversamente proporcional a la
concentración de la sustancia, es decir, que si la transmitancia aumenta, los valores de la
absorbancia disminuye.
El resultado obtenido de la concentración de Fe2+ en la muestra problema (Río Fucha) fue
de 0,736 ppm (mg/L), este resultado debe ser comparado con las resoluciones existentes
como lo es la resolución 0631 del 2015, “por la cual se establecen los parámetros y los
valores límites máximos permisibles en los vertimientos puntuales a cuerpos de aguas
superficiales y a los sistemas de alcantarillado público y se dictan otras disposiciones”. A
partir de esto se especifica que la muestra problema fue tomada por la Av 68. lo que indica
que en este punto el agua ya viene con cierta concentración de hierro puesto que ya a
pasado por una localidad primordial para que se genere un grado de contaminación que
afecte los factores fisicoquímicos de este río; esta localidad se le conoce con el nombre de
Puente Aranda en la cual se pueden encontrar variedad de industrias implicadas en la
contaminación del río fucha pese a que generan gran cantidad de vertimientos.
Con respecto a la resolución 0631 del 2015 esta nos indica que para el parámetro de hierro,
en aguas residuales domésticas (ARD) y aguas residuales no domésticas (ARnD) los
valores máximos permisibles son objeto de análisis y reporte por parte de las actividades
industriales, comerciales o servicios, de acuerdo con el artículo 18 de esta resolución se
establece que la información de los resultados de los análisis y cuantificación de los
parámetros específicos definidos para los vertimientos puntuales a los cuerpos de agua
superficiales y al alcantarillado público deberá suministrarla el responsable de la actividad a
la Autoridad Ambiental competente. Es por este motivo que no se podría saber de manera
global si esta concentración obtenida se encuentra en el rango aceptable; aunque sí se
sabe que este río pasa cerca a estas industrias podríamos deducir que clase de industrias
estarían afectando la fuente de agua según el tipo de actividad que se realice en cada una
de ellas, entonces según la deducción realizada y la resolución 0631 podremos comparar si
y sólo si, las industrias ubicadas en este sector generarán la misma actividad.
La primera deducción sería para una industria que fabrica articulos plasticos; para esta
actividad la resolución indica que el valor límite permisible es de 3,00 mg/L, a partir de esto
se puede decir que según la normativa, el valor de Hierro obtenido está por debajo del
rango máximo aceptable y por ende cumple con la norma. La segunda deducción sería para
una industria que fabrica autopartes y siderurgia, según esta actividad la resolución indica
que el valor límite permisible es de 3,00 mg/L y 5,00mg/L, y a partir de esto se puede decir
que según la normativa, el valor de Hierro obtenido está por debajo del rango máximo
aceptable por ende cumple con la norma dada por el ministerio de ambiente y desarrollo
sostenible. Para finalizar la última deducción fue para una industria que fabrica imprentas y
litografías; y a partir de esta actividad la resolución indica que el valor límite permisible es de
3,00 mg/L, de igual modo se podría decir que según la normativa, el valor de Hierro
obtenido está por debajo del rango máximo aceptable y por ende cumple con la norma
establecida por minambiente para este parámetro.
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
C1V1=C2V2 (1)
Despejando la C2 en la ecuación (1) se obtiene:
𝐶1𝑉1
𝐶2 = (2)
𝑉2
MUESTRA 1
V1= 1 ml (Patrón de Hierro)
C1= 13,8 ppm (Concentración del patrón) ≈ 13,8 𝑚𝑔/𝐿
V2 = 50 ml (Volumen final)
Conversión de ml a L
1𝐿
1𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,001 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Conversión de ml a L
1𝐿
2𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,002 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Conversión de ml a L
1𝐿
3𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,003 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Conversión de ml a L
1𝐿
4𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,004 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Conversión de ml a L
1𝐿
6𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,006 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Conversión de ml a L
1𝐿
7𝑚𝑙 (1000𝑚𝐿) = 0,007 𝐿
1𝐿
50𝑚𝑙 ( ) = 0,05 𝐿
1000𝑚𝐿
Utilizando la ecuación (2)
𝑚𝑔
13,8 𝐿 (0,007𝐿)
𝐶2 =
(0,05𝐿)
𝐶2= 1,932 mg/L
MUESTRA ( Río Fucha)
➢ Cálculo para hallar la concentración de Hierro en la muestra problema, para calcular
esta concentración se utilizó la gráfica 2
A= m[ ] + b (3)
Despejando la [ ] de la ecuación (3) se obtiene:
𝐴−𝑏
[] = (4)
𝑚
Se reemplazan los valores obtenidos de m y b de la gráfica 2 y la A de la Tabla 3 en la
ecuación (4)
A= 0,062
b= 0,0064
m= 0,0755
0,062 − 0,0064
[] =
0,0755
[ ] = 0,736 𝑚𝑔/𝐿